Научная статья на тему 'Реакция периферической крови и пищеварительной системы сеголеток амурского осетра на условия зимовки в садках тепловодного хозяйства'

Реакция периферической крови и пищеварительной системы сеголеток амурского осетра на условия зимовки в садках тепловодного хозяйства Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

CC BY
425
114
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ЭРИТРОЦИТЫ / ЛЕЙКОЦИТЫ / ЦВЕТНОЙ ПОКАЗАТЕЛЬ / ИНДЕКС ЯДЕРНОГО СДВИГА / ГЕМАТОКРИТ / ПЕЧЕНЬ / ГЕПАТОЦИТ / ЛИПОИДНАЯ ДЕГЕНЕРАЦИЯ ПЕЧЕНИ / ЗИМОВКА / ГЕРПЕСВИРУС / ERYTHROCYTE / LEUCOCYTE / BLOOD COLOR INDEX / NUCLEAR SHIFT INDEX / HEMATOCRIT / LIVER / HEPATOCYTE / LIVER LIPOID DEGENERATION / WINTERING / HERPES VIRUS

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Валова Вера Николаевна

Проведено исследование реакции периферической крови и пищеварительной системы сеголеток амурского осетра на условия зимовки в садках тепловодного хозяйства. Сделанные перед началом зимовки анализы крови и пищеварительной системы показали, что молодь амурского осетра вошла в зимовку с признаками патологического процесса неясной этиологии (либо развития кумулятивного политоксикоза, либо вирусной инфекции). Основной признак заболевания — эозинофилия на фоне дегенеративного ядерного сдвига и микроцитарной анемии. Результаты анализов физиологического состояния сеголеток амурского осетра в середине и конце зимовки исключили развитие кумулятивного политоксикоза, так как произошло постепенное снижение доли эозинофилов в лейкограмме. Состояние внутренних органов при визуальном осмотре и на гистологических препаратах подтверждало наличие вирусной инфекции. В связи с тем, что в России не разработаны вакцины против вирусных инфекций осетровых рыб и профилактическая вакцинация не проводится ни на одном рыбоводном предприятии, рекомендуется проведение мероприятий по повышению иммунофизиологического статуса молоди, в частности использование введения в комбикорма витаминов С и Е и пробиотиков.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по ветеринарным наукам , автор научной работы — Валова Вера Николаевна

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Reaction of peripheral blood and digestive system of the amur sturgeon fingerlings on conditions of their wintering in warm-water farm cages

Wintering is a hard period in life cycle of fish, including sturgeons, particularly for fingerlings. In natural conditions, amur sturgeons spend winters in deeps of riverbed and almost do not feed, but in aquaculture they remain in warm water. Ethology and physiology of the amur sturgeon fingerlings wintering in conditions of warm-water farm are investigated, with detection of their peripheral blood and digestive system reaction on the wintering. For this purpose, the state of peripheral blood and digestive system before the wintering, in the middle of wintering, and after the wintering was tested. The fish were fed by granulated fodders. The tested specimens began the wintering with symptoms of pathological process: eosinophilia with degenerative nuclear shift and microcytic anemia. Either polytoxicosis or viral infection were supposed as a reason of this disease, but further samplings allowed to exclude the toxicosis because of gradual reduction of eosinocytes. There is concluded that the fingerlings spend the winter infected by herpes virus that is confirmed by examination of both internal organs and histological preparations. Measures for enhancing of fish immunity for wintering at fish farms are recommended.

Текст научной работы на тему «Реакция периферической крови и пищеварительной системы сеголеток амурского осетра на условия зимовки в садках тепловодного хозяйства»

Известия ТИНРО

2013

Том 173

АКВАКУЛЬТУРА

УДК 639.3.006.3:597.442

В.Н. Валова*

Тихоокеанский научно-исследовательский рыбохозяйственный центр, 690091, г. Владивосток, пер. Шевченко, 4

реакция периферической крови и пищеварительной системы сеголеток амурского осетра на условия зимовки в садках тепловодного хозяйства

