Роль полиморфного варианта rs7216389 гена гасдермина в в нарушении регуляции эпидермального барьера у детей с аллергическими заболеваниями

Левашева С.В.; Эткина Э.И.; Карунас А.С.; Гималова Г.Ф.; Гаврилова Л.А.; Хуснутдинова Э.К.

группе на 38,1% и во II Б подгруппе на 44,5%. пациентов вследствие повышения физической Таким образом, физическая реабилитация паци- активности и улучшения психологического ентов с АГ значимо повышает уровень само- статуса по сравнению с лицами, получавшими уважения и комплаентности к лечению у тех, изолированную антигипертензивную тера-кто занимается физическими упражнениями. пию. Позитивное влияние физических нагру-Заключение зок по уменьшению риска развития сердечно-Применение физической реабилитации сосудистых осложнений у больных АГ обув амбулаторных условиях у больных АГ поз- словлено снижением массы тела, улучшением воляет с большей эффективностью достигать показателей липидного обмена, а также поло-целевого уровня АД, снижения уровня липи- жительным влиянием на уровень самоуваже-дов крови, а также улучшения качества жизни ния и приверженности к лечению.

Сведения об авторах статьи: Кильдебекова Раушания Насгутдиновна - д.м.н., профессор кафедры мобилизационной подготовки здравоохранения и медицины катастроф ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3. E-mail: kildebekova49@mail.ru.

Дмитриев Алексей Валерьевич - аспирант кафедры мобилизационной подготовки здравоохранения и медицины катастроф ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3. E-mail: ufus@bk.ru. Федотов Алексей Леонидович - к.м.н., доцент кафедры мобилизационной подготовки здравоохранения и медицины катастроф ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3.

Низамов Айрат Камилевич - ассистент кафедры мобилизационной подготовки здравоохранения и медицины катастроф ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3.

ЛИТЕРАТУРА

1. Кобалава, Ж.Д. Современные методы регистрации артериального давления в стратификации больных артериальной гипертонией по риску развития сердечно-сосудистых осложнений // Материалы Всероссийской научно-практической конференции «Современные проблемы артериальной гипертонии». - М., 2003.- С.81-83.

2. Диагностика и лечение артериальной гипертензии: рекомендации Российского медицинского общества по артериальной гипертонии и Всероссийского научного общества кардиологов (4-й пересмотр) // Системные гипертензии. - 2010. -№ 3. - С. 5-26.

3. Чазова, И.Е. Метаболический синдром / И.Е. Чазова, В.Б. Мычка. - М.: Медиа Медика, 2008. - 76 с.

4. Остроумова О.Д. Лечение артериальной гипертонии в условиях поликлиники: клиническая и экономическая эффективность / О. Д. Остроумова, К. А. Ищенко // Consilium medicum . - 2007. - Т. 9, N° 5. - С. 19-24.

5. 24-часовое мониторирование АД, дозированная изометрическая и динамическая физические нагрузки, внутрисердечная гемодинамика и ремоделирование сердца у больных эссенциальной АГ / А.В. Грачев [и др.] // Вестник аритмологии. -2000. - Т.19. - С.6-17.

6. Клочков, В.А. Динамика среднего АД при проведении ВЭМ у больных артериальной гипертензией // Российский кардиологический журнал. - № 3. - 2000. - C.18-20.

7. Аронов, Д.М. Кардиологическая реабилитация на рубеже веков // Сердце. - 2002. - № 3. - С. 123-125.

8. Roy Brad A. Exercise and Hypertension // American Council on Exercise. Fitnesssymposium. - 2011.

9. Кильдебекова Р.Н., Дмитриев А.В., Федотов А.Л., Саяхов Р.Ф. Влияние физических тренировок на психологическое здоровье больных артериальной гипертензией [Электронный ресурс] // Медицина. Сетевое издание. - 2014. - №1. - С.15-19.- Режим доступа: http://www.fsmj.ru/

УДК 575.22:616.5-002-056.43-053.2-097

С.В. Левашева1, Э.И.Эткина1, А.С. Карунас2, Г.Ф. Гималова2, Л.А. Гаврилова3, Э.К. Хуснутдинова2 РОЛЬ ПОЛИМОРФНОГО ВАРИАНТА RS7216389 ГЕНА ГАСДЕРМИНА В В НАРУШЕНИИ РЕГУЛЯЦИИ ЭПИДЕРМАЛЬНОГО БАРЬЕРА У ДЕТЕЙ С АЛЛЕРГИЧЕСКИМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ 'ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Уфа 2ФГБУН «Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН», г. Уфа 3МБУЗ «Детская поликлиника №8» городского округа г. Уфа

