CC BY
47
2015
ВЕСТНИК САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКОГО УНИВЕРСИТЕТА
Сер. 11
Вып. 3
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ МЕДИЦИНА
УДК 616.33-002.44-084:615.03
Д. В. Чегодарь, А. В. Кубышкин
ВЛИЯНИЕ РАСТВОРА НАНОСЕРЕБРА НА ПРОЦЕССЫ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОГО ПРОТЕОЛИЗА В СЛИЗИСТОЙ ЖЕЛУДКА ПРИ МОДЕЛИРОВАНИИ ЯЗВЕННОГО ПОВРЕЖДЕНИЯ
Медицинская академия имени С. И. Георгиевского ФГАОУ ВО «КФУ им. В. И. Вернадского, Российская Федерация, Крым, 295006, Симферополь, бульвар Ленина, 5/7
Изучено влияние раствора наносеребра при пероральном применении на слизистую желудка интактных животных и при профилактике формирования острой язвы желудка. Оценивали показатели неспецифических протеиназ и их ингибиторов в сыворотке крови и суперна-танте гомогената слизистой желудка. Установлено, что применение раствора наносеребра в качестве питьевого субстрата у интактных животных сопровождается минимальной реакцией компонентов протеиназ-ингибиторных систем как на системном, так и на локальном уровне. Профилактическое применение раствора наносеребра при моделировании острой язвы слизистой желудка приводит к сдерживанию активации неспецифических протеиназ и сохранению ингибиторного потенциала, что может свидетельствовать о наличии противовоспалительных эффектов наносеребра. Библиогр. 18 назв. Табл. 3. Ил. 5.
Ключевые слова: язва желудка, наносеребро, протеиназы, ингибиторы протеиназ, воспаление.
THE EFFECT OF NANOSILVER SOLUTION ON NONSPECIFIC PROTEOLYSIS PROCESSES IN SIMULATION OF ULCERATIVE DAMAGE IN GASTRIC MUCOSA
D. V Chegodar, A. V. Kybushkin
Medical Academy named after S. I. Georgievsky of V. I. Vernadsky Crimean Federal University, 5/7, bul'var Lenina, Simferopol, 295006, Crimea, Russian Federation
In our research we have investigated the effect of oral use of nanosilver solution on the gastric mucosa of intact animals, and as preventing measures for simulation of acute gastric ulcer. We have evaluated the indices of nonspecific proteinases and their inhibitors in blood serum and homogenate supernatant of gastric mucosa. We have indicated that the use of nanosilver solution as drinking substrate for intact animals is accompanied by minimal reaction of proteinase-inhibitor systems components on both systematic and local levels. Using nanosilver solution for preventing measures in simulation of acute gastric ulcer leads to suppressing the activation of nonspecific proteinases and preserving the inhibitor potential, which can indicate non-inflammatory effects of nanosilver. Refs 18. Tables 3. Figs 5. Keywords: gastric ulcer, nanosilver, proteinases, proteinase inhibitors, inflammation.
В настоящее время все большее внимание исследователей концентрируется на изучении возможностей использования нанотехнологий для модификации и разработки лекарственных препаратов. Особое внимание в этом направлении привлекает использование наночастиц металлов, биологическая активность которых в наноразмерном диапазоне существенно возрастает [1, 2]. Модификация серебра с использованием нанотехнологий позволяет в сотни раз снизить концентрацию металла при сохранении всех его бактерицидных свойств [3].
В литературных источниках имеются указания на высокую антимикробную активность наночастиц серебра в отношении широкого спектра грамположитель-ных и грамотрицательных бактерий, однако изучению противовоспалительных эффектов наносеребра, связанных, по-видимому, с его антибактериальным действием, уделяется недостаточно внимания [4]. Вместе с тем возможности использования наночастиц серебра требуют дальнейшего детального изучения ввиду недостаточно изученного токсикологического влияния препарата на организм [5-7].
Одной из экспериментальных моделей, позволяющей использовать для изучения эффектов наносеребра, является модель язвенного повреждения слизистой оболочки гастродуоденальной зоны желудочно-кишечного тракта, которую можно рассматривать с точки зрения типического воспалительного процесса [8, 9]. Причем при моделировании острой язвы желудка существенную роль играет активация компонентов протеиназ-ингибиторной системы и их исследование можно эффективно использовать для изучения разнообразных факторов, влияющих на формирование воспаления [10].
