CC BY
111
REFERENCES
1. Birger M.O. Handbook of microbiological and virological research methods. - Moscow: Medisina, 1982. - 464 p. (in Russian)
2. Bukharin O. V. Persistence ofpathogenic bacteria. - Moscow: Medisina, 1999. - 365 p. (in Russian)
3. Glazeva S.A., Tarasenko V.S. Clinical variants of the course and characteristics of pathogens faces and uncomplicated forms of it // Vestnik Orenburgskogo Gosudarstvennogo Universiteta. -2006. - №13 (63). - P.121-122. (in Russian)
4. Kapustina O.A., Kartashova O.L., Potekhina L.P., et al. Biofilm formation of Candida isolated from different human's biotopes // Problemy meditsinskoj mikologii. - 2011. - Vol.13. №2. - P.81-82. (in Russian)
5. Kartashova O.L., Utkina T.M. Regulation persistence properties of mikroorganisms properties factors of the various nature (review) // Bulleten Orenburgskogo Nauhnogo Tsentra UrO RAN. - 2013. - №1. - P.4. (in Russian)
6. Kartashova O.L., Gandybin E.A., Utkina T.M., et al. Biological characteristics of microorganisms for prognosis of trophic ulcers course // Zhyrnal microbiologii, epidemiologii, immunobiologii. - 2009. - №4. - P.111-114. (in Russian)
7. Kartashova O.L., Utkina T.M., Zhestkov A.V., et al. Effect of phytosubstances with antioxidant activity on persistence properties of microorganisms // Antibiotiki i himioterapia. -2009. - Vol. 54. №9-10. - P.16-18. (in Russian)
8. Kirillov D.A. Drug regulation of persistent properties of microorganisms: Author. dis .... Candidate. Med. Sciences. -Orenburg, 2004. - 22 p. (in Russian)
9. Okulich V.K., Plotnikov F.V., Kabanova A.A. Biofilm's role in the pathogenesis of infectious process at the present stage // Immunologia, allergologia, infectologia. - 2012. - №4. - P.70-82. (in Russian)
10. Pankrusheva T.A., Kobzareva E.V. Development of multicomponent ointments for the treatment of local inflammatory processes // Actual problems of Medicine and Pharmacy: collection of scientific papers. - Kursk, 2001. - P.264-265. (in Russian)
11. Fadeev S.B., Nemtseva N.V. Formation of biofilms by agents of surgical soft tissue infections // Zhyrnal microbiologii, epidemiologii, immunobiologii. - 2009. - №4. - P.114-117. (in Russian)
12. Chainikova I.N. Self-descriptiveness of immunological indexes and biological characteristics of salmonellas at forecasting of salmonella infection outcome // Vestnik Orenburgskogo Gosudarstvennogo Universiteta. - 2005. - №12. - P.58-62. (in Russian)
13. Merrit J.H., Kadouri D.E., O Toole G.A. Growing and analyzing static biofilms // Curr. Protoc. Microbiol. - 2005. - №1. - P.135-139.
14. Ramezani M., Bazzaz F.B.S., Khadem S.F. Antimicrobial activity of four Artemisia species of Iran // Fitoterapia. - 2004. -№75. - P.201-203.
15. Saddi M., Sanna A., Cottiglia F., et al. Antiherpevirus activity of Artemisia arborescens essential oil and inhibition of lateral diffusion in Vero cells // Ann Clin Microbiol Antimicrob. -2007. - №6. - P. 1476-1479.
Информация об авторах:
Уткина Татьяна Михайловна - к.б.н., старший научный сотрудник, 460000, г. Оренбург, ул. Пионерская, 11, тел. (3532) 774463, e-mail: pashkova070782@mail.ru; Потехина Лидия Петровна - к.м.н., старший научный сотрудник, e-mail: ploomy@list.ru; Карташова Ольга Львовна - д.б.н., заведующая лабораторией, e-mail: labpersist@mail.ru.
Information About the Authors:
Utkina Tatiana Mihailovna - senior Researcher, PhD, e-mail: pashkova070782@mail.ru, 460000, Orenburg, st. Pionerskaya, 11, tel. (3532)774463; Potekhina Lidia Petrovna - senior Researcher, PhD, MD, e-mail: ploomy@list.ru; Kartashova Olga Lvovna -
head of the laboratory, PhD, professor, e-mail: labpersist@mail.ru.