Для изучения факторов, предрасполагающих к развитию бронхиальной астмы, аллергического ринита и/или аллергического конъюнктивита у детей с атопическим дерматитом, проведен генетический анализ полиморфного маркера ге7216389 гена гасдермина В (С8ЭМВ) у 198 детей с атопическим дерматитом и 63 практически здоровых индивидов. В исследуемой нами выборке носители аллеля ге7216389*Т (х2=5,13, р=0,0235, й£=1, V=0,1) и генотипа ге7216389*С/Т (х2=11,81, р=0,0027, df=2, V=0,21) гена GSDMB имеют повышенный риск развития атопического дерматитом. Сочетанные аллергические проявления чаще наблюдались у детей с атомическим дерматитом и генотипом ге7216389*С/Т гена GSDMB, однако данные показатели не достигли уровня статистической значимости (р>0,05).

Ключевые слова: атопический дерматит, бронхиальная астма, аллергический ринит, гасдермин В, дети.

S.V. Levashеva, E.I. Etkina, A.S. Karunas, G.F. Gimalova, L.A. Gavrilova, E.K. Khusnutdinova THE ROLE OF POLYMORPHIC VARIANTS OF RS7216389 GENE GATTERMAN B IN THE DYSREGULATION OF THE EPIDERMAL BARRIER IN CHILDREN

WITH ALLERGIC DISEASES

To study the factors predisposing to the development of asthma, allergic rhinitis and/or allergic conjunctivitis in children with atopic dermatitis, genetic analysis of polymorphic marker rs7216389 gene gatterman B (GSDMB) was conducted in 198 children with atopic dermatitis and 63 healthy individuals. In the studied sample carriers of the allele rs7216389*T (x2=5,13, p=0,0235, df=1, V=0,1) and genotype rs7216389*C/T (x2=11,81, p=0,0027, df=2, V=0,21) GSDMB gene have an increased risk of developing atopic dermatitis. Concomitant allergic symptoms were more frequently observed in children with atomic dermatitis and genotype rs7216389*C/T GSDMB gene, however, these indicators have not reached the level of statistical significance (p>0.05).

Key words: atopic dermatitis, bronchial asthma, allergic rhinitis, gatterman B, children.

В настоящее время аллергическими заболеваниями страдает примерно 20% населения развитых стран [21], что приводит к ухудшению производительности труда у взрослых и успеваемости детей в школе, снижению качества жизни, существенным медицинским и немедицинским расходам [13]. В развитых странах каждый третий ребенок страдает атопическим дерматитом (АД), аллергическим ринитом (АР) и/или БА [12]. Первым проявлением атопии, как правило, является АД, поражающий около 20% детей и почти 3% взрослого населения планеты [14]. Он является одним из факторов высокого риска развития БА у детей, а также первой клинической манифестацией «атопического марша» [2].

На сегодняшний день основополагающим моментом в развитии АД является нарушение барьерной функции эпидермиса, в связи с этим гены, регулирующие функции эпи-дермального барьера, должны стать предметом самого детального изучения для поиска причин, предрасполагающих к заболеванию [18].

В последние годы определен ряд генетических мутаций, приводящих к изменениям в роговом слое эпидермиса. В роли фактора риска развития АД и сопутствующих ему БА, АР и/или АК наименее изучен ген гасдермин В (ОБВМВ). Его однонуклеотидный полиморфизм (ОНП) га7216389 (3621С>Т) расположен в интроне 1 гена гасдермина В (ОБВМВ) [3], локализованного на длинном плече хромосомы 17 в области 17q12-q21. Данное семейство состоит из четырех белков со своими структурными и функциональными особенностями. Впервые эти белки были обнаружены в верхних отделах ЖКТ и эпидермисе [17]. Позднее установлена их экспрессия в лимфоцитах, кишечнике, печени, легких, мышцах, мозге, матке и других органах [3]. Кроме того, О8БМБ может быть вовлечен в развитие и/или прогрессирование рака [10], а также ассоциирован с патологической воспалительной реакцией [9].

Функция белка 08БМБ до конца не выяснена, но предполагается, что он играет роль метаболита секреторного пути, может участвовать в терминальной дифференцировке эпителиальных клеток, в поддержании барьерной функции кожи [7]. Соок^оп и соавт. [15], а позже МЕ Мойай и соавт. [6] доказали важную роль ОНП гена ОБВМВ как нового гена-кандидата детской астмы. В дальнейшем ученые разных стран выявили ассоциацию между полиморфизмом rs7216389 гена ОБВМВ и восприимчивостью к БА в детском возрасте [8, 19, 20]. В то же время китайские ученые [11], изучив 315 пациентов с БА и 192 индивидуума группы контроля, не выявили ассоциации ОНП rs7216389 с астмой (р>0,05).

