CC BY
51
Перейти в содержание Вестника РНЦРР МЗ РФ N12
Текущий раздел: Молекулярная медицина
Связь экспрессии маммаглобина с рентгенологическими признаками при фиброаденоме молочной железы.
Боженко В.К.1, Харченко Н.В.2, Васкевич Е.Ф.1, КудиноваЕ.А.1, Ооржак А.В.1, Якобс О.Э.1, Троценко И.Д.2
1 ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздравсоцразвития РФ, г.Москва.
2 кафедра онкологии и рентгенорадиологии РУДН
Адрес документа для ссылки: http://vestnik.rncrr.ru/vestnik/v12/papers/trots2_v12.htm Статья опубликована: 25 октября 2012 года
Контактная информация:
Рабочий адрес:
1 117997, Москва, ГСП-7, ул. Профсоюзная, д. 86, ФГБУ «РНЦРР»
2 117198, Москва, ул. Миклухо-Маклая ул., 6, г. ФГБУ ВПО РУДН Боженко Владимир Константинович - д.м.н., проф., руководитель клиникодиагностической лаборатории ФГБУ РНЦРР, 117997, г. Москва, ул. Профсоюзная, д. 86, vbojenko@mail.ru
Харченко Наталья Владимировна - д.м.н., проф., зав. кафедрой онкологии и ренгенорадиологии РУДН, 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, 6, nkharchenko@mail.ru
Васкевич Елена Федоровна - к.м.н., врач лабораторной диагностики ФГБУ РНЦРР, 117997, г. Москва, ул. Профсоюзная, д. 86, ФГБУ РНЦРР Минздравсоцразвития Кудинова Елена Александровна - к.м.н., зав. клинико-диагностической лаборатории ФГБУ РНЦРР, 117997, г. Москва, ул. Профсоюзная, д. 86, ФГБУ РНЦРР Минздравсоцразвития, ekudinova@mail.ru
Ооржак Айлан Владимировна - ординатор ФГБУ РНЦРР, 117997, г. Москва, ул. Профсоюзная, д. 86, aylan08@mail.ru
Якобс Ольга Эдмундовна - научный сотрудник Федерального маммологического центра ФГБУ РНЦРР, 117997, г. Москва, ул. Профсоюзная, д. 86
Контактное лицо:
Троценко Иван Дмитриевич - ассистент кафедры онкологии и ренгенорадиологии РУДН, 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, 6, 89035101359, trotsenkoivan@mail.ru
Резюме
Маммаглобин является перспективным специфическим маркером раннего рака молочной железы, экспрессия которого коррелирует с такими клинико-морфологическими характеристиками опухоли как размер узла, степень злокачественности и т.д., однако закономерности экспрессии мРНК маммаглобина в зависимости от рентгенологических признаков остаются малоизученными. Материалы и методы: С использованием метода ПЦР в реальном времени была
проанализирована экспрессия мРНК маммаглобина у 42 пациенток с диагнозом фиброаденома молочной железы. Проанализировано 84 образца морфологически неизмененной ткани и фиброаденомы (ФА) молочной железы. Оценивалась связь экспрессии маммаглобина с наличием четких контуров образования, диффузных изменений, наличием фиброзно-кистозной мастопатии, фиброзно-жировой инволюции по данным маммаграфии.
Результаты: Среднее значение экспрессии мРНК маммаглобина при сравнении групп «без
диффузных изменений» и «фиброзно-жировая инволюция» достоверно различимы (р=0,00039). Средний уровень экспрессии мРНК маммаглобина в группе пациенток с выраженной ФКМ практически в три раза отличался от групп с нерезкой и умеренной ФКМ (Р<0,05). Уровень экспрессии маммаглобина при отсутствии четких контуров ФА был выше по сравнению с четким контуром (Р=0,062).
Заключение: Сочетание высокого уровня экспрессии мРНК маммаглобина в ткани
фиброваденомы с такими рентгенологическими признаками как нечеткие контуры и выраженная фиброзно-кистозная мастопатия в окружающей ткани является неблагоприятным фактором прогноза и требует более детального обследования и наблюдения.
