Научная статья на тему 'Роль дрожжевых грибов рода Candida в патологии желудочно-кишечного тракта'

Роль дрожжевых грибов рода Candida в патологии желудочно-кишечного тракта Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

CC BY
730
192
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ДРОЖЖЕВЫЕ ГРИБЫ / ХРОНИЧЕСКИЙ ГАСТРИТ / ЯЗВЕННАЯ БОЛЕЗНЬ / АНТИФУНГАЛЬНЫЕ ПРЕПАРАТЫ / ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Текст научной работы на тему «Роль дрожжевых грибов рода Candida в патологии желудочно-кишечного тракта»

гематокрита и степени эффективности доставки кислорода к тканям. Из этого следует, что у пациентов с данным заболеванием до начала оперативного лечения отмечается ухудшение текучести крови. Повышенная вязкость крови создает дополнительное сопротивление кровотоку и поэтому сопряжена с избыточной постнагрузкой сердца, микроциркуляторными расстройствами, тканевой гипоксией. Можно предположить, что увеличение показателей вязкости крови у пациентов с данной патологией может приводить к развитию микротромбозов, что способствует прогрессированию онкологического процесса. При этом у пациентов с доброкачественными образованиями кожи все исследуемые показатели были повышены, но статистически достоверных величин при этом отмечено не было. При проведении исследований этих показателей в ближайшем послеоперационном периоде было установлено, что в первые послеоперационные сутки у пациентов обеих групп отмечалось значительное повышение реологических свойств крови при всех скоростях сдвига, но показатели гематокрита и степени эффективности доставки кислорода к тканям существенно не отличались от данных до начала оперативного лечения. Данные изменения нельзя отнести к специфическим, они могут быть проявлением развития компенсаторной реакции на операционную травму. В дальнейшем установлено, что проведение оперативного лечения приводит к коррекции показателей вязкости крови у пациентов с доброкачественными образованиями кожи, которые полностью восстанавливались на седьмые послеоперационные сутки и соответствовали нормальным физиологическим показателям в отдаленном послеоперационном периоде. В то же время в группе пациентов с базаль-но-клеточным раком кожи оперативное лечение приводило лишь к частичному восстановлению показателей вязкости крови. Так, на десятые послеоперационные сутки происходило частичное восстановление показателей вязкости крови, что проявлялось снижением до физиологически нормальных величин показателей при скоростях сдвига 200 с-1 и 150 с-1, при этом увеличение этих показателей отмечалось и в отдаленном послеоперационном периоде.

Из этого можно сделать заключение, что оперативное лечение базально-клеточного рака кожи приводит лишь к частичному восстановлению показателей вязкости крови при высоких скоростях сдвига, которые характеризуют изменения реологических свойств в магистральных сосудах, однако показатели при низких скоростях сдвига остаются повышенными, что свидетельствует о нарушении микроциркуляции в капиллярах.

Список литературы

1. Гамаюнов С.В., Шумская И.С. Базально-клеточный рак кожи - обзор современного состояния проблемы // Практическая онкология. 2012. № 2. С. 92-106.

2. Онкология: учебник с компакт-диском / под ред. В.И. Чиссова, С.Л. Дарьяловой. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. 560 с.

3. Парфенов А.С., Пешков А.В., Добровольский Н.А. Анализатор крови реологический АКР-2. Определение реологических свойств крови: метод. рекомендации НИИ физико-химической медицины. М., 1994. С. 15.

4. Тодоров Й. Клинические лабораторные исследования в педиатрии. София, 1961. 784 с.

References

1. Gamajunov S.V., Shumskaja I.S. Bazal'no-kletochnyj rak kozhi - obzor sovremennogo sostojanija problemy // Prakticheskaja onkologija, 2012, N 2. pp. 92-106.

2. Onkologija: uchebnik s kompakt-diskom / Pod red. VI. Chissova, S.L. Dar'jalovoj. Moskow, GJeOTAR-Media, 2007, 560 p.

3. Parfenov A.S., Peshkov A.V., Dobrovol'skij N.A. Analizator krovi reologicheskij AKR-2. Opredelenie reologicheskih svojstv krovi: metod. rekomendacii NII fiziko-himicheskoj mediciny, Moskow, 1994. p. 15.

4. Todorov J. Klinicheskie laboratornye issledovanija v pediatrii. Sofija, 1961, 784 p.

УДК: 616-093

РОЛЬ ДРОЖЖЕВЫХ ГРИБОВ РОДА CANDIDA В ПАТОЛОГИИ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА

Новопашина Ю.А.