Учитывая неоднозначные результаты исследований в различных популяциях ОНП гена ОБВМВ, представляет интерес анализ полиморфного локуса ^7216389 в когорте больных АД, проживающих в Республике Башкортостан, и возможной ассоциации данного полиморфного маркера гена ОБВМВ с другими аллергическими заболеваниями.

Материал и методы

Исследование проводилось на базе Клиники БГМУ и ФГНУ «Институт биохимии и генетики» Уфимского научного центра РАН (директор - академик АН РБ д.б.н., профессор Вахитов В.А.) в лаборатории молекулярной генетики человека (зав. лабораторией - академик АН РБ, д.б.н., профессор Хуснутдинова Э.К.) в 2009 - 2013 гг. Обследован 261 ребенок в возрасте от 0 до 18 лет. Основную группу составили 198 пациентов с диагнозом ато-пический дерматит (средний возраст детей 9,18±0,36 года). Критериями включения детей в данную группу наблюдения являлись уточненный диагноз на основании анамнеза и клинической картины заболевания, информированное согласие родителей или опекунов детей. Диагноз АД устанавливался на основании диагностических критериев, предложенных I. НапШп и О. Я^ка (1980), а также современной классификации болезней согласно документу «Современная стратегия терапии

атопического дерматита: Программа действия педиатра» [5]. Диагноз бронхиальная астма устанавливался на основании критериев GINA (2008, 2012) и отечественных программных документов по диагностике, лечению и профилактике БА [1].

Группа контроля представлена 63 детьми (средний возраст 13,79±0,52 года), не имеющими проявлений аллергических заболеваний и отягощенной наследственности по атопии.

Всем детям проводилось общеклиническое (установление жалоб, сбор анамнеза жизни и заболевания ребенка) и объективное обследование. Для определения роли нарушений эпидермального барьера в развитии БА, АР и/или АК у детей с АД в Республике Башкортостан изучен полиморфный вариант rs7216389 гена гасдермина B (GSDMB). Для исследования полиморфного варианта rs7216389 данного гена венозную кровь в объеме 5-8 мл забирали в пробирки Вакутей-нера, содержащие калиевую соль этилендиа-минтетрауксусной кислоты. Выделение геномной ДНК проводили методом фенольно-хлороформной экстракции [16]. Генотипиро-вание полиморфного варианта rs7216389 гена GSDMB осуществляли методом полимеразной цепной реакции в реальном времени с использованием TaqMan® SNP Genotyping Assays

C_29062108_10 и TaqMan® Genotyping

Master Mix (Applied Biosystems) согласно протоколу фирмы-производителя на амплифика-торе с детекцией в реальном времени CFX96™ (BioRad).

Процедуры статистического анализа выполнялись с применением статистического пакета STATISTICA 10. При проверке нулевых гипотез критическое значение уровня статистической значимости принималось равным 0,05. В случае превышения достигнутого уровня значимости статистического критерия этой величины принималась нулевая гипотеза. Проверка нормальности распределения количественных данных в группах сравнения проводилась с использованием критериев Колмогорова-Смирнова и Шапиро-Уилка. Количественные данные представлены в виде M±m, где М - среднее, m - ошибка среднего. Исследование взаимосвязи межу качественными признаками проводилось с использованием анализа парных таблиц сопряжённости с поправкой Иэйтса на непрерывность. Помимо оценок критерия Пирсона и достигнутого уровня статистической значимости этого кри-

терия (р) вычислялись оценка интенсивности связи анализируемых признаков с помощью коэффициента Крамера (V), который изменялся от нуля (нет связи) до единицы (функциональная связь есть) [4].

Результаты и обсуждение

При изучении распределения частот аллелей и генотипов полиморфного маркера ю7216389 гена ОБОМБ у детей с АД и в контроле установлено, что в группе больных статистически значимо чаще определялись аллель г$7216389*Т (58,33%; х2=5,13, р=0,0235, ^1, V=0,1) и генотип ™7216389*С/Т (50%; х2=11,81, р=0,0027, ё£=2, V=0,21). Таким образом, в данной выборке носители аллеля ги7216389*Т и генотипа ги7216389*С/Т гена ОБОМБ имели повышенный риск развития АД.

