CC BY
17
DOI 10.26724 / 2079-8334-2017-4-62-145-149
УДК 599.32:612.76+615.063-002:515.9]-092.4
П.Г. Лихацьки ш, Л.С. Ф1ра
ДВНЗ "Тернопшьський державший медичний унiверситет ¡меш I. Я. Горбачевського МОЗ
УкраУни", м. Терношль
РОЗВИТОК Н1ТРООКСИДАТИВНОГО СТРЕСУ ТА ЗАПАЛЬНИХ ПРОЦЕС1В У ЩУР1В Р1ЗНОГО В1КУ, УРАЖЕНИХ ТЮТЮНОВИМ ДИМОМ
e-mail: luhatsky@ukr.net
Метою даноï роботи було дослiдити активнiсть КС-синтазил системи та розвиток запальних процеав у щурiв pi3Horo в1ку в динамщ отруення тютюновим димом. Дослвдження проведенi на бiлих безпородних щурах-самцях рiзного вжу, якi щоденно протягом 45 див пiддавались д11 тютюнового диму у герметичнiй камерi (час експозицп 6 хв). Через 15, 30 та 45 дiб ввд початку ураження тварин тютюновим димом, ïx виводили i3 експерименту шляхом евтанази пiд тiопенталовим наркозом з дотриманням усix правил по робот! з хребетними тваринами. Встановлено, що ураження щур1в протягом 45 дшв тютюновим димом призвело до збшьшення у сироватцi кровi вмiсту прозапального цитокiну IL-6. Найбшьш чутливими до даного токсиканта виявились статевонезрш щури, у яких вмiст IL-6 зростав на 50 %, 164 % та 237 % вщповщно через 15, 30 та 45 дтв тсля ураження. Отруення щурш тютюновим димом призвело до тдвищення активностi iндуцибельноï NO-синтази у сироватщ кровi та печiнцi протягом усього термшу дослiдження. Вiдмiчено, що оргашзм статевонезрiлиx щурiв найбiльш швидко i найбiльш виражено реагуе на тютюновий дим. Активнiсть iNO-синтази найбшьших значень досягла як у сироватщ кров1, так i в печшщ статевонезрших тварин. Пiсля ураження щур1в тютюновим димом у наших експериментах вiдмiчалось зниження активностi ендотелiальноï NO-синтази у всх вiковиx групах щур1в. У статевонезрших щурiв актившсть еNOS у сироватцi кровi знизилась у 1,4 раза, 1,8 та 2 рази через 15, 30 та 45 дтв в1дпов1дно пор1вняно з нормою. У печшщ щур1в уах вiковиx груп протягом експерименту спостерггалось аналогiчне зниження активностi еNOS i найменшого значення вона досягла в останнш термiн дослiдження (45 день ураження тютюновим димом).
К.почош слова: тютюновий дим, 6im щури, штрооксидативний стрес, NO-синтаза, штерлейкши.
Робота е фрагментом НДР "Бioхiмiчнi мехатзми порушень Mema6oni3My за умов надходження до оргатзму moKCUKaHmieрiзного генезу". № державноïреестрацй 0115U003359.
Тютюнопалшня посщае особливе мюце серед шюдливих звичок, оскшьки на вщмшу вщ алкоголю i наркотиюв - «вщкритих вбивць» людського оргашзму, д1я тютюнового диму на початкових етапах вживання практично непом1тна. Ймов1рно, ця властивють тютюнопалшня серед шших чинниюв, що стимулюють формування i закршлення звички, призводить до широко1' поширеност курiння. Курiння цигарок серед населення щороку зростае. Сьогоднi у свт налiчуеться бiля 1,3 млрд людей, що курять, у крашах Свропи - до 28 % дорослого населення [4, 6]. На виникнення захворювань впливае як активне, так i пасивне куршня. Активш та пасивш курцi вдихають однакову кшьюсть токсинiв, що однаково впливае на здоров'я людини [16].