ГБОУ ВПО Кировская государственная медицинская академия Минздрава России, Киров, Россия (610027, г. Киров, ул. К. Маркса, 112), e-mail: vesnushka_ gulia@mail.ru

Представлены материалы исследования биологических свойств дрожжевых грибов, манифестирующих на слизистых оболочках гастродуоденальной зоны у пациентов с хеликобактерной инфекцией. Изучены видовое разнообразие дрожжевых грибов рода Candida, гемолитическая активность штаммов, их способность к образованию «ростовых трубок» и определена чувствительность к антимико-тическим препаратам.

Всего обследовано 89 пациентов с патологией органов пищеварения (хронический гастрит, язвенная болезнь) в возрасте от 16 до 88 лет, которые находились на стационарном и амбулаторном лечении. Среди пациентов были 31 (34,83%) мужчина и 58 (65,17%) женщин. По итогам HelPil-теста все пациенты разделены на две группы в зависимости от результатов скрининга. Основную группу (I группа) составили 57 пациентов с подтвержденной Hp-инфекцией. В контрольную группу (II группа) вошло 32 пациента с отрицательной HelPil-пробой. Средний возраст в обеих группах составил 45,84±10,27 лет. Использовали бактерио-скопический, микологический, молекулярно-гене-тический (полимеразная цепная реакция) методы. Результаты исследования обрабатывали с помощью программы STATISTICA for Windows версия 6.1. Использовали непараметрические и параметрические методы анализа. Критерием статистической достоверности получаемых данных считали общепринятую в медицине величину p<0,05. Установлено преобладание дрожжевых грибов у пациентов первой группы по сравнению с представителями второй группы (82,46% и 43,59% соответственно, p<0,05). Гемолитическая активность обнаруживалась у грибов Candida glabrata (5%), Candida tropicalis (3%), изолированных от I группы пациентов. В контрольной группе гемолитические штаммы не выявлены.

Ключевые слова: дрожжевые грибы, хронический гастрит, язвенная болезнь, антифунгальные препараты, полимеразная цепная реакция.

THE ROLE OF CANDIDA YEASTS IN THE PATHOLOGY OF THE GASTROINTESTINAL TRACT

Novopashina Yu.A.

Kirov State Medical Academy, Kirov, Russia (610027, Kirov, K. Marx Street, 112), e-mail: vesnushka_gulia@ mail.ru

The article demonstrate the study of biological properties of yeast, manifesting in the gastroduodenal mucosa in patients with H. pylori infection. We studied the diversity of yeast fungi of the genus Candida, hemolytic activity of the strains, their ability to form a «germ tubes» and determined sensitivity to antifungal preparations. There were inspected 89 patients with pathology of the digestive system (chronic gastritis, peptic ulcer disease) aged 16 to 88 years, who were on inpatient and outpatient treatment. Among the patients was 31 (34,83%) men and 58 (65,17%) women. According to the results HelPil-test, all patients were divided into two groups depending on the results of screening. The main group (I group) were 57 patients with confirmed Hp-infection. The control group (П group) included 32 patients with negative HelPil breakdown. The average age in both groups was 45,84±10,27 years. We were used bacterioscopic, mycological, molecular genetic (polymerase chain reaction) methods. The study results were processed using STATISTICA for Windows Version 6.1. Non-parametric and parametric methods of analysis were used. The criterion for statistical significance of the data was generally accepted in the medical value of p <0,05. Haemolytic activity was detected in fungi Candida glabrata (5%), Candida tropicalis (3%), isolated from the I group patients. In the control group of hemolytic strains were not detected.

Key words: yeasts, chronic gastritis, peptic ulcer disease, antifungal agents, polymerase chain reaction.

Введение

В последние годы оппортунистические инфекции представляют острую проблему в современной гастроэнтерологии [2]. Используемые схемы лечения желудочно-кишечных патологий, ассоциированных с Helicobacter pylori (H. pylori), как и схемы лечения язвенной болезни, предусматривают назначение антибактериальных препаратов и их комбинаций [1]. Результатом длительного применения антимикробных препаратов, назначаемых для индукции ремиссии заболевания, служит увеличение пролиферации дрожжевых микромицетов. Дрожжевые грибы, являясь комменсалами желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), становятся патогенными. Это относится в основном к грибам Candida spp., виды и даже штаммы которых различаются по факторам агрессии, способности к адгезии и инвазии [4]. Candida albicans - наиболее частый возбудитель кандидоза ЖКТ. Однако в последние годы многие авторы в своих исследованиях отмечают возрастающую роль группы видов Candida non-albicans (C. krusei, C. tropicalis, C. kefyr, C. glabrata, C. parapsilosis) [3, 4].

