ственная резистентность крупного рогатого скота и свиней / Монография. - Персиановский, 2007. - 175 с.
3. Чеботкевич В.Н., Лютинский С.И. Методы оценки состояния иммунной системы и факторов неспецифической резистентности в ветеринарии / Учебное пособие для студентов, аспирантов и вра-
чей ветеринарной медицины. - С-Пб., 1998. - 30 с.
4. Шуканов А.А., Кириллов Н.К., Петрянкин Ф.П. К проблеме иммунитета и повышения резистентности животных // Известия НАНИЧР Чебоксары, 1996. № 4. - С. 43-53.
Контактная информации об авторах для переписки Полозюк Ольга Николаевна, доцент кафедры внутренних незаразных болезней, патофизиологии, клинической диагностики и фармакологии, кандидат с/х наук ДонГАУ 346493 Ростовская обл., Октябрьский район, п. Персиановский, ул. Мичурина, 39/1, телефон 89081931695
Кошляк Владимир Васильевич, доцент кафедры эпизоотологии, ветеринарно-сани-тарной экспертизы и паразитологии, кандидат с/х наук, Донской ГАУ 346493 Ростовская обл., Октябрьский район, п. Персиановский, ул. Горького, 13, телефон 890818508575
Федюк Елена Ивановна, старший преподаватель кафедры технологии молока и пищевой биотехнологии, кандидат с/х наук, Донской ГАУ 346493 Ростовская обл., Октябрьский район, п. Персиановский, ул. Мичурина, 9, кв. 48, телефон 89185043619
УДК: 636.4.03
Полозюк О.Н., Федюк В.В., Федюк Е.И.
(Донской ГАУ)
РЕЗИСТЕНТНОСТЬ ПОМЕСНЫХ ПОРОСЯТ РАЗЛИЧНЫХ ГЕНОТИПОВ ПО ГЕНУ RYR-1
Ключевые слова: Естественная резистентность, бактерицидная и лизоцимная активность сыворотки крови, фагоцитарная активность нейтрофильных гранулоцитов, фагоцитарная емкость крови, фагоцитарный индекс.
Введение
Естественная резистентность животного организма имеет, скорее всего, полимерную схему наследования, у помесного потомства следует ожидать широкий спектр расщеплений по признакам неспецифической защиты организма. В связи с этим определенный интерес представляет динамика уровня естественной резистентности свиней разных генотипов по гену RYR-1 при проведении двух - и трехпород-ного скрещивания. Как правило, при проведении исследований, посвященных сочетаемости пород для промышленного скрещивания, учитывали только комплекс хозяйственно-полезных признаков помесных животных, делая на основании этих данных выводы о пригодности к двухпородно-му скрещиванию той или иной породы свиней. При этом уровень защиты организма не принимался [3, 5, 6].
Поэтому целью наших исследований явилось изучение изменения уровня естественной резитсентности подсвинков раз-
личных генотипов, полученных от двух-породного и трехпородного скрещиваний.
Материалы и методы
Исследования по генотипирова-нию и определению частоты мутантно-го п-аллеля (для выявления генной мутации в гене рецептора рианодина RYR -1) и проведения сравнительного анализа естественной резистентности поросят проводили на свинокомплексе ЗАО «Батайское» Азовского района Ростовской области. В опыте было сформировано две группы поросят по 40 голов в каждой: I - помеси (матери получены при скрещивании самок КБ породы с хряками породы ландрас, отцы порода дюрок), II - помеси (мать крупная белая порода, отец - порода ландрас).
Исследования показателей естественной резистентности животных проводили в лаборатории по изучению биологических проблем животноводства Дон ГАУ, а выявления генной мутации в гене рецептора рианодина RYR-1 проводили в лаборатории биотехнологии СКНИИЖ метода-
ми ПЦР/ПДРФ (г. Краснодар).
Кровь для исследования брали утром, до кормления животных. У поросят до 4-месячного возраста кровь брали из хвостовой вены, с 4-месячного возраста, из ушной вены. Для выявления генной мутации в гене рецептора рианодина RYR-1 брали по 1мл цитратной крови, помещали в термос - холодильник и доставляли на исследование в лабораторию биотехнологии СКНИИЖ (г. Краснодар).
