CC BY
32
УДК 547.857.4, 615.273.53
СИНТЕЗ НОВЫХ СОЛЕЙ 2-[1-БЕНЗИЛ-3-МЕТИЛ-7-(ТИЕТАНИЛ-3) КСАНТИНИЛ-8-ТИО] УКСУСНОЙ КИСЛОТЫ И ИХ ВЛИЯНИЕ НА СИСТЕМУ ГЕМОСТАЗА
Уразбаев М.А., Халиуллин Ф.А., Самородов А.В., Камилов Ф.Х
ФГБОУ ВО Башкирский государственный медицинский университет, г. Уфа, Российская Федерация.
Аннотация: Взаимодействием 2-[(1-бензил-3-метил-7-(тиетанил-3) ксантин-8-ил)тио]уксусной кислоты с аминами получены соответствующие соли с выходами 46-72%. Структура синтезированных соединений подтверждена данными ИК и ЯМР'Н спектроскопии. Изучена антиагрегационная и антикоагуляционная активность солей 2-[(1-бензил-3-метил-7-(тиетанил-3) ксантин-8-ил)тио]уксусной кислоты. При АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов морфолиниевая, N-метилпиперази-ниевая, моноэтаноламмониевая, бензиламмониевая, диэтиламмониевая и калиевая соли показали антиагрегационную активность, сравнимую с аспирином, но уступающую пентоксифиллину. При коллаген-индуцированной агрегации все соединения проявили аниагрегационную активность, аспирин и пентоксифиллин в этих условиях активности не проявили. Антикоагуля-ционная активность синтезированных соединений значительно уступает гепарину натрия. Ключевые слова: антиагрегационная активность, антикоагуляционная активность, ксантины, синтез, тиетан
Производное ксантина - пентоксифиллин проявляет антиагрегантную, ангиопротекторную активность и применяется в медицине при нарушениях кровообращения [1]. Поиск новых производных ксантина, влияющих на систему гемостаза продолжается. Циклогек-силаммониевая соль 2-[3-метил-7-(1,1-диоксотиета-нил-3)-1-этилксантинил-8-тио]уксусной кислоты превосходит пентоксифиллин по уровню антиагрегацион-ной активности, а циклогексиламмониевая соль 2-[3-метил-1-н-пропил-7-(1,1-диоксотиетанил-3)ксанти-нил-8-тио]уксусной кислоты оказывает проагрегант-ное действие [2,3]. В работах ряда авторов показано, что производные бензилксантина биологически активны [4,5,6]. В связи с этим интересен синтез солей 2-[1-бензил-3-метил-7-(тиетанил-3)ксантинил-8-тио]ук-сусной кислоты и изучение их влияния на систему гемостаза.
Материалы и методы
Экспериментальная химическая часть. ИК спектры соединений сняты на приборе «Инфралюм-ФТ-02» в дисках с калия бромидом. Спектры ЯМР:Н сняты на приборах Вгикег DRX-500 и "Вгикег АМ-300" с рабочей частотой 500.13 и 300 МГц соответственно. В качестве растворителя использовался ДМСО-йй, в качестве внутреннего стандарта - сигналы растворителя. Индивидуальность полученных соединений подтверждена методом тонкослойной хроматографии на пластинах <^орЬА1» в системе хлороформ-этанол (объемное соотношение 9:1), пятна проявляли УФ светом при длине волны 254 нм.
2-[(1-бензил-3-метил-7-(тиетанил-3)ксантин-8-ил)тио]уксусная кислота (1)
Синтезирована по известной методике [7] Пиперидиниевая соль 2-[(1-бензил-3-метил-7-(тие-танил-3)ксантин-8-ил)тио]уксусной кислоты (2а)
К раствору 0.63 г (1.5 ммоль) 2-[(1-бензил-3-метил-7-(тиетанил-3)ксантин-8-ил)тио]уксусной кислоты в 50 мл ацетона добавляют 0.16г(1.8 ммоль) пиперидина в 5 мл ацетона. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают ацетоном, сушат. Получают 0.35г (46%) соединения 2а. Cl8Hl7N4NaO4S2. Т.пл. 204-206оС (этанол).
Морфолиниевая соль 2-[(1-бензил-3-метил-7-(тие-танил-3)ксантин-8-ил)тио]уксусной кислоты (2Ь)
Получают аналогично 2а. Выход: 0.34г (46%) соединения 2Ь. C22H27N5O5S2. Т.пл. 175-177оС (и-пропа-нол).