Цель исследования: установить видовую при-

надлежность и определить чувствительность к антифунгальным препаратам дрожжевых грибов, выделенных при хроническом гастрите и язвенной болезни.

Задачи: оценить частоту персистенции и степень выраженности кандидоза при заболеваниях верхних отделов пищеварительного тракта; определить видовой состав грибов рода Candida у пациентов с патологией ЖКТ; установить чувствительность выделенных штаммов к антимикотическим препаратам.

Материал и методы

В клинике ГБОУ ВПО Кировской ГМА было обследовано 89 пациентов с патологией органов пищеварения (хронический гастрит, язвенная болезнь) в возрасте от 16 до 88 лет, которые находились на стационарном и амбулаторном лечении. Среди пациентов были 31 (34,83%) мужчина и 58 (65,17%) женщин.

Критериями диагностики гастродуоденальных патологий служили жалобы на дисфагию, ретро-стернальный дискомфорт, гиперсаливацию, а также визуальные признаки эритематозно-атрофических и фибринозных изменений слизистой оболочки при фиброгастроскопии. Проведен тест инвазивной экспресс-диагностики инфекции Helicobacter pylori по уреазной активности биоптата (HelPil-тесты фирмы «Sintana SM», Санкт-Петербург) при эндоскопическом обследовании слизистой оболочки.

По итогам HelPil-теста все пациенты были разделены на две группы в зависимости от результатов скрининга. Основную группу (I группа) составили 57 пациентов с подтвержденной Hp-инфекцией. В контрольную группу (II группа) вошло 32 пациента с отрицательной HelPil-пробой. Средний возраст в обеих группах составил 45,84±10,27 лет.

Материалом для микробиологических и моле-кулярно-генетических исследований являлись био-птаты слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки, полученные в результате биопсии, проводимой при фиброгастродуоденоскопии. Пробы отбирали с помощью биопсийных щипцов врачом-эндоскопистом и помещали в транспортные среды HiCulture™ Transport Swabs фирмы HiMedia.

Посев на питательные среды проводился не позднее чем через 2 часа после взятия клинических образцов. Для выделения и первичной идентификации дрожжевых грибов производили посев на среду Сабуро и хромогенный агар (HiMedia), позволяющий дифференцировать следующие виды по окрашиванию и морфологии: Candida albicans, Candida glabrata, Candida tropicalis и Candida krusei, инкубировали при 25°С и 37°С в течение 48 ч. Затем, отобрав отдельные колонии, ресуспендировали в бульоне Сабуро с добавлением сыворотки (10%) при 37°С, микроскопировали через 4 часа с целью обнаружения характерных «ростовых трубок». Штаммы, не способные к образованию «ростовых трубок», считались авирулентными. Гемолитическую активность выявляли при высеве колоний на кровяной агар. Для изучения сахаролитиче-ских свойств использовали дифференциально-диагностический биохимический тест CandidaTest (Lachema, Чехия). Одновременно проводили молекулярно-гене-тические методы с использованием набора реагентов для качественного выявления ДНК Candida albicans, Candida glabrata, Candida krusei в клиническом материале методом ПЦР с гибридизационно-флуорес-центной детекцией (АмплиСенс). Дискодиффузным

методом устанавливали чувствительность к антимико-тическим препаратам: нистатину, каспофунгину, флу-коназолу, вориконазолу, амфотерицину В.

Статистическая обработка выполнена с использованием программы STATISTICA for Windows, версия 6.1. Анализ данных начинался с оценки вида распределения признака в выборке с помощью построения гистограмм. Объемы выборок, используемые в работе, являются достаточными и соответствуют выбранной мощности критерия (=0,09). Количественные данные, имеющие показатели, близкие к нормальному распределению, представлены в виде среднего арифметического (М) и стандартного отклонения (m). Относительными величинами (%) в виде 95% доверительных интервалов описывались качественные данные. Для оценки статистической значимости различий выборочных количественных данных, при близком к нормальному распределению, использовался t-критерий Стъюдента; при распределении, отличном от нормального, применялись непараметрические методы статистического анализа - критерий Манна-Уитни. Оценка статистической значимости различия выборочных относительных величин выполнялась с помощью критерия х2. В качестве критического уровня статистической значимости (p) принято значение p<0,05.

