Растворимый внеклеточный домен рецептора HER2/neu при раке молочной железы Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

В одном случае в метастатическом очаге не выявлялась гиперэкспрессия HER2 при наличии ее в первичной опухоли, а в 7 случаях наоборот метастатические очаги демонстрировали возрастание экспрессии HER2 по сравнению с первичным очагом [50].

Метод ИФА в определении внеклеточного домена рецептора HER2. Метод ИФА можно использовать для количественного определения всего белка p185 в опухоли или его циркулирующего растворимого фрагмента в плазме или сыворотке крови. Так, используя моноклональные антитела (МА), направленные на выявление внеклеточного домена HER2, [22] продемонстрировали, что фрагмент рецептора HER2 мигрировал во внеклеточную среду культуры SK-BR-3 клеток РМЖ. Исследование, основанное на применении специфических МА к внеклеточному домену рецептора HER2/neu в комбинации с иммунопреципитацией и Western blot методом, позволило определить, что внеклеточный домен является гликопротеидом с молекулярной массой между 97 и 115 kDa [23].

Описано множество вариантов ИФА теста, используемых для определения sHER2 в плазме и сыворотке крови, однако отсутствие стандартизации этих методов затрудняет сравнение результатов, полученных разными авторами. Например, в трех ранних публикациях [26; 54-55] сообщается об исследованиях с использованием одного специфического коммерческого набора (Triton-Ciba Coming-Chiron), при этом авторы указывают три различных границы нормы - 3, 12 и 30 ед/мл соответственно. В автоматизированном Immuno-1 HER2/neu тесте (Bayer HealthCare, Tarrytown, NY) и наборе Oncogene Science Manual Microtiter Plate HER2/neu test (Oncogene Science, Cambridge, MA) используются схожие мышиные МА к растворимым фрагментам HER2/neu (р97-115 kDa) - NB-3 и TA-1 [22] и определен одинаковый пороговый уровень sHER2 - 15 нг/мл. Отмечена выраженная корреляция между результатами автоматического и ручного методов [56-58].

Проанализировано 20 исследований, проведенных с помощью Triton-Ciba-Chiron теста с одиннадцатью различными показателями нормы от 5 до 30 ед/мл, а также 120 и 450 фмоль/мл, однако в настоящее время данный тест недоступен для рутинного использования. Обнаружено также 5 сообщений, где ИФА проводили с использованием Nicherei assay, 3 исследования с использованием Calbiochem или ORP assay, 3 сообщения об использовании Dianova assay и 2 - Bender assay, однако каких-либо ссылок, описывающих специфику антигена или стандарты их применения, не представлено. Изучение методик Calbiochem, Dianova и Bender продолжается. В некоторых сообщениях по поводу использования тест-системы Bender указывают, что с ее помощью определяется полноразмерный sHER2 (р185 kDa), но это не подтверждено научными исследованиями. В других публикациях с использованием этого же метода сообщается о реакции, направленной на укороченную внеклеточную часть рецептора HER2 (p97-115kDa) [23-24; 26].

КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ sHER2 У БОЛЬНЫХ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

Взаимосвязь концентрации sHER2 в периферической крови и HER2-статуса РМЖ Данные о взаимосвязи концентрации sHER2 в периферической крови

и HER2-CTaTyca опухоли больных РМЖ остаются противоречивыми. Так, в работе [59] представлены данные иммунохимического определения sHER2, который выявлен у 15 % больных РМЖ, при этом не всегда экспрессия рецептора HER2 в опухоли совпадала с обнаружением циркулирующего sHER2 в крови. Сравнительный анализ уровней sHER2 в сыворотке крови и экспрессии рецептора HER2 в опухоли до проводимой терапии у 118 больных РМЖ позволил [60] сделать заключение о том, что повышенные уровни sHER2 были обнаружены только у 16,2 % пациенток с HER2-позитивнми опухолями, а у некоторых больных с не-выявленной ИГХ/FISH методами экспрессией HER2 в ткани новообразования отмечены повышенные уровни sHER^ сыворотке крови.

По данным [61], повышенные уровни sHER2 (>15,2 нг/мл) до операции выявлены в сыворотке крови только у 4,4 % больных, а гиперэкспрессия рецептора HER2 - в 24,2 % опухолей 2862 обследованных больных РМЖ. В то же время [62] показали, что 17-20 % больных РМЖ, чьи опухоли характеризовали как HER2-негативные, имели повышенные уровни sHER2, и предложили использовать ИГХ тест для скрининга HER2-позитивности первичных опухолей, FISH - как дополнительный тест и метод ИФА - для мониторинга этих больных. Также считают, что sHER2 можно использовать в качестве дополнительного маркера при оценке HER2 статуса первичной опухоли больных РМЖ [63].

Авторы, обследовавшие 437 больных РМЖ с HER2-негативными первичными опухолями, обнаружили, что у 69 из них (15,7 %) отмечены повышенные уровни sHER2 [64]. Повышенные уровни sHER2 были выявлены ими и у 45 из 209 пациенток (20,5 %) с неизвестным рецепторным статусом опухоли. Эти авторы также предложили дополнительно к ИГХ методу использовать определение sHER2 в сыворотке крови для повышения чувствительности определения HER2 статуса первичной опухоли. Они рекомендовали использовать определение уровней sHER2, в первую очередь у пациенток, имевших отрицательный или неизвестный HER2 статус первичной опухоли.