Останнiм часом багато дослщжень присвяченi вивченню важливого ендотелiального фактора - оксиду азоту (NO) [3, 5]. Ендотелш стшки судин за допомогою ферменту NO-синтази (NOS) з L-арпшну продукуе оксид азоту (NO) як один iз найважливших месенджерiв, який бере участь у розвитку як у фiзiологiчниx, так i патолопчних процесiв, що перебтають в органiзмi. NO-синтази вважають бiфункцiональними ферментами, оскiльки вони активують кисень i, «зв'язуючи» його з гуашдиновим азотом L-аргiнiну, вившьняють NO. Хоча всi iзоформи NOS виконують одну й ту ж функщю, каталiзують утворення NO, двi iзоформи NOS, нейрональна та ендотелiальна, постiйно та стабiльно наявнi в кттинах та тканинах. На вiдмiну вiд них третя iзоформа (iNOS) проявляе свою активнiсть у вщповщь на розвиток патологiчниx процесiв, тсля ïï стимулювання ендотоксинами чи цитокшами [8, 15].
З лiтератури вщомо, що потрапляння до органiзму тютюнового диму викликае утворення значно1' кшькост активних форм кисню, що призводить до розвитку окиснювального стресу [7]. У цей час в органiзмi активуються запальш процеси, на що вказуе дисбаланс про-та протизапальних цитоюшв, який переважае в сторону утворення маркерiв запалення iнтерлейкiнiв IL-1, 8, 6, TFN. Останнi можуть бути активаторами утворення шдуцибельно1' NO-синтази [6].
Метою роботи було дослщити актившсть NO-otot^^i' системи та розвиток запальних процешв у щурiв рiзного вшу в динамщ отруення тютюновим димом.
Матерiал та методи дослiдження. Дослщження проведенi на бiлиx безпородних щурах-самцях, як утримувались на стандартному ращош вiварiю Тернопiльського державного медичного ушверситету. Щури були подiленi на три вiковi категорiï - перша - статевонезрш, масою тша 60-80 г (2-ох мiсячнi), друга - статевозрш - масою тiла - 180-200 г (9-ти мюячш) i
третя - CTape4i (15-ти мюячш), маса тша яких становила 300-320 г. Кожна вшова група складалася i3 двох тдгруп - iнтактний контроль та дослщна група. Щури дослiдних груп щоденно протягом 45 днiв тддавались впливовi тютюнового диму. Модель залежност вiд хрошчно! ди тютюнового диму створювали за допомогою герметично! камери об'емом 30 лiтрiв, що дозволило обкурювати тварин у вiльнiй поведшщ. Тютюновий дим, що утворювався вщ горiння 6 сигарет «Прима срiбна (синя)» (i3 вмiстом 0,6 мг шкотину та 8 мг смоли), через отвори у камерi подавався всередину не!. У камерi одночасно знаходилось 6 тварин протягом 6 хвилин. Тварини контрольно! групи також знаходились на протязi 6 хвилин у герметичнш камер^ але не шдлягали дi! тютюнового диму.
Через 15, 30 та 45 дiб вщ початку ураження тварин тютюновим димом, !х виводили iз експерименту шляхом евтанази пiд тiопенталовим наркозом. Для дослщження брали сироватку кровi та печiнку уражених тварин. 1муноферментним методом за допомогою тест-систем у сироватщ кровi визначали рiвень прозапальних цитокiнiв (iнтерлейкiну 6 (IL-6) [12, 13]. Кшьюсну оцiнку концентрацi! в сироватщ периферично! кровi зазначеного цитокшу проводили методом твердофазного iмунофeрментного аналiзу на iмуноферментному аналiзаторi RT-2100C. Використовували тест-системи та контрольнi сироватки IL-6 виробництва Росiя, згiдно протоколам до тест-систем. Результати реакцп визначали на спектрофотометрi ULAB-108UA при довжинi хвилi 450 нм. За допомогою калiбрувально! криво! розраховували концентрацiю зазначеного цитокшу в ткограмах на 1 мл (пг/мл). Актившсть NO-синтаз проводили методом iмуноферментного аналiзу, використовуючи набiр реактивiв, адаптований для щурiв. Для визначення активностi iNO-синтази користувались набором «Enzyme-linked Immunosorbent Assay Kit for rat Nitric Oxide Syntase 2, Inducible (NOS2), Uscn, Life Science Inc, E90837Ra. Для визначення активносп еNO-синтази користувались набором «Enzyme-linked Immunosorbent Assay Kit for rat Nitric Oxide Syntase 3, Endothelial (NOS3), Uscn, Life Science Inc, E90868Ra. Актившсть ензимiв виражали в нг/мл у сироватщ кровi та в нг/г у печшщ тварин. Кров забирали з ЕДТА як антикоагулянтом. Вдабраш проби центрифугували 15 хв при 1000 об/хв при 2-8 оС. Вщразу проводили визначення або заморожували взiрцi при t = -20 оС для подальшого дослiдження.
