CC BY
97
Journal of Stress Physiology & Biochemistry, Vol. 11 No. 4 2015, pp. 118-127 ISSN 1997-0838 Original Text Copyright © 2015 by Korsukova, Borovik, Grabelnych and Voinikov
ORIGINAL ARTICLE
The Tebuconazole-based Protectant of Seeds “Bunker” Induces the Synthesis of Dehydrins During Cold Hardening and Increases the Frost Resistance of
Wheat Seedlings
A.V. Korsukova1,2*, O.A. Borovik1, O.I. Grabelnych1,2,
V.K. Voinikov1
1 Siberian Institute of Plant Physiology and Biochemistry, SB RAS, Irkutsk, Russia
2 Irkutsk State University, Irkutsk, Russia
*E-Mail: avkorsukova@smail.com
Received October 15, 2015
Triazole derivatives are widely used in agriculture for seed protectant of cereals against seed and soil infection. Triazole derivatives can have an effect on the biochemical and physiological functions of plants. The tebuconazole-based protectant of seeds «Bunker» (content of tebuconazole 60 grams per liter, g/L) is a systemic fungicide of preventive and therapeutic action. The effect of the seed treatment by «Bunker» preparation on the shoot growth and cell viability coleoptile, synthesis of dehydrins in shoots and frost resistance etiolated winter and spring wheat seedlings has been studied. It has been shown that treatment of winter and spring wheat seed by «Bunker» preparation induces similar concentration-dependent inhibition of the coleoptiles length. At the recommended dose (0,5 liter per tonne of seeds, L/t) growth inhibition was 28 - 30%, at a concentration of 1 L/t - 33 - 36%, at a concentration of 1,5 L/t - 40 - 42%, at a concentration of 3 L/t - 43 - 47%, at a concentration of 4 L/t - 48 - 51% and at 5 L/t - 53 - 56%. The treatment of wheat seed by «Bunker» preparation had no phytotoxic effect on coleoptile cells in any of the studied concentrations, on the contrary, with increasing concentration of preparation observed the increase in cell viability, as measured by recovery of 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride. We can assume that having retardant properties, tebuconazole not only inhibits the growth of plants, but also delays their aging. The treatment of seed protectant at a concentration of 1.5 L/t induced synthesis of the dehydrins with molecular masses about 19, 21,22, 25 and 27 kD in winter wheat shoots and 18,6, 27 and 28,5 kD in spring wheat shoots during cold hardening. Among identified dehydrins the dehydrin of 27 kD is most significantly induced both in winter and spring wheat. The treatment of seed protectant «Bunker» in the same concentration increased the frost resistance of winter and spring wheat seedlings. It is supposed that increasing of cold and frost resistance of winter and spring wheat caused by seed treatment of the tebuconazole-based protectant may be associated with increase of the abscisic acid content - one of the triggers of the low-temperature adaptation of plants. It is concluded that tebuconazole-based protectant of seeds «Bunker» increases the resistance of wheat to low temperature, affecting the growth processes and the synthesis of stress proteins.
Key words: triazole, tebuconazole, growth inhibition, frost resistance, dehydrins, winter wheat, spring wheat
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 11 No. 4 2015
119
The Tebuconazole-based Protectant of Seeds...