Проведено исследование реакции периферической крови и пищеварительной системы сеголеток амурского осетра на условия зимовки в садках тепловодного хозяйства. Сделанные перед началом зимовки анализы крови и пищеварительной системы показали, что молодь амурского осетра вошла в зимовку с признаками патологического процесса неясной этиологии (либо развития кумулятивного политоксикоза, либо вирусной инфекции). Основной признак заболевания — эозинофилия на фоне дегенеративного ядерного сдвига и микроцитарной анемии. Результаты анализов физиологического состояния сеголеток амурского осетра в середине и конце зимовки исключили развитие кумулятивного политоксикоза, так как произошло постепенное снижение доли эозинофилов в лейко-грамме. Состояние внутренних органов при визуальном осмотре и на гистологических препаратах подтверждало наличие вирусной инфекции. В связи с тем, что в России не разработаны вакцины против вирусных инфекций осетровых рыб и профилактическая вакцинация не проводится ни на одном рыбоводном предприятии, рекомендуется проведение мероприятий по повышению иммунофизиологического статуса молоди, в частности использование введения в комбикорма витаминов С и Е и пробиотиков.

ключевые слова: эритроциты, лейкоциты, цветной показатель, индекс ядерного сдвига, гематокрит, печень, гепатоцит, липоидная дегенерация печени, зимовка, герпес-вирус.

Valova V.N. Reaction of peripheral blood and digestive system of the amur sturgeon fingerlings on conditions of their wintering in warm-water farm cages // Izv. TINRO. — 2013. — Vol. 173. — P. 259-268.

Wintering is a hard period in life cycle of fish, including sturgeons, particularly for fingerlings. In natural conditions, amur sturgeons spend winters in deeps of riverbed and almost do not feed, but in aquaculture they remain in warm water. Ethology and physiology of the amur sturgeon fingerlings wintering in conditions of warm-water farm are investigated, with detection of their peripheral blood and digestive system reaction on the wintering. For this purpose, the state of peripheral blood and digestive system before the wintering, in the middle of wintering, and after the wintering was tested. The fish were fed by granulated fodders. The tested specimens began the wintering with symptoms of pathological process: eosinophilia with degenerative nuclear shift and microcytic anemia. Either polytoxicosis or viral infection were supposed as a reason of this disease, but further samplings allowed to exclude the toxicosis because of gradual reduction of eosinocytes. There is concluded that the fingerlings spend the winter infected by herpes virus that is confirmed by examination of both internal organs and

* Валова Вера Николаевна, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, e-mail: valova@tinro.ru.

Valova Vera N., Ph.D., senior researcher, e-mail: valova@tinro.ru.

histological preparations. Measures for enhancing of fish immunity for wintering at fish farms are recommended.

Key words: erythrocyte, leucocyte, blood color index, nuclear shift index, hematocrit, liver, hepatocyte, liver lipoid degeneration, wintering, herpes virus.

Введение

Особое место при зимнем содержании осетровых рыб в управляемых системах занимают проблемы, связанные с изучением влияния абиотических и биотических факторов на организм рыб, что весьма важно для оптимизации биотехники их выращивания. Исследования вопросов кормления осетровых в зимний период выращивания, выполнявшиеся в 1960-1970-е гг., в основном проводились на бестере при естественном ходе температур (Гарин, 1976; Канаев, 1976). Эксперименты, проведенные А.В. Гариным (1976) по зимнему содержанию молоди осетровых рыб в бассейнах при естественной температуре воды, показали возможность влиять на процесс зимовки условиями содержания, в частности созданием оптимальных условий, включающих гидрологический и гидрохимический режимы, оптимизацию плотности посадки и обеспечение эффективных мер борьбы с зимними эктопаразитарными заболеваниями. В настоящее время некоторые исследователи (Пономарев и др., 2009) полагают, что обеспеченность кормом осетровых рыб в течение зимнего периода может сказаться на результатах зимовки. Согласно полученным ими данным, осетровые рыбы достаточно активно питаются в прудах зимой, однако кормовая база водоемов в это время ограничена и не может удовлетворить их пищевые потребности. Вместе с тем обязательным условием для зимнего кормления молоди осетров является хорошее гидрохимическое состояние водоёма, особенно оптимальный кислородный режим. Вынужденное голодание в период зимовки при неблагоприятных абиотических условиях приводит к значительной потере массы тела (до 30 %), росту потребностей в основных питательных компонентах кормов (до 20 %), результатом чего становится ослабление иммунофизиологического статуса рыб и удлинение восстановительного периода весной. В связи с этим зимостойкость рыб, т.е. их способность противостоять неблагоприятным воздействиям окружающей среды в зимний период, определяется физиологическим состоянием особей перед зимовкой, которое характеризуется определенными показателями, например упитанность, гематологические и гистоморфологические характеристики.