Цель исследования — изучить эффекты наносеребра при пероральном применении на слизистую оболочку желудка интактных крыс и при моделировании острой язвы желудка на основании оценки системных и локальных реакций неспецифических протеиназ и их ингибиторов.
Материалы и методы исследования. Экспериментальное исследование было проведено на 38 белых крысах-самцах линии «ММаг», массой тела 180-210 г. Проведение исследования было одобрено комитетом по биоэтике Крымского государственного медицинского университета с соблюдением принципов Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных целей (Страсбург, 1986 г.).
Проведено две серии экспериментов. В первой серии изучали действие нано-серебра на ткани слизистой оболочки желудка крыс при пероральном приеме без моделирования патологии. Для этого лабораторных животных опытной группы (п = 9) в течение 21 дня поили раствором наносеребра концентрацией 0,01 г/л. В качестве контрольной группы (п = 9) использовали животных, которые находились на свободном режиме питья дистиллированной водой. В конце указанного срока животных выводили из эксперимента под эфирным наркозом с последующим забором материала для исследования.
Во второй серии экспериментов изучали профилактическое действие раствора наносеребра на формирование экспериментального язвенного повреждения слизистой желудка. Для этого в группе лабораторных животных (п = 10) в качестве субстрата для питья использовали раствор наносеребра на протяжении 21 дня. По окончании указанного периода времени проводили моделирование язвы желудка подкожным введением животным индометацина в дозировке 35 мг/кг массы тела
после 24 ч голодания. В качестве контроля служила группа животных (n = 10), получавшая для питья дистиллированную воду. Эвтаназию животных осуществляли через 24 ч после моделирования язвенного повреждения под эфирным наркозом путем декапитации с последующим забором материала.
Для работы использовали раствор наносеребра, разработанный в Таврическом национальном университете с участием сотрудников Института биологии южных морей [11]. В состав исследуемого раствора входят: наночастицы серебра размером 10-20 нм (0,1%), альгинат натрия (0,6%) и дистиллированная вода (99,3%). Исходный раствор до начала экспериментального исследования был разведен дистиллированной водой в соотношении 1:99.
Материалом для исследований служила сыворотка крови и супернатант го-могената слизистой желудка, который получали по методике, описанной Р. Скоупс и И. М. Скрипник [12, 13]. Определение активности компонентов протеиназ-инги-биторной системы проводили с использованием энзиматических методов [14] на спектрофотометре "Biomat 5» (Великобритания). Метод определения трипсино-подобной активности основан на спектрофотометрическом измерении скорости отщепления N-бензоил-Ь-аргинина от синтетического субстрата N-бензоил-Ь-аргинина этилового эфира. Определение эластазоподобной активности проводили на основании изучения скорости гидролиза синтетического субстрата N-t-BOC-аланил-р-нитрофинилового эфира. Определение концентрации альфа-1-ингибитора протеиназ проводили на основании торможения расщепления трипсином БАЭЭ. Аналогично определялась активность кислотостабильных ингибиторов после предварительной подготовки сыворотки прогреванием в кислой среде. Белок во всех образцах определяли методом Лоури.
Для оценки патоморфологических изменений в тканях желудка готовили серийные срезы толщиной 4-5 мкм, которые окрашивали гематоксилин-эозином. Просмотр и цифровые фотографии микропрепаратов осуществляли с помощью светового микроскопа «Olympus CX-41».
Статистическая обработка полученных данных проведена с применением методов вариационной статистики с вычислением средних величин (M), оценкой вероятности расхождений (m), оценкой достоверности изменений с использованием t-критерия Стьюдента. За достоверную принималась разность средних значений при р < 0,05.
Результаты исследования. Результаты проведенных исследований в первой серии экспериментов показали, что длительное пероральное применение раствора наносеребра не приводило к существенным изменениям состояния компонентов протеиназ-ингибиторной системы как в сыворотке крови, так и на локальном уровне. Как видно из представленных результатов (табл. 1), в сыворотке крови исследование неспецифических протеиназ и их ингибиторов не выявило различий в группах, получавших раствор наносеребра и дистиллированную воду.