Для исследования показателей естественной резистентности животных в полученную кровь в качестве антикоагулянта добавляли препарат «Трилон-Б». При взятии крови учитывали сроки проведения ветеринарно-профилактических мероприятий, особенно вакцинаций. В крови определяли клеточные и гуморальные показатели естественной резистентности:
- лизоцимную активность сыворотки крови - по В.Т. Дорофейчук (1998);
- бактерицидную активность сыворотки крови - по О.В.Смирновой, Т.А.Кузьминой (1966);
- фагоцитарную активность нейтро-фильных гранулоцитов и фагоцитарный индекс и фагоцитарную емкость крови по В.В. Федюку с соавт. (2007);
- реакцию бактериальной агглютинации по М.О. Биргеру (1982).
Полученные в ходе опыта данные обработаны биометрическими методами Н.А. Плохинского (1970), Е.К. Меркурье-вой (1970).
Результаты и обсуждения
В первый месяц жизни у гомозиготных помесных поросят 1/4КБ+1/4Л +1/2Д I группы (табл.1) лизоцимная и бактерицидная активность сыворотки крови была на 3,26 (Р>0,95) и 2,6% выше чем у гетерозиготных, и на 5,89 (Р>0,99) и 8,79% (Р>0,99) у гомозиготных (табл.2) и на 4,4 (Р>0,95) и 9,2%(Р>0,99) гетерозиготных поросят II группы соответственно. У поросят II группы способность лейкоцитов к фагоцитозу как гомозиготных, так и гетерозиготных была выше, чем у поросят I группы на 2,6 и 4,87% (Р>0,95). Концентрация иммуноглобулинов у гомозиготных и гетерозиготных поросят обеих групп достоверных различий не имели. Индекс резистентности был выше у гомозиготных и гетерозиготных поросят I группы.
В период завершения колострально-го иммунитета, когда расходуются антитела, полученные с молоком матери у поросят отмечается снижение индекса резистентности особенно это характерно для
гетерозиготных поросят II группы. Разница между высоко - и низкорезистентными животными составляла около 2 %.
Индекс резистентности оказал влияние на рост и развитие поросят. Поэтому значительный падеж поросят в подсосный период был отмечен у помесных поросят с генотипом № от варианта скрещивания КБ х Л, что и нашло свое отражение в низком уровне неспецифической защиты у них до 3-месячного возраста. Наоборот, высокорезистентные поросята с NN генотипом, полученные от скрещивания (КБ х Л) хД характеризовались более высокой сохранностью в подсосный период.
К трехмесячному возрасту более высокорезистентными также были гомозиготные поросята % КБ + % Л + У Д, а относительно низкорезистентными гетерозиготные У КБ + У Л. Однако различия в уровне резистентности между данными вариантами были в этом возрасте поросят неза-чительными.
До четырехмесячного возраста статистически достоверные различия имели место лишь по некоторым гуморальным факторам неспецифической резистентности - по лизоцимной, бактерицидной активности сывортки крови и по концентрации иммуноглобулинов. Клеточные факторы естественной резистентности находились в этот период у поросят приблизительно на одном и том же уровне, как у гомозиготных, так и гетерозиготных поросят
Начиная с 4-месячного возраста, у подсвинков стали проявляться различия и по клеточным факторам неспецифической резистентности. В этот период самыми высокими значениями фагоцитарного индекса и фагоцитарной емкости крови (показывающими качественную сторону процесса фагоцитоза) характеризовались гомозиготные поросята с долями кровности % КБ + % Л + У Д. В этом возрасте они являлись и самыми высокорезистентными в целом (по ИР).
С пятимесячного возраста и до убоя более высокорезистентными были подсвинки с NN генотипом % КБ + % Л + У Д, а у подсвинков с № генотипом КБ+ У + Л У был отмечен низкий среди сверстников уровень естественной резистентности организма.
К пяти - шестимесячному возрасту у свиней опытных групп полностью сформировывается статус неспецифической защиты организма, как клеточные, так и гуморальные факторы в этот период находят свою фенотипическую реализацию.