В работе [65] исследовали уровни sHER2 и экспрессию рецептора HER2 в опухолях больных РМЖ женщин и мужчин и обнаружили следующие особенности: показатели sHER2 выше у здоровых мужчин, чем у женщин; отмечена возрастная зависимость уровней sHER2 у женщин - у пожилых маркер выше; обнаружена корреляционная связь между уровнем sHER2 и рецептором HER2 в первичной опухоли больных локализованным и метастатическим РМЖ. При пороговом уровне sHER2 30 нг/мл у всех больных РМЖ отмечен HER2-положительный статус первичной опухоли. Эти авторы также настоятельно рекомендуют использовать исследование sHER2 у больных РМЖ в качестве маркера, характеризующего с большей долей вероятности HER2 статус опухоли.

Несомненный интерес представляют также данные, полученные [66] при исследовании дооперационных уровней sHER2 в сравнении с показателями экспрессии рецептора HER2 (ИГХ/FISH) в первичной опухоли у 232 больных ранним РМЖ. Авторы выявили высокие уровни sHER2 в сыворотке крови 38,2 % больных и экспрессию рецептора в опухолях 33,2 %. При этом показатели sHER2 коррелировали с постменопаузаль-ным статусом, высокой степенью дифференцировки опухоли, отрицательным статусом рецепторов стеро-

2180

идных гормонов в опухоли и высокими уровнями маркера СА15-3.

Недавно [67], используя хемилюминисцентный метод, также выявили связь уровня sHER2 у больных РМЖ не только с экспрессией рецептора HER2 в первичной опухоли, но и с прогнозом, а также показателями безрецидивной выживаемости.

Важно подчеркнуть, что во многих исследованиях показано, что больные РМЖ с HER2-негативной опухолью могли иметь повышенные уровни sHER2 при развитии метастатического рака [16-17; 27; 29; 62; 68-74].

Таким образом, многие авторы [14; 75-79] подтверждают предположение о существования группы больных РМЖ, у которых в период прогрессирования болезни (метастазирования) выявляется sHER2, хотя при исследовании первичной опухоли этих пациенток экспрессия рецептора HER2 не была обнаружена.

Механизм повышения уровня циркулирующего sHER2 при образовании метастазов до конца не ясен. Полагают, что в первичной опухоли всегда достаточно HER2+ опухолевых клеток, способных к образованию метастатических очагов, что, вероятно, и приводит к последующему увеличению концентрации sHER2. В связи с этим возникает вопрос о том, можно ли больных, опухоли которых содержат менее 10 % HER2+ клеток по данным ИГХ, считать обладающими отрицательным HER2 статусом и, соответственно, не проводить им анти-HER2-таргетную терапию. Чтобы ответить на этот важный вопрос, должны быть проведены дополнительные клинические исследования, т. к. большое число больных РМЖ может не получить соответствующее лечение. В связи с тем, что экспрессия рецептора HER2, не обнаруженная в первичной опухоли больных РМЖ, может появиться или, наоборот, исчезнуть в клетках метастатической опухоли, некоторые авторы рекомендуют выполнять повторную биопсию этих очагов и исследовать в них экспрессию этого белка для уточнения показаний к таргетной терапии [80-81].

Несмотря на описанные выше многочисленные наблюдения, в настоящее время считается, что только ИГХ и FISH методы являются обязательными для определения статуса HER2/neu в первичной опухоли. В противовес этим методикам, ИФА - это единственный способ проводить мониторинг уровня этого белка после хирургического удаления опухоли у больных РМЖ.

Анализ экспрессии HER2 на циркулирующих опухолевых клетках. В последнее время большой интерес исследователей вызывает анализ экспрессии HER2 не только в первичной опухоли или сыворотке/плазме крови, но и в циркулирующих опухолевых клетках, хотя результаты этих исследований неоднозначны [82-84]. Так, [82] выявили в 32 % случаев несогласующиеся результаты по экспрессии HER2 в первичной опухоли и циркулирующих метастатических клетках РМЖ, а именно: 29 % (8/28) больных с HER2-отрицательными первичными опухолями и HER2-положительными циркулирующими опухолевыми клетками и 42 % (5/12) с противоположным соотношением экспрессии маркеров. Основной и наиболее важный вывод этого исследования состоит в том, что у пациенток с HER2-отрицательным первичным РМЖ при прогрессировании заболевания выявляются HER2-положительные циркулирующие метастатические клетки.

Также рекомендуют исследовать ИГХ методом экспрессию рецептора HER2 на циркулирующих опу-

холевых клетках, поскольку [85] показали, что эффект aHrn-HER2 терапии у больных с выявленной экспрессией маркера в этих клетках достоверно увеличивал длительность безрецидивного периода. При этом авторы отметили, что у 52 % (14/27) больных РМЖ с HER2-позитивной опухолью не выявлена экспрессия рецептора на циркулирующих клетках РМЖ и анти-HER2 лечение этих больных незначимо улучшало медиану безрецидивной выживаемости.

СЫВОРОТОЧНЫЙ sHER2 В ДИАГНОСТИКЕ, МОНИТОРИНГЕ И ПРОГНОЗЕ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

Несмотря на сохраняющиеся методологические проблемы, определение растворимого рецептора sHER2 в сыворотке крови с 1991 г. рекомендовано для использования в практике онкологов CША по решению FDA. Пороговый уровень, по данным большинства исследований, был принят равным 15 нг/мл. Тест используется в мониторинге, особенно при лечении герцептином, больных не только ранними [86-92], но и метастатическими формами РМЖ [12; 17; 26; 57-58; 64; 69; 72; 93-97]. Следует отметить, что большинство исследователей продемонстрировали значительные колебания уровней sHER2, особенно среди больных метастатическим РМЖ. Повышенные концентрации sHER2 выявлены у 10-15 % больных локализованным РМЖ [16; 19-20; 27; 74; 77; 79; 83; 86-88; 90-96; 98-99; 102-103] и у 90 % пациенток с метастатическим РМЖ с HER2-положигельным статусом опухоли [70; 100].