Сходная ситуация была отмечена и на местном уровне. В супернатанте го-могената слизистой желудка применение раствора наносеребра в качестве питья характеризовалось маловыраженными изменениями эластазаподобной и трипси-ноподобной активностей, а также кислотостабильных ингибиторов. Вместе с тем из всех изученных показателей обращает внимание снижение уровня антитрип-тической активности на 70% по сравнению с ее уровнем в контрольной группе
Таблица 1. Изменение показателей протеиназ и их ингибиторов в сыворотке крови крыс без моделирования патологии при пероральном применении раствора наносеребра
Контроль Наносеребро
Показатели n=9 n=9
ЭПА M±m 1,57±0,48 i,66±0,25
мкМ/мл • мин Pi >0,5
ТПА M±m 0,49±0,08 0,40±0,06
мкМ/мл • мин Pi >0,5
АТА M±m 34,81±6,02 41,41±5,01
ИЕ /мл Pi >0,5
КСИ M±m 7,07±0,82 5,58±0,52
ИЕ/мл Pi >0,25
Примечание:р1 — достоверность различий по отношению к контролю.
(табл. 2). Тем не менее отсутствие роста активности как трипсиноподобных, так и эластазаподобных протеиназ свидетельствует о сохранении достаточного уровня антипротеиназного потенциала в слизистой оболочке желудка.
Таблица 2. Изменение показателей протеиназ и их ингибиторов в супернатанте гомогената слизистой оболочки желудка крыс без моделирования патологии при пероральном применении раствора наносеребра
Контроль Наносеребро
Показатели n=9 n=9
ЭПА M±m 29,60±3,47 36,76±7,86
мкМ/мг мин Pi >0,5
ТПА M±m 29,09±3,32 2i,94±4,i5
мкМ/мг • мин Pi >0,5
АТА M±m 78,74±4,i4 23,47±i,70
ИЕ /мг Pi <0,0i
КСИ M±m 2i,0i±2,66 24,20±i,78
ИЕ/мг Pi >0,5
Примечание:р! — достоверность различий по отношению к контролю.
Микроскопическое исследование желудка крыс как контрольной, так и опытной группы выявило однотипную гистологическую картину, присущую особям данного возраста. Слизистая желудка крыс контрольной группы характеризовалась многочисленными складками, покрытыми однослойным призматическим эпителием. В собственной пластинке слизистой располагались многочисленные железы, содержащие главные, париетальные и слизистые экзокриноциты, были обнаружены диффузно расположенные различные иммунокомпетентные клетки в строме, а в подслизистом слое единичные лимфоидные фолликулы (рис. 1).
При гистологическом исследовании слизистой желудка крыс, которых поили раствором наносеребра, картина была аналогичной вышеприведенной, однако основной особенностью была более выраженная способность слизистой к фоллику-лообразованию. Так, в ряде срезов, на фоне интактной слизистой, определяется несколько увеличенное количество лимфоидных фолликулов в подслизистом слое,
Рис. 1. Гистологическая структура стенки желудка крысы контрольной группы. Ув. 10x40. Окраска гематоксилин-эозином.
Рис. 2. Слизистая пищеводно-желудочного перехода крысы при пероральном применении раствора наносеребра. Слабая субэпителиальная лимфоидная инфильтрация. Ув. 10x10. Окраска гематоксилин-эозином.
что может свидетельствовать об активации местных факторов иммунной защиты (рис. 2).
Во второй серии экспериментов при моделировании язвы желудка отмечались более существенные сдвиги в протеиназ-ингибиторной системе. Так, в сыворотке крови через 24 ч после моделирования язвы была отмечена тенденция к повышению эластазаподобных и трипсиноподобных протеаз на фоне повышения анти-триптической активности (табл. 3). На местном уровне в слизистой желудка наблю-
Таблица 3. Изменение показателей протеиназ и их ингибиторов в сыворотке крови при моделировании язвы желудка на фоне перорального применения раствора наносеребра
Показатели Контроль Язва желудка Язва желудка + наносеребро
n=9 п=10 п=10
ЭПА мкМ/мл • мин M±m 1,57±0,48 2,06±0,26 1,85±0,24
Pi >0,5 >0,5
Р2 >0,5
ТПА мкМ/мл • мин M±m 0,49±0,08 0,50±0,15 0,28±0,09
Pi >0,5 >0,1
Р2 >0,25
АТА ИЕ /мл M±m 34,81±6,02 37,44±3,34 29,57±3,83
Pi >0,5 >0,5
Р2 >0,5
КСИ ИЕ/мл M±m 7,07±0,82 6,75±1,08 6,91±0,62
Pi >0,5 >0,5
Р2 >0,5
Примечание: р1 — достоверность различий по отношению к контролю, р2— достоверность различий по отношению к группе с моделированием язвы желудка.