Одной из важнейших сельскохозяйственных (Theocharis et al., 2012). Одной из основных групп
задач было и остается решение проблемы холодо-, белков при низкотемпературном стрессе является
морозо- и зимостойкости возделываемых культур. группа COR/LEA - белков (Monroy et al., 2007; Hara,
В настоящее время в сельском хозяйстве активно 2010; Hanin et al., 2011). Эта группа включает LEA-
используются системные фунгициды - ингибиторы II белки, к которым относятся дегидрины,
C -деметилирования, среди которых ведущие содержание которых возрастает при
позиции занимают азолы, содержащие в своей обезвоживании. Благодаря своей гидрофильности
молекуле триазольную или имидазольную группы. и шапероноподобной активности дегидрины
Наибольшее применение получили производные предотвращают деградацию и коагуляцию ряда
триазола - ингибиторы синтеза стеринов и макромолекул клеточных структур при
терпеноидов (Popov et al., 2003). Производные обезвоживании их внеклеточным льдом (Skriver
триазола - ретарданты, которые не только and Mundy, 1990; Goyal et al., 2005). Кроме этого,
подавляют биосинтез гиббереллина, но и дегидрины проявляют криопротекторную,
увеличивают содержание эндогенной абсцизовой антифризную и антиоксидантную активности
кислоты (АБК), оказывая, таким образом, (Rorat, 2006; Hara, 2010; Hanin et al., 2011).
ингибирующее влияние на прорастание семян и Показано, что содержание дегидринов
рост осевых органов растений, имеют увеличивается при закаливании растений в
ростостимулирующее действие на корневую осенний период и снижается во время
систему (Prusakova and Chizhova, 1998). Триазолы деакклимации весной (Bubjakina et al., 2011; Petrov
характеризуются низкой фитотоксичностью по et al., 2011; Ponomarev et al., 2014).
сравнению с другими ретардантами, эффективны Одним из представителей соединений
в малых дозах и экологически безопасны триазолиевого ряда является тебуконазол (1-(4-
(Prusakova and Chizhova, 1998). хлорфенил)-4,4-диметил-3-(1H-1,2,4-триазол-1-
Увеличение содержания эндогенной АБК илметил)-3-пентанол). Тебуконазол обладает
рассматривается как один из триггеров профилактическим и лечебным системным
низкотемпературной адаптации растений (Titov et действием, эффективен против всех видов
al., 2006). АБК индуцирует синтез стрессовых ржавчины зерновых культур, подавляет
белков при действии низких температур головнёвые грибы, возбудителей корневых гнилей
(Chinnusamy et al., 2006; Theocharis et al., 2012). и плесневения семян (Popov et al., 2003).
АБК-зависимая экспрессия генов регулируется Учитывая, что производные триазола обладают
транскрипционными факторами, которые ретардантным действием и повышают содержание
принадлежат к семействам bZIP, MYC и MYB эндогенной АБК, можно предположить, что эти
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 11 No. 4 2015
Korsukova et al.
120
вещества будут влиять на синтез стрессовых выращенных из необработанных (контроль) и
белков и холодо- и морозоустойчивость растений. обработанных препаратом «Бункер» семян.
Тебуконазол-содержащий препарат «Бункер» Для определения жизнеспособности клеток
(содержание тебуконазола составляет 60 г/л) колеоптилей использовали метод восстановления
является системным фунгицидом красителя 2,3,5-трифенилтетразолий хлорида
профилактического и лечебного действия для (ТТХ) (Enikeev et al., 1995). Для этого колеоптили
протравливания семян зерновых культур против 5-ти суточных проростков злаков (0,1 г)
семенной и почвенной инфекции (производитель инфильтровали раствором K-Na фосфатного
ЗАО Фирма «Август»). В настоящей работе буфера (pH 7,0), содержащего 0,5% ТТХ, и
изучалось влияние обработки семян препаратом инкубировали в анаэробных условиях при 26 °C в
«Бункер» на синтез дегидринов при холодовом течение 12 ч в темноте. Затем краситель удаляли 3-
закаливании и морозоустойчивость проростков х кратным промыванием дистиллированной водой.
озимой и яровой пшеницы. Продукт восстановления ТТХ - формазан
MATERIALS AND METHODS экстрагировали 96%-м этиловым спиртом в течение
В работе использовали этиолированные 15 мин при 60 °C. Концентрацию формазана
проростки мягкой яровой (сорт «Новосибирская рассчитывали по оптической плотности раствора
29») и озимой (сорт «Иркутская») пшеницы при 490 нм. Расчёт проводили в относительных
(Triticum aestivum L.). Обработку семян единицах (отн. ед.) на 1 г сырого веса
протравителем проводили непосредственно перед (восстановление ТТХ, А49(/г сырого веса).