При проведенш дослiджень користувались загальними принципами експерименнв на тваринах, схваленими на Нащональному конгресi з бiоетики (Ки!в, Укра!на, 2001) та узгодженими з положеннями Свропейсько! конвенцi! про захист хребетних тварин, що використовуються для експериментальних та шших наукових щлей (Страсбург, Францiя, 1985) [9]. Статистичну обробку отриманих даних проводили за допомогою програми "STATISTICA 6,0" з використанням параметричного критерiю Стьюдента та непараметричного критерiю Вiлкоксона для зв'язаних вибiрок. Змiни вважали достовiрними при р<0,05 [14].
Результати дослiдження та Тх обговорення. Багато лiтературних даних вказують на те, що тютюновий дим може викликати запальш процеси, зокрема, за допомогою i^^^i! прозапальних цитоюшв [11,17]. Вiдомо, що цитокши втягуються у запальний процес на рiвнi iмунних механiзмiв i ефекторно! ланки, запускаючи послiдовний ланцюг реакцш, що проявляеться у порушеннi мшроциркуляци, виникненнi гiпоксi!, ушкодженнi метаболiчно! функци органiв. Вказанi порушення визначають перебщ тяжкiсть i результат патологiчного процесу [1]. IL-6 продукуеться активованими макрофагами, ендотелiальними клiтинами, активованими Т-кттинами та рядом клiтин, якi не е iмуноцитами. Вiн е багатофункщональним цитокiном та впливае на рiзнi органи i системи: кров, печшку, iмунну систему, мае пiрогенний ефект та ш. Пiдвищення рiвня IL-6 в кровi спостерiгаеться при багатьох патолопчних станах, тяжких запальних процесах [2]. Його використовують в якосн маркера для ранньо! оцiнки тяжкосп багатьох захворювань. Ураження щурiв протягом 45 дшв тютюновим димом призвело до збiльшення у сироватцi кровi вмiсту IL-6 (рис.). Найбiльш чутливими до даного токсиканта виявились статевонезрш щури, у яких вмют IL-6 зростав на 50 %, 164 % та 237 % вщповщно через 15, 30 та 45 дшв тсля ураження порiвняно з штактними тваринами. У статевозрших щурiв до кiнця експерименту даний показник тдвищився на 177 %, у старечих - на 141 %. Таке шдвищення вмiсту IL-6 свщчить про розвиток запальних процесiв уже на раншх стадiях тютюново! штоксикаци, якi поглиблюються з подовженням термiну отруення тварин.
Вiдомо, що прозапальш цитокiни можуть бути активаторами шдуцибельно! NO-синтази в органiзмi за рiзних патологiчних станiв [10]. Окрiм того, сигаретний дим, який мютить у складi газово! фази оксид азоту, може бути блокатором утворення ендогенного NO шляхом зменшення експресi! ендотелiально! NO-синтази [8, 15]. Ураження щурiв тютюновим димом призвело до шдвищення активносп iNO-синтази у сироватцi кровi та печiнцi щурiв протягом усього термшу дослiдження (табл.1).
300
200
100
статевонезрШ „ _ статевозрШ . и iнтакTнi V-15 днш и 30 днiв
«45 днтарещ
Рис. Динамiка вмiсту 1Ь-6 (%) у сироватцi кровi щурiв рiзного вiку, уражених тютюновим димом протягом 45 дшв/ Примiтка: * - вiрогiднi змiни мiж штактними щурами та щурами, ураженими тютюновим димом (р < 0,05).
У сироватщ кров1
статевонезрших щур1в шсля ураження тютюновим димом актившсть ¡N08 зростала найбшьше пор1вняно з1 статевозршими та старечими тваринами. До кшця експерименту (на 45 добу дослщження) вона шдвищилася у 2,75 раза пор1вняно з нормою, у статевозрших - в 1,4 раза, у старечих - у 2,2 раза. Аналопчне шдвищення активносп даного ензиму
спостериалося у печшщ щур1в, токсикованих тютюновим димом.