дались более выраженные сдвиги компонентов протеиназ-ингибиторной системы, о чем свидетельствовало достоверное увеличение эластазаподобной активности на 160% и трипсиноподобной активности на 45% по сравнению с контролем. Причем на фоне роста активности протеиназ происходило достоверное снижение уровня антитриптической активности и кислотостабильных ингибиторов на 40% и 33% соответственно.
Превентивное использование раствора наносеребра в качестве питьевого субстрата в течение 21 дня до моделирования язвенного повреждения слизистой желудка приводило к менее выраженным сдвигам показателей компонентов про-теиназ-инигибиторной системы. Причем, если на системном уровне наблюдалась только тенденция к уменьшению уровня неспецифических протеиназ (табл. 3), то на локальном уровне в слизистой оболочке желудка отмечалась существенно менее выраженная активация протеолитических ферментов с одновременной стабилизацией ингибиторного потенциала. Так, уровень активации эластазаподобной и трипсиноподобной активностей был ниже соответственно на 30% и 37% средних показателей в группе с моделированием язвы желудка, при этом значение ТПА оставалось на уровне контроля. Ингибиторы протеиназ, напротив, сохранялись на относительно высоком уровне, о чем свидетельствовали более высокие показатели антитриптической активности, на 38% выше, чем в группе без применения наносеребра и уровня кислотостабильных ингибиторов, который также был больше на 21% (рис. 3).
Выявленные изменения показателей в системе протеолиза при моделировании острой язвы желудка сопровождались характерными морфологическими изменениями в слизистой оболочке, которые характеризовались существенными воспалительно-деструктивными изменениями. Так, во всем объеме среза определялся выраженный отек, массивная нейтрофильная инфильтрация, полнокровие сосу-
Рис. 3. Изменения показателей протеиназ и их ингибиторов в суперна-танте гомогената слизистой желудка при моделировании язвы желудка на фоне перорального применения раствора наносеребра.
Достоверность различий (р) по отношению к контролю:* — р<0,05; ** — р<0,01; *** — р<0,001.
Рис. 4. Дно язвенного дефекта желудка крысы без применения раствора наносеребра. Ув. 10x10. Окраска гематоксилин-эозином.
дов. Дном язвенного дефекта являлся мышечный слой, покрытый лейкоцитарно-тканевым детритом и фибринозным экссудатом (рис. 4).
Морфологическая картина слизистой желудка крыс в группе с пероральным профилактическим применением раствора наносеребра при язве желудка также характеризовалась наличием язвенного дефекта, воспалительной гиперемией и отеком, однако глубина язвы и выраженность лейкоцитарной инфильтрации были существенно меньше (рис. 5).
Рис. 5. Слизистая желудка крысы при моделировании острой язвы на фоне перорального применения раствора наносеребра. Ув. 10x10. Окраска гематоксилин-эозином.
Обсуждение. Таким образом, как показали проведенные исследования, использование раствора наносеребра в качестве питьевого субстрата для интактных животных в течение длительного времени не приводило к существенным сдвигам в протеиназ-ингибиторной системе как на системном, так и на локальном уровне, что говорит об отсутствии провоспалительных эффектов у исследуемого раствора.
Превентивное использование раствора наносеребра в качестве профилактики формирования язвенного повреждения желудка приводило к развитию менее выраженных проявлений язвенного повреждения слизистой желудка, чем в группе лабораторных животных, которые пили только дистиллированную воду. В нашем эксперименте было показано, что моделирование острой язвы слизистой желудка, помимо морфологических изменений, сопровождается острофазной реакцией компонентов системы протеолиза, в большей степени выраженной на местном уровне, о чем свидетельствовало достоверное увеличение эластаза- и трипсиноподобной активности с одновременным снижением антитриптической активности и уровня кислотостабильных ингибиторов. Пероральное использование наносеребра до моделирования язвы желудка, напротив, приводит к развитию менее выраженных проявлений язвенного повреждения слизистой желудка. Так, при изучении активностей протеиназ и их ингибиторов, установлено, что на местном уровне профилактический пероральный прием раствора наносеребра на протяжении 21 дня, предшествующего моделированию острой язвы желудка, характеризуется к концу первых суток после выполнения модели более слабой активацией неспецифических протеиназ, а ингибиторный потенциал сохраняется на достаточно высоком уровне. Кроме того, при применении наносеребра отмечаются менее выраженные проявления признаков воспалительной альтерации на морфологическом уровне.