Цель настоящей работы — оценка реакции периферической крови и пищеварительной системы сеголеток амурского осетра на условия зимовки в садках тепловодного хозяйства.

Для достижения поставленной цели необходимо было оценить состояние периферической крови и пищеварительной системы сеголеток амурского осетра перед зимовкой, а также в период и после выхода из зимовки.

материалы и методы

Объектом исследований служили сеголетки амурского осетра Acipenser schrencki, выращиваемые в условиях тепловодного хозяйства Лучегорской НИС ФГУП «ТИНРО-Центр». Молодь исследовалась непосредственно перед зимовкой, в середине и в конце зимовки 2010-2011 гг. Физиологическое состояние молоди оценивалось по гематологическим показателям и цитоморфологии пищеварительной системы (печень, желудок, кишечник). Обработка гематологических и гистологических материалов проводилась по общепринятым методикам (Ромейс, 1954; Лилли, 1969; Иванова, 1983; Сборник инструкций ..., 1998*).

При исследованиях оценивались следующие гематологические показатели: общее количество гемоглобина, гематокрит, концентрация гемоглобина в 1 эритроците (МСНС), содержание гемоглобина в 1 эритроците (MCH), объем 1 эритроцита (MCV), цветной показатель, общее число эритроцитов, общее число тромбоцитов и

* Сборник инструкций по борьбе с болезнями рыб. В 2 ч. — М. : Отд. маркетинга АМБ-агро, 1998. — Ч. 1. — 310 с.; Ч. 2. — 234 с.

лейкоцитарная формула крови. Все определения проводились согласно методическим указаниям по проведению гематологического обследования рыб*. Количество гемоглобина в периферической крови определяли гемоглобинцианидным методом на гемоглобинометре «Минигем». Для определения лейкоцитарной формулы и наличия патоморфологических изменений мазки крови окрашивали по Май-Грюнвальду (Ро-мейс, 1954) с использованием стандартного красителя производства фирмы «ДИАХИМ-ЦИТОСТЕЙН». Лейкоцитарная формула определялась при помощи микроскопа «Olympus» при увеличении 10 х 40. Общее количество лейкоцитов просчитывали как прямым, так и косвенным методом (расчет на 1000 эритроцитов); результаты подсчетов оказались сопоставимыми. Общее количество тромбоцитов также подсчитывали прямым и косвенным (из расчета на 1000 эритроцитов) путем.

Гистологические срезы толщиной 4-5 мк для морфологических исследований окрашивали стандартизированным гистологическим красителем производства фирмы «ДИАХИМ-ЦИТОСТЕЙН» гематоксилин-эозином по Караччи (Ромейс, 1954). В ходе исследований оценивалось состояние селезенки и эпикардиального кроветворного органа и кроветворного органа, расположенного в кишечнике. Состояние пищеварительной системы оценивали по печени, стадии развития липоидной дегенерации печени определяли по методу площадей (Pohlman, 1939; Факторович, 1956, 1984) и состоянию стенки желудка и кишечника. Просмотр гистологических препаратов и фотографирование проводили на цифровой микроскопической системе «Leica».

Весь материал статистически обработан с использованием пакета Excel.

Результаты и их обсуждение

Зимний период — один из самых сложных периодов в жизни рыб, в том числе и осетровых, особенно молоди на первом году жизни. Зимой взрослые особи амурского осетра держатся в русле, в ямах и почти не питаются; весной (в мае) они начинают движение в верхние участки реки к местам нереста. Питание разновозрастной молоди, включая сеголеток, зимой практически не изучено. Возможно, сеголетки и молодь других возрастов зимой ведут малоподвижный образ жизни и голодают, но не исключено, что они довольно активно питаются при низких температурах. Интерес представляют этология и физиологическое состояние сеголеток амурского осетра во время зимовки (октябрь 2010 г. — май 2011 г.) в садках в условиях тепловодного хозяйства Лучегорской НИС.

