Научная статья на тему 'Супрамолекулярные ферментные системы на основе липазы из поджелудочной железы свиньи'

Супрамолекулярные ферментные системы на основе липазы из поджелудочной железы свиньи Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
165
46
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ЛИПАЗА / СУПРАМОЛЕКУЛЯРНЫЙ КОМПЛЕКС / ИММОБИЛИЗИРОВАННЫЕ ФЕРМЕНТЫ / LIPASE / SUPRAMOLECULAR COMPLEX / IMMOBILIZED ENZYMES

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Соловьева Д. О., Зайцев С. Ю., Тульская Е. В., Штырлин Ю. Г.

Изучено влияние полиэлектролитного и полимерного окружения на активность липазы. Предложены модели супрамолекулярных систем на основе липаз и полиэлектролитов. Показана перспективность использования полимер-ферментных систем в практике.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Соловьева Д. О., Зайцев С. Ю., Тульская Е. В., Штырлин Ю. Г.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

SUPRAMOLECULAR ENZYME COMPLEXES BASED ON LIPASE FROM HOG PANCRES

The influence of polyelectrolyte and polymer environment on the lipase activity was studied. The models of supramolecular systems based on lipases and polyelectrolytes were proposed. The prospects of using the polymer-enzyme systems in practice were showed.

Текст научной работы на тему «Супрамолекулярные ферментные системы на основе липазы из поджелудочной железы свиньи»

EFFECTIVNESSOF COMBINED APPLICATION OF TRANSCRANIAL ELECTROSTIMULATION (TKES) AND ALKALINE HUDROLYSATES SAPROPEL (SCHGS) ON THE BLOOD PERFORMANCES AND CALVES GROWTH WEIGHT WITH SIGNS OF NUTRITIONAL ANEMIF

Skachov D.V.

Summary

Use of a joint way of influence on an organism promotes preventive maintenance and correction of anemic conditions at young growth of animals, and also for activization of speed of a gain of weight of a body of animals.

УДК 577.153.2:636.4:611.37

СУПРАМОЛЕКУЛЯРНЫЕ ФЕРМЕНТНЫЕ СИСТЕМЫ НА ОСНОВЕ ЛИПАЗЫ ИЗ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ СВИНЬИ

Соловьева Д.О., Зайцев С.Ю., Тульская Е.В., Штырлин Ю.Г. *

ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина»,

ГОУ ВПО «Казанский (Приволжский) федеральный университет» *

Ключевые слова: липаза, супрамолекулярный комплекс,

иммобилизированные ферменты.

Key words: lipase, supramolecular complex, immobilized enzymes.

Введение. Одним из современных методов биохимии и биотехнологии, направленных на улучшение свойств биологически активных веществ для их практического использования, является метод иммобилизации на полимерные носители. Ферменты, иммобилизованные на полимерном носителе, обладают рядом преимуществ, что делает их более удобными для эффективного технического применения. Увеличивается стабильность фермента во времени и к различным денатурирующим агентам, появляется возможность многократного использования фермента, а также более простого и быстрого разделения реакционной среды [1]. Среди всех методов иммобилизации можно выделить связывание фермента с полиэлектролитами как наиболее простой в техническом плане [2]. Он основан на ионном взаимодействии между белком и носителем.

Липаза была выбрана для исследования ее комплексообразования с полиэлектролитами как одна из наиболее изученных гидролаз, которая может катализировать следующие реакции: гидролиз липидов и сложных эфиров, эстерификацию, трансэстерификацию, перенос ацильных групп

[3]. Кроме того, известно свойство липазы активироваться на границе раздела фаз [3].

Материалы и методы. В работе использовали следующие реактивы: липаза из поджелудочной железы свиньи (Л-1), активность фермента 15-35 МЕ/мг; триацилглицерол (фирменное название - триацетин), Na-полистиролсульфонат (ПСС), полидиаллилдиметиламмоний хлорид

(ПАМА), сополимер ПЭ-240, раствор NaOH (0,01М) использовали в качестве титранта; растворы NaCl (0,05М) и CaCl2 (0,05М) использовали для приготовления рабочего раствора субстрата. Активность липазы была измерена с помощью метода потенциометрического титрования на автоматическом титраторе фирмы “Radiometer” (Копенгаген) по скорости гидролиза субстрата триацетина. Основные достоинства этого метода -высокая точность высокая чувствительность и возможность проводить титрование в более разбавленных растворах, чем это позволяют визуальные индикаторные методы.

