CC BY
50
УДК 619:612.115:636.271
Влияние аквапунктуры на реологические свойства крови крупного рогатого скота
Ткачева Елена Сергеевна, соискатель кафедры анатомии и физиологии е-mail: kafanat@vf.molochnoe.ru
ФГБОУ ВПО «Вологодская государственная молочнохозяйственная академия имени Н.В. Верещагина»
Ошуркова Юлия Леонидовна, доцент кафедры анатомии и физиологии, канд. биологических наук
е-mail: kafanat@vf.molochnoe.ru
ФГБОУ ВПО «Вологодская государственная молочнохозяйственная академия имени Н.В. Верещагина»
Аннотация: изучено влияние аквапунктуры с использованием физиологического раствора на реологические свойства крови по показателям системы гемостаза у клинически здоровых коров черно-пестрой породы.
Ключевые слова: плазменный гемостаз, тромбоцитарный гемостаз, крупный рогатый скот, аквапунктура.
Аквапунктура (инъекционная терапия) - введение в акупунктурные или болевые точки дистиллированной воды или растворов лекарственных веществ. Аквапунктура является одной из разновидностей рефлексотерапии, экологически чистого и экономически оправданного метода профилактики, стимуляции и лечения незаразных заболеваний животных [9].
Клинический эффект реализуется благодаря изменениям биохимических процессов и выработке биологически активных веществ на местном, органном и системном уровнях организма в ответ на инъекционную терапию, что приводит к нормализации функционирования клеток, тканей, органов, систем и всего организма в целом. Благодаря непосредственному воздействию на основные проводящие системы организма (нервную, сосудистую, лимфатическую) и опосредованной активизации главных управляющих систем (центральная нервная система, эндокринная, иммунная), аквапунктура является эффективным методом в лечении широкого ряда заболеваний [1, 5, 6].
Кроме того, в настоящее время интерес многих исследователей прикован к изучению системы гемостаза. Факторы гемостаза принимают участие в сохранении жидкого состояния крови, регуляции транскапиллярного обмена, резистентности сосудистой стенки, влияют на интенсивность репаративных процессов и многие другие процессы [5, 7]. При этом гемостатический процесс всегда включается в компенсаторно-приспособительные реакции организма, становясь непременным патогенетическим звеном различных заболеваний. В связи с этим раскрытие закономерностей реагирования системы гемостаза на аквапунтктуру представляет фундаментальный интерес для разработки методов эффективного предупреждения и лечения различных проявлений внутрисосудистого свертывания крови, влекущего за собой нарушения системного кровообращения.
Целью исследования данной работы явилось изучение изменений реологических свойств крови по показателям системы гемостаза у коров черно-пестрой породы после применения аквапунктуры с использованием физиологического раствора.
Материалы и методы. Исследования проводили в феврале-марте 2014 года в ОАО «Заря» отделение Молочное на здоровых телках случного возраста черно-пестрой породы (п = 10). В процессе исследования все животные содержались в одинаковых условиях в соответствии с зоогигиеническими требованиями.
Кровь животных исследовалась до и после аквапунктуры с применением физиологического раствора.
Аквапунктуру проводили дважды, в поясничной области. Зоны инфильтрации располагались по сторонам от срединной линии туловища на протяжении от остистого отростка 3-4-го поясничного до 1-2-го крестцового позвонков. Ширина участка инфильтрации достигала 3-4 см. Подогретый до температуры тела физиологический раствор вводили внутрикожно с помощью безыгольного инъектора Би-7М. Первоначально производили внутрикожное введение до образования сплошной припухлости типа «лимонной корочки» на всей площади участка кожи. При этом уколы располагали в шахматном порядке. В одну точку укола вводили от 0,1 до 0,2 мл раствора; расстояние между уколами оставляли 1 см. Повторные инъекции проводили через два дня. Кровь повторно исследовали через два дня после второй инъекции.
Для оценки тромбоцитарного звена системы гемостаза определяли количество тромбоцитов и их агрегационные свойства.
Подсчет количества тромбоцитов проводился по Фонио в мазке крови, стабилизированной ЭДТА, и окрашенных по Романовскому. [4]
Агрегационную активность тромбоцитов определяли количественным методом с применением фотоэлектроколориметра КФК-2 по Howard M.A. с использованием активаторов свертывания (АДФ, коллаген, ристомицин) [2]. Исследование агрегации тромбоцитов является наиболее универсальным методом анализа, цель которого - оценка «качественных» функциональных характеристик тромбоцитов, т. е. способность тромбоцитов к активации посредством образования агрегатов после активации. У коров определяли суммирующий индекс агрегации тромбоцитов (СИАТ) и индекс дезагрегации тромбоцитов (ИДТ).