их размещением на подложки кювет. Для Контролем служили колеоптили 5-ти суточных
обработки использовали водный раствор этиолированных проростков, гибель которых
препарата «Бункер» разной концентрации (0,5, 1, вызывали кипячением в течение 15 мин.
1,5, 3, 4 и 5 литров на тонну семян, л/т). В Холодовому закаливанию подвергали 3-х
лабораторных экспериментах проводили пересчёт суточные этиолированные проростки пшеницы,
на вес семян в граммах (мкл/г). выращенные из необработанных и обработанных
Для определения степени ингибирования роста препаратом «Бункер» семян. Закаливание
и жизнеспособности клеток колеоптилей семена проводили в темноте при температуре 2 °С в
проращивали в течение 5-ти суток на влажной течение 7-ми суток в камере тепла/холода MKT-240
фильтровальной бумаге при 24 °С в темноте. (ЦКП Фитотрон СИФИБР СО РАН). Закалённые
Степень ингибирования роста побегов проростки промораживали при температурах -2, -
этиолированных проростков злаков (I, %) 4, -6, -8, -10 °С (снижение температуры
определяли согласно (Ivanov, 1974), замеряя длину происходило со скоростью 1 °С/ч один раз в
колеоптилей 5-ти суточных проростков, сутки). После этого температуру повышали,
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 11 No. 4 2015
121
The Tebuconazole-based Protectant of Seeds...
моделируя условия раззакаливания: -8, -6, -4, 0, 4 °С (продолжительность обработки каждой температурой составляла 24 ч за исключением обработок температурами -8 и 4 °С, которые длились 12 ч). Для изучения изменений в синтезе дегидринов отбирали побеги до закаливания (контроль в возрасте 3-х суток), закаленные в течение 7-ми суток при 2 °С и подвергнутые раззакаливанию 4 °С в течение 12 ч.
Для оценки морозоустойчивости проростков закалённые этилированные проростки из необработанных и обработанных препаратом «Бункер» семян промораживали при температуре -7 °С в течение 24 ч. Затем проростки оттаивали при 2 °С в течение суток, после чего оставляли растения отрастать в темноте при 24 °С в течение 3-х - 7-ми суток. Количество выживших после промораживания проростков выражали в процентах от общего числа проростков.
Выделение общего белка из побегов проростков озимой и яровой пшеницы проводили по ранее описанной методике (Pobezhimova et al., 2004). Содержание дегидринов в побегах изучали с помощью электрофореза в 12,5% полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия и вестерн-блоттинга (Pobezhimova et al., 2004) с поликлональными антителами против дегидринов (антитела против синтетического пептида, содержащего последовательность KIKEKLPG, являющуюся частью уникального К-сегмента дегидринов) (ADI-PLA-100, “StressGen”, США). Использовали вторичные антитела, конъюгированные с щелочной фосфатазой, а
детекцию белков проводили с 5-бромо-4-хлоро-3-индолил фосфатом и нитротетразолием синим.
Проводили не менее трёх независимых экспериментов. На рисунках 1, 2 и 4 представлены средние арифметические значения и их стандартные отклонения. На рисунке 3 представлены типичные иммуноблоты. «л» (в подписях к рисункам) означает количество независимых экспериментов.
RESULTS AND DISCUSSION
Ретардантный эффект тебуконазол-содержащего протравителя семян «Бункер» и отсутствие его фитотоксичного эффекта
Для подтверждения данных, имеющихся в литературе, относительно наличия у тебуконазола ретардантных свойств (Prusakova and Chizhova, 1998), было изучено влияние протравителя «Бункер» на длину колеоптилей этиолированных проростков яровой и озимой пшеницы. Одновременно с изучением ретардантных свойств препарата «Бункер» проводили подбор его рабочей концентрации для дальнейших исследований. В инструкции по применению данного препарата рекомендованная
концентрация для достижения фунгицидного эффекта составляет 0,5 л/т, возможно, что для проявления ретардантных свойств концентрация препарата «Бункер» будет несколько отличаться от рекомендованной для применения в качестве фунгицида.