Таблиця 1
Актившсть iNOS у сироватщ кров1 (нг/мл) та печшщ (нг/г) щур1в р1зних в1кових груп,
Дослщжуваш тканини Термши ураження, доби Вжов1 групи тварин
статевонезрЫ щури статевозрЫ щури стареч1 щури
Сироватка кров1 1нтактш щури 13,16±0,95 18,84±1,93 14,86±1,27
15 днiв ураження 25,90±1,73* 19,68±1,87 17,85±1,62
30 дшв ураження 29,10±2,60* 23,89±1,76 27,37±2,60*
45 див ураження 36,26±2,17* 26,21±2,20 33,86±2,08*
Печшка 1нтактш щури 2,38±0,18 4,02±0,36 2,75±0,24
15 дтв ураження 4,24±0,35* 4,46±0,39 5,33±0,48*
30 днiв ураження 5,57±0,44* 5,19±0,27 5,20±0,39*
45 д^в ураження 6,23±0,36* 5,58±0,42* 6,09±0,40*
А
Я
0
Примгтка: *- вiрогiднi змши мiж iнтактними та ураженими тютюновим димом тваринами (р <0,05).
У статевозрших щурiв вiрогiдне (р<0,05) шдвищення спостериалось тiльки у кiнцi експерименту, коли актившсть ензиму ув 1,4 раза перевищила рiвень iнтактних тварин. У статевонезрших щурiв активнiсть iNOS зростала поступово i вiрогiдне шдвищення И вiдмiчалося у всi термши дослiдження. Максимуму цей показник досяг на 45 добу ураження димом -шдвищився у 2,6 раза. У цей же перюд у печшщ старечих щурiв активнiсть ензиму шдвищилася у 2,2 раза. Отже, нами вiдмiчено, що органiзм статевонезрших щурiв найбiльш швидко i найбшьш виражено реагуе на тютюновий дим. Актившсть ензиму, яка залежить вщ наявностi токсиканта, i активуеться за розвитку патолопчного стану в оргашзм^ найбiльших значень досягла як у сироватщ кров^ так i в печшщ статевонезрших тварин. Доцшьним за даних умов виявилось дослiдження активносп еNO-синтази, яка за фiзiологiчних умов активно каталiзуе утворення ендогенного оксиду азоту [12]. В умовах пасивного тютюнопалшня блокуеться утворення ендогенного N0, так як газова фаза тютюнового диму мютить оксиди азоту та iншi азотвмiснi сполуки, що ддать за принципом зворотнього зв'язку. Пюля ураження щурiв тютюновим димом у наших експериментах вiдмiчалось зниження активносп еNO-синтази у всiх вiкових групах щурiв (табл.2).
Таблиця 2
Актившсть еNOS у сироватщ кров1 (нг/мл) та печшщ (нг/г) щур1в р1зних в1кових груп,
уражених тютюновим димом (М±т; п=108)
Дослщжуват тканини Термши ураження, доби В1ков1 групи тварин
статевонезрЫ щури статевозрЫ щури стареч1 щури
Сироватка кров1 1нтактт щури 2,23±0,18 2,89±0,22 2,36±0,16
15 дтв ураження 1,61±0,12* 2,54±0,22 1,89±0,14
30 дтв ураження 1,24±0,11* 2,17±0,19 1,49±0,11*
45 дтв ураження 1,10±0,08* 2,01±0,18* 1,29±0,11*
Печшка 1нтактт щури 3,26±0,26 4,11±0,19 3,42±0,23
15 дтв ураження 1,73±0,15* 2,77±0,23* 2,02±0,14*
30 дтв ураження 1,16±0,10* 1,75±0,14* 1,31±0,10*
45 дтв ураження 1,09±0,09* 1,62±0,10* 1,25±0,09*
Примiтка: *- вiрогiднi змiни мiж iнтактними та ураженими тютюновим димом тваринами (р <0,05).