По результатам динамического наблюдения увеличение исходной концентрации sHER2 отмечено у 31 % больных первичным и 62 % - метастатическим РМЖ, и с течением времени от начала заболевания обнаружено постепенное увеличение концентрации маркера [79]. Ранее были выявлены увеличенные концентрации sHER2 только y 8 % больных РМЖ до операции и всего у 3 % в послеоперационном периоде [76]. При обнаружении рецидива РМЖ повышение sHER2 отметили в 59 % случаев, при этом самые высокие уровни маркера обнаружены у 68 % больных с отдаленными метастазами по сравнению с группами больных с местным рецидивом и с региональными метастазами (19 %). Эти результаты совпадают с данными [54], также отметивших достоверное повышение маркера у больных с рецидивом РМЖ по сравнению с пациентками в стадии ремиссии.

Проведен анализ уровней sHER2 y 256 больных РМЖ I-III стадий и обнаружена связь этого показателя с основными клинико-морфологическими характеристиками заболевания [86]. Несмотря на то, что превышение порогового уровня 15 нг/мл было зафиксировано только у 23 (9 %) больных, авторам удалось показать, что высокие концентрации sHER2 были достоверно ассоциированы с гистологическим строением опухоли, стадией заболевания, негативным статусом опухоли по рецепторам эстрогенов (РЭ) и прогестерона (РП). Кроме того, многофакторный анализ свидетельствовал о том, что высокие уровни маркера могут служить независимым неблагоприятным прогностическим фактором безрецидивной выживаемости.

sHER2 и ранний рецидив РМЖ. В одном из первых исследований этой проблемы [101] провели анализ клинической значимости определения sHER2, РЭА и CA 15-3 у больных с ранним рецидивом, обследовав

2181

200 первичных больных РМЖ без каких-либо проявлений заболевания после первичной терапии. Срок наблюдения за пациентками колебался от 1 до 4 лет. У 28 % из 89 пациенток, у которых впоследствии развились отдаленные метастазы, отмечено превышение нормальных уровней 8ИБК2, показатели РЭА были повышены в 30 % случаев, СА15-3 - в 47 %. Среднее время до обнаружения метастазов составило 4,5 месяца при повышенном уровне 8БЕК2, 4,8 месяца при повышении СЕА и 4,9 месяца при повышенном СА15-3. При этом информативность показателей зависела от места развития рецидива: наиболее низкой она была при выявлении местного рецидива, а самые высокие уровни маркеров обнаружены у пациенток с отдаленными висцеральными метастазами РМЖ. После исключения из анализа пациенток с местными рецидивами чувствительность 8НЕК2 составила 31 %, а комбинированная чувствительность с участием всех трех маркеров - 76 %. В другой работе [101] продемонстрирован худший прогноз и более частое выявление метастазов, чем местных рецидивов (45,5 и 9,2 % соответственно) у больных РМЖ с высокими исходными уровняи 8БЕК2. Эти данные подтвердили работы других авторов [54; 57]. Вместе с тем [102] сообщили о незначительной ценности определения СЕА, СА 15-3 и 8НЕК2 в комплексе с другими сывороточными тестами.

Выявлены более высокие уровни 8НЕК2 в плазме крови 46 % больных метастатическим РМЖ по сравнению с группой контроля, а также достоверное уменьшение медианы общей выживаемости и интервала до прогрессирования после высокодозной терапии с пак-литакселом и пересадкой костного мозга (15,9 и 8,6 мес. соответственно) у больных с высоким уровнем 8НЕК2 по сравнению с группой пациенток с низкими уровнем маркера (29,8 и 13,0 мес. соответственно) [103]. Другие исследователи также выявили связь высоких уровней 8ИБК2 с неблагоприятным прогнозом метастатического РМЖ: медианы общей выживаемости больных с высоким и низким уровнем маркера составили соответственно 17,1 и 29 мес. [104].

В исследовании [105] представлен анализ уровней 8НЕК2 у 240 больных метастатическим РМЖ, получавших в первой линии гормонотерапию тамоксифе-ном или летрозолом. Исходные уровни 8ИБК2 у всех пациенток не превышали 15 нг/мл, однако при про-грессировании у 25 % больных, принимавших тамок-сифен, и у 26 % больных, леченных летрозолом, уровни маркера превысили эту границу, и выживаемость этих пациенток была достоверно ниже, чем в группе с неизменившимся уровнем 8ИБК2.

В ряде исследований обнаружено, что повышенные уровни 8ИБК2 могут выявляться за 3-24 месяца до клинических признаков рецидива заболевания и являются ранним индикатором прогрессирования заболевания [16-17; 64; 79; 98].

Персистирующие [13; 97; 105-107] или не снижающиеся уровни 8ИБК2 [108] также могут свидетельствовать о прогрессировании болезни. При этом больные РМЖ с выявленным рецидивом и постоянно высокими уровнями 8ИБК2 (>15 нг/мл) имеют неблагоприятный прогноз выживаемости, по сравнению с пациентками, у которых 8ИБК2 все время был <15 нг/мл. Больные, у которых в период выявления рецидива показатели 8ИБК2 с уровней <15 нг/мл перешли в зону концентрации маркера >15 нг/мл, также имели низкие показатели выживаемости. По данным некоторых ав-

торов, пациентки, у которых исходно высокие уровни sHER^ процессе лечения снижались, имели достоверно лучшую выживаемость [97; 105-106].