Действительно, обработка семян препаратом «Бункер» сопровождалась ингибированием длины колеоптилей яровой и озимой пшеницы, при этом
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 11 No. 4 2015
Korsukova et al.
122
степень ингибирования роста возрастала с необработанных семян. Наблюдаемое нами
увеличением концентрации препарата. Так, отсутствие гибели клеток колеоптилей озимой и
препарат «Бункер» приводил к ингибированию яровой пшеницы соответствует данным,
длины колеоптилей проростков яровой пшеницы и имеющимся в литературе, характеризующим
озимой пшеницы в концентрации 0,5 л/т на 28 и производные триазола как ретарданты,
30%, в концентрации 1 л/т - на 33 и 36%, в обладающие низкой фитотоксичностью (Mel'nikov
концентрации 1,5 л/т - на 42 и 40%, в et al., 1995; Prusakova and Chizhova, 1998). На
концентрации 3 л/т - на 47 и 43%, в концентрации основании результатов по увеличению степени
4 л/т - на 51 и 48%, а в концентрации 5 л/т - на 56 и восстановления ТТХ в клетках колеоптилей из
53%, соответственно (рис. 1). Эти данные проростков, выращенных из семян, обработанных
подтверждают, что тебуконазол-содержащий препаратом «Бункер», можно предполагать, что
протравитель семян «Бункер» является обладая ретардантными свойствами, тебуконазол
ретардантом и оказывает концентрационно- не только замедляет процессы роста, но и
зависимое ингибирующее действие на рост отодвигает сроки старения. В этом случае
побегов озимой и яровой пшеницы. обработка семян злаков тебуконазол-содержащим
Чтобы определить безопасность использования препаратом «Бункер» привела к замедлению роста
протравителя семян «Бункер» для растений яровой растений и торможению программы старения и по
и озимой пшеницы в концентрации выше своим физиолого-биохимическим параметрам
рекомендованной производителем, далее была проростки из обработанных препаратом «Бункер»
изучена жизнеспособность клеток колеоптилей семян не соответствовали 5-ти суточным
изучаемых злаков. Величина восстановления ТТХ, проросткам из необработанных семян. При этом,
которая наблюдалась в колеоптилях 5-ти суточных чем более выраженный ретардантный эффект
проростков злаков, подвергнутых кипячению, оказывал препарат на проростки яровой и озимой
считалась значением, характеризующим пшеницы (рис. 1), тем выше была
«погибшие» растения. Как оказалось, обработка жизнеспособность клеток колеоптилей этих
семян препаратом «Бункер» в концентрациях 1,5, проростков (рис. 2). Ранее нами было показано, что
3, 4 и 5 л/т не приводит к гибели клеток гибель клеток колеоптилей этиолированных
колеоптилей озимой и яровой пшеницы (рис. 2). проростков злаков (кукурузы и озимой пшеницы)
Наоборот, с повышением концентрации препарата происходит на 5-6-ые сутки роста (Korsukova et al.,
наблюдается увеличение восстановления ТТХ в 2013a, b). Возможно, поэтому жизнеспособность
клетках, что свидетельствует о том, что клеток колеоптилей 5-ти суточных проростков
жизнеспособность клеток колеоптилей выше, по озимой и яровой пшеницы из необработанных
сравнению с колеоптилями проростков из семян была ниже жизнеспособности клеток
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 11 No. 4 2015
123
The Tebuconazole-based Protectant of Seeds...
колеоптилей злаков этого же биологического возраста, выросших из обработанных препаратом «Бункер» семян.
В дальнейшем в качестве рабочей
концентрации протравителя «Бункер» была
выбрана концентрация 1,5 л/т.