Результаты анализа сопутствующий ал-лергопатологии у больных с АД и различными генотипами rs7216389 гена ОБОМБ показали, что более чем в 60% случаев у обследованных детей встречался АР (%2=0,11, р=0,95). Кроме того, у каждого второго - третьего ребенка с АД выявлен АК (%2=0,21, р=0,9). Что касается БА, то она наиболее чаще встречалась у больных с АД, имеющих генотип ™7216389*С/Т гена ОБОМБ (47,47%), однако статистически значимого уровня данные показатели не достигли (%2=5,50, р=0,06).

Статистически значимых уровней не достигли также и такие изучаемые факторы, как возраст дебюта АР (%2=4,88, р=0,56) и АК (х2=2,89, р=0,82) и возраст постановки диагноза БА (х2=8,85, р=0,18).

При оценке степени тяжести БА у больных с АД выявлено, что у детей с генотипами гэ7216389*Т/Т и ™7216389*С/Т преобладало легкое течение заболевания (75,86% и 57,45% соответственно), и редко встречалось тяжелое течение (™7216389*Т/Т - 3,45%, ^7216389*С/Т - 2,13%) заболевания. Что касается генотипа rs7216389*С/С, то тяжелые случаи БА у больных с данным генотипом гена ОБОМБ не встречались, а легкое и сред-нетяжелое заболевания наблюдались в половине случаев каждое (50%; %2=4,18, р=0,38).

Таким образом, в исследуемой нами выборке носители аллеля ги7216389*Т и генотипа ги7216389*С/Т гена ОБОМБ имеют повышенный риск развития АД. Сочетанные аллергические проявления чаще наблюдались у детей с АД и генотипом ^7216389*С/Т гена ОБОМБ, однако данные показатели не достигли уровня статистической значимости.

Сведения об авторах статьи: Левашева Светлана Владимировна - ассистент кафедры детских болезней ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3. E-mail: levashova79@mail.ru.

Эткина Эсфирь Исааковна - д.м.н., профессор, зав. кафедрой детских болезней ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3.

Карунас Александра Станиславовна - д.б.н., старший научный сотрудник ФГБУН «Институт биохимии и генетики УНЦ РАН». Адрес: 450054, г. Уфа, Пр. Октября, 71, Тел./факс: (347)235-60-88. E-mail: carunas@list.ru.

Гималова Галия Фуатовна - научный сотрудник ФГБУН «Институт биохимии и генетики УНЦ РАН». Адрес: 450054, г. Уфа, Пр. Октября, 71. Тел./факс: (347)235-60-88. E-mail: galiyagimalova@gmail.com.

Гаврилова Лариса Анатольевна - врач-педиатр МБУЗ «Детская поликлиника № 8». Адрес: 450105 г. Уфа, ул. Мира, 4. Хуснутдинова Эльза Камилевна - д.б.н., профессор, академик АН РБ, зав. лабораторией молекулярной генетики человека ФГБУН «Институт биохимии и генетики УНЦ РАН». Адрес: 450054, г. Уфа, Пр. Октября, 71.

ЛИТЕРАТУРА

1. Глобальная стратегия лечения и профилактики бронхиальной астмы (пересмотр 2011 г.) / под ред. А.С. Белевского. - М.: Российское респираторное общество, 2012. - 108 с.

2. Мачарадзе, Д.Ш. Атопический дерматит у детей / Д.Ш. Мачарадзе. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. - 384 с.

3. Полногеномный анализ ассоциаций бронхиальной астмы в Волго-Уральском регионе России / А.С. Карунас [и др.] // Молекулярная биология. - 2011. - Т. 45, № 6. - С. 911-920.

4. Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA / О.Ю. Реброва. - М.: Медиа Сфера, 2002. - 312 с.

5. Современная стратегия терапии атопического дерматита: программа действия педиатра: согласительный документ Ассоциации детских аллергологов и иммунологов России. - М., 2004. - 96 с.

6. A large-scale, consortium-based genomewide association study of asthma / M.F. Moffatt [et al.] // N. Engl. J. Med. - 2010. - Vol. 363, № 13.- Р. 1211-21.

7. A polymorphism controlling ORMDL3 expression is associated with asthma that is poorly controlled by current medications / R. Taven-dale [et al.] // J. Allerg. Clin. Immunol. - 2008. - Vol. 121, № 4. - Р. 860-63.

8. A sequence variant on 17q21 is associated with age at onset and severity of asthma / E. Halapi [et al.] // Eur. J. Hum. Genet. - 2010. -Vol. 18, № 8. - Р. 902-8.