При обследовании 152 больных РМЖ [109] выявили повышенные уровни sHER2 в 18 % наблюдений до лечения и у 37 % пациенток при развитии рецидива. При этом медианы выживаемости при развитии метастазов были статистически более высокими в группе пациенток с низким уровнем sHER2 (18 мес.), чем с высоким (8 мес.).

По данным [100], у 109 из 123 (90 %) больных метастатическим РМЖ c амплифицированным геном HER2 обнаружены высокие уровни sHER2 (>15 нг/мл), и у 83 % пациентов с опухолевой прогрессией происходили значительные изменения концентрации растворимого рецептора. Авторы подтверждают тот факт, что sHER2 является хорошим маркером в предсказании рецидива, а пациентки с высоким исходным уровнем маркера имеют больший риск прогрессирования болезни. Большинство исследователей полагают, что мониторинг sHER2 следует считать клинически информативным и важным критерием в выявлении ранних признаков рецидива у 20-30 % больных РМЖ с экспрессией HER2 в опухоли. Другие исследователи полагают, что базальные уровни sHER2 следует считать наиболее важным прогностическим индикатором, и больные РМЖ с исходными уровнями sHER2 >15 нг/мл чаще склонны к развитию возврата болезни по сравнению с теми, кто имел значения маркера <15 нг/мл.

Анализ уровней sHER2 в сыворотке крови 701 больной РМЖ I-III стадии до и после лечения показал, что уровень маркера до лечения тесно связан с контра-латеральным РМЖ, развитием отдаленных метастазов в легких и печени, а также с показателями безрецидивной и общей выживаемости [110]. Достоверное снижение показателей общей выживаемости отмечено, в частности, у больных РЭ и РП-отрицательным РМЖ с повышенным сывороточным уровнем sHER2. Интересно, что по данным многофакторного анализа единственным независимым фактором прогноза безрецидивной и общей выживаемости обследованных больных РМЖ оказался только уровень sHER2 в послеоперационном периоде. На основании полученных данных авторы исследования рекомендуют более агрессивные схемы адьювантной терапии пациенткам с повышенным уровнем sHER2 [110].

По данным [98], при увеличенных концентрациях sHER2 в сыворотке крови больных РМЖ перед операцией достоверно повышалась вероятность последующего метастатического поражения легких и печени. На небольшой группе 89 больных [111] показали, что высокие уровни сывороточных маркеров sHER2, BCL2, CA 15-3, РЭА у больных РМЖ свидетельствуют об «агрессивном поведении» опухоли и ассоциированы с быстрым рецидивом заболевания.

Рецидив РМЖ у больных, у которых отмечено изменение уровней sHER2 на фоне лечения, выявлен как у пациенток, получавших транстузумаб [69; 87-88; 9194; 96; 112-113], так и у больных, леченных лапатини-бом [114].

C помощью многофакторного анализа [115] показали, что сывороточные уровни sHER2, S100P, CA15-3 могут служить независимыми показателями неблагоприятного прогноза у больных метастатическим РМЖ, однако они не выявили четкой связи уровней sHER2 с экспрессией рецептора HER2 в первичной опухоли и

2182

объяснили это гетерогенностью метастатического потенциала клеток РМЖ, а следовательно, и их способности продуцировать этот белок.

8НБК2 В ОЦЕНКЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ РМЖ К ЛЕКАРСТВЕННОЙ ТЕРАПИИ

Гормонотерапия. Хорошо известно, что больные РМЖ с НЕК2-положительными опухолями слабо реагируют на гормонотерапию, независимо от статуса рецепторов стероидных гормонов [10]. Данные, касающиеся влияния исходных уровней растворимого 8НЕК2 на эффективность гормонотерапии, не столь многочисленны.

По данным [116], только 20,7 % больных с высоким (>15 нг/мл) уровнем 8НЕК2 в сыворотке крови отвечали на вторую линию гормонотерапии (прогестины, мегейс, ингибитор ароматазы фадразол), тогда как среди пациенток с низким уровнем маркера эффективность этого лечения составила 40,9 %. Авторы также показали, что пациентки с низким уровнем растворимого рецептора лучше отвечали на летрозол, чем на тамоксифен, однако у больных с высоким уровнем 8НБК2 достоверного различия в уровне ответа на лет-розол или тамоксифен не было. У пациенток с высоким 8НЕК2 отмечена более короткая продолжительность ответа на лечение и низкая общая выживаемость, чем у больных с низким уровнем 8НЕК2 перед началом лечения. Также [117] значительно реже выявляли ответ на лечение дролоксифеном у больных РМЖ с высокими уровнями 8НЕК2 (9 %), чем у пациенток с низкой концентрацией маркера (56 %). Такое соотношение эффективности соответствует данным, полученным при оценке НЕК2-статуса опухоли ИГХ методом [118].

Выявили подгруппу больных РМЖ с сывороточной концентрацией 8НБК2 >15 нг/мл, которые во время развития метастатической болезни имели низкий ответ на терапию первой линии независимо от того, использовали ли гормоно- или химиотерапию [79]. Эти пациентки имели и более низкие показатели общей выживаемости. Вместе с тем, по данным [119], повышенные в 35-40 % наблюдений уровни 8НЕК2 у больных метастатическим РМЖ не оказывали какого-либо влияния на эффективность эндокринной или антрациклин-содержащей терапии.