Индукция синтеза дегидринов и повышение морозоустойчивости пшеницы после обработки семян препаратом «Бункер»
Синтез стрессовых белков является одним из механизмов низкотемпературной адаптации растений (Chinnusamy et a., 2006; Trunova, 2007; Hanin et al., 2011). Закаливание индуцировало синтез дегидринов в побегах этиолированных проростков озимой и яровой пшеницы (рис. 3). В проростках озимой пшеницы после закаливания обнаруживались дегидрины с относительными молекулярными массами 209, 200, 70, 55, 51, 43, 34, 33, 17, 16 и 15,7 кДа. В побегах проростков озимой пшеницы, выросших из семян, обработанных протравителем «Бункер», при закаливании наблюдали появление новых полипептидов с относительными молекулярными массами 27, 25, 22, 21, 19 и 18,6 кДа (рис. 3). Наиболее значительно индуцировался полипептид с молекулярной массой 27 кДа. Моделируя условия раззакаливания обнаружено, что в побегах проростков озимой пшеницы, выращенных из обработанных препаратом «Бункер» семян, дегидрины с молекулярными массами 27, 25, 22, 21 и 19 кДа продолжали присутствовать и в период раззакаливания.
С помощью антител против дегидринов в
побегах этиолированных проростков яровой пшеницы после закаливания обнаруживались полипептиды с относительными молекулярными массами 209, 200, 70, 56, 51, 43, 32, 12,3 и 11,5 кДа (рис. 3). Обработка семян протравителем «Бункер» приводила к появлению при закаливании в побегах яровой пшеницы трех новых полипептидов с относительными молекулярными массами 19, 27 и 28,5 кДа, при этом полипептид с молекулярной массой 27 кДа индуцировался значительнее других. После раззакаливания проростков полипептид с молекулярной массой 27 кДа продолжал детектироваться в побегах яровой пшеницы (рис. 3).
Торможение ростовых процессов и синтез дегидринов являются одними из механизмов, способствующих повышению устойчивости растений к низким неблагоприятным температурам (Trunova, 2007; Kosulina et al., 2011). Поскольку обработка семян как озимой, так и яровой пшеницы протравителем «Бункер» приводила к ингибированию роста побегов (рис. 1), а также индуцировала синтез ряда дегидринов (рис. 3), то возможно, что обработка препаратом «Бункер» будет влиять и на морозоустойчивость этих зерновых культур.
Чтобы выяснить данное предположение, проанализировали выживаемость
холодозакалённых проростков озимой и яровой пшеницы, выращенных из необработанных и обработанных препаратом «Бункер» семян, после их промораживания при -7 °С в течение 24 ч. Оказалось, что выживаемость проростков из
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 11 No. 4 2015
Korsukova et al.
124
необработанных семян при данной температуре составляет 30% для яровой пшеницы и 70% для озимой пшеницы (рис. 4). В то же время выживаемость проростков, выращенных из семян,
обработанных препаратом «Бункер» в концентрации 1,5 л/т, значительно выше и составляет 84,5% для яровой пшеницы и 95% для озимой пшеницы (рис. 4).
1 1,5 3 4
Концентрация препарата “Бункер”, л/т
Figure 1. Ингибирование длины колеоптилей, вызванное обработкой семян озимой и яровой пшеницы препаратом «Бункер». В качестве контроля использовали колеоптили 5-ти суточных проростков, выращенных из семян, необработанных препаратом «Бункер». n=4. M±S.D.
Figure 2. Влияние обработки семян препаратом «Бункер» на жизнеспособность клеток колеоптилей озимой и яровой пшеницы
Обозначения, погибшие колеоптили - колеоптили 5-ти суточных проростков злаков, подвергнутых кипячению; контроль 5 сут - колеоптили 5-ти суточных проростков злаков, выращенных из необработанных препаратом «Бункер» семян. n=3. M±S.D.
