Синтез потенциально иммуноактивных лизинсодержащих пептидов Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

ДОКЛАДЫ АКАДЕМИИ НАУК РЕСПУБЛИКИ ТАДЖИКИСТАН ____________________________________2013, том 56, №6__________________________________

БИООРГАНИЧЕСКАЯ ХИМИЯ

УДК 547.964

Б.М.Холназаров, Н.Д.Бунятян, А.Н.Шахматов, Г.М.Бобиев

СИНТЕЗ ПОТЕНЦИАЛЬНО ИММУНОАКТИВНЫХ ЛИЗИНСОДЕРЖАЩИХ ПЕПТИДОВ

Таджикский государственный педагогический университет им. С.Айни

(Представлено академиком АН Республики Таджикистан К.Х.Хайдаровым 25.04.2013 г.)

Описан синтез лизинсодержащих тетрапептидов Н-Pro-Lys-Lys-Gly-OН и Н-Pro-Ala-Lys-Val-OН с использованием активированных (пентахлорфениловых) эфиров путем ступенчатого наращивания пептидной цепи, начиная с С-конца. Определение активности синтезированных пептидов т vivо путём изучения антителообразования при совместном применении с противотейлериозной вакциной в сравнении с тимогаром показало, что пептиды не обладают иммуностимулирующей активностью.

Ключевые слова: синтез - лизинсодержащие пептиды - активированные эфиры - иммуностимулирующая активность.

В последние годы низкомолекулярные пептиды занимают всё большее место среди лекарственных препаратов. Это объясняется тем, что они не являюися чужеродными для живого организма и вследствие этого почти не вызывают побочных явлений. Известно, что биологическая активность пептидов обуславливается активностью входящих в их состав аминокислот [1-3]. Одной из таких аминокислот является лизин, входящий в состав активных центров многих белков и гормонов, например тимозина а1, тимопоэтина [4,5]. Поэтому можно предположить, что лизинсодержащие пептиды могут обладать иммуностимулирующей активностью.

Цель данной работы - синтез лизинсодержащих тетрапептидов Н-Pro-Lys-Lys-Gly-OН и Н-Pro-Ala-Lys-Val-OН и оценка их иммуностимулирующей активности.

При синтезе некоторых низкомолекулярных иммуноактивных пептидов было показано, что одним из эффективных методов их синтеза является ступенчатое наращивание пептидной цепи начиная с С-конца, с использованием активированных эфиров с соблюдением тактики максимальной защиты [6].

В качестве активированных были использованы пентахлорфениловые эфиры. Для защиты а-аминогруппы в качестве временной защиты использовали трет-бутилоксикарбонильную группу, для защиты а-аминогрупп ^концевого пролина использовали бензилоксикарбонильную группу. Эту же группу использовали для блокирования е-аминогруппы лизина. Для блокирования а-карбоксильных групп С-концевых аминокислот использовали сложноэфирную бензильную группу. Трет-бутилоксикарбонильную группу на промежуточных стадиях синтеза удаляли действием 3.17 М раствором HQ в этилацетате в течение 30 мин. Бензилоксикарбонильную и бензильную группы снимали

Адрес для корреспонденции: Холназаров Баходур Махмадназарович. 734005, Республика Таджикистан, г.Душанбе, ул. А.Каххарова, 111, ООО «Занд». E-mail: bobievgm@rambler.ru.

каталитическим гидрированием в присутствии 5%-ного палладия на активированном угле. Такой выбор защитных групп позволил проводить окончательное деблокирование за одну стадию.

Схемы синтеза тетрапептидов H-Pro-Lys-Lys-Gly-OH и H-Pro-Ala-Lys-Val-OH приведены на рисунке.

Pro Lys Lys Gly

Boc Boc

Z —|—OPcp H Z -H

Boc Boc •^OPcp H — Z -OBzl

Z

Z Z

Z ^Z

Z Z

Z Z OH

Pro

Ala

Lys

Val

Z

Z

H

- OPcp H -

Boc -|— OPcp Boc

Boc Boc Н

^OPcp H — Z OBzl OBzl

Z OBzl

Z OBzl

Z OBzl

Z OBzl

Z OH

Рис. 1. Схе мы синтеза тетрапептидов H-Pro-Ala-Lys-Val-OH и H-Pro-Lys-Lys-Gly-OH

Очистку промежуточных защищённых ди-, три- и тетрапептидов проводили стандартным методом путём промывания их этилацетатных растворов кислыми и основными реагентами. Выход защищённых промежуточных пептидов на стадиях конденсации составлял 68.8-80.4%.