Сеголетки в начале зимовки (10.2010 г.). Анализ состояния периферической крови и пищеварительной системы сеголеток амурского осетра проводился непосредственно перед входом в зимовку 2010-2011 гг. (табл. 1).

Согласно полученным данным, у сеголеток, несмотря на высокие значения СОЭ, общее число эритроцитов, общий гемоглобин, содержание гемоглобина в 1 эритроците и концентрация гемоглобина в 1 эритроците были достаточно высокими на фоне низкого гематокрита (табл. 1) и значений объема 1 эритроцита в сравнении с разработанными нормативами для сеголеток осетровых рыб* *. У всей исследованной молоди отмечалось усиление эритропоэза, о чем свидетельствовало увеличение доли юных форм эритроцитов (табл. 1). Однако низкие значения объема 1 эритроцита, общего объема эритроцитов, гематокрита и цветного показателя свидетельствовали о развитии микроцитарной анемии (табл. 1). Помимо этого, наблюдались патоморфологические изменения в клетках красной крови, такие как анизоцитоз, пойкилоцитоз, гипохромазия, кариорексис, кариолизис и гемолиз эритроцитов. Лейкоцитарная формула носила лимфоидный характер (60,6 % лимфоцитов), при этом преобладали малые лимфоциты (табл. 2). В белой крови отмечалось появление пенистых клеток, доля которых превышала таковую моноцитов в 1,35 раза. Помимо лимфоцитов основная доля форменных элементов белой крови приходилась на гранулоциты, в основном на эозинофилы (32,20 %) и базофилы (3,15 %), доля нейтрофилов была незначительной (2,05 %). Индекс ядерного сдвига составлял 7,2 % в

* Сборник инструкций ... (1998).

** То же.

Состояние эритрона у сеголеток амурского осетра в период зимовки

Table 1

Erythron of amur sturgeon fingerling at wintering

Показатель Перед зимовкой (10.2010 г.) Во время зимовки (02.2011 г.) После зимовки (03.2011 г.)

Общее число эритроцитов, млн/мкл 0,800±0,87 0,956±0,05 1,223±0,06

Гемоглобин, г/л 51,80±5,24 42,80±0,45 71,90±4,72

СОЭ, мм/ч 10,60±2,56 5,40±0,91 3,10±0,59

Гематокрит, об% 7,59±2,24 14,42±1,87 24,85±6,03

Объем 1 эритроцита (МСУ), мкм3 99,65±26,12 154,22±19,44 201,75±43,82

Содержание гемоглобина в 1 эритроците (МСН), пг 70,55±8,41 45,03±3,77 59,37±3,92

Концентрация гемоглобина в 1 эритроците (МСНС), г% 121,07±30,99 31,91±3,23 26,06±3,53

Зрелые эритроциты, % 29,30±1,16 65,10±1,54 62,20±1,13

Юные эритроциты, % 40,70±1,16 34,90±1,54 37,80±1,13

Цветной показатель 1,94±0,02 1,35±0,12 1,77±0,59

Общее число тромбоцитов, тыс./мкл 65,00±2,29 107,90±5,37 104,40±3,99

сторону молодых форм (палочкоядерные нейтрофилы и метамиелоциты), т.е. отмечался дегенеративный ядерный сдвиг, который обычно протекает без увеличения общего числа лейкоцитов. Относительное содержание нейтрофилов при этом сдвиге всегда снижено, что наблюдается и в нашем случае (табл. 2). Согласно литературным данным (Бяловский и др., 1999), дегенеративный сдвиг является выражением первичной или быстро наступающей после начального раздражения функциональной недостаточности нейтрофильного лейкопоэза, связанной либо с интоксикацией и развитием токсикозов, в частности кумулятивного политоксикоза, либо с инфекционными заболеваниями.

Таблица 2

Лейкограмма сеголеток амурского осетра в период зимовки

Table 2

Leucogram for amur sturgeon fingerling at wintering

Показатель Перед зимовкой (10.2010 г.) Во время зимовки (02.2011 г.) После зимовки (03.2011 г.)