Ключевые слова: экспрессия маммаглобина, фиброзно-жировая инволюция, фиброзно-кистозная мастопатия.
Relationship between mammaglobin expression and radiological characteristics in breast fibroadenoma
Bozhenko V.K., Kharchenko N.V., Vaskevich E.F., Kudinova E.A., Oorzhak A.V., Jacobs O.E., Trotsenko I.D.
Federal State Budget Establishment Russian Scientific Center of Roentgenoradiology (RSCRR) of Ministry of Health and Social Development of Russian Federation, Moscow
Summary
Mammaglobin (MGB) is the promising specific marker of early breast cancer. MGB expression correlates with tumor size, stage of the disease, grade, etc., but relationship between MGB expression level and tumor mammographic features is considered to be insufficiently explored.
Materials and Methods: MGB mRNA expression level was analyzed by real-time PCR in 84 tissue samples from 42 patients with histologically confirmed breast fibroadenoma. Correlation between mammaglobin expression level and different X-ray tumor features, such as precise tumor contours, diffuse mastopathy, fibrocystic mastopathy (FCM) and fatty involution, was assessed.
Results: Average mRNA mammaglobin expression level in patients "without diffuse mastopathy" was significantly lower than in patients with "fatty involution" (P = 0.00039). Average MGB expression level in patients with severe FCM was three times higher than in patients with low and moderate FCM (P <0.05). MGB expression level in FA with precise X-ray contour was lower as compared to tumors with illegible contour (P = 0.062).
Conclusion: Combination of severe FCM, illegible X-ray tumor contour and high level of mRNA MGB expression may be adverse diagnostic factor and requires a more detailed examination.
Key words: Mammaglobin expression, fibrous involution, fibro-cystic mastopathy
Оглавление:
Введение
Материалы и методы Результаты и обсуждение
Введение
Наряду с развитием клинико-рентгено-сонографических методов диагностики заболеваний молочной железы в настоящее время все больше научных работ посвящается созданию методов молекулярно-генетической дифференциальной диагностике [3]. Определение молекулярно-генетических маркеров в ткани доброкачественной или злокачественной опухоли может давать дополнительную информацию о ее биологических особенностях и повышать достоверность прогноза заболевания.
Одним из наиболее перспективных молекулярно-генетических маркеров РМЖ является
маммаглобин, который принадлежит к семейству утероглобинов - эпителиальных
секреторных белков [6]. Впервые ген, продуктом экспрессии которого является
маммаглобин (SCGB2A1), был идентифицирован Watson M.A и Flemind T.P в 1996 году
3
[5,10]. Экспрессия маммаглобина определяется в основном в эпителиальных клетках молочной железы [4]. При этом мРНК маммаглобина в 10 раз интенсивней экспрессируется при злокачественных новообразованиях, чем при доброкачественных процессах [7], а также уровень экспрессии меняется в зависимости от клиникоморфологических особенностей опухоли [2]. Незначительную экспрессию маммаглобина можно наблюдать также и в здоровой ткани молочной железы [8], в нормальной и опухолевой ткани потовых желез, яичников, шейки матки и предстательной железы [9]. В то же время, остается не изученной связь экспрессии мРНК маммаглобина с основными клинико-рентгенологическими признаками доброкачественных образований молочной железы.
Перейти в оглавление статьи >>>
Материалы и методы
Всего было проанализировано 84 образца ткани у 42 пациенток с гистологически подтвержденным диагнозом фиброаденомы молочной железы. В качестве контроля использовали участки ткани молочной железы этих же пациенток без морфологических признаков патологии. В исследуемую группу вошли пациентки в возрасте от 19 до 59 лет, средний возраст составил 33,00±10,00 года. Все пациентки были обследованы и прошли комплексное лечение в ФГУ Российском научном центре рентгенрадиологии в период с ноября 2008 по декабрь 2011 года.
Рентгенологическое исследование проводили на маммографической установке "MAMMODIAGNOST US" фирмы "Philips". Ультразвуковое исследование выполняли на аппарате «SONOLINE Elegra» фирмы и «Vivid 4» фирмы GE.