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 11 No. 4 2015
125
The Tebuconazole-based Protectant of Seeds...
Figure 3. Влияние обработки семян препаратом «Бункер» на синтез дегидринов в побегах проростков озимой и яровой пшеницы, подвергнутых закаливанию и раззакаливанию Обозначения: М - белковые маркеры (кДа); К - проростки, выращенные из необработанных семян (контрольные проростки); Б - проростки, выращенные из семян, обработанных препаратом «Бункер» (1,5 л/т); До зак - проростки до закаливания (24 °С, 3 суток); Зак - 3-х суточные проростки, подвергнутые закаливанию (2 °С, 7 суток); Раззак - закалённые проростки, подвергнутые ступенчатому промораживанию при -2, -4, -6, -8, -10 °С и раззакаливанию при -8, -6, -4, 0, 4 °С (продолжительность воздействия представлена в методике). n=3.
Figure 4. Влияние обработки семян препаратом «Бункер» на выживаемость проростков озимой и яровой пшеницы после действия отрицательной температуры -7 °С (24 ч)
Обозначения: хол.зак. - холодозакалённые проростки, выращенные из необработанных семян, хол.зак. (Б) -холодозакалённые проростки, выращенные из семян, обработанных препаратом «Бункер» (1,5 л/т). n=3. M±S.D.
Таким образом, обработка семян озимой и яровой пшеницы препаратом «Бункер» -фунгицидом триазольной природы, содержащим в
качестве действующего вещества тебуконазол, приводит к ингибированию роста побегов, к синтезу в побегах специфических дегидринов и к
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 11 No. 4 2015
Korsukova et al.
126
повышению морозоустойчивости проростков. Можно полагать, что наблюдаемые в работе эффекты от обработки семян озимой и яровой пшеницы препаратом триазольной природы обусловлены влиянием производных триазола на содержание в клетках АБК (Prusakova and Chizhova, 1998). Вероятно, что действие производных триазола на растительные клетки носит комплексный характер и не ограничивается их влиянием только на изученные параметры, что требует дальнейшего изучения.
Исходя из полученных данных, можно заключить, что тебуконазол-содержащий препарат «Бункер» повышает устойчивость растений к низкой температуре, влияя на ростовые процессы и синтез стрессовых белков.
REFERENCES
Bubjakina V.V., Tatarinova T.D., Ponomarev A.G., Perk A.A. and Solomonov N.G. (2011) Osobennosti sezonnoj dinamiki degidrinov Betula platyphylla Sukacz., associirovannye s formirovaniem morozoustojchivosti v uslovijah kriolitozony. Doklady Akademii nauk [In Russian], 439, 844-877.
Chinnusamy V., Zhu J. and Zhu J.-K. (2006) Gene regulation during cold acclimation in plants.
Physiol. Plant., 126, 52-61.
Enikeev A.G., Gamburg K.Z., Vysockaja E.F. and Leonova L.A. (1995) Ob ispol'zovanii 2,3,5-trifeniltetrazolij hlorida dlja ocenki zhiznesposobnosti kul'tur rastitel'nyh kletok. Fiziologija rastenij [In Russian], 42, 423-426.
Goyal K., Walton L.J. and Tunnacliffe A. (2005) LEA proteins prevent protein aggregation due to water stress. Biochem. J., 388, 151-157.
Hanin M., Brini F., Ebel C., Toda Y., Takeda S. and Masmoudi K. (2011) Plant dehydrins and stress tolerance. Versatile proteins for complex mechanisms. Plant Signal. Behav., 6, 15031509.
Hara M. (2010) The multifunctionality of dehydrins.
Plant Signal. Behav., 5, 1-6.
Ivanov V.B. (1974) Kletochnye osnovy rosta rasteniy.