© ЛАТЫПОВА Г.М., ИВАНОВА Д.Ф., ДАВЛЕТШИНА Р.Я., УРАЗЛИНА О.И. - 2014 УДК 582.689.2:581.192.2:547.1-32:615.07
СОСТАВ ОРГАНИЧЕСКИХ КИСЛОТ В РАСТЕНИЯХ РОДА ПЕРВОЦВЕТ
Гузель Минулловна Латыпова, Дина Фирусовна Иванова, Разида Ягафаровна Давлетшина, Ольга Исламовна Уразлина (Башкирский государственный медицинский университет, ректор - д.м.н., проф. В.Н. Павлов, кафедра послевузовского и дополнительного профессионального фармацевтического образования ИПО,
зав. - д.ф.н., проф. В.А. Катаев)
Резюме. Определено содержание органических кислот в растениях рода первоцвет. Сравнительный анализ качественного состава органических кислот исследуемых растений показал наличие в них общих кислот: щавелевой, лимонной, аскорбиновой и янтарной. Качественный состав первоцвета весеннего оказался богаче, в нем содержатся дополнительно гидроксилимонная, винная и фумаровая кислоты. По количественному содержанию органических кислот первоцвет крупночашечный не уступает первоцвету весеннему. Пищевые растения рода первоцвет представляют интерес в качестве сырьевых источников органических кислот.
Ключевые слова: первоцвет весенний, первоцвет лекарственный, Primula veris L., P officinalis (L.) Hill., первоцвет крупочашечный, Primula macrocalyx Bunge, надземная часть трава, органические кислоты.
COMPOSITION OF ORGANIC ACIDS IN THE PLANTS OF PRIMULA GENUS
G.M. Latypova, D.F. Ivanova, R. Ya. Davletshina, O.I. Urazlina (Bashkir State Medical University, Russia)
Summary. The composition of organic acids in the plants of Primula genus has been determined. The comparative analysis of the qualitative composition of organic acids in the plants under study has demonstrated the presence of general acids such as axalic, citric, ascobic and succinic ones. Qualitative composition of Primula officinalis has been found to be richer as hydroxycitric, tartaric and fumaric acids are contained in it. It has been revealed that Primula macrocalyx Bunge is equal to Primula officinalis in quantitative amount of organic acids. Plants of Primula genus are of interest as raw material for organic acids.
Key words: Primula veris L. or Primula officinalis, Primula macrocalyx Bunge, aerial part of the herb, organic acid.
Органические кислоты (ОК) большая и разнообразная по своим свойствам группа биологически активных веществ (БАВ), содержащиеся в большинстве пищевых и лекарственных растений, формирующие вкус растительной пищи. Наиболее часто встречаются органические кислоты алифатического ряда яблочная, лимонная, янтарная, щавелевая, фитиновая, уксусная, винная, молочная, кофейная, галловая и др. В ряде случаев их количество в растениях достигает весьма высоких величин.
Назначение органических кислот в питании определяется их энергетической ценностью (так яблочная кислота составляет 2,4 ккал/г, лимонная - 2,5 ккал/г, молочная -3,6 ккал/г), а также активным участием в обмене веществ. В гигиеническом плане важно отметить благоприятное влияние ОК на процесс пищеварения - они снижают рН среды, способствуя созданию определенного состава микрофлоры, тормозят процессы гниения в ЖКТ. ОК ягод, фруктов, плодов стимулируют сокоотделение в желудочно-кишечном тракте, улучшают пищеварение, активизируют перистальтику кишечника, способствуя снижению риска развития многих желудочно-кишечных и других заболеваний. Многие органические кислоты синтезируются химическим путем и широко применяются в пищевой промышленности и медицинской практике [2,8].
Исследования по содержанию ОК особенно в пищевых растениях представляют большой интерес. Объектом наших исследований являются растения рода первоцвет, являющиеся источниками поливитаминов, полифенолов, триперпеновых сапонинов и др. БАВ. На основе первоцвета весеннего (Primula veris L., или P officinalis (L.) Hill.) разрешены к применению отхаркивающие лекарственные препараты, производятся БАД к пище, листья разрешены к применению в качестве поливитаминного пищевого растительного сырья. Первоцвет крупночашечный (Primula macrocalyx Bunge), являющийся подвидом первоцвета весеннего, широко используется в народной медицине наравне с весенним, однако является малоизученным в отношении химического состава [3,5,6].
Ранее нами был изучен состав фенольных соединений растений рода первоцвет [4,7].
Целью работы явилось изучение качественного и количественного состава органических кислот в траве первоцветов весеннего и крупночашечного методами тонкослойной, высокоэффективной жидкостной хроматографии и кислотно-основного титрования.