Проведен совместный анализ уровней СА15-3 и 8НБК2 в сыворотке крови 566 пациенток с гормоно-чувствительным метастатическим РМЖ, получавших гормонотерапию второй линии (мегейс или фадрозол) [104]. У 30 % больных выявлены повышенные концентрации 8НБК2, у 60 % пациенток СА15-3 превышал нормальные значения. Обнаружено, что клинический эффект (полный ответ + частичный ответ + стабилизация >24 недель) от проводимой эндокринной терапии был достоверно снижен у пациенток с высоким уровнем 8НБК2. Авторы полагают, что концентрация 8НЕК2 может служить маркером, позволяющим предсказывать и прогнозировать ответ на гормонотерапию у больных метастатическим РМЖ.

В целом, анализ эффективности гормонотерапии у 1273 больных метастатическим РМЖ, проведенный различными исследовательскими группами, продемонстрировал, что пациентки с концентрациями 8НЕК2 >15 нг/мл резистентны к проводимому лечению как первой, так и второй линии [116; 120].

Химиотерапия. В одной из первых работ по исследованию клинической значимости sHER2 при химиотерапии больных метастатическим РМЖ показано, что больные РМЖ с поражением периферических лимфоузлов и высокими уровнями sHER2 в сыворотке крови хуже реагировали на адьювантную терапию по схеме CMF, чем те, у которых не было отмечено повышения маркера [121]. Показано, что высокие уровни данного маркера в крови тесно связаны с резистентностью опухоли к паклитакселу и доксорубицину, ассоциированы с экспрессией рецептора HER2 в первичной опухоли и не связаны с менопаузным статусом пациентки, стадией заболевания и количеством метастазов РМЖ [122]. По данным этих авторов, продолжительность клинического ответа была значительно короче у больных с повышенным уровнем sHER2 (>15 нг/мл), чем у пациентов с нормальными уровнями маркера: 7,5 и 11 мес. соответственно.

Во II фазе клинических испытаний еженедельного назначения паклитаксела продемонстрировали, что уровень sHER2 является фактором, предсказывающим длительность ответа на проводимое лечение [123]. Анализ связи уровней sHER2 с эффективностью первой линии химиотерапии метастатического РМЖ по схемам эпирубицин + циклофосфамид (ЕС) и эпируби-цин + паклитаксел (ЕТ) провели [124]. Авторы показали, что пациентки с уровнем sHER2 >15 нг/мл имели достоверно меньшую общую выживаемость, чем больные с низким уровнем маркера при лечении по схеме ЕС, при этом снижение уровня sHER2 к окончанию 3 цикла достоверно коррелировало с чувствительностью к проводимой терапии. При лечении по схеме ЕТ подобной закономерности не выявлено.

Таргетная и комбинированная терапия. Особый интерес представляет роль растворимого sHER2 в оценке чувствительности и эффективности таргетных препаратов, направленных непосредственно на подавление активности рецептора HER2, в первую очередь герцептина (трастузумаба). Герцептин обладает высоким сродством с внеклеточным доменом рецептора HER2 и ингибирует пролиферацию клеток опухоли с гиперэкспрессией этого рецептора. Результаты крупного мультицентрового исследования III фазы показали, что герцептин, совместно с химиотерапией, может приводить к улучшению результатов лечения у больных метастатическим РМЖ с гиперэкспрессией HER2 по сравнению с больными, принимавшими стандартную терапию. Включение герцептина в стандартные схемы лечения больных РМЖ первой линии химиотерапии приводило к значительному увеличению показателей безрецидивной выживаемости, длительности и выраженности ответа на лечение и улучшению общей выживаемости больных [125]. Значительный интерес представляют совместные рекомендации Американского общества клинических онкологов и колледжа американских патологов по использованию ингибиторов рецептора HER2 герцептина и лапатиниба в схемах полихимиотерапии у больных РМЖ, которые вышли в 2014 г. [126].

Общепринятым методом оценки чувствительности РМЖ к герцептину является использование иммуноги-стохимического (ИГХ) окрашивания опухолевых тканей на белок HER2/neu с последующей оценкой амплификации гена HER2 с помощью флуоресцентной гибридизации in situ (FISH), которая проводится в

2183

спорных случаях, когда ИГХ метод не дает строго положительного или строго отрицательного ответа. Подобный подход хорошо зарекомендовал себя в лечении больных РМЖ, позволяя обеспечить максимальную эффективность герцептина и избежать неоправданных затрат и осложнений [127]. Возможность использования определения растворимого sHER2 для оценки чувствительности опухоли к герцептину пока четко не доказана.

Представлены данные по лечению 30 больных метастатическим РМЖ комбинацией доксетаксела и гер-цептина (у всех пациенток выявлена гиперэкспрессия рецептора HER2 в первичной опухоли), при этом пациентки были разделены на группы с высокими и низкими уровнями sHER2/neu в сыворотке крови [93]. Медиана концентрации маркера до лечения составила 41,9 нг/мл (интервал 7,1-666 нг/мл). У 21 пациентки (70 %) уровень sHER2 превышал нормальный уровень (>15 нг/мл). Эти больные имели самый высокий ответ на терапию герцептином (76 %), и только 33 % женщин с более низкими концентрациями sHER2 ответили на лечение. Для сравнения, на терапию ответили 67 % пациенток с EER2-положительной опухолью по данным FISH, а полный эффект был достигнут у 63 % этих больных. Авторы также сообщают, что последовательные изменения концентраций sHER2 коррелировали с выраженностью клинического ответа на лечение гер-цептином и доцетакселом.