Пиперазина ди-(2-[(1 -бензил-3-метил-7-(тиетанил-3)ксантин-8-ил)тио]ацетат) (2с)
Получают аналогично 2а. Выход: 1.00 г (72%) соединения 2с. C4oH46NloO8S4. Т.разл. 230оС (этанол).
Диэтаноламмониевая соль 2-[(1-бензил-3-метил-7-(тиетанил-3)ксантин-8-ил)тио]уксусной кислоты (2d)
Получают аналогично 2а. Выход: 1.26 г (71%) соединения 2d. C22H29N5O6S2. Т.пл. 73-74оС (этанол).
N-метилпиперазиниевая соль 2-[(1-бензил-3-ме-тил-7-(тиетанил-3)ксантин-8-ил)тио]уксусной кислоты (2е)
Получают аналогично 2a. Выход: 1.01 г (64%) соединения 2e. C23H3oN6O4S2. Т.пл. 160-161оС (и-пропа-нол).
Моноэтаноламмониевая соль соль 2-[(1-бензил-3-метил-7-(тиетанил-3)ксантин-8-ил)тио]уксусной кислоты (2f)
Получают аналогично 2a. Выход: 1.03 г (71%) соединения 2f. C20H25N5O5S2. Т.пл. 181-182оС (этанол).
Бензиламмониевая соль 2-[(1-бензил-3-метил-7-(тиетанил-3)ксантин-8-ил)тио]уксусной кислоты (2g)
Получают аналогично 2a. Выход: 0.64 г (64%)со-единения 2g. C25H27N5O4S2. Т.пл. 161-162оС (ацетон).
Трисаммониевая соль 2-[(1-бензил-3-метил-7-(тие-танил-3)ксантин-8-ил)тио]уксусной кислоты (2h)
К раствору 1.25 г (3 ммоль) 2-[(1-бензил-3-метил-7-(тиетанил-3)ксантин-8-ил)тио]уксусной кислоты в 50 мл этанола добавляют 0.39г (3.6 ммоль) трисамина в 5 мл этанола. Через час раствор упаривают досуха, затирают ацетоном, осадок отфильтровывают, промывают ацетоном, сушат. Получают 1.02 г (62%) соединения 2h. C22H29N5O7S2.T.ra. 149-151°С (этанол).
Вся экспериментальная работа выполнена на крови здоровых доноров-мужчин в возрасте 18-24 лет в условиях in vitro в соответствии с рекомендациями "Руководства по доклиническому изучению новых фармакологических веществ" [8]. Исследование было одобрено этическим комитетом ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России (№2 от 17.10.2012). Информированное согласие было получено у всех участников исследования до забора крови.
Взятие крови проводили из кубитальной вены с использованием систем вакуумного забора крови BD Vacutainer® (Dickinson and Company, США). В качестве стабилизатора венозной крови использовали 3,8% раствор цитрата натрия в соотношении 9:1.
Все тесты проводили на обогащенной и обедненной тромбоцитами плазмах. Образцы богатой тромбоцитами плазмы получали центрифугированием цитрат-ной крови при 100g в течение 10 минут, бестромбоци-тарной плазмы - при 300g в течение 15 минут. В работе использовалась центрифуга 0ПН-3.02 (Россия).
Данные ИК спектров солей 2-[1-бешил-3-метил-7-1
Исследование влияния новых производных ксан-тина и препаратов сравнения на агрегацию тромбоцитов в условиях in vitro на крови человека осуществляли с помощью лазерного анализатора агрегации тромбоцитов "Thromlite-1006A" (Россия) [9]. В качестве индуктора агрегации использовали аденозиндифосфат (АДФ) в концентрации 20 мкг/мл и коллаген в концентрации 5 мг/мл производства "Технология-Стандарт" (г. Барнаул, Россия). Определение активности исследуемых веществ проводили в концентрации 2*10-3 М/л.
Исследование влияния на коагуляционный компонент гемостаза впервые синтезированных соединений и гепарина натрия проводили общепризнанными клот-тинговыми тестами на турбидиметрическом гемокоа-гулометре Solar CGL 2110 (ЗАО "СОЛАР", Беларусь). Изучались показатели активированного парциального тромбопластинового времени (АПТВ), протромбино-вого времени (ПВ) и концентрации фибриногена по A.Clauss. Определение антикоагуляционной активности исследуемых веществ проводили в концентрации 10-3 г/мл. В работе использовались реактивы производства "Технология-Стандарт" (г. Барнаул, Россия).