Ураження статевонезрших щурiв тютюновим димом призвело до зниження активносп еNOS у сироватщ кровi в 1,4 раза, 1,8 та 2 рази через 15, 30 та 45 дшв вщповщно порiвняно з нормою. У вс
термши дослщження зниження активносп ензиму було Bipor^^M (р<0,05). У статевозрiлих тварин BÎpor^He зниження даного показника вiдмiчалoсь тшьки в кiнцi експерименту (в 1,4 раза). У старечих щуpiв на 30 день дослщження активнiсть ензиму знизилась у 1,6 раза, на 45 день - в 1,8 раза щодо piвня iнтактних тварин. У печшщ щ^в усiх вшових груп протягом експерименту вipoгiднo знижувалась активнiсть еNOS i найменшого значення досягла в oстаннiй теpмiн дослщження (45 день ураження тютюновим димом). У цей перюд у печшщ статевонезрших щуpiв даний показник знизився у 3 рази, статевозрших у 2,5 раза та старечих у 2,7 раза, що може свщчити про втягнення в патолопчний процес печiнки (порушення ïï бiлoксинтезувальнoï функцл). Таким чином, у щуpiв уах вiкoвих груп спoстеpiгалoсь зниження активносп еNOS, що зумовлюе пpигнiчення синтезу ендогенного оксиду азоту i зменшення його при видиху, що в кшцевому pезультатi призводить до iнгiбування процесу вiднoвлення дихальних шлях1в.
1. Ураження щуpiв тютюновим димом призводить до розвитку запальних процеав в opганiзмi, зокрема у дихальних шляхах, що пщтверджуеться збiльшенням у сироватщ кpoвi щуpiв усiх вшових груп вмiсту прозапального цитоюну IL-6. Найбшьше його значення вiдмiченo у статевонезрших тварин, що вказуе на бшьш виражену чутливiсть до токсиканта саме uieï групи щуpiв.
2. У сироватщ кpoвi та печшщ щуpiв piзних вiкoвих груп тсля ураження тютюновим димом вipoгiднo зростае актившсть iндуцибельнoï NO-синтази, яка е iндикатopoм розвитку патoлoгiчнoгo процесу в оргашзму Найбiльшoгo значення сягае даний показник у сироватщ кpoвi та печшщ статевонезрших щуpiв.
3. На rai тдвищення активносп iNO-синтази в opганiзмi тварин piзнoгo вiку знижуеться активнiсть ендoтелiальнoï iзoфopми даного ензиму. Вiдмiченo зниження активнoстi еNO-синтази у сироватщ кpoвi та печiнцi токсикованих димом щуpiв, яке найбiльш виражене у статевoнезpiлих тварин.
1. Aleksandrova Yu. N. O sisteme tsitokinov / Yu. N. Aleksandrova // Pediatriya. - 2007. - No. 3 (86). - S. 124-28.
2. Berezhnaya N. M. Tsitokinovaya regulyatsiya pri patologii: stremitelnoye razvitiye i neizbezhnyye voprosy / N. M. Berezhnaya // Tsitokiny i vospaleniye. - 2007. - No. 2 (6). - S. 26-34.
3. Mykhaylenko V.M. Markery nitrozatyvnoho stresu pry inhalyatsiyniy diyi oksydiv azotu v normi ta pry pukhlynnomu rosti / V. M. Mykhaylenko, P. M. Mykhaylenko, I. S. Holovina // Suchasni problemy toksykolohiyi. - 2011. - No.4. - S. 28-35.
4. Pikas O.B. Pro stan kurinnya tsyharok u suchasnykh umovakh, yoho vplyv na vynyknennya zakhvoryuvan v orhanizmi lyudyny / O. B. Pikas // Bukovynskyy medychnyy visnyk. - 2015. - No. 4 (76). - S. 227-30.
5. Yachnyk A. I. Fiziolohichni aspekty oksydu azotu pry porushennyakh lehenevoho krovoobihu ta rol' L-arhininu v korektsiyi yoho syntezu / A. I. Yachnyk, M. I. Humenyuk, A. D. Chopchyk // Ukrayinskyy pulmonolohichnyy zhurnal. - 2008. - No. 1. - S.40-44.
6. Argacha J. Acute effect of sidestream cigarette smoke extract on vascular endothelial function / J. Argacha, D. Fontaine, D. Adamopoulos, A. Ajose, P. Van de Borne [et.al.] // J. Cardiovasc. Pharmacol. - 2008. - Vol. 52(3). - Р. 262-27.
7. Birben E. Oxidative Stress and Antioxidant Defense / E.Birben, U. Sahiner, C. Sackesen, S. Erzurum, O. Kalayci // World Allergy Organ. J. - 2012. - Vol. 5(1). - Р. 9-19.
8. Csiszar A. Oxidative stress and accelerated vascular aging: implications for cigarette smoking / A. Csiszar, A. Podlutsky, M. Wolin, G. Losonczy, P. Pacher [et.al.] // Front Biosci (Landmark Ed). - 2009. - Vol. 14(1). - Р. 3128-44.