Очевидно нельзя исключить возможные эффекты альгината натрия, входящего в состав исследуемого раствора. Так, препараты с альгинатом натрия нашли широкое применение в практической медицине как средства «скорой помощи» при
изжоге и лечения гастроэзофагеальной рефлюксной болезни [15, 16]. Однако анализ литературы показал, что механизм действия альгината натрия направлен прежде всего на ликвидацию кислотной агрессии путем образования так называемого геля, который предохраняет слизистую оболочку пищевода, а также связан с формированием механического барьера-плота, который предупреждает заброс содержимого желудка в пищевод [17]. Альгинат натрия не предотвращает полностью развития деструктивных повреждений и нарушения трофики желудка, а только лишь снижает риск развития глубокой патологии [18].
Так или иначе, применение наносеребра в комплексе с альгинатом натрия способствует формированию менее выраженных проявлений язвенного дефекта при моделировании острой язвы желудка, что обосновывает возможность его использования для профилактики развития гастродуоденальных язв.
Таким образом, пероральное применение раствора наносеребра в качестве питьевого субстрата в течение длительного периода времени у интактных животных сопровождается слабовыраженной реакцией компонентов протеиназ-ингибитор-ной системы как на системном, так и на местном уровне, что свидетельствует о минимальных эффектах влияния наносеребра на реакцию интактных тканей слизистой желудка.
Превентивное пероральное использование наносеребра приводит к развитию менее выраженных проявлений язвенного повреждения слизистой при моделировании язвы желудка, о чем свидетельствует более низкий уровень активации неспецифических протеиназ с сохранением высокого ингибиторного потенциала, чем в группе без применения наносеребра.
Сдерживание активации протеолитических ферментов и сохранение достаточно высокого ингибиторного потенциала раствора наносеребра в качестве превентивного средства формирования язвенного дефекта слизистой желудка свидетельствует о наличии противовоспалительных эффектов наносеребра, что является основой для проведения дальнейших исследований.
Литература
1. ZhangL, Gu F. X., Chan J. M. et al. Nanoparticles in medicine: therapeutic applications and developments // Clin. Pharmacol. Ther. 2008. Vol. 83, N 5. P. 761-769.
2. Chen X., Schlusener H. J. Nanosilver: nanoproduct in medical application // Toxicol. Lett. 2008. Vol. 76. P. 1-12.
3. Чекман И. С., Мовчан Б. А., Загородный М. И. и др. Наносеребро: технологии получения, фармакологические свойства, показания к применению // Препараты и технологии. 2008. № 5 (51). C. 32-34.
4. Babanin A. A., Kubyshkin A. V., Ermola Yu. A. et al. Changes of nonspecific proteinases and free-radical oxidation processes in treatment of experimental peritonitis with the nanobiosilver solution // The New Armenian Medical Journal. 2014. Vol. 8, N 1. P. 46-51.
5. Чекман И. С., Прискока А. О., Бабий В. Ф. и др. Медицинское применение наночастиц серебра: токсикологический аспект // Современные проблемы токсикологии. 2010. № 4. С. 10-13.
6. Bidgoli S. A., Mahdavi M., Rezayat S. M. et al. Toxicity Assessment of Nanosilver Wound Dressing in Wistar Rat // Acta Medica Iranica. 2013. Vol. 51, N 4. P. 203-208.
7. Cheraghi J., Hosseini E., Hoshmandfar R. et al. In vivo effect of Silver Nanoparticles on serum ALT, AST and ALP activity in male and female mice // Advances in Environmental Biology. 2013. Vol. 7 (1). P. 116-122.
8. Зайчик А. Ш., Чурилов Л. П. Патофизиология (в 3-томах). Т. 3. Механизмы развития болезней и синдромов. Изд. 2-е, доп.и перераб. СПб.: ЭЛБИ-СПб, 2005. 507 с.
9. Строев Ю. И., ЧуриловЛ. П., Варзин С. А. Клинико-патофизиологические размышления о болевом синдроме при язвенной болезни // Медицина — XXI век. 2009. № 14. С. 46-53.