В качестве препаратов сравнения, согласно [10] из принципа химического подобия и установленной высокой биологической активности, в экспериментах использовали пентоксифиллин (ОАО "Борисовский завод медицинских препаратов", Беларусь), ацетилсалициловую кислоту (Фармацевтическая фабрика Шан-донг Ксинхуа Фармасьютикал Ко., ЛТД, Китай) и гепарин натрия (ОАО «Синтез», Россия).
Результаты исследования обработаны с применением статистического пакета Statistica 10,0 (StatSoft Inc, США). Проверку на нормальность распределения фактических данных выполняли с помощью критерия Шапиро-Уилка. Установлено, что вид распределения полученных данных отличается от нормального, поэтому при дальнейшей работе использовались непараметрические методы. Данные представлены в виде медианы, 25 и 75 процентилей. Дисперсионный анализ проводили с помощью критерия Краскела-Уоллиса. Критический уровень значимости р для статистических критериев принимали равным 0,05.
Таблица 1
[етанил-3)ксантинил-8-тио]уксусной кислоты, см-1
Соединение C =C вал., C = N вал., C = O вал. N+ - H вал., О - Н вал.
2a 1660, 1699 2800-3050
2b 1635, 1662, 1701 2200-3050
2c 1655, 1661, 1698 3300-3550
2d 1665, 1697, 1703 2610-3350
2e 1655, 1665, 1702 3300-3550
2f 1650, 1657, 1699, 1702 2720-3320
2g 1658, 1667, 1699, 1702 2780-3150
2h 1672, 1709 2740-3450
Таблица 2
Данные ЯМР1Н спектров солей 2-[1-бензил-3-метил-7-(тиетанил-3)ксантинил-8-тио]
уксусной кислоты, м.д.
Соединение 1-СН2С6Н5 3- СН3 3Н, с 7-(тиетанил-3) SCH2 2Н, с Другие протоны
СН2 2Н, с С6Н5 5Н, м S(CH)2 2Н, м S(CH)2 2Н, м 7-CH 1Н, м
1 2 3 4 5 6 7 8 9
2a 5.10 7,22-7.30 3.40 3.27-3.33 4.16-4.23 5.85-5.94 3.89 2.89-3.02 (N(CH2)2, м, 4Н), 1,55-1.65 ((С-СНг)2 4Н, м), 1.48-1.55 (СН2 2Н, м)
2b 5.08 7.19-7.26 3.39 3.29-3.34 4.17-4.21 5.85-5.93 3.94 2.95-2.97 (N(CH2)2, 4Н, т, J=4.85ru,), 3.66-3.69 (O(CH2)2, 4Н, т, J=4.85ru,)
2c 5.08 7.19-7.28 3.38 3.29-3.32 4.17-4.35 5.84-5.92 3.97 2.89 (N(CH2)2, 4H, c)
2d 5.08 7.19-7.29 3.42 3.30-3.33 4.17-4.21 5.85-5.92 3.87 2.95-2.98 (N(CH2)2, 4Н, т, J=5.25rq), 3.59-3.62 (O(CH2)2, 4Н, т, J=5.25rq)
2e 5.08 7.20-7.30 3.39 3.30-3.34 4.18-4.22 5.86-5.94 3.88 2.96-2.98 (N(CH2)2, 4Н, м), 2.42-2.44 (N(CH2)2, 4Н, м) 2.16 (№СН3 3Н, с)
2f 5.07 7.20-7.28 3.39 3.28-3.31 4.18-4.21 5.85-5.92 3.86 2.80-2.82 (N(CH2)2, 2Н, т, J=5.25rq), 3.54-3.56 (O(CHz)2, 2Н, т, J=5.25rq)
2g 5.08 7.19-7.29 3.38 3.24-3.31 4.17-4.21 5.86-5.93 3.87 3.97 (NCH2, 2Н, c), 7.30-7.45 (C6H5, 5Н, м)
2h 5.10 7.23-7.31 3.41 3.29-3.34 4.18-4.24 5.85-5.98 3.89 3.45 (N(CH2)3, 6Н, c)
Примечание: Экспериментальная биологическая часть
Результаты и обсуждение. В качестве исходного соединения использована 2-[1-бензил-3-метил-7-(тие-танил-3)ксантинил-8-тио]уксусная кислота (1), синтез которой был осуществлен по известной методике[7].