Таблица 1
Показатели естественной резистентности помесных поросят 1/4КБ +1/4Л+1/2Д различных генотипов по гену ЯУЯ-1
Генотип по гену ЯУЯ-1, в разные периоды развития, мес. ( 1-группа)
Показатели месячные 3-месячные 4-месячные 5-месячные 6-месячные
резистентности
NN п=28 Ш, п=12 NN п=27 Ш, п=10 NN п=26 Ш, п=10 N14, п=26 Ш,п=10 МЧ,п=26 Ш,п=10
Фагоцитарная 26,56± 24,30± 27,83± 26,1=1± 32,15± 30,48± 35,80± 33,90± 39,21± 35,18±
активность 2,92 2,55 1,67 1,85 1,44
нейтро филов,%
Фагоцитарный 2,72± 0,18 2,70± 3,10±0,16 2,80± 3,55± 0,09 3,24± 3,88± 0,13 3,62± 4,01± 0,20 3,81±
индекс
Фагоцитарное 0,74± 0,10 0,72± 0,87± 0,10 0,80± 1,01 0,08 0,90± 1,35± 0,06 1,18± 1,55± 0,09 1,38±
число
Фагоцитарная 8,66± 1,37 8,46± 9,74± 1,36 9,24± 13,96± 12,31± 18,48± 18,02± 22,13± 22,31±
емкость крови, тыс, мм3 1,88 1,71 1,24
ЛАСК,% 36,54± 3,44 33.28± 44,92± 4,45 41,27± 36,11± 3,29 34,48± 51,68± 3,04 47,62± 58,10± 3,00 54,36±
БАСК,% 54,22± 4,62 51,62± 53,54± 5,97 50,28± 58,67± 5,42 54,27± 61,04± 2,66** 58,34± 65,28± 2,13 61,89±
Концентрация имму но гло булино в в сыворотке крови, г/л 8,88± 1,95 8,62± 13,25± 0,96 12,08± 19,46± 1,23 17,21± 22,49± 1,88 19,87± 24,51± 1,62 22,16±
Индекс 77,11 75,28 76,67 74,68 88,33 84,99 90,20 87,31 92,33 89,64
резистентности, бал
Таблица 2
Показатели естественной резистентности помесных поросят 1/2КБ +1/2Л различных генотипов по гену ЯУК-1
Показатели резистентности Генотип по гену ЯУЯ-1, в разные периоды развития, мес. (2-я группа)
месяц 3 месяца 4 месяца 5 месяцев бмесяцев
NN,11=26 п=14 NN,11=24 Ш, п=10 NN,11=23 N11, п=9 N14, п=22 N11, п=9 NN,11=22 N11,11=8
Фагоцитарная активность нейтро филов,% 29,17± 2,64 27,81±2,34 27,17± 1,56 26,18±2,00 29,33± 1,49 27,85±3,11 33,00± 1,06 32,20±2,32 33,10± 1,34 33,12±2,64
Фагоцитарный индекс 2,58± 0,26 2,36±0,16 3,47± 0,24 3,18±0,30 3,22± 0,17 3,16±0,18 3,75± 0,07 3,62±0,12 3,88± 0,15 3,28±0,2
Фагоцитарное число 0,78± 0,13 0,76±0,11 0,95± 0,08 0,87±0,90 1,00 0,15 0,97±0,12 1,24± 0,04 1,16±0,09 1,38 ±0,03 1,30±0,10
Фагоцитарная емкость крови, тыс, мм3 8,91± 1,28 8,21±1,32 11,03± 1,20 10,88±1,14 11,19± 1,63 11,02±0,96 17,24± 1,01 16,78±1,56 19,51±1,09 19,21±1.21
ЛАСК,% 30,65± 3,40 32,14±2,46 41,46± 4,19 38,27±2,65 41,36± 4,80 40,21±3.16 51,48± 4,12 50,48±3,14 51,11± 2,11 52,18±2,67
БАСК,% 45,43± 2,65 44,82±3,10 48,25± 6,36 45,92±2,54 58,79± 3,93 57,86±2,76 59,29± 2,50 54,62±3,62 52,87± 2,66 52,46±2,86
Концентрация иммуногло булинов в сыворотке крови, г/л 8,90± 1,47 8,70±0,90 11,28± 0,84 10,76±1,04 15,65± 1,19 16,10±0,90 19,60± 1,53 18,96±0,88 21,10± 1,77 20,87±1,12
Индекс резистентности, бал 73,67 72,18 73,33 72,80 81,67 80,16 80,06 78,92 87,67 85,46
Преимущество было у гомозиготных и гетерозиготных трехпородных помесей.