Операционный материал предоставлялся патоморфологу сразу после поступления в лабораторию. Гистологическое исследование проводили в плановом порядке по стандартной методике. Для молекулярного анализа у каждой пациентки было взято две пробы ткани (морфологически неизмененной и патологической), которые собирались в 2 стерильные пробирки, содержащие раствор EverFresh RNA ^Клоноген, Санкт-Петербург) для предотвращения деградации РНК в образце, и хранились при -70 0С до проведения исследования. Выделение общей РНК проводили набором RNeasy Plus Mini Kit (Qiagen, Германия) согласно протоколу выделения. Постановку ПЦР проводили с использованием оборудования и реагентов производства «ДНК-технология», Россия, по методике производителя. Для оценки относительного содержания мРНК маммаглобина в
образцах использовали анализ содержания мРНК референтного гена гипоксантин - гуанин фосфорибозилтрансферазы (HPRT1) в том же образце, характеризующимся низким и стабильным уровнем экспрессии мРНК в клетке.
Статистическая обработка результатов проводилась с помощью программного пакета STATISTICA 6,0 фирмы (StatSoft Inc.). Для выявления различий между количественными данными для независимых групп использовали метод непараметрической статистики по Манну-Уитни.
Перейти в оглавление статьи >>>
Результаты и обсуждение
Маммография представляет собой рентгенологический метод исследования, который позволяет не только определить наличие изменений в тканях молочной железы, но и оценить их размеры, характер, распространенность. Одним из признаков, оцениваемым при изучении маммограмм, является оценка диффузных изменений в ткани молочной железы. Часто узловым образованиям сопутствуют соответствующие диффузные изменения, такие как: фиброзно-жировая инволюция молочных желез или фибрознокистозная мастопатия различной степени выраженности. Мы сравнили уровень экспрессии маммаглобина в ткани фиброаденомы в зависимости от диффузных изменений в окружающей ткани (Рисунок 1).
Зависимость экспрессии мРНК маммаглобина от наличия диффузных изменений в ткани фиброаденомы молочной железы
Диффузные изменения молочной железы. 0 - нет изменений, I Меап±0),95*8Е
1 - фиброзно-жировая инволюция, 2 - фиброзно-кистозная мастопатия
Рис. 1. Зависимость уровня экспрессии мРНК в ткани фиброаденомы от диффузных изменений в ткани молочной железы.
Среднее значение экспрессии мРНК маммаглобина при отсутствии диффузных изменений составляет - 22,26 отн.ед, при фиброзно-жировой инволюции - 118,93 отн.ед, а при фиброзно-кистозной мастопатии - 50,83 отн.ед. Отличия между группами «без диффузных изменений» и «фиброзно-жировая инволюция» достоверно различимы (Р =
0,00039).
В группу с фиброзно-кистозной мастопатией вошли 23 больные РМЖ с мастопатией различной степени выраженности (от нерезкой до выраженной). Результаты представлены на рисунке 2.
160
140
120
100
ос 80
CL
X
ЕЁ
2 60
40
20
1 2 3
Фиброзно-кистозная мастопатия: 1-слаборываженная ЗКМ, 2 умеренная ФКМ, 3 - вфраженная ФКМ
Mean
Mean±0,95*SE
0
Рис. 2. Зависимость экспрессии мРНК маммаглобина от степени выраженности фибрознокистозной мастопатии (ФКМ).
Как видно из данных, представленных на рисунке 2, у пациенток с выраженной ФКМ средний уровень экспрессии мРНК маммаглобина сотавил 94,45 отн.ед и практически в три раза отличался от групп с нерезкой и умеренной ФКМ (среднее значение в этих
группах - 33,11 отн.ед, и 24,70 отн.ед, соответственно). Таким образом, для групп пациенток с фиброаденомой молочной железы при наличии диффузных изменений (ФКМ, ФЖИ) в ткани железы отмечается повышенный уровень экспрессии мРНК маммаглобина. Также установлено что, чем более выражена фиброзно-кистозная мастопатия, тем выше уровни экспрессии мРНК маммаглобина.