Результаты и их обсждение. Активность липазы из поджелудочной железы свиньи в присутствии ПСС при соотношениях 1:10 и 1:100 была выше контроля на 17 и 15 %, что может быть связано с увеличением микрогетерогенности системы в результате взаимодействия липазы с полиэлектролитом. Использование смеси липаза: ПСС 1:1 приводит к значительной инактивации липазы (до 23%), из-за недостаточного количества ПСС для образования микрогетерогенности системы (рис. 1).

псс

Липаза - закрытая конформация

Триацилглицеролы

а

Липаза - открытая конформация

Т риацилглицерол

б

Моноацилглицеро; и жирные кислоты

1. Модели систем липаза : ПСС 1:1 (а- «низкая активность») и 1:10 (б «высокая активность»).

В присутствии ПАМА даже «наивысшая» активность панкреатической липазы при соотношении липаза: полиэлектролит равном 1:10 оказалась ниже контроля на 6 %. По-видимому, отрицательно

заряженная при нейтральных значениях рН липаза в процессе комплексообразования оказывается расположенной внутри глобулы положительно заряженного полимера и становится менее доступной для субстрата (рис. 2).

ПАМА©

Липаза - открытая конформация

Триацилглицерол :

а

Моноацилглицерс и жирные кислоть

ПАМА

Липаза - закрытая конформация

Т риацилглицеролы

б

2. Модели систем липаза : ПАМА 1:10 (а- «высокая активность») и 1:100 (б- «низкая активность»).

При исследовании смеси липаза (Л-1) : ПЭ-240 в ряду соотношений от 10:1 до 1:10 наблюдалось значительное изменение активности фермента (рис. 3).

3. Зависимость относительной активности липазы (в %) от соотношения липаза (Л-1) к полимеру (ПЭ-240).

В соотношении 1:5 активность липазы понизилась по отношению к контролю на 12%. Наибольшая активность фермента наблюдалась при соотношении липаза:ПЭ-240 равном 5:1 и составила величину на 12% превышающую контроль.

Таким образом, активность липазы прежде всего зависит от заряда полиэлектролита и от концентрации его относительно фермента.

Наилучшими являются системы с ПСС 1:10 и 1:100, а также системы с ПЭ-240 5:1 и 1:1, которые перспективны для практического использования.

ЛИТЕРАТУРА: 1. Березин И.В., Клячко Н.Л., Левашов А.В. / Иммобилизованные ферменты. - М.: Высш. шк., 1987. - 159 с. 2. Ai H., Jones S.A., Lvov Yu.M.//Cell Biochemistry and Biophysics. - 2003. - Vol. 39.

- P. 23-43. 3. Jaeger K.E., Eggert T.// Curr. Opin. Biotechnol. - 2002. - Vol. 13.

- P. 390-397.

СУПРАМОЛЕКУЛЯРНЫЕ ФЕРМЕНТНЫЕ СИСТЕМЫ НА ОСНОВЕ ЛИПАЗЫ ИЗ

ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ СВИНЬИ

Соловьева Д.О., Зайцев С.Ю., Тульская Е.В., Штырлин Ю.Г.

Резюме

Изучено влияние полиэлектролитного и полимерного окружения на активность липазы. Предложены модели супрамолекулярных систем на основе липаз и полиэлектролитов. Показана перспективность использования полимер-ферментных систем в практике.

SUPRAMOLECULAR ENZYME COMPLEXES BASED ON LIPASE FROM HOG

PANCRES

Solovieva D.O., Zaitsev S.Yu., Tulskaya E.V., Shtyrlin Yu.G.

Summary

The influence of polyelectrolyte and polymer environment on the lipase activity was studied. The models of supramolecular systems based on lipases and polyelectrolytes were proposed. The prospects of using the polymer-enzyme systems in practice were showed.

УДК 619:614.48.576.8

ИЗУЧЕНИЕ ОБЕЗЗАРАЖИВАЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ ПРЕПАРАТА «МУК-Д» НА БАКТЕРИИ РАЗЛИЧНЫХ ГРУПП УСТОЙЧИВОСТИ ПОД ВЛИЯНИЕМ ОРГАНИЧЕСКОЙ НАГРУЗКИ

Софронов В.Г., Аржаков П. В.*

ФГОУ ВпО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины

имени Н.Э.Баумана»

Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных, г. Омск*

Ключевые слова: дезинфицирующие средства, микробная

загрязненность, обеззараживание поверхности испытуемых объектов.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.