Таким образом, проведённый синтез ещё раз подтвердил тот факт, что одним из оптимальных путей синтеза низкомолекулярных пептидов является использование тактики максимальной защиты и ступенчатого наращивания пептидной цепи методом активированных эфиров, начиная с С-конца.

Активность синтезированных пептидов была изучена in vivo по усилению антителообразова-ния при совместном применении с противотейлериозной вакциной в сравнении с тимогаром. Полученные результаты приведены в таблице.

Таблица

Иммунологическая активность синтезированных пептидов

Формула дипептида Титр противотейлерийных антител Иммунологическая активность относительно тимогара

H-Ile-Trp-OH (тимогар) 1:1600 100,0

H-Tyr-Lys-Phe-Gly-OH 1:800 0

H-Tyr-Tyr-Pro-Ser-NH2 1:800 0

H-Pro-Lys-Lys-Gly-OH 1:800 0

H-Pro-Ala-Lys-Val-OH 1:800 0

Доклады Академии наук Республики Таджикистан 2013, том 56, №6

Как показывают полученные результаты, наиболее активным оказался дипептид изолейцил-триптофан (тимогар), вследствие чего он является наиболее перспективным для разработки на его основе иммуностимулирующих лекарственных препаратов.

Поступило 26.04.2013 г.

ЛИТЕРАТУРА

1. Белокрылов Г.А., Попова О.Я., Сорочинская Е.И. - Бюлл. эксперим. биол. мед., 1999, т. 127, № 6, с. 674-676.

2. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х., Малинин В.В. Пептидные тимомиметики. - СПб.: Наука, 2000, 158 с.

3. Шатаева Л.К., Хавинсон В.Х., Ряднова И.Ю. Пептидная саморегуляция живых систем (факты и гипотезы). - СПб.: Наука, 2003, 222 с.

4. Abiko T., Onodera I., Sekino H. - Chem. Pharm. Bull., 1980, v.28, № 8, рр.2507-2511.

5. Denes L., Szende B., Ember J., Hajos G., Szporny L., Rill A., Nyeki O., Schon J., Kisfaludy L. - Иммунология, 1986, №3, с. 13-19.

6. Бобиев Г.М. Бунятян Н.Д., Саядян Х.С., Саповский М.М. Иммуноактивные пептиды и их координационные соединения в медицине. - М.: Издательский дом «Русский врач», 2009, 228 с.

Б.М.Холназаров, Н.Д.Бунятян, A.H^axMaTOB, F-М.Бобиев

СИНТЕЗИ ПЕПТИД^И ЛИЗИHДOРИ ФAЪOЛHOKИИ МAСУHИИ ИМKOHПAЗИРДOШТA

Донишго^и давлатии омузгории Тоцикистон ба номи С.Айни

Синтези тетрапептидх,ои лизиндори H-Pro-Lys-Lys-Gly-OH ва H-Pro-Ala-Lys-Val-OH бо УСули эфирх,ои фaъолкapдaшyдa (пентахлорфенилй) бо рох,и аз С-охир сар карда, зина ба зина дароз кардани занчири пептидй тавсиф карда мешавад. Муайянкунии фаъолияти пептидх,ои синтез кардашуда in vivo бо рох,и тадкдкд зиддичисмх,осилкунй хднгоми истифодаи якчояи онх,о бо ваксинаи зиддитейлериозй нисбат ба тимогар нишон дод, ки пептидх,ои мазкур аз назари масунй фаъол нестанд.

Калима^ои калиди: синтез - пептидуои лизиндор - эфир^ои фаъол кардашуда - фаъолнокии ба ангузиш оварандаи масуният.

B.M.Kholnazarov, N.D.Buniatian, A.N.Shakhmatov, G.M.Bobiev THE SYNTHESIS OF THE POTENTIAL IMMUNOACTIVE LYSINE-CONTAINING PEPTIDES

S.Ainy Tajik State Pedagogical University

The synthesis of lysine-containing tetrapeptides H-Pro-Lys-Lys-Gly-OH и H-Pro-Ala-Lys-Val-OH by the method of activated (pentachlorophenyl) esters by stepwise increase of peptide chain from C-end are describe The study of activity of synthesised peptides in vivo on intension of formation of aniybodies at co-

operative use with antitheileriosis vaccine in comparison with thymogar showed that peptides has not immy-nostimulating activity.

Key words: synthesis - lysine-containing peptides - activated esters - immynostimulating activity.