В качестве оснований для синтеза солей использовали трисамин, моноэтаноламин, диэтаноламин, пиперидин, морфолин, бензиламин, пиперазин и N
метилпиперазин. Соли, за исключением трисаммоние-вой, были получены добавлением ацетоновых растворов оснований к ацетоновому раствору кислоты 1 с выходом 46-72%. Трисаммониевая соль была получена путем добавления этанольного раствора трисамина к этанольному раствору кислоты 1, с последующим упариванием и затиранием остатка ацетоном. Выход составил 62%.
Рис.1 Схема синтеза солей 2-[1-бензил-3-метил-7-(тиетанил-3)ксантинил-8-тио]уксусной кислоты
В ИК спектрах всех соединений наблюдаются характерные для ксантинов полосы поглощения С=С,
С=^ С=0 связей в области 1635-1702 см-1, полосы поглощения №-Н связей в области 2600-3050 см-1 подтверждают строение солей (табл. 1).
Во всех ЯМР1Н спектрах наблюдаются сигналы протонов тиетанового цикла, метильного и бензиль-ного заместителей, остатка тиогликолевой кислоты, характерные для исходного соединения 1, Образование солей подтверждается сигналами протонов соответствующих аминов (табл. 2). Например, в спектрах моноэтаноламмониевой 2£ диэтаноламмониевой 2d солей регистрируются триплеты N0^ групп около 2.8-2.9 м.д., триплеты ОСН2 групп около 3.5-3.6 м.д. с константой спин-спинового взаимодействия 5.25 Гц. В спектре морфолиниевой соли 2Ь наблюдаются сигналы протонов ^СН2)2 и 0(СН2)2 групп в виде триплетов при 2.95-2.97 и 3.66-3.69 м.д. с константой спин-спинового взаимодействия 4.85Гц. Спектр соединения 3с содержит один синглет при 2.90 м.д. интенсивностью в 4 протона, соответствующий двум №(СН2)2 группам, и синглет SCH2 группы интенсивностью в 2 протона, что свидетельствует об образовании соли в соотношении амин : кислота, равной 1 : 2. Для N метилпиперазиниевой соли 3е зарегистрированы сигналы пиперазиниевого цикла при 2.96-2.98 м.д. в 4 протона и при 2.42-2.44 м.д. также в 4 протона, сигнал ме-
тильной группы при 2.16 м.д. интенсивностью в 3 протона, синглет SCH2 группы интенсивностью в 2 протона что свидетельствует об образовании соли в соотношении амин : кислота, равной 1 : 1.
Нами изучалось влияние солей 2-[1-бензил-3-ме-тил-7-(тиетанил-3)ксантинил-8-тио]уксусной кислоты на систему гемостаза (табл. 3). Кроме описанных выше солей также были изучены натриевая (21), калиевая ф), аммониевая (2к), диэтиламмониевая (21) соли кислоты 1, которые были синтезированы по известным ме-тодикам[7]. При АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов соединения 2Ь, 2е, 2£ 2g, 2j и 21 показали антиагрегационную активность, сравнимую с аспирином, но значительно уступающую пентоксифиллину. Остальные соли показали более низкую активность. При коллаген-индуцированной агрегации все соединения проявили антиагрегационные свойства, однако аспирин и пентоксифиллин в этих условиях не проявили активность. Соединения показали невыраженную, в сравнении с гепарином натрия, антикоагуляционную активность по активированному парциальному тром-бопластиновому времени (АПТВ), не влияли на про-тромбиновое время и концентрацию фибриногена.