Общее число лейкоцитов, тыс./мкл 32,20±4,94 42,40±0,45 41,70±0,42

Метамиелоциты, % 0,40±0,15 1,50±0,45 0,50±0,19

Палочкоядерные нейтрофилы, % 1,40±0,32 1,55±0,42 3,00±0,67

Сегментоядерные нейтрофилы, % 0,25±0,11 0,15±0,08 0,25±0,11

Эозинофилы, % 32,20±4,99 16,15±2,40 9,00±4,22

Базофилы, % 3,15±0,42 0,95±0,35 0,85±0,47

Моноциты, % 0,85±0,39 0,80±0,23 0,90±0,21

Лимфоциты (большие), % 20,10±2,01 42,40±2,47 39,75±2,67

Лимфоциты (малые), % 40,50±3,68 34,80±2,47 42,80±2,54

Пенистые клетки, % 1,15±0,99 1,70±0,70 2,95±1,03

Ядерный индекс 7,20±0,85 20,33±0,63 14,00±0,12

Данные гематологического анализа и внешние признаки наличия патологических процессов в организме исследованных сеголеток (белая, мраморная окраска печени с кровоизлияниями, гиперемия кишечника с заполнением его слизеобразным зеленовато-желтым экссудатом) подтверждались данными гистологического анализа пищеварительной системы, в частности печени. В нашем случае на гистологических

препаратах отмечалось нарушение микроциркуляции (рис. 1) и некробиотические изменения в области желчных протоков и мелких кровеносных сосудов (рис. 2). Также наблюдалось развитие липоидной дегенерации средней и тяжелой степени (рис. 3), когда пустоты на месте экстрагированных липидов занимают от 20 до 50 % ткани органа (средняя степень) и более 50 % (тяжелая степень). Патологические изменения в желудке и кишечнике у исследованных рыб были слабо выражены и представляли собой микроэрозии в эпителиальной выстилке кишечника, гиперфункцию секреторных клеток эпителия и нарушения секреции желудочных желез (рис. 4). Наблюдаемая картина типична для кумулятивного политоксикоза (Валова, Хованский, 2009), а также для герпесвирусной инфекции (Щелкунов, 2010). Таким образом, сеголетки амурского осетра вошли в зимовку с наличием тяжелой патологии, которая при неблагоприятных абиотических условиях зимой могла вызвать значительный отход молоди.

Рис. 1. Нарушение микроциркуляции в печеночной паренхиме сеголеток амурского осетра перед зимовкой

Fig. 1. Disturbance of hepatic parenchyma microcirculation for amur sturgeon fingerling before wintering

Рис. 2. Некробиотические изменения в области желчного протока у сеголеток амурского осетра перед зимовкой: а — желчный проток; б — некробиотические изменения

Fig. 2. Necrobiotic changes in biliary duct of amur sturgeon fingerling before wintering: a — biliary duct; б — necrobiotic changes

а

б

Рис. 3. Липоидная дегенерация печени средней и тяжелой степени у сеголеток амурского осетра перед зимовкой: а — средняя степень; б — тяжелая степень

Fig. 3. Lipoid degeneration of the amur sturgeon fingerling liver before wintering: a — medium degeneration; б — severe degeneration

Сеголетки в середине зимовки (02.2011 г.). Оценка физиологического состояния сеголеток амурского осетра проводилась в феврале 2011 г., фактически в середине зимовки. В сравнении с началом зимовки в состоянии эритрона периферической крови у молоди произошли некоторые изменения (см. табл. 1, 2). Практически в 2 раза снизились значения СОЭ (до 5,4 мм/ч против 10,6 мм/ч), что свидетельствует об улучшении физиологического состояния молоди. Также увеличилось общее число эритроцитов в периферической крови на 156 тыс./мкл. Наблюдалось увеличение значений MCV и гематокрита при снижении общего гемоглобина в периферической крови и параметров MCH и MCHC (табл. 1). Одновременно понизился цветной показатель, т.е. развилась гипохромия (Бяловский и др., 1999; Висмонт и др., 2011), что служит показателем

Рис. 4. Нарушение секреции желудочных желез у сеголеток амурского осетра

Fig. 4. Gastric malsecretion of amur sturgeon fingerling

дефицита железа или нарушения его метаболизма. В середине зимовки лейкограмма крови сеголеток амурского осетра стала носить ярко выраженный лимфоидный характер (доля лимфоцитов увеличилась до 77,2 %), при этом соотношение больших и малых лимфоцитов сдвинулось в сторону больших (табл. 2). Удельный вес эозинофилов снизился почти в 2 раза при резком увеличении (в 2,82 раза) индекса ядерного сдвига влево на фоне повышения общего количества лейкоцитов в периферической крови. Также уменьшилась доля моноцитов и базофилов, однако возросла доля пенистых клеток (табл. 2).