При исследовании раннего РМЖ [92] показали, что 3-летняя выживаемость больных с КЕК^-позитивными опухолями, получавших герцептин и имевших в период выявления рецидива уровень sHER2 >15 нг/мл, составила 51 %, тогда как в группе пациенток с уровнями sHER2 <15 нг/мл она равнялась 77 %. Авторы полагают, что высокий исходный уровень sHER2 может служить биологическим маркером, ассоциированным с ухудшением безрецидивной выживаемости больных ранним РМЖ, получавших герцептин.

Наиболее высокие показатели в оценке чувствительности ответа больных метастатическим РМЖ на лечение герцептином и таксолом отмечены при комплексном определении 3 маркеров - sHER2, CA15-3 и РЭА [128]. На лечение ответили 6 из 18 больных с низкими (<15 нг/мл) уровнями sHER2. В то же время выраженный эффект отмечен у 30 из 36 больных (83 %) с повышенным уровнем sHER2 (средний уровень составил 344 нг/мл), и у большинства из них продемонстрировано снижение этого показателя в процессе лечения до нормы. При комбинации тестов объединенная чувствительность ответа на лечение составила 76 %, а индивидуальная составила для sHER2 - 67 %, для CA 15-3 - 54 %, для РЭА - 43 %.

Роль уровней sHER2 в предсказании результатов терапии герцептином у пациенток с метастатическим РМЖ пытались определить также [129]. При этом главным параметром в оценке эффективности был выбран показатель времени до прогрессирования. Оказалось, что концентрация sHER2 в плазме крови является фактором, прогнозирующим течение заболевания у 80 % больных, и все пациентки с низкими уровнями растворимого рецептора отвечали на терапию. При высоких уровнях sHER2 в плазме положительный клинический эффект наблюдали только у 6 из 10 пациенток. Авторы полагают, что концентрация sHER2 в плазме крови может быть ранним фактором, предсказывающим ответ на терапию герцептином.

Представлены результаты лечения транстузумабом 48 больных РМЖ с НЕК2-позитивным статусом опухоли [113]. Значительное снижение 8НЕК2 (>20 %) коррелировало с отсутствием прогрессии РМЖ у 20 из 21 больной, в то время как сохранение исходных уровней 8НЕК2 на фоне лечения сопровождалось прогрессиро-ванием процесса у 40 из 44 больных. При этом 18 пациенток без рецидива после лечения транстузумабом имели медиану 8НЕК2 10,5 нг/мл, а 13 больных с рецидивом РМЖ - 20,1 нг/мл. У больных РМЖ, которые умерли от рецидива, медиана 8НЕК2 незадолго до смерти составила 232 нг/мл. Авторы сделали заключение, что снижение концентрации 8НЕК2 у больных РМЖ в начале лечения может свидетельствовать о последующей эффективности транстузумаба и, наоборот, неснижающиеся уровни 8НЕК2 указывают на резистентность к анти-НЕК2 терапии. Кроме того, по их мнению, уровни 8НЕК2 около 1000 нг/мл указывают на то, что стандартные дозы транстузумаба, которые эффективны у больных с низкими уровнями 8НЕК2, могут быть недостаточно эффективными у этой категории пациенток.

Проведен многофакторный анализ результатов лечения 307 больных метастатическим РМЖ, леченных транстузумабом, с мониторированием уровней 8НЕК2 в течение первых 3 месяцев от начала терапии [112]. У 191 (62 %) из 307 больных отмечено значительное снижение уровней 8НЕК2 (более чем на 20 %), у 116 (38 %) - его уровни не изменились. Объективный ответ и более длительный период до прогрессирования болезни отмечен у 57 % пациенток, которые имели снижение 8НЕК2, и только у 28 % пациенток без снижения уровня маркера. Время до прогрессирования равнялось в этих группах, соответственно, 320 и 180 дней, а выживаемость - 989 и 593 дня.

Таким образом, повышенные уровни 8НЕК2, а также последующая динамика этого показателя могут служить фактором, предсказывающим ответ РМЖ на терапию герцептином.

Известно о первичной резистентности (20-30 %) и о развитии в первый год лечения вторичной резистентности (15 %) больных РМЖ к транстузумабу [130-131], поэтому своевременное выявление резистентных пациенток имеет большое клиническое значение, и в этой ситуации у больных очень важно исследовать 8НЕК2. Ряд исследователей высказывают предположение о том, что снижение концентрации 8НЕК2 в первые 3090 дней от начала лечения свидетельствует об эффективности таргетной терапии транстузумабом и, наоборот, повышение уровня маркера в сыворотке крови на фоне таргентной терапии указывает на ее неэффективность и служит показанием к назначению новых НЕК2-ингибиторов [112-114].

При развитии резистентности к трунстузумабу в настоящее время рекомендуют новый блокатор рецептора НЕК2 лапатиниб (комплексный ингибитор внутренних тирозинкиназ НЕЮ и НЕК2), который используют в лечении НЕК2-положительного метастатического и прогрессирующего РМЖ. Лечение лапатини-бом (в дозе 1250 и 1500 мг 1 раз в день) больных РМЖ с ШБ-1У стадиями показало высокую его эффективность. По мнению большинства химиотерапевтов, оправданным также является использование лапатиниба в комбинированных схемах химиотерапии у больных ранним и метастатическим РМЖ.