Таблица 3
Влияние солей 2-[1-бензил-3-метил-7-(тиетанил-3)ксантинил-8-тио]уксусной кислоты
на систему гемостаза
Шифр Снижение уровня АДФ-инду-цированной агрегации тромбоцитов, % к контролю Снижение уровня коллаген-индуцированной агрегации тромбоцитов, % к контролю Удлинение АПТВ, % к контролю
2a 8,3 (7,6-9,4) а в 8,1 (7,7-8,6) а в 5,1 (4,8-7,2)
2b 10,1 (8,3-12,1) а в 9,6 (8,5-11,8) а в 7,4 (6,2-8,3)
2c 4,3 (3,5-8,7) ав 4,8 (4,0-6,3) а в 3,7 (3,4-4,5)
2d 7,3 (6,1-9,5) а в 5,6 (4,3-7,1) а в 6,3 (6,1-8,2)
2e 12,5 (11,3-13,7) в 11,2 (10,8-13,6) а в 5,9 (4,1-6,3)
2f 14,7 (11,3-15,5) в 12,1 (9,7-14,5) а в 3,3 (1,7-4,2)
2g 12,3 (10,6-13,4) в 11,6 (9,3-13,1) а в 9,1 (7,8-13,5)
2h 8,2 (7,4-9,3) а в 6,3 (5,5-8,3) а в 7,4 (6,6-8,5)
2i 8,1 (7,3-9,6) а в 7,7 (6,4-8,5) а в 1,2 (0,9-2,3)
2j 11,4 (9,7-13,2) а 10,8 (8,9-12,2) а в 4,2 (3,1-6,2)
2k 6,3 (5,1-7,2) а в 6,8 (5,9-7,6) а в 1,2 (0,5-1,9)
21 13,1 (11,4-14,2) в 12,7 (11,8-13,8) а в 9,3 (7,2-10,8)
Аспирин 13,7 (10,8-16,4) 0,0 (0,0-0,0) н.э.
Пентокси-филлин 48,4 (42,7-56,5) 0,0 (0,0-0,0) н.э.
Гепарин натрия н.э. н.э. 54,7 (47,7-60,2)
Примечание: данные достоверны в сравнении с контролем при р<0,05; п=6; н.э. - нет эффекта; уровень статистической значимости различий в сравнении с аспирином (а) и пентоксифиллином (в) при р<0,05.
Выводы:
1. Реакцией 2-[1-бензил-3-метил-7-(тиетанил-3)ксантинил-8-тио]уксусной кислоты с аминами
получено 8 новых солей. Строение подтверждено методами ЯМР1Н и ИК спектроскопии.
2. Исследована антиагрегационная и антикоагуля-ционная активность солей 2-[1-бензил-3-метил-7-(тиетанил-3)ксантинил-8-тио]уксусной кислоты.
3. Синтезированные соли проявили антиагрегаци-онную активность, сравнимую с аспирином при АДФ-индуцированной агрегации. При коллаген-индуцированной агрегации синтезированные соединения уменьшали агрегацию тромбоцитов на 5-13%, пентоксифиллин и аспирин в данных условиях не проявили активности.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
[1] Регистр лекарственный средств России. URL: www.rlsnet.ru/mnn_index_id_308.htm (дата обращения: 22.05.17)
[2] Самородов А.В. Камилов Ф.Х., Халиуллин Ф.А. [и др.] Результаты доклинических исследований новой цикло-гексиламмониевой соли 2-[3-метил-7-(1,1-диоксотие-танил-3)-1-этилксантинил-8-тио]уксусной кислоты в отношении системы гемостаза в условиях in vivoZ/Во-просы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2016. № 8. С. 10-17.
[3] Камилов Ф.Х., Тимирханова Г.А., Самородов А.В. [и др.] Соли [3-метил-1-н-пропил-7-(1,1-диоксотиетанил-3)ксантинил-8-тио]уксусной кислоты, проявляющие
проагрегантную активность // Патент на изобретение RUS 2459825 31.05.2011.
[4] Левич С.В., Александрова Е.В., Шкода А.С. [и др.] Поиск веществ с антимикробной и противогрибковой активностями среди новых производных 3-бензилксан-тина//Вестник новых медицинских технологий. 2013. Т.20. № 4. С.25-28.
[5] Белай И.М., Александрова Е.В., Левич С.В. [и др.] Исследование гипогликемической активности производных 3-бензил-8-метилксантина//Актуальш питання фармацевтично! i медично! науки та практики. 2015. №1(17). С. 89-92.
[6] Иванченко Д.Г., Романенко Н.И.1, Валександрова Е. [и др.] Синтез и изучение антиоксидантной активности 8-к-амино-1-бензилтеоброминов//Вгсник фармацй. 2009. №1 С. 3-6.
[7] Халиуллин Ф.А., Уразбаев М.А. Синтез солей 2-[1-бен-зил-3-метил-7-(тиетанил-3)-ксантинил-8-тио]уксусной кислоты//Башкирский химический журнал. 2016. Т. 23. № 3. С. 53-55.
[8] Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. - М.: Гриф и К, 2012. - 944 с.