9. Gross D. Ethics in Animal-Based Research / D. Gross, R. Tolba // Eur. Surg. Res. - 2015. - Vol. 55(1-2). - Р. 43 - 57.
10. Lee J. Cigarette smoking and inflammation: cellular and molecular mechanisms / J. Lee, V. Taneja, R. Vassallo // J. Dent. Res. - 2012. - Vol. 91(2). - Р. 142-49.
11. Luckett-Chastain L. Interleukin (IL)-6 modulates transforming growth factor-beta expression in skin and dermal fibroblasts from IL-6- deficient mice / L. Luckett-Chastain, R. Gallucci // Br. J. Dermatol. - 2009. - Vol. 161(2). - Р. 237-48.
12. Nam J. Interleukin-13/-4-induced oxidative stress contributes to death of hippocampal neurons in api-42-treated hippocampus in vivo / J. Nam, K. Park, E. Park, Y. Lee, H. Lee [et.al.] //Antioxid. Redox. Signal. - 2012. - Vol. 16(12). - Р. 1369-83.
13. Nolan Y. Role of interleukin-4 in regulation of age-related inflammatory changes in the hippocampus / Y. Nolan, F. Maher, D. Martin, R. Clarke, M. Brady [et.al.] // J. Biol. Chem. - 2005. - Vol. 280(10). - Р. 9354-62.
14. Okeh U. Statistical problems in medical research / U. Okeh // East. Afr. J. Public. Health. - 2009. - Vol. 6(1). - Р. 1 - 7.
15. Rahman M. Structural and functional alteration of blood vessels caused by cigarette smoking: an overview of molecular mechanisms / M. Rahman, I. Laher // Curr. Vasc. Pharmacol. - 2007. - Vol. 5(4). - Р. 276-92.
16. Wirth N. Respiratory diseases related to passive smoking / N. Wirth, A. Bohadana, A. Spinosa, Y. Martinet // Rev. Mal. Respir. - 2009. - Vol. 26(6). - P. 667-78.
17. Zhou H. Changes in serum contents of interleukin-6 and interleukin-10 and their relation with occurrence of sepsis and prognosis of severely burned patients / J. Zhou, J. Tu, Y. Huangetal. // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. - 2012. - Vol. 28(2). - P. 111-15.
РАЗВИТИЕ НИТРООКСИДАТИВНОГО СТРЕССА И DEVELOPMENT OF NITROOXIDATIVE STRESS AN ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ У КРЫС РАЗНОГО INFLAMMATORY PROCESSES IN RATS OF
ВОЗРАСТА, ПОРАЖЕННЫХ ТАБАЧНЫМ ДЫМОМ DIFFERENT AGE, AFFECTED BY TOBACCO SMOK Лихацкий П.Г., Фира Л.С. Lykhatskyi P.H., Fira L.S.
Целью данной работы было исследовать активность NO- The aim of this work was to investigate the activity of
синтазнои системы и развитие воспалительных процессов у крыс разного возраста в динамике отравления табачным дымом. Исследования проведены на белых беспородных крысах-самцах разного возраста, которые ежедневно в течение 45 дней подвергались воздействию табачного дыма в герметичной камере (время экспозиции 6 мин). Через 15, 30 и 45 суток от начала поражения животных табачным дымом, их выводили из эксперимента путем эвтаназии под тиопенталовым наркозом с соблюдением всех правил по работе с позвоночными животными. Установлено, что поражение крыс в течение 45 дней табачным дымом привело к увеличению в сыворотке крови содержания провоспалительного цитокина IL-6. Наиболее чувствительными к данному токсиканту оказались неполовозрелые крысы, в которых содержание IL-6 увеличилось на 50%, 164% и 237% соответственно через 15, 30 и 45 дней после поражения. Отравление крыс табачным дымом привело к повышению активности индуцибельной NO-синтазы в сыворотке крови и печени в течение всего срока исследования. Отмечено, что организм неполовозрелых крыс наиболее быстро и наиболее выражено реагирует на табачный дым. Активность iNO-синтазы наибольших значений достигла как в сыворотке крови, так и в печени неполовозрелых животных. После поражения крыс табачным дымом в наших экспериментах отмечалось снижение активности эндотелиальной NO-синтазы во всех возрастных группах крыс. У неполовозрелых крыс активность еNOS в сыворотке крови снизилась в 1,4 раза, 1,8 и 2 раза через 15, 30 и 45 дней соответственно по сравнению с нормой. В печени крыс всех возрастных групп в течение эксперимента наблюдалось аналогичное снижение активности еNOS и наименьшего значения она достигла в последний срок исследования (45 день поражения табачным дымом).