2184

При оценке эффективности лечения больных РМЖ лапатинибом в зависимости от концентрации sHER2 показано, что клинический ответ на проводимую терапию коррелировал со снижением уровня растворимого рецептора через 4 и 8 недель от начала лечения. В 2011 г. опубликована работа [114] (Hershey Medical Center) в сотрудничестве с учеными фирмы Glaxo Smith Kline по изучению уровней sHER2 и эффективности монотерапии лапатинибом у больных РМЖ. По их данным, у 79 % пациенток с HER2-позитивным (ИГХ и FISH) метастатическим РМЖ и повышенными (>15 нг/мл) исходными уровнями sHER2 отмечена ассоциация с низкими показателями общей, но не безрецидивной выживаемости [114].

Выявлено различие в медианах sHER2 у 1902 больных РМЖ c HER2-позитивными и HER2-негативными опухолями (подтвержденными FISH методом), которые составили 25,1 и 10,1 нг/мл соответственно [132]. При этом высокие уровни sHER2 были ассоциированы с коротким периодом до прогрессирования в группе пациенток, не получавших лапатиниб.

В отличие от большого количества публикаций, которые иллюстрируют клиническую ценность тестирования sHER2, в ряде работ представлены отрицательные выводы относительно клинического значения измерения этого специфического маркера у больных HER2-положительным РМЖ [133-135]. Все три группы авторов согласились с руководящими принципами ASCO 2007 [136], но не рекомендовали выполнять тестирование sHER2 в клинических исследованиях. Обоснованием этому послужил анализ ранее представленных публикаций, в которых, как полагают оппоненты, проведенные анализы не были стандартизованными или не были подтверждены приемлемыми диагностическими протоколами [134-135].

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Многочисленные клинические исследования, проводимые на протяжении последних 20 лет, выявили взаимосвязь уровней растворимого внеклеточного домена рецептора HER2 (sHER2) с особенностями клинического течения РМЖ и эффективностью проводимого лечения, что позволяет обеспечить эффективный способ мониторинга ИЕК2-положительных пациентов, а также выявить тех больных РМЖ, которые неправильно классифицированы как HER2-отрицательные. Показано, что для HER2-положительных пациентов повышение уровня sHER2 является ранним индикатором прогрессирования рака, в то время как значительное его снижение в первые 12-16 недель после терапии - ранний биохимический маркер эффективности проводимой терапии. Отсутствие выраженного снижения sHER2 в этот период времени свидетельствует о неэффективности лечения, и эти больные могут воспользоваться дополнительной анти-ИЕК2 таргетной терапией или адъювантной химиотерапией по усмотрению врача.

Базовые исходные уровни sHER2 >15 нг/мл у больных метастатическим РМЖ указывают на неблагоприятный прогноз заболевания и более короткий безрецидивный период, а переход уровней маркера от >15 нг/мл до <15 нг/мл является хорошим показателем эффективности лечения, по сравнению с пациентками с постоянно повышенным уровнем данного маркера. Кроме того, в группе больных с HER2-отрицательным статусом первичной опухоли периодическое исследо-

вание уровней sHER2 наряду с ИГХ/FISH методами анализа метастатических очагов помогают выявить НЕК2-положительных пациенток, изначально классифицированных как НЕК2-отрицательные, или тех больных, для которых исходный статус HER2 неизвестен. После этого больным РМЖ с повышенным уровнем sHER2 (>15 нг/мл) необходимо повторно провести ИГХ^^Н-анализ метастатазов, чтобы определить необходимость проведения ИЕК2-таргетной терапии.

Периодическое тестирование всех больных РМЖ на выявление повышенных уровней sHER2 может дать ценную информацию для разделения пациентов на две группы ИЕК2-положительных и ИЕК2-отрицательных, что может служить ранним предупреждающим знаком для онкологов с целью возможного выбора альтернативной терапевтической стратегии.

Таким образом, анализ приведенной литературы позволяет утверждать, что в большинстве работ, посвященных изучению sHER2 при РМЖ, представлены обнадеживающие результаты. Перспективным следует считать определение sHER2 в сыворотке крови больных РМЖ для прогноза, предсказания ответа на анти-HER2 терапию, а также в качестве маркера, позволяющего контролировать клиническое течение заболевания.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Campbell L.L., PolyakK. Breast tumor heterogeneity: cancer stem cells or clonal evolution? // Cell Cycle. 2007. V. 6 (19). P. 2332-2338.

2. Duru N., Candas D., Jiang G., Li J.J. Breast cancer adaptive resistance: HER2 and cancer stem cell repopulation in a heterogeneous tumor society // J. Cancer Res. Clin. Oncol. 2014. V. 140 (1). P. 1-14.

3. Свердлов Е.Д. Многомерная сложность рака. Нужны простые решения // Биохимия. 2016. Т. 81. № 7. C. 962-970.

4. Кушлинский Н.Е. Молекулярно-биологические признаки злокачественных опухолей // Молекулярная медицина. 2015. № 2. С. 1318.

5. Hanahan D., Weinberg R.A. The hallmarks of cancer. The next generation // Cell. 2011. V. 144 (4). P. 646-674.

6. Кушлинский Н.Е., НемцоваМ.В. Молекулярные механизмы опухолевого роста // Патогенез. 2014. Т. 12. № 1. С. 4-14.

7. Pauletti G., Godolphin W., Press M.F., Slamon D.J. Detection and quantitation of HER-2/neu gene amplification in human breast cancer archival material using fluorescence in situ hybridization // Oncogene. 1996. V. 13 (1). P. 63-72.

8. Немцова М.В., Кушлинский Н.Е. Научный и клинический аспекты опухолевой клональности // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2014. Т. 158. № 8. С. 213-220.