10. Анисимова Л. В. Состояние местной неспецифической протеиназ-ингибиторной системы при экспериментальной язве слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта // Архив клинической и экспериментальной медицины. 2006. Т. 15, № 2. С. 141-144.
11. Юркова И. Н., Эстрелла-Льопис В. Р., Рябушко В. И., Рябушко Л. И. Пат. UA Украина 10539. МКИ 7 А61К33/38, А61К31/715 Способ получения водорастворимой бактерицидной композиции, которая содержит наночастицы серебра // Бюллетень. 2005. №11. 3 с.
12. Скоупс Р. Методы очистки белков. М.: Мир, 1985. 358 с.
13. Скрипник И. М. Биохимические механизмы развития язвы желудка в условиях стресса // Укр. биохим. журн. 2001. Т. 73, № 1. С. 110-114.
14. Кубышкин А. В., Харченко В. 3., Семенец П. Ф. и др. Методы определения активности неспецифических протеиназ и их ингибиторов в сыворотке крови и биологических жидкостях. Киев, 2010. 28 с.
15. Tytgat G. N., McColl K., Tack J. et al. New algorithm for the treatment of gastroesophageal reflux disease // Aliment Pharmacol Ther. 2008. Vol. 27, N 3. P. 249-256.
16. Бордин Д. С., Машарова А. А., Кожурина Т. С. Альгинатный тест как критерий диагностики гастроэзофагеальной рефлюксной болезни // Consilium medicum гастроэнтерология. 2011. № 1. С. 5-9.
17. Булгаков С. А. Альгинаты в купировании клинических проявлений диспепсии и гастроэзофагеальной рефлюксной болезни // Сучасна гастроентеролоия. 2013. № 1 (69). С. 81-84.
18. Хасина Э. И., Кривоногова А. С. Протективное действие альгината натрия при поражениях желудка, индуцированных эмоциональным стрессом, индометацином и пестицидами // Аграрный вестник Урала. 2009. № 11 (65). С. 92-94.
References
1. Zhang L, Gu F. X., Chan J. M. et al. Nanoparticles in medicine: therapeutic applications and developments. Clin. Pharmacol. Ther., 2008, vol. 83, no. 5, pp. 761-769.
2. Chen X., Schlusener H. J. Nanosilver: nanoproduct in medical application. Toxicol. Lett., 2008, vol. 76, pp. 1-12.
3. Chekman I. S., Movchan B. A., Zagorodnyi M. I. i dr. Nanoserebro: tekhnologii polucheniia, farmakologicheskie svoistva, pokazaniia k primeneniiu [Nanosilver: technologies of production, pharmacological properties, indications to application]. Preparaty i tekhnologii [Preparations and technology], 2008, no. 5 (51), pp. 32-34. (In Russian)
4. Babanin A. A., Kubyshkin A. V., Ermola Yu. A. et al. Changes of nonspecific proteinases and free-radical oxidation processes in treatment of experimental peritonitis with the nanobiosilver solution. The New Armenian Medical Journal, 2014, vol. 8, no. 1, pp. 46-51.
5. Chekman I. S., Priskoka A. O., Babii V. F. i dr. Meditsinskoe primenenie nanochastits serebra: toksikologicheskii aspekt [Medical applications of silver nanoparticles: toxicological aspect]. Sovremennye problemy toksikologii [Modern problems of toxicology], 2010, no. 4, pp. 10-13. (In Russian)
6. Bidgoli S. A., Mahdavi M., Rezayat S. M. et al. Toxicity Assessment of Nanosilver Wound Dressing in Wistar Rat. Acta Medica Iranica, 2013, vol. 51, no. 4, pp. 203-208.
7. Cheraghi J., Hosseini E., Hoshmandfar R. et al. In vivo effect of Silver Nanoparticles on serum ALT, AST and ALP activity in male and female mice. Advances in Environmental Biology, 2013, vol. 7 (1), pp. 116-122.
