Разработка селективной методики количественного определения тиамина в плазме крови Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Бюллетень медицинских Интернет-конференций (^БЫ 2224-6150)

2013. Том 3. № 3__________________________________________________________________________________________________________607

Ю: 2013-03-27-Т-1987 Тезис

Петухова О.А., Раменская Г.В.

Разработка селективной методики количественного определения тиамина в плазме крови

ГБОУ ВПО Первый Московский ГМУ им. И. М. Сеченова Минздрава России, кафедра фармацевтической и токсикологической химии

Витамин В1 (тиамин) - это эссенциальный микронутриент, он является кофактором ряда ферментов в процессах углеводного обмена. Известно, что нервные клетки получают энергию за счет окисления углеводов, поэтому дефицит тиамина в организме вызывает различные полинейропатии, основными лекарственными средствами терапии которых являются препараты, витаминов группы В. На сегодняшний день на фармацевтическом рынке существует множество препаратов витамина В1 и его производных, включая липофильные и гидрофильные формы. Число регистрируемых препаратов тиамина на территории Российской Федерации постоянно растет, поэтому возникает необходимость проведения исследований биоэквивалентности. Поскольку все производные тиамина метаболизируются до тиамина дифосфата, является возможной разработка универсальной методики количественного определения тиамина в плазме крови. Методики количественного определения тиамина в плазме крови, описанные в литературе на данный момент, являются довольно трудоемкими за счет проведения предварительной дериватизации образцов, а предлагаемые флюорометрический и спектрофотометрический методы детектирования дают не столь высокий предел количественного определения.

Целью нашего исследования была разработка простой, чувствительной и селективной методики количественного определения тиамина в плазме крови методом LC-MS с последующей оценкой биоэквивалентности препаратов, содержащих липофильную и гидрофильную формы тиамина. Анализ проводили методом LC-MS на приборе «Agilent 1200» с масс-спектрометром. В процессе пробоподготовки проводили осаждение белков насыщенным раствором сульфата меди. Условия хроматографирования: в качестве подвижной фазы была выбрана смесь ацетонитрила и 0,05% раствора трихлоруксусной кислоты (рН=2,6) в соотношении 2:98. Скорость потока составляла 0,8 мл/мин. Использовали колонку Agilent XDB-C18 150x2,1 мм; 5 мкм при температуре 300C. Объем вкола составлял 20 мкл. Условия МС - SIM режим при значении m/z=265 и 265,1. Тип ионизации: MM-ES + APCI. Для количественного определения использовался метод абсолютной калибровки.

Разработанная методика количественного определения тиамина в плазме крови методом LC-MS является высокочувствительной и селективной, и может быть использована для определения концентрации тиамина в крови.

Ключевые слова

тиамин, LC-MS, ВЭЖХ

© Бюллетень медицинских Интернет-конференций, 2013

www.medconfer.com