9. Aaronson S.A. Growth factors and cancer // Science. 1991. V. 254 (5035). P. 1146-1153.

10. Герштейн Е.С., Кушлинский Н.Е. Факторы роста, их рецепторы и нижележащие сигнальные белки: от эксперимента к клинике // Молекулярный канцерогенез. М.: АБВ-пресс, 2016. 416 с.

11. Coussens L., Yang-Feng T.L., Liao Y.-C., Chen E., Gray A., McGrath J. et al. Tyrosine kinase receptor with extensive homology to EGF receptor shares chromosomal location with neu oncogene // Science. 1985. V. 230 (4730). P. 1132-1139.

12. Carney W.P., Leitzel K., Ali S., Neumann R., Lipton A. HER-2/neu diagnostics in breast cancer // Breast Cancer Res. 2007. V. 9 (3). P. 207.

13. Carney W.P., Thiel R. Serum HER-2 levels as a predictor of clinical outcome in metastatic breast cancer (MBC) patients treated with trastuzumab-based therapies // Ann. Oncol. 2013. V. 24 (Supp. l3). P. iii32-iii33.

14. Baric M., Kulic A., Sirotkovic-Skerlev M., Dedic Plavetic N., Vidovic M., Horvatic-Herceg G., Vrbanec D. Circulating Her-2/neu extracellular domain in breast cancer patients-correlation with prognosis and clinicopathological parameters including steroid receptor, Her-2/neu receptor coexpression // Pathol. Oncol. Res. 2015. V. 21 (3). P. 589595.

15. Ross J.S., Gray G.S. Targeted therapy for cancer: the HER-2/neu and Herceptin story // Clin. Leadersh Manag. Rev. 2003. V. 17 (6). P. 333340.

16. Molina R., Escudero J.M., MuñozM., Augé J.M., Filella X. Circulating levels of HER-2/neu oncoprotein in breast cancer // Clin. Chem. Lab. Med. 2012. V. 50 (1). P. 5-21.

2185

17. S0rensen P.D., Jakobsen E.H., Madsen J.S., Petersen E.B., Andersen R.F., 0stergaard B., BrandslundI. Serum HER-2: sensitivity, specificity, and predictive values for detecting metastatic recurrence in breast cancer patients // J. Cancer Res. Clin. Oncol. 2013. V. 139 (6). P. 1005-1013.

18. Brandt-Rauf P.W., Pincus M.R., Carney W.P. The c-erbB-2 protein in oncogenesis: molecular structure to molecular epidemiology // Crit. Rev. Oncog. 1994. V. 5 (2-3). P. 313-329.

19. Abu-Khalaf M.M., Harris L. The prognostic and predictive values of circulating HER-2/neu extracellular domain in patients with metastaticbreast cancer // Breast Cancer Res. Treat. 2009. V. 114 (3). P. 513-515.

20. Miles D. W. Update on HER-2 as a target for cancer therapy: herceptin in the clinical setting // Breast Cancer Res. 2001. V. 3 (6). P. 380-384.

21. Nunes R.A., Harris L.N. The HER2 extracellular domain as a prognostic and predictive factor in breast cancer // Clin. Breast Cancer. 2002. V. 3 (2). P. 125-135.

22. McKenzie S.J., Marks P.J., Lam T., Morgan J., Panicali D.L., Trimpe K.L., Carney W.P. Generation and characterization of monoclonal antibodies specific for the human neu oncogene product, p185 // Onco-gene. 1989. V. 4 (5). P. 543-548.

23. Zabrecky J.R., Lam T., McKenzie S.J., Carney W. The extracellular domain of p185 is released from the surface of human breast carcinoma cells, SK-BR-3 // J. Biol. Chem. 1991. V. 266 (3). P. 1716-1720.

24. Carney W.P., Hamer P.J., Petit D., Retos C., Greene R., Zabrecky J.R., Mckenzie S., Hayes D., Kufe D., Delellis R., Naber S., Wolfe H. Detection and quantitation of the human neu oncoprotein // J. Tumor Marker Oncol. 1991. V. 6. P. 53-72.

25. Carney W.P., Neumann R., Lipton A., Leitzel K., Ali S., Price C.P. Monitoring the circulating levels of the HER2/neu oncoprotein in breast cancer // Clin. Breast Cancer. 2004. V. 5 (2). P. 105-116.

26. Leitzel K., Teramoto Y., Sampson E., Mauceri J., Langton B.C., Demers L. et al. Elevated soluble c-erbB-2 antigen levels in the serum and effusions of a preparation of breast cancer patients // J. Clin. Oncol. 1992. V. 10. P. 436-443.

27. Kong S.Y., Nam B.H., Lee K.S., Kwon Y., Lee E.S., Seong M.W., Lee D.H., Ro J. Predicting tissue HER2 status using serum HER2 levels in patients with metastatic breast cancer // Clin Chem. 2006. V. 52 (8). P. 1510-1515.

28. Quaranta M., Daniele A., Coviello M., Savonarola A., Abbate I., Venneri M.T., Paradiso A., Stea B., Zito A., Labriola A., Schittulli F. c-erbB-2 protein level in tissue and sera of breast cancer patients: a possibly useful clinical correlation // Tumori. 2006. V. 92 (4). P. 311317.

29. Fehm T., Becker S., Duerr-Stoerzer S., Sotlar K., Mueller V., Wallwiener D., Lane N., Solomayer E., Uhr J. Determination of HER2 status using both serum HER2 levels and circulating tumor cells in patients with recurrent breast cancer whose primary tumor was HER2 negative or of unknown HER2 status // Breast Cancer Res. 2007. V. 9 (5). P. R74.

30. Lamy P.-J., Guachez A.-S., Tse C. The HER2 shedding and its consequences