При оценке цитоструктуры клеток печеночной паренхимы выявлены незначительные сдвиги в сторону улучшения. Реже встречались особи с тяжелой патологией (липоидной дегенерацией печени тяжелой степени), ткань органа у исследованных рыб имела довольно плотную консистенцию, светлую розово-коричневатую окраску. На препаратах наблюдались нарушения архитектоники органа с разрушением трабекул и клеток печени, замещенных жировыми глыбками и каплями, однако участки полностью разрушенной ткани встречались реже. У всех исследованных особей болезнь носила среднюю степень тяжести. Улучшение состояния печени рыб связано с вынужденным голоданием во время зимовки.

Сеголетки в конце зимовки (03.2011 г.). В конце зимовки у сеголеток амурского осетра произошли изменения в состоянии эритрона: увеличилось общее число эритроцитов, количество общего гемоглобина в периферической крови; снизились по сравнению с данными, полученными перед зимовкой, значения MCH, MCHC, зато произошло увеличение значений MCV и гематокрита. Цветной показатель значительно увеличился в сравнении с предыдущим периодом (середина зимовки) и остался на высоком уровне (табл. 1), что в совокупности с увеличением MCV и низкими значениями MCHC свидетельствует о развитии нормоцитарной анемии. У всех исследованных рыб отмечались патоморфологические изменения клеток красной крови, в частности адгезия эритроцитов («монетные столбики»), анизоцитоз, пойкилоцитоз, гемолиз и кариорек-сис (см. рис. 1). Часто встречались эритроциты с фестончатыми краями, безъядерные эритроциты, тени эритроцитов. Доля лейкоцитов в периферической крови у молоди в конце зимовки несколько увеличилась. У молоди также отмечались изменения в лейкоцитарной формуле крови. Лейкограмма у всех исследованных рыб по окончании зимовки носила ярко выраженный лимфоидный характер на фоне преобладания малых лимфоцитов (табл. 2). Почти в 2 раза (в сравнении с серединой зимовки) снизилась

доля эозинофилов в периферической крови, ее значения достигли верхнего предела нормы для молоди осетровых рыб (9,05 %). При этом значительно уменьшилось значение индекса ядерного сдвига в сторону юных форм нейтрофилов (сдвиг влево) на фоне увеличения доли пенистых клеток (табл. 2).

Состояние пищеварительной системы сеголеток (годовиков) не претерпело значительных изменений за истекший период (от середины зимовки до ее окончания). Так же как и в середине зимовки, цвет печени у исследованных рыб варьировал от бледно-розового (почти белого) с кровоизлияниями до светлого коричневато-розового. При исследовании цитоструктуры печени обнаружены нарушение микроциркуляции и участки некробиотических изменений (рис. 1, 2); липоидная дегенерация печени средней степени тяжести, часто сопровождающаяся патоморфологическими изменениями в эпителиальной выстилке кишечника: микроэрозиями, образованием клостомозов, отеком и отслоением эпителиального пласта слизистой оболочки (рис. 5).