[9] Bom G.G.V.Nature (London).-1962 .-V.194.
[10] Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. - М.: Гриф и К, 2012. - 944 с.
SYNTHESIS OF SALTS 2-[1-BENZYL-3-METHYL-7-(THIETAN-3-YL) XANTHINYL-8-THIO]ACETIC ACID AND THEIR IMPACT ON THE HEMOSTASIS SYSTEM
Urazbaev M.A., Khaliullin F.A., Samorodov A.V., Kamilov F.Kh.
Bashkir State Medical University Ufa, Russian Federation.
Annotation.: The reaction of 2-[1-benzyl-3-methyl-7-(thietan-3-yl)xanthinyl-8-thio]acetic acid with amines yielded the corresponding salts with yields of46-72%. The structure of the synthesized compounds is confirmed by the data of IR and NMR'H spectroscopy. The antiplatelet and anticoagulant activity of 2-[1-benzyl-3-methyl-7-(thietan-3-yl)xanthinyl-8-thio]acetic and 12 of its salts was studied. With ADP-induced platelet aggregation, morpholinium, N-methylpiperazinium, monoethanolammonium, benzylammonium, di-ethylammonium and potassium salts showed a level of antiaggregation activity comparable to aspirin, but inferior to pentoxifylline. With collagen-induced aggregation, all compounds showed mild activity, but neither aspirin nor pentoxifylline showed activity in these conditions. The anticoagulant activity of synthesized compounds is significantly inferior to sodium heparin. Key words: antiaggregation activity, anticoagulant activity, synthesis, thietane, xanthines
REFERENCES
[1] The register of medicines in Russia. URL: www.rlsnet.ru/mnn_in-dex_id_308.htm (reference date: May 22, 2017)
[2] Samorodov A.V. Kamilov F.H., Haliullin F.A. [et al.] Rezul'taty doklinicheskih issledovanij novoj ciklogeksilammonievoj soli 2-[3-metil-7-(1,1-dioksotietanil-3)-1-jetilksantinil-8-tio]uksusnoj kisloty v otnoshenii sistemy gemostaza v uslovijah in vivo//Vo-prosy biologicheskoj, medicinskoj i farmacevticheskoj himii. 2016. № 8. pp. 10-17. (in Russian)
[3] Kamilov F.H., Timirhanova G.A., Samorodov A.V. [i dr.] Soli [3-metil-1-n-propil-7-(1,1-dioksotietanil-3)ksantinil-8-tio]uksusnoj kisloty, projavljajushhie proagregantnuju aktivnost' // Patent na izobretenie RUS 2459825 31.05.2011. (in Russian)
[4] Levich S.V., Aleksandrova E.V., Shkoda A.S. [et al.] Poisk vesh-hestv s antimikrobnoj i protivogribkovoj aktivnostjami sredi novyh proizvodnyh 3-benzilksantina//Vestnik novyh medicinskih tehnologij. 2013. vol. 20. № 4. pp. 25-28. (in Russian)
[5] Belaj I.M., Aleksandrova E.V., Levich S.V. [et al.] Issledovanie gipoglikemicheskoj aktivnosti proizvodnyh 3-benzil-8-metilksan-tina//Aktual'ni pitannja farmacevtichnoi i medichnoi nauki ta prak-tiki. 2015. №1(17). pp. 89-92. (in Russian)
[6] Ivanchenko D.G., Romanenko N.I.1, Valeksandrova E. [et al.] Sin-tez i izuchenie antioksidantnoj aktivnosti 8-k-amino-1-benzilteo-brominov//Visnik farmacii. 2009. №1 pp. 3-6. (in Russian)
[7] Haliullin F.A., Urazbaev M.A. Sintez solej 2-[1-benzil-3-metil-7-(tietanil-3)ksantinil-8-tio]uksusnoj kisloty//Bashkirskij himich-eskij zhurnal. 2016. vol. 23. № 3. pp. 53-55. (in Russian)
[8] Rukovodstvo po provedeniju doklinicheskih issledovanij le-karstvennyh sredstv. Chast' pervaja. - M.: Grif i K, 2012. pp. - 944.
[9] Born G.G.V.Nature (London).-1962 .-V.194.
[10] Rukovodstvo po provedeniju doklinicheskih issledovanij le-karstvennyh sredstv. Chast' pervaja. - M.: Grif i K, 2012. pp. - 944.