Материалы и методы
Объектом исследования явились образцы сырья травы первоцвета весеннего и травы первоцвета крупночашечного, собранного на территории Республики Башкирия в 2012 г.
Качественное определение органических кислот проводили хроматографированием водного извлечения в тонком слое сорбента и методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Исследования проводили на высокоэффективном жидкостном хроматографе фирмы «Gilston», модель 305, Франция; инжектор ручной, модель Rheodyne 7125 USA с последующей компьютерной обработкой результатов исследования с помощью программы «Мультихром для «Windows». В качестве неподвижной фазы была использована металлическая колонка размером 6,5х300 мм «Altech OA-1000 Organic Acids». В качестве подвижной фазы - 0,005 М раствор кислоты серной. Скорость подачи элюента - 0,5 мл/мин. Продолжительность анализа - 120 мин. Детектирование проводилось с помощью УФ-детектора «Gilston UV/VIS модель 151» при длине волны 210 нм.
Для приготовления подвижной фазы использовали спирт метиловый, кислоту серную (ос. ч.), очищенную дистиллированную воду. Для приготовления рабочих растворов стандартных образцов использовали стандарты органических кислот фирм «Fluka», «Sigma» (США) и спирт метиловый (ос. ч.). Идентификацию разделенных веществ проводили путем
сопоставления времен удерживания пиков, полученных на хроматограмме пробы, со временами удерживания стандартных растворов.
Для количественного определения свободных органических кислот использовали метод кислотно-основного титрования согласно методики ГФ-Х1 [1].
Результаты и обсуждение
Идентификацию органических кислот методом ТСХ проводили со стандартными образцами, которые проявлялись в виде желтых пятен на синем фоне в системе растворителей петролейный эфир-хлороформ-кислота муравьиная (10:4:1). В ходе проведенных исследований методом ТСХ в изучаемых образцах сырья обнаружены лимонная (Я? - 0,17), янтарная (Я? - 0,33), щавелевая (Я? - 0,43) и аскорбиновая (Я? - 0,54) кислоты.
Результаты исследования органических кислот в сырье первоцвета методом ВЭЖХ
Таблица 1
Наименование РСО органических кислот Первоцвет весенний Первоцвет крупночашечный
Время удерживания, мин. Количеств. соотношение, % Время удерживания, мин. Количеств. соотношение, %
Щавелевая 7,06 6,19 7,16 28,14
Гидроксилимонная 7,85 10,25 - -
Лимонная 8,82 8,09 9,47 7,79
Винная 9,54 1,91 - -
Аскорбиновая 10,85 5,54 11,23 15,46
Янтарная 12,15 4,12 13,66 15,79
Фумаровая 17,34 11,92 - -
Далее нами был использован метод ВЭЖХ. Результаты проведенных исследований содержания ОК изучаемых образцов представлены в таблицах 1, 2.
150-
5 10 15 20 35 30
Рис. 1. Хроматограмма (ВЭЖХ) извлечения из травы первоцвета весеннего.
Из таблицы 1 и рисунков 1, 2 видно, что исследуемые образцы сырья травы первоцветов весеннего и крупночашеч-
150-
50-
....... ■ ■ 4 < -------- ......
i & _______ 1 4
ё i i в : 1
л 4—!....... i 1 1 i &
1 -— Iii Ur-f 1 » ........jj...... ly f\ \ ______
5 lo _ 15 20 25
Рис. 2. Хроматограмма (ВЭЖХ) извлечения из травы первоцвета крупночашечного.
Таблица 2
Метрологическая характеристика методики количественного определения свободных органических кислот в сырье первоцвета
n I f I x ср. | S2 | S | P, % | t (P, f) | Д x E, %
Трава первоцвета весеннего
6 | 5 | 7,28 | 0,00454 | 0,06738 | 95 | 2,57 | 0,17317 2,4
Трава первоцвета крупночашечного
6 | 5 | 6,70 | 0,00516 | 0,07183 | 95 | 2,57 | 0,18460 2,8
ного содержат общие ОК: щавелевую, лимонную, аскорбиновую и янтарную. Качественный состав первоцвета весеннего оказался богаче, в нем содержатся дополнительно гидроксилимонная, винная и фумаровая кислоты.
Результаты количественного определения содержания органических кислот приведены в таблице 2.
Содержание свободных ОК в траве первоцвета весеннего составило 7,28%, в траве первоцвета крупночашечного - 6,70%. Ошибка единичного определения с вероятностью 95% не превышает 2,8%.