Для оценки плазменного звена системы гемостаза использовали одноканаль-ный коагулометр - THROMBOSTAT производства Behnk Elektronik (Германия), на котором определяли следующие показатели: ПВ (протромбиновое время), ТВ (тромбиновое время), АЧТВ (активированное частичное тромбопластиновое время), количественный анализ фибриногена.
Противосвертывающие механизмы системы гемостаза оценивали с помощью измерения активности антитромбина III с хромогенным субстратом в бедной тромбоцитами плазме с применением фотоэлектроколориметр КФК-2.
Полученные в ходе исследования результаты обрабатывались с помощью программного пакета Microsoft Excel. Значения полученных результатов в работе представлены в виде средней величины и стандартной ошибки средней (M±m). Сравнение между собой данных проводилось с применением t-критерия Стьюден-та. Результаты исследования со значением вероятности допущения альфа-ошибки, равные либо менее 5 % (P<0,05) расценивались как статистически значимые.
Результаты исследования представлены в таблице 1.
Количество тромбоцитов у опытных животных до аквапунктуры было несколько ниже справочно-нормативных значений. После аквапунктуры количество тромбоцитов недостоверно снизилось [7]. Эти данные отличаются от результатов исследований на опытных животных, полученных в 2011-2012 годах, где подсчет количества тромбоцитов осуществлялся на гематологическом анализаторе ВС-3000 PLUS [10].
Несмотря на уменьшение количества тромбоциты были более активны под воздействием индукторов АДФ и коллагена после аквапунктуры, о чем говорит повышение суммирующего индекса агрегации тромбоцитов (СИАТ). Однако образовавшиеся агрегаты были менее устойчивы, о чем свидетельствует повышение индекса дезагрегации тромбоцитов (ИДТ).
Недостоверное повышение СИАТ с одновременным снижением ИДТ при индукции ристомицином после аквапунктуры с физиологическим раствором говорит о повышении адгезивной способности тромбоцитов с образованием более прочных комплексов. Адгезивные свойства тромбоцитов являются, пожалуй, самыми характерными для них. Способность приклеиваться и распластываться на стекле, колла-геновых волокнах, на стенке поврежденного сосуда, лишенного эндотелиального покрова, меняется при изменении электрического потенциала на наружной поверхности пластинок. Молодые пластинки гораздо быстрее прилипают к коллаге-новым волокнам и друг к другу [3, 4, 8].
Таблица 1 - Показатели системы гемостаза.
Показатели До аквапунктуры После аквапунктуры
Количество тоомбоиитов. 10"9/л 161 ± 19,18 144,66 ± 25,34
Реакция тоомбоиитов с АЛФ
СИАТ,% 12,90 ± 3,19 19,42 ± 1,75
ИЛТ, % 7,47 ± 128 9,91 ± 1,45
Реакция тоомбоиитов с коллагеном
СИАТ,% 11,06 ± 2,00 19,57 ± 1,27.
ИЛТ, % 4,48 ± 102 5,63 ± 070
Реакция тоомбоиитов с оистомииином
СИАТ, % 11,52 ± 4,98 15,60 ± 2,23
ИЛТ, % 4,83 ± 1,008 3,28 ± 0,38
Показатели плазменного гемостаза
Протромбиновое Время,с 42,65 ± 2,14 42,64 ± 4,5
Тромбиновое Время,с 19,4 ± 0,69 23,21 ± 2,31
АЧТВ,с 87,03 ± 7,32 63,43 ± 2,91.
Фибриноген, г/л 2,297 ± 0,07 2,118 ± 0,19
АТ-3,% 93,97 ± 4,87 196,6 ± 9,11.
•- разность с контрольной группой достоверна (р < 0,05)
для всех значений, представленных в таблице р< 0,01
Агрегация тромбоцитов, особенно под влиянием АДФ нуждается в ряде плазменных кофакторов, одним из которых является фибриноген. Фибриноген необходим для агрегации в очень небольших количествах. Аквапунктура недостоверно не оказала влияния на его концентрацию.
Одновременно с тромбоцитарными активируются плазменные факторы свертывания крови. Плазменный гемостаз начинается по двум направлениям - внешнему (тканевому) и внутреннему (кровяному), а завершается общим.
АЧТВ характеризует внутренний путь - протромбиназообразование и представляет собой многоступенчатый процесс, в результате которого в крови накапливается комплекс факторов, способных превратить протромбин в тромбин. Активность внутреннего пути свертывания после аквапунктуры достоверно повышалась.
На активность внешнего пути свертывания указывают показатели протром-бинового времени. Протромбиновое время характеризует активность так называемого протромбинового комплекса (факторов V, VII, X и собственно протромбина - фактора II). Аквапунктура на данный показатель влияния не оказала.