Рис. 5. Патологические изменения в эпителиальной выстилке слизистой оболочки желудка и кишечника: а — отек слизистой; б — микроэрозии и отслоение эпителиального пласта слизистой оболочки

Fig. 5. Pathological changes in epithelium of stomach and intestine mucous tunic for amur sturgeon fingerling: a — edema; б — microerosion and exfoliation

заключение

Изучение влияния негативных факторов окружающей среды на физиологическое состояние рыб, выращиваемых в условиях индустриальных рыбоводных предприятий представляет собой важную практическую задачу. При товарном выращивании молоди в садках большое значение имеет период зимовки, когда рыба при низких температурах воды практически перестает питаться. Благополучность зимовки во многом определяется не только количеством резервных веществ, накопленных рыбой, но и ее иммунофизиологическим статусом в конце вегетационного периода. Согласно полученным нами результатам, у сеголеток амурского осетра в конце вегетационного периода наблюдалось значительное несоответствие физиологического состояния разработанной норме для сеголеток осетровых рыб*. У всех исследованных рыб отмечалась эозинофилия, являющаяся характерным признаком кумулятивного политоксикоза, вызванного поллютантами, либо инфекционного заболевания (Микряков, Лапирова, 1997; Бяловский и др., 1999; Земков, 2003; Рачек и др., 2010; Висмонт и др., 2011). Эозинофилия сопровождалась нарушениями в состоянии эритрона: высокое значение СОЭ и все признаки микроцитарной анемии. В красной крови также наблюдались изменения поверхностной структуры эритроцитов, что является признаком дестабилизации клеточной мембраны и нарушения ядерно-плазменных отношений. Часто встречались безъядерные эритроциты (шистоциты), эритроциты каплевидной и шлемовидной

* Сборник инструкций ... (1998).

формы, эритроциты типа эхиноцитов и акантоцитов (признаки пойкилоцитоза), что свидетельствовало о развитии апластической анемии.

В течение зимовки произошли значительные изменения как в количественном, так и в качественном составе эритрона и белой крови. В конце зимовки наблюдались характерные признаки гипоксии, характеризовавшиеся увеличением общего числа эритроцитов и содержания общего гемоглобина в периферической крови на фоне увеличения гематокрита, которое явно превосходит увеличение первых двух показателей. Последнее в значительной степени обусловлено набуханием циркулирующих эритроцитов, что подтверждается резким (почти в 3 раза) увеличением к концу зимовки MCV. Поскольку возрастание гематокрита наблюдалось еще в середине зимовки, то, следовательно, содержание кислорода в воде (в садке, где содержалась молодь) достигало крайних значений в течение всего зимнего периода. В белой крови отмечалось постепенное снижение доли эозинофилов, к концу зимовки она снизилась в 3,5 раза на фоне увеличения лимфоцитарного пула. Следовательно, можно исключить влияние поллютантов на физиологическое состояние сеголеток амурского осетра. Поскольку в лейкограмме наблюдалось резкое снижение значений сдвига ядерного индекса влево в середине зимовки (почти в 3 раза по сравнению с началом зимовки) с последующим возрастанием в конце зимовки (при повышении температуры воды), можно сделать вывод, что эозинофилия имеет инфекционное начало. Оно подтверждается тем, что ядерный сдвиг влево носит дегенеративный характер, поскольку происходит без увеличения общего числа лейкоцитов и относительное содержание нейтрофилов несколько снижено (Бяловский и др., 1999; Висмонт и др., 2011). Также о наличии инфекционного процесса свидетельствует появление пенистых клеток, доля которых в лейкограмме возрастает к концу зимовки более чем в 2 раза.

Данные гематологического анализа подтверждаются наличием характерных для вирусного заболевания (Щелкунов, 2010) типа герпесвируса сибирского осетра патоморфологических изменений внутренних органов, в частности печени. Несмотря на отсутствие внешних проявлений, у всей исследованной молоди амурского осетра перед зимовкой печень имела характерную белую с кровоизлияниями окраску, при этом ткань печени была рыхлой, мажущей консистенции, на гистологических препаратах наблюдалась картина, характерная для данного заболевания. Еще один из симптомов инфекционного заболевания — гиперемия кишечника и заполнение его слизью характерного зеленовато-желтого цвета с примесью крови. Воздействие низких температур на организм рыб и вынужденное голодание во время зимовки несколько сгладили картину патоморфологических изменений в пищеварительной системе, сняв фактор влияния пищи. Согласно А.М. Щелкунову (2010), активность герпесвируса снижается уже при температуре 15 0С, при более низких температурах воды он практически не выявляется у рыб, следовательно, зимовка снижает вероятность вспышки заболевания. Однако переболевшие рыбы более двух месяцев остаются носителями вируса, поэтому возможность вспышки заболевания весной при повышении температуры воды до 13-17 0С остается. Необходимо отметить, что данный вирус обладает выраженным покровно-тканевым тропизмом (Щелкунов, 2010), т.е. накапливается в тканях кожи, плавников, ротового аппарата и в слизи (наибольшее количество) на поверхности тела рыб. Выделение вируса в воду происходит со слизью, выделениями кишечника, мочой и через жабры. В хозяйство Лучегорской НИС ФГУП «ТИНРО-Центр» он мог быть ввезен с молодью сибирского осетра.