В полугодовалом возрасте произошла окончательная дифференциация животных различных вариантов межпородного скрещивания по признакам неспецифической резистентности.
За период выращивания подсвинков с одного до шести месяцев средний индекс резистентности составил у гомозиготных поросят варианта (КБ х Л ) х Д 84,5 балла, а КБ х Л 79,8 балла, гетерозиготных 82,39 и 77,86 соответственно. Таким образом, более высокорезистентными были гомозиготные поросята % КБ + % Л + Д, а относительно низкорезистентным гетерозиготные ^ КБ + ^ Л.
Уровень естественной резистентности оказал большое влияние на рост и развитие поросят. Значительный падеж поросят в подсосный период был отмечен у помесных поросят с генотипом № от варианта скрещивания КБ х Л, что и нашло свое отражение в низком уровне неспецифической защиты у них до 3-месячного возраста. Наоборот, высокорезистентные поросята с NN генотипом, полученные от скрещивания КБ х Л х Д характеризовались исключительно высокой сохранностью в подсосный период.
Начиная с 4-месячного возраста, у подсвинков стали проявляться различия и по клеточным факторам неспецифической резистентности. В этот период самыми высокими значениями фагоцитарного индек-
са и фагоцитарной емкости крови (показывающими качественную сторону процесса фагоцитоза) характеризовались как гомозиготные, так и гетерозиготные поросята с долями кровности % КБ + % Л + Д.
В четырехмесячном возрасте они являлись и самыми высокорезистентными в целом (по ИР) отставая, однако, по уровню бактерицидной активности сыворотки крови от своих сверстников второго варианта скрещивания.
С пятимесячного возраста и до убоя более высокорезистентными были подсвинки с NN генотипом % КБ + % Л + Д, а у подсвинков как с NN так и № генотипом КБ + Л был отмечен низкий среди сверстников уровень естественной резистентности организма. К шестимесячному возрасту статус неспецифической защиты организма полностью сформировался, как клеточные, так и гуморальные факторы в этот период нашли полную фенотипиче-скую реализацию.
Заключение
Лучшей естественной резистентностью среди помесей, обладали подсвинки с генотипом NN 1/4КБ+1/4Л+1/2Д, что позволяет сделать вывод о высокой потенциальной устойчивости указанных животных к возможным заболеваниям. Наиболее уязвимым звеном защиты организма у гетерозиготных подсвинков 1/2КБ+1/2Л является функциональная активность лейкоцитов -в частности их фагоцитарная способность.
Резюме: авторами определен уровень естественной резистентности свиней разных генотипов по гену RYR-1 при проведении двух - и трехпородного промышленного скрещивания.
SUMMARY
authors define level of natural resistance of pigs of different genotypes on gene RYR-1 at carrying out of two - and three-pedigree industrial crossing.
Keywords: natural resistance, bactaricidic and lysocim activity of blood serum, phagocyte activity of neutrophylic granulocytes, phogocitic capacity of blood phagocitic index.
Литература
1. Биргер М.О. Клинические лабораторные исследования / М.О. Биргер. - М.: Медицина, 1982. - 582 с.
2. Меркурьева Е.К. Биометрия в селекции и генетике с.-х. животных / Е. К. Меркурьева. - М.: Колос, 1970. - 424 с.
3. Павлуненко А. Селекционный путь повышения естественной резистентности свиней /А. Павлуненко // Зоотехния. - 1990. - №1. - 36-39с.
4. Плященко С. Естественная резистентность организма животных / С. Плященко, В.Сидоров //- Л.:
Колос, 1979. - С. 182
5. Сердюк Г. О взаимосвязи между естественной резистентностью и группами крови у свиней /Г. Сердюк, В.Павличенко, О.Лозгачева // С.-х. биология. -1986. - №5. - 112-114с.
6. Сухова Н. Естественные гуморальные факторы крови и продуктивные показатели животных /Н. Сухова, С.Смирнов., В.Коломников // Науч. -техн. бюл. - СибНИИ проектно-технологич. институт животноводства. - 1990. - Вып.4. - 30-34с.
Контактная информации об авторах для переписки Полозюк Ольга Николаевна, доцент кафедры внутренних незаразных болезней, патофизиологии, клинической диагностики и фармакологии, кандидат с./х. наук Дон ГАУ