Таким образом, сравнительный анализ состава органических кислот исследуемых растений показал наличие в них щавелевой, лимонной, аскорбиновой и янтарной кислот. Однако качественный состав изучаемых соединений в траве
первоцвета весеннего оказался богаче. По количественному содержанию органических кислот первоцвет крупночашечный не уступает первоцвету весеннему и может явиться дополнительным источником получения БАВ.
ЛИТЕРАТУРА
1. Государственная фармакопея СССР. - Вып.1: Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / Минздрав СССР. - 11-е изд., доп. - М.: Медицина, 1989. - С.199.
2. Киселева Т.Л., Смирнова Ю.А. Лекарственные растения в мировой медицинской практике: государственное регулирование номенклатуры и качества. - М.: Изд-во Профессиональной ассоциации натуротерапевтов, 2009. -295 с.
3. Кучеров Е.В. Дикорастущие пищевые растения и их использование. - Уфа: РИО Госкомиздата БССР, 1990. - 160 с.
4. Латыпова Г.М., Романова З.Р., Бубенчикова В.Н. и др. Исследование состава фенольных соединений первоцвета весеннего, произрастающего во флоре Башкортостана // Башкирский химический журнал. - 2007. - Т. 14. №5. - С.34-36.
5. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства Paeoniaceae - Thimelaeaceae / Под ред. П.Д. Соколов. - Л.: Наука, 1986. -С.175-176.
6. Регистр лекарственных средств России / Под ред. Г.Л. Вышковского.- 19-й вып. - М., 2010. - 1368 с.
7. Романова З.Р. Фармакогностическое исследование первоцвета весеннего и первоцвета крупночашечного: Дис. ... канд. фарм. наук. - Курск, 2010. - 138 с.
8. Толстикова Т.Г., Толстиков А.Г., Толстиков Г.А. Лекарства из растительных веществ / Российская академия наук, Сибирское отделение, Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова. - Новосибирск: Гео, 2010. - 215 с.
REFERENCES
1. USSR State Pharmacopoeia. - Is. 1: General methods of analysis. Herbal drugs / USSR Ministry of Health. - 11th ed. -Moscow: Medicina, 1989. - P.199. (in Russian)
2. Kiseleva T.L., Smirnov Yu.A. Medicinal plants in the world medical practice: state regulation range and quality. - Moscow: Izd-vo Professionalnoj Assotsiatsii Naturoterapevtov, 2009. -295 p. (in Russian)
3. KucherovE.V. Wild edible plants and their uses. - Ufa: RIO Goskomisdat BSSR, 1990. - 160 p. (in Russian)
4. Latypova G.M., Romanova Z.R., Bubenchikova V.N., et al. The study of the composition of phenol combinations in Primula officinalis growing in Bashkortostan // Bashkirskij Chemicheskij Zurnal. - 2007. - Vol. 14. №5. - P.34-36. (in Russian)
5. Plant Resources of the USSR: Flowering plants, their chemical composition and utilization; Family Paeoniaceae -Thimelaeaceae / Ed. P.D. Sokolov. - Leningrad: Nauka, 1986. -P.175-176. (in Russian)
6. Register medicines Russia / Ed. G.L. Vyshkovsky. - 19th. ed. - Moscow, 2010. - 1368 p. (in Russian)
7. Romanova Z.R. Farmakognostichesky research and primrose Primula krupnochashechnogo: Dis. ... Cand. pharm. Sciences. - Kursk 2010. - 138 p. (in Russian)
8. Tolstikova T.G., Tolstikov A.G., Tolstikov G.A. Medicines from plant substances / Russian Academy of Sciences, Siberian Branch, N.N. Vorozhtsov's Novosibirsk Institute of Organic Chemistry. - Novosibirsk: Geo, 2010. - 215 p. (in Russian)
Информация об авторах:
Латыпова Гузель Минулловна - к.ф.н., доцент кафедры, e-mail: guzel.latypova2014@yandex.ru; Иванова Дина Фирусовна - ассистент кафедры; Давлетшина Разида Ягафаровна - к.ф.н., доцент кафедры; Уразлина Ольга Исламовна - к.ф.н., доцент кафедры.
Information About the Authors:
Latypova Guzel Minullovna - Associate Professor at the Department, e-mail: guzel.latypova2014@yandex.ru; Dina Ivanova Firusovna - Assistant Professor; Davletshina Razida Yagafarovna - PhD, Associate Professor; Urazlina Olga Islamovna - Associate Professor at the department.