8. Zaichik A. Sh., Churilov L. P. Patofiziologiia (v 3-tomakh). T. 3. Mekhanizmy razvitiia boleznei i sindromov [Pathophysiology (in 3-volumes), vol. 3. Mechanisms of the diseases and syndromes development]. 2nd ed. revised and supplemented. St. Petersburg, ELBI-SPb Publ., 2005. 507 p. (In Russian)
9. Stroev Iu. I., Churilov L. P., Varzin S. A. Kliniko-patofiziologicheskie razmyshleniia o bolevom sindrome pri iazvennoi bolezni [Clinical and pathophysiological reflections on pain syndromes in peptic ulcer disease]. Meditsina — XXI vek [Medicine-XXI century], 2009, no. 14, pp. 46-53. (In Russian)
10. Anisimova L. V. Sostoianie mestnoi nespetsificheskoi proteinaz-ingibitornoi sistemy pri eksperimental'noi iazve slizistoi obolochki zheludochno-kishechnogo trakta [The state of local nonspecific proteinase-inhibitory system in experimental ulcer of the mucous membrane of the gastro-intestinal tract ]. Arkhiv klinicheskoi i eksperimental'noi meditsiny [Archives of clinical and experimental medicine], 2006, vol. 15, no. 2, pp. 141-144. (In Russian)
11. Iurkova I. N., Estrella-Lopis V. R., Riabushko V. I., Riabushko L. I. Pat. UA Ukraina 10539. MKI 7 A61K33/38, A61K31/715 Sposob polucheniia vodorastvorimoi bakteritsidnoi kompozitsii, kotoraia soderzhit nanochastitsy serebra [The patent of the invention no 10539, MCI 7 A61K33/38, A61K31/715. A method for producing a water-soluble bactericidal composition comprising silver nanoparticles]. Biulleten [Bulletin], 2005, no. 11. 3p. (In Russian)
12. Skoups R. Metody ochistki belkov [Proteinpurification]. Moscow, Mir Publ., 1985. 358 p. (In Russian)
13. Skripnik I. M. Biokhimicheskie mekhanizmy razvitiia iazvy zheludka v usloviiakh stressa [Biochemical mechanism of ulcer development under stressful conditions]. Ukr. biokhim. zhurn. [The Ukr. Biochem. Journal], 2001, vol. 73, no. 1, pp. 110-114.
14. Kubyshkin A. V., Kharchenko V. Z., Semenets P. F. i dr. Metody opredeleniia aktivnosti nespetsificheskikh proteinaz i ikh ingibitorov v syvorotke krovi i biologicheskikh zhidkostiakh [Methods of determination of the nonspecific proteinases and their inhibitors activity in blood serum and biological fluids (Methodical recommendation)]. Kiev, 2010. 28 p.
15. Tytgat G. N., McColl K., Tack J. et al. New algorithm for the treatment of gastroesophageal reflux disease. Aliment Pharmacol Ther., 2008, vol. 27, no. 3, pp. 249-256.
16. Bordin D. S., Masharova A. A., Kozhurina T. S. Al'ginatnyi test kak kriterii diagnostiki gastroezofageal'noi refliuksnoi bolezni [Alginate test as criterion of gastroesophageal reflux disease diagnostics]. Consilium medicum gastroenterologiia [Consilium medicum (gastroenterology)], 2011, no. 1, pp. 5-9. (In Russian)
17. Bulgakov S. A. Al'ginaty v kupirovanii klinicheskikh proiavlenii dispepsii i gastroezofageal'noi refliuksnoi bolezni [Alginates in the removal of clinical manifestations of dyspepsia and gastroesophageal reflux disease]. Suchasnagastroenterologiia [Contemporarygastroenterology], 2013, no. 1 (69), pp. 81-84.
18. Khasina E. I., Krivonogova A. S. Protektivnoe deistvie al'ginata natriia pri porazheniiakh zheludka, indutsirovannykh emotsional'nym stressom, indometatsinom i pestitsidami [Protective action of sodium alginate in the gastric lesions induced by emotional stress, indomethacin and pesticides]. Agrarnyi vestnik Urala [Agrarian Bulletin of the Urals], 2009, no. 11 (65), pp. 92-94. (In Russian)
Статья поступила в редакцию 30 декабря 2014 г.
Контактная информация
Чегодарь Денис Владимирович — ассистент кафедры общей и клинической патофизиологии;
chegodar_d@ukr.net
Кубышкин Анатолий Владимирович — заведующий кафедрой общей и клинической
патофизиологии, доктор медицинских наук, профессор; anatoly2802@gmail.com
Chegodar Denis V. — Assistant of the department of general and clinical pathophysiology;
chegodar_d@ukr.net
Kubyshkin Anatoly V. — Head of the department of general and clinical pathophysiology, Doctor of
Medicine, professor; anatoly2802@gmail.com