9. Allele-specific chromatin remodeling in the ZPBP2/GSDMB/ORMDL3 locus associated with the risk of asthma and autoimmune disease / D.J. Verlaan [et al.] // Am. J. Hum. Genet. - 2009. - Vol. 85, № 3. - Р. 377-93.

10. Alu-derived cis-element regulates tumorigenesis-dependent gastric expression of GASDERMIN B (GSDMB) / H. Komiyama [et al.] // Gen. Genet. Syst. - 2010. - Vol. 85, № 1. - Р.75-83.

11. Asthma and atopy are associated with chromosome 17q21 markers in Chinese children / T.F. Leung [et al.] // Allergy. - 2009. - Vol. 64, № 4. - Р. 621-28.

12. Clinical manifestations of atopy in children up to two years of age / N. Ilic [et al.] // Vojnosanit Pregl. - 2011. - Vol. 68, № 8. - Р. 690-95.

13. Diagnostics and treatment of atopic dermatitis in children and adults: Consensus EAACI/AAAAI/PRACTALL / C.A. Akdis [et al.] // J. Allergy Clin. Immunol. - 2006. - Vol. 118. - Р. 152-69.

14. Garnacho-Saucedo, G. Atopic dermatitis: update and proposed management algorithm / G. Garnacho-Saucedo, R. Salido-Vallejo, J.C. Moreno-Giménez // Actas Dermosifiliogr. - 2013. - Vol. 104. - Р. 4-16.

15. Genetic variants regulating ORMDL3 expression contribute to the risk of childhood asthma / M.F. Moffatt [et al.] // Nature. - 2007. -Vol. 448. - Р. 470-73.

16. Mathew, C.G. The isolation of high molecular weight eucariotic DNA / C.G. Mathew // Method. Mol. Biol. - 1985. - № 2. - P. 31-34.

17. Members of a novel gene family, Gsdm, are expressed exclusively in the epithelium of the skin and gastrointestinal tract in a highly tissue-specific manner / M. Tamura [et al.] // Genomics. - 2007. - Vol. 89, № 5. - P. 618-29.

18. New perspectives on epidermal barrier dysfunction in atopic dermatitis: gene-environment interactions / M.J. Cork [et al.] // J. Allergy Clin. Immunol. - 2006. - Vol. 118. - Р. 3-21.

19. ORMDL3 variants associated with asthma susceptibility in North Americans of European ancestry / M.A. Sleiman [et al.] // J. Allergy Clin. Immunol. - 2008. - Vol. 122, № 6. - P. 1225-27.

20. Replication of an association between 17q21 SNPs and asthma in a French-Canadian familial collection / А. Madore, K. Tremblay, T.J. Hudson, C. Laprise // Hum. Genet. - 2008. - Vol. 123, № 1. - Р. 93-95.

21. Spergel, J.M. Atopic dermatitis and the atopic march / J.M. Spergel, A.S. Paller // J. Allergy Clin. Immunol. - 2003. - Vol. 112, № 6. -Р. 118-27.

Р.М. Файзуллина1, Н.В. Самигуллина1'2 ОСОБЕННОСТИ ИММУНОЛОГИЧЕСКОГО СТАТУСА У ДЕТЕЙ, БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ

1ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Уфа 2ГБУЗ РБ «Больница скорой медицинской помощи», г. Уфа

Авторами проведено иммунологическое обследование 38 детей, больных бронхиальной астмой, и 22 клинически здоровых ребенка, перенесших в раннем возрасте эпизоды бронхиальной обструкции. В 71 % случаев была выявлена поздняя диагностика бронхиальной астмы. Анализ полученных результатов показал, что в случае поздней диагностики астмы у детей были установлены морфологические и функциональные нарушения иммунологической реактивности: снижение функциональной активности Т-лимфоцитов, повышение функциональной активности В-лимфоцитов, снижение уровня иммуноглобулина А, повышение уровня иммуноглобулина G, циркулирующих иммунных комплексов, резкое повышение иммуноглобулина Е, снижение фагоцитарной активности и переваривающей способности нейтрофилов.

Ключевые слова: бронхиальная астма, дети, иммунитет, поздняя диагностика.

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Левашева С. В., Эткина Э. И., Карунас А. С., Гималова Г. Ф., Гаврилова Л. А.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Левашева С. В., Эткина Э. И., Карунас А. С., Гималова Г. Ф., Гаврилова Л. А.

THE ROLE OF POLYMORPHIC VARIANTS OF RS7216389 GENE GATTERMAN B IN THE DYSREGULATION OF THE EPIDERMAL BARRIER IN CHILDREN WITH ALLERGIC DISEASES