Другими признаками, оцениваемыми по маммографическому снимку при анализе маммограмм, являются форма и структура патологического образования. Как
правило, доброкачественные узловые образования имеют четкие контуры и однородную структуру. Из проанализированных нами маммограмм 41 пациентки с фиброаденомой молочной железы, характерные для доброкачественного образования контуры имели 36 (87,8 %) пациенток, средний уровень экспрессии мРНК маммаглобина в этой группе составил 63,1 отн.ед. На маммограммах 5 (12,2 %) пациенток узловые образования имели нечеткие, полициклические контуры. В этой группе уровень экспрессии составлял 206,4 отн.ед. (Р = 0,062) (Рис. 3).
Очертание контуров по маммографическом снимке: I Mean±0,95*SE
0 - четкие, ровные; 1 - не ровные, полициклические контуры
Рис. 3. Зависимость уровня экспрессии мРНК от формы доброкачественного узлового образования.
Таким образом, высокий уровень экспрессии мРНК маммаглобина коррелирует с такими рентгенологическими признаками, как наличие фиброзно-жировой инволюции, фибрознокистозной мастопатии, нечеткими контурами доброкачественного образования [1]. Прогностическое значение обнаруженных закономерностей требует дальнейшего
изучения. Однако можно предположить, что женщины, у которых обнаружена фиброаденома, имеющая такие рентгенологические признаки как нечеткие, полициклические контуры на фоне выраженных изменений в ткани (фиброзно-кистозная мастопатия или жировая инволюция), в сочетании с высокими цифрами экспрессии мРНК маммаглобина могут быть отнесены в группу пациентов, требующих более детального обследования. Основанием для этого является известный из литературы [1] и также подтвержденный нами [2] факт резкого повышения уровня экспрессии маммаглобина в ткани рака молочной железы.
Работа была поддержана грантом Минобрнауки № 16.512.11.2093.
Перейти в оглавление статьи >>>
Список литературы:
1. Боженко В.К., Васкевич Е.Ф., Кудинова Е.А., Чазова Н.Л., Берщанская А.М.,
Мельникова Н.В., Тащян А.А., Слонов А.В. Возможности оценки экспрессии маммаглобина при различной патологии молочной железы. Литературный обзор.// Вестник РНЦРР. - М. - 2010. - №9. - С. 35-43
2. Боженко В.К., Васкевич Е.Ф., Чазова Н.Л и др. Исследование экспрессии мРНК маммаглобина А при различной патологии молочных желез.// Вестник РНЦРР. - М. -2009. - №9. - С. 55-58
3. Харченко В.П., Рожкова Н.И. Маммалогия: национальное руководство// ГЭОТАР-Медиа, 2009, Москва, С. 56.
4. Ach R.A., Floore A., Curry B. et al. Robust interlaboratory reproducibility of a gene expression signature measurement consistent with the needs of new generation of diagnostic tools// BMC Genomics, 2007,V. 8, P 56-64.
5. Adkins K.L. Partial nephrectomy safely preserves renal function in patients with a solitary kidney // J Urol. 2003. vol. 169. Р.79-81.
6. Albani J.M., Novick A.C. Renal pseudoaneurysm after partial nephrectomy: three case reports and a literature review // Urology. 2003. vol. 62. Р.227-31.
7. Ardela D.E., Miguel M.B., Gutierrez D.J.M. Comparative study of differential renal function by DMSA and MAG-3 in congenital unilateral uropathies. // Cir Pediatr. 2002. vol. 15. Р.118-21.
8. Yeo E.E., Low J.C. Intrarenal arteriovenous fistula simulating a hypervascular renal tumor on radionuclide renal imaging. // Clin Nucl Med. 1995. vol.20. P.549-50.
9. Zajic T., Moser E. Procedure guidelines for dynamic renal scintigraphy. // Nuklearmedizin. 2004. vol.43. P.177-80.
10. Zecchin R., Monici M., Englaro G.C. Tradioisotopes in the diagnosis of diseases of the kidney. // Friuli Med. 1964. vol.19. P.456-68. vol.19. P.456-68.
Перейти в оглавление статьи >>>
ISSN 1999-7264 © Вестник РНЦРР Минздрава России © Российский научный центр рентгенорадиологии Минздрава России