Результаты исследования и их практическая значимость

По результатам исследования установлено, что частота обнаружения грибов рода Candida в желудке при заболеваниях верхних отделов пищеварительного тракта (хронический гастрит и язвенная болезнь) варьирует в диапазоне от 43,59% в контрольной группе до 82,46% - в опытной.

Штаммы C.glabrata и C.krusei являются превалирующими (p<0,05) в обеих изучаемых группах (рис. 1.).

Candida albicans Candida glabrata Candida tropicalis Candida krusei I группа (Опыт) II группа (Контроль)

Рис. 1. Частота манифестации грибов Candida (%) Определение чувствительнос

У группы пациентов с заболеваниями гастро-дуоденальной зоны, отягощенными персистенцией H. pylori, общая частота встречаемости кандидоноси-тельства была выше, чем в контрольной группе.

Способность к образованию «ростовых трубок» чаще отмечалась среди штаммов Candida spp., изолированных от пациентов с хелибактерной инфекцией, чем от пациентов с отрицательным HelPil-тестом (87% и 12% соответственно).

Количественная оценка дрожжевых грибов, обнаруженных при бактериологическом анализе биоптатов у пациентов опытной группы, показала превышение концентрации грибов рода Candida на 1-2 порядка относительно нормальных показателей (<3 lg КОЕ/мл). Наиболее высокие титры были зафиксированы у группы С. non-albicans: C.glabrata (4,85±0,15 lg КОЕ/мл; p<0,05) и C.krusei (4,85±0,15 lg КОЕ/мл; p<0,05). Показатели контрольной группы соответствовали норме (рис. 2.).

Candida krusei

Рис. 2. Количественное определение дрожжевых грибов в биоптатах ЖКТ (lg КОЕ/мл)

Установлено, что C. glabrata реже выделяли в монокультуре (29%), чем в ассоциации с другими штаммами Candida spp. (C. glabrata + С. albicans -21%, C. glabrata + C. krusei - 29%, C. glabrata + C. tropicalis - 21%; p<0,05).

Гемолитическая активность выявлена у грибов C. glabrata (5%), C. tropicalis (3%), изолированных от I группы пациентов. В контрольной группе гемолитические штаммы не обнаружены.

При анализе чувствительности штаммов Candida spp. к противогрибковым препаратам установлено (табл.1.), что вид С. albicans устойчив к большинству применяемых для лечения антимикотиков. Обнаружена высокая резистентность к амфотерици-ну В у штаммов С. glabrata (75%) и С. krusei (64%).

Таблица 1

Candida spp. к антимикотикам

Вид гриба Чувствительность штаммов к антимикотическим препаратам, %

Нистатин Каспофунгин Амфотерицин В Флуконазол Вориконазол

Candida albicans ++ (87%) + (64%) (54%) (89%) (68%)

Candida glabrata ++ (64%) + (80%) (75%) (78%) + (87%)

Candida tropicalis + (77%) ++ (59%) ++ (84%) + (74%) ++ (65%)

Candida krusei + (76%) + (82%) (64%) + (70%) + (85%)

— резистентные + - слабочувствительные ++ - чувствительные

Сохранялась чувствительность к нистатину и каспо-фунгину у всех изучаемых видов дрожжевых грибов.

Обсуждение результатов

Выявленная частота вегетации грибов рода Candida в желудке при заболеваниях верхних отделов пищеварительного тракта является высокой (43,59 -82,46%). Большинство штаммов (87%), выделенных от представителей опытной группы, способны к образованию «ростовых трубок» и развитию канди-дозной инфекции. В контрольной группе наиболее характерным вариантом существования Candida spp. являлось кандидоносительство.

Повышенная концентрация грибов Candida spp. служит индикатором, свидетельствующим о наличии дисбиотических процессов. Причиной повышенных титров дрожжевых грибов в опытной группе могут служить ассоциативные взаимодействия с бактериями с Hp при хроническом гастрите и язвенной болезни.

Заключение

Этиология заболеваний ЖКТ устанавливается при проведении комплексного клинико-микробио-логического обследования, включающего эндоскопическое исследование, микроскопию и культуральный анализ биоптатов слизистых оболочек.