Ключевые слова: табачный дым, белые крысы, нитроокидативний стресс, NO-синтаза, интерлейкины.
Стаття надшшла 14.10.2017 р.
the NO-synthase system and the development of inflammatory processes in rats of different ages in the dynamics of tobacco smoke poisoning. Studies were carried out on white, non-native male rats of different ages, which were exposed to tobacco smoke daily for 45 days in a sealed chamber (exposure time 6 min). After 15, 30 and 45 days from the onset of the animals' defeat with tobacco smoke, they were taken out of the experiment by euthanizing them under thiopental anesthesia, observing all the rules for working with vertebrates. It was found that the damage to the rats for 45 days with tobacco smoke led to an increase in the serum content of the proinflammatory cytokine IL-6. The most sensitive to this toxicant were immature rats, in which the content of IL-6 increased by 50%, 164% and 237%, respectively, 15, 30 and 45 days after injury. Poisoning of rats with tobacco smoke led to an increase in the activity of inducible NO-synthase in serum and liver throughout the study period. It is noted that the body of immature rats reacts most quickly and most strongly to tobacco smoke. The activity of iNO synthase reached the highest values both in the blood serum and in the liver of immature animals. After the defeat of rats with tobacco smoke, in our experiments a decrease in the activity of endothelial NO synthase in all age groups of rats was noted. In immature rats, the activity of eNOS in serum decreased 1.4 times, 1.8 and 2 times in 15, 30 and 45 days, respectively, compared with the norm. In the liver of rats of all age groups, during the experiment, a similar decrease in eNOS activity was observed and the lowest value was reached at the last term of the study (day 45 of the exposure to tobacco smoke).
Key words: tobacco smoke, white rats, nitrooxidative stress, NO synthase, interleukins.
Pe^roeHT KocTeHKO B.O.
DOI 10.26724 / 2079-8334-2017-4-62-149-152 UDC 611. 26.34 - 12.01
N.V. Malko1 , P.A. Hasiuk2, V.V. Ivanchyshyn1, N.V. Hasiuk2
'Danvlo Halvtskv Lviv National Medical I Jniversitv, Lviv, 2SHEI "I. Horbachevskv Ternopil State Medical IniuTsitv",
CHANGES IN BIOCHEMICAL PARAMETERS OF BLOOD SERUM AND GINGIVAL HOMOGENATES WITH EXPERIMENTAL GINGIVITIS
e-mail: gasiukpa@tdmu.edu.ua
Inflammatory periodontal diseases is an urgent problem not only in dentistry, but also in general medicine, due to their high prevalence and negative effects on a human body causing significant economic consequences. As a result, the bioregulation of biochemical processes is often damaged, due to it, at a certain level of damage, different diseases, including dental ones, occur and develop. Moreover, the study of the impact of the combined action of xenobiotics on biochemical tissue indicators of a growing up human body, the development of new means of correction, which are based on inhibition of proteases, hydrolases, kinin system, normalization of tissue penetration, enhancing the action of protective factors of a human body, ensuring the sustainability of periodontal tissues to the negative influence of environmental agents, are important and poorly understood issues. Research purpose - to study the biochemical parameters of blood serum and homogenates of the gums in experimental animals with gingivitis caused by the combined action of heavy metals and deficiency of fluorine and iodine. Consequently, experimental studies have convincingly demonstrated that in experimental gingivitis under the influence of the adverse environmental factors the levels of inflammatory markers - elastase and urease, as well as the indices of the protease-inhibitory system increased.
Key words: Inflammatory periodontal diseases, xenobiotics, experimental animals, protease-inhibitory system.
Inflammatory periodontal diseases is an urgent problem not only in dentistry, but also in general medicine, due to their high prevalence and negative impact on a human body causing considerable economic consequences [1]. For the last ten years state expenses for providing dental care to children of Ukraine have increased more than 2.5 times, indicating the lack of effectiveness of the prevention of major dental diseases in children [2, 3]. The scientific literature extensively discusses the influence of ecological factors of the environment on the children's morbidity, including a dental one [4, 5]. It is