Тромбиновое время характеризует конечный этап свертывания. Тест измеряет скорость превращения фибриногена в фибрин под действием тромбина. При этом скорость образования фибринового сгустка зависит, главным образом, от количества и функциональной полноценности фибриногена и присутствия в крови антикоагулянтов. После аквапунктуры мы наблюдали недостоверное удлинение тромбинового времени.
Сохранение крови в жидком состоянии во многом определяется наличием в
кровотоке естественных веществ, обладающих антикоагулянтной активностью. Вещества, обладающие антикоагулянтной активностью, постоянно синтезируются в организме и с определенной скоростью выделяются в кровоток. Одним из антикоагулянтов является антитромбин 3. После аквапунктуры его концентрация достоверно увеличилась. Возможно это является компенсаторной реакцией на повышение агрегационной активности тромбоцитов и активацию внутреннего пути свертывания крови [4, 6, 8].
Выводы. Под влиянием аквапунктуры наблюдали достоверное усиление коллаген-индуцированной агрегации тромбоцитов с образованием нестабильных агрегатов. Плазменный гемостаз изменялся разнонаправленно, что характерно для реакций напряжения. При этом повышение активности внутреннего пути свертывания крови достоверно сопровождалось усилением противосвертывающих механизмов, что оптимизирует процессы микроциркуляции в органах и тканях.
Список литературных источников:
1. Аквапунктура в ветеринарии: история, теория, эксперимент, практика : учебно-методическое пособие / Сост. А. В. Рыжаков [и др.]. - Вологда ; Молочное : ИЦ ВГМХА, 2013. - 63 с.
2. Балуда, В. П. Лабораторные методы исследования системы гемостаза / В. П. Балуда, З. С. Баркаган, Е. Д. Гольдберг. - Томск, 1980. - 304 с.
3. Берковский, А. Л. Пособие по изучению адгезивно-агрегационной активности тромбоцитов / А. Л. Берковский [и др.]. - М. : НПО «Ренам», 2003. - 29 с.
4. Долгов, В. В. Лабораторная диагностика нарушений гемостаза / В. В. Долгов, П. В. Свирин. - Триада, 2005.- 227 с.
5. Жаркин А. Ф., Жаркин Н, А. Рефлексотерапия в акушерстве и гинекологии. - Л. : Медицина, 1988. - 160с.
6. Медведев, И. Н. Физиологическое становление тромбоцитарного звена гемостаза у продуктивных животных в постнатальном онтогенезе : дис. ... д-ра биол. наук (03.00.13) / И. Н. Медведев. - Чебоксары, 2008. - 396 с.
7. Мейер Д. Ветеринарная лабораторная медицина. Интерпретация и диагностика / Д. Мейер, Дж. Харви; пер. с англ. - М. : Софион, 2007. - 456 с.
8. Ошуркова, Ю. Л. Состояние тромбоцитарного звена системы гемостаза у лактирующих коров [Электронный ресурс] / Ю. Л. Ошуркова, Л. Л. Фомина, Е. Н. Соболева // Молочнохозяйственный вестник. - 2011. - №1, II кв. - С. 20-22. Режим доступа: http://molochnoe.ru/journal/sites/molochnoe.ru.journal/files/jrnl_ publication/vypusk1.pdf.
9. Ткачева, Е. С. Влияние аквапунктуры на биохимические показатели крови коров / А. И. Вечеринина // Научное обозрение. - 2013. - №6 - С. 8-11.
10. Ткачева, Е. С. Реакции тромбоцитов крупного рогатого скота на аква-пунктуру / Е. С. Ткачева, Ю. Л. Ошуркова // Молочнохозяйственный вестник. -2012. - №2(6), II кв. - С. 18-21. Режим доступа: http://molochnoe.ru/journal/sites/ molochnoe.ru.journal/files/jrnl_publication/vestnik6_0.pdf.
Aquapuncture's influence on rheological properties
of cattle's blood
Tkachyova Yelena Sergeevna, Applicant at the Anatomy and Physiology Department e-mail:kafanat@vf.molochnoe.ru
FSBEI HPE the Vereshchagin Vologda State Dairy Farming Academy
Oshurkova Yulia Leonidovna, Candidate of Sciences (Agriculture), Associate professor of the Anatomy and Physiology Department e-mail:kafanat@vf.molochnoe.ru
FSBEI HPE the Vereshchagin Vologda State Dairy Farming Academy
Abstract. The paper deals with aquapuncture's influence (injected with saline) on rheological properties of cattle's blood. The hemostasis indices of clinically healthy black and white breed cattle has been determined.
Keywords: plasma hemostasis, platelet hemostasis, cattle, aquapuncture.