Обнаружение Candida spp. на слизистых оболочках ЖКТ не является основанием для постановки диагноза «кандидоз». Для подтверждения наличия кандидозной инфекции необходима не только качественная, но и количественная оценка дрожжевых грибов, проводимая в сопоставлении с клинической симптоматикой, с учетом наличия фоновых заболеваний, микст-инфекции. Перед назначением этиотроп-ной противогрибковой терапии необходимо оценить чувствительность обнаруженных возбудителей к антимикотическим препаратам in vitro.

Список литературы

1. АвалуеваЕ.Б., АлимоваИ.С., ГоршковВ.А. Отдаленные результаты эрадикации Н. pylori у больных с дуоденальной язвой// Гастроэнтерология Санкт-Петербурга. 2003. № 2-3. С.10.

2. Бурова С.А. Современные представления о грибковой патологии пищеварительного тракта// Лечащий врач - медицинский научно-практический журнал. 2003. № 12. С. 24-25.

3. Баженов Л.Г. Роль грибов рода Candida в микробиоценозе желудка при хеликобактериозе// Успехи медицинской микологии. 2003. № 1. С. 8-9.

4. Levine J., Dycoski R.D., Janoff E.N. Candida -associated diarrhea: a syndrome in search of credibility// Clin. Inf. Dis. 1995. № 21. P. 881-886.

References

1. Avalueva E.B., Alimova I.S., Gorshkov V.A. Gastrojenterologija Sankt-Peterburga, 2003, N 2-3, p.10.

2. Burova S.A. Lechashhij vrach - medicinskij nauchno-prakticheskij zhurnal, 2003, N 12, pp. 24-25.

3. Bazhenov L.G. Uspehi medicinskoj mikologii, 2003, N 1, pp. 8-9.

4. Levine J., Dycoski R.D., Janoff E.N. Clin. Inf. Dis., 1995, N 21, pp. 881-886.

УДК 616.61-076-08

КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ НЕФРОБИОПСИИ

Постникова Г.А., Попова Л.В.

ГБОУ ВПО Кировская государственная медицинская академия Минздрава России, Киров, Россия (610027, г. Киров, ул. К Маркса, 112), e-mail: postnikovakirov@yaindex.ru

В статье представлены результаты ретроспективного анализа медицинской документации 30 больных, которым была выполнена чрескожная пункцион-ная нефробиопсия в условиях нефрологического отделения Кировской ОКБ в 2014-2015 гг. Исследованы клинические особенности нефропатий, цели назначения биопсии почки. Выявлены корреляции между клиническими особенностями нефропатий и определенными морфологическими изменениями. Подтверждена высокая диагностическая ценность нефробиопсии и значительное влияние на изменение лечебной тактики после получения результатов морфологического исследования.

Ключевые слова: нефробиопсия, гломерулонеф-рит, нефротический синдром, острое почечное повреждение.

Список сокращений:

АНЦА - антитела к цитоплазме лейкоцитов. БПГН - быстропрогрессирующий гломерулонефрит. МПГН - мембранопролиферативный гломерулонефрит. НС - нефротический синдром.

ОПП - острое повреждение почек (острая почечная недостаточность).

ХПН - хроническая почечная недостаточность.

CLINICAL SIGNIFICANCE OF NEFROBIOPSY

Postnikova G.A., Popova L.V.

Kirov State Medical Academy, Kirov, Russia (610027, Kirov, K. Marx Street, 112), e-mail: postnikovakirov@yandex.ru

The article presents the results of retrospective analysis of 30 medical histories. The patients underwent nefrobiopsy in the Nephrology Department of Kirov Regional Hospital in 2014-2015. Clinical features of nephropathy and purposes of nefrobiopsy indication were studied. Correlation between clinical features of nephropathy and certain morphological changes were found. High diagnostic value of nefrobiopsy and its great impact on treatment strategies were confirmed.

Key words: nefrobiopsy, glomerulonephritis, nephrotic syndrome, acute kidney injury (AKI).

Введение

Чрескожная биопсия почки позволяет провести прижизненное морфологическое исследование почечной ткани и уточнить характер нефропатии, степень вовлеченности в патологический процесс клубочков, канальцев, сосудов и интерстиция, а также выраженность воспалительных или склеротических изменений [2]. Нефробиопсию проводят с целью уточнения диагноза,

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.