M. : Nauka [In Russian], 223 s.
Korsukova A.V, Grabel'nyh O.I., Ljubushkina I.V., Pobezhimova T.P., Koroleva N.A., Pavlovskaja
N. S., Fedoseeva I.V., Voinikov V.K. (2013a) Rol'
aktivnyh form kisloroda i uchastie mitohondrij v
razvitii programmiruemoj kletochnoj gibeli v
koleoptiljah ozimoj pshenicy. Izvestija Irkutskogo gosudarstvennogo universiteta.
Serija "Biologija. Ekologija' [In Russian], 6, 1018.
Korsukova A.V., Grabelnych O.I., Pobezhimova T.P., Koroleva N.A., Fedoseeva I.V., Pavlovskaya N.S., Lyubushkina I.V., Borovik O.A., Fedyaeva A.V., Voznenko S.A., Ilyushneva E.M., Voinikov V.K. (2013b) Cold hardening prevents H2O2-induced programmed cell death in maize coleoptiles. J. Stress Physiol. & Biochem., 9, 246-257.
Kosulina L.G., Lucenko Je.K. and Aksenova V.A. (2011) Fiziologija ustojchivosti rastenij k neblagoprijatnym faktoram sredy : Uchebnoe
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 11 No. 4 2015
127
The Tebuconazole-based Protectant of Seeds...
posobie. Rostov n/D : Izd-vo Rost. un-ta [In Russian], 236 s.
Mel'nikov N.N., Novozhilov K.V. and Belan S.R. (1995) Pesticidy i reguljatory rosta rastenij : Spravochnik. M. : Himija [In Russian], 575 s.
Monroy A.F., Dryanova A., Malette B., Oren D.H., Farajalla M.R., Liu W., Danyluk J., Ubayasena
L. W.C., Kane K., Scoles G.J., Sarhan F. and Gulick P.J. (2007) Regulatory gene candidates and gene expression analysis of cold acclimation in winter and spring wheat. Plant Mol. Biol., 64, 409-423.
Petrov K.A., Sofronova V.E., Bubjakina V.V., Perk A.A., Tatarinova T.D., Ponomarev A.G., Chepalov V.A., Ohlopkova Zh.M., Vasil'eva I.V. and Maksimov T.H. (2011) Drevesnye rastenija Jakutii i nizkotemperaturnyj stress. Fiziologija rastenij [In Russian], 58, 866-874.
Pobezhimova T.P., Kolesnichenko A.V. and Grabel'nych O.I. (2004) Metody izuchenija mitohondrij rastenij. Poljarografija i elektroforez.
M. : OOO «NPK Promjekspobezopasnost'» [In Russian], 98 s.
Ponomarev A.G., Tatarinova T.D., Perk A.A., Vasil'eva I.V. and Bubjakina V.V. (2014) Degidriny,
associirovannye s formirovaniem
morozoustojchivosti berezy ploskolistnoj.
Fiziologija rastenij [In Russian], 61, 144-120.
Popov S.Ja., Dorozhkina L.A. and Kalinin V.A. (2003) Osnovy himicheskoj zashhity rastenij : Uchebnoe posobie. Pod red. professora S.Ja. Popova. M.: Art-Lion [In Russian], 208 s.
Prusakova L.D. and Chizhova S.I. (1998) Primenenie proizvodnyh triazola v rastenievodstve (obzor). Agrohimija [In Russian], 37-44.
Skriver K. and Mundy J. (1990) Gene expression in response to abscisic acid and osmotic stress. Plant Cell, 2, 503-512.
Theocharis A., Clement C. and Barka E.A. (2012) Physiological and molecular changes in plants grown at low temperatures. Planta, 235, 10911105.
Titov A.F., Akimova T.V., Talanova V.V. and Topchieva L.V. (2006) Ustojchivost' rastenij v nachal'nyj period dejstvija neblagoprijatnyh temperatur. Otv. red. N.N. Nemova. M. : Nauka [In Russian], 143 s.
Trunova T.I. (2007) Rastenie i nizkotemperaturnyj stress. M.: Nauka [In Russian], 54 s.
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 11 No. 4 2015