В связи с этой угрозой необходимо проведение профилактических мероприятий, направленных на повышение жизнестойкости молоди амурского осетра, особенно сеголеток и двухлеток. К профилактическим мероприятиям по повышению иммуно-физиологического статуса молоди амурских осетров в возрасте 0+, 1+ относятся: 1) обязательное введение в корма по окончании зимовки витаминов С (1000 мг/кг корма) и Е (800 мг/кг корма); 2) обогащение корма пробиотиком (жидкая или высушенная культура бактерий Lactobacterium acidophilum, 10 % на 1 кг корма).

список литературы

Бяловский Ю.Ю., глобин В.И., Шустова с.А. Анализ гемограмм, теория и практика (учебное пособие). — Рязань : Медуниверситет, 1999. — 84 с.

Валова В.Н., хованский И.Е. Сравнительная характеристика физиологических показателей производителей амурских осетровых рыб из естественных популяций и управляемых систем // Вопр. рыб-ва. — 2009. — Т. 10, № 3(39). — С. 575-589.

Висмонт ф.И., лемешонок л.с., попутников д.м. Патофизиологический анализ гемограмм и оценка типовых нарушений системы крови (учебно-методическое пособие). — Минск : Белорус. мед. ун-т, 2011. — 79 с.

гарин А.В. Зимовка рыб в бассейнах // Рыболовство и рыбоводство. — 1976. — № 1. — С. 10-11.

земков г.В. Морфофункциональные критерии толерантности рыб при кумулятивном токсикозе : автореф. дис. ... д-ра биол. наук. — Астрахань, 2003. — 58 с.

Иванова Н.Т. Атлас клеток крови рыб. — М. : Лег. и пищ. пром-сть, 1983. — 184 с. канаев А.И. Новая технология зимовки рыбы : монография. — М. : Колос, 1976. — 126 с. лилли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия : монография. — М. : Мир, 1969. — 624 с.

микряков В.Р., лапирова Т.Б. Влияние солей тяжелых металлов на состав белой крови молоди ленского осетра Acipenser baeri // Вопр. ихтиол. — 1997. — Т. 37, № 4. — С. 538-542.

пономарев с.В., Болонина Н.В., Богатырева м.м., лапухин Ю.А. Выращивание русского осетра в зимний период // Вестн. АГТУ Сер. Рыб. хоз-во. — 2009. — № 1. — С. 79-81.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Рачек Е.И., Валова В.Н., скирин В.И. и др. Формирование ремонтных и продукционных стад ценных промысловых видов рыб амурского комплекса с целью получения рыбопосадочного материала для восстановления численности природных популяций в бассейне р. Амур : отчет о НИР / ТИНРО-центр. № ГР 01.20.0010949; Инв. № 26952. — Владивосток, 2010. — 211 с. Ромейс Б. Микроскопическая техника : монография. — М. : Изд-во иностр. лит., 1954. —

712 с.

факторович к.А. Алиментарные заболевания у рыб // Биологические основы рыбоводства: паразиты и болезни рыб. — М. : Наука, 1984. — С. 144-159.

факторович к.А. О патогенезе липоидной дегенерации печени у радужной форели // НТБ ВНИИПРХ. — 1956. — № 8. — С. 55-58.

щелкунов А.м. Биологические, физико-химические и молекулярно-генетические свойства герпесвируса сибирского осетра : автореф. дис. ... канд. биол. наук. — Покров, 2010. — 25 с.

Pohlman I.H. Outogenia und mikroskopisher Bau der Leber einiger Fishene // Arch. Nezland der Zoologie. — 1939. — B. 13. — P. 234.

Поступила в редакцию 12.03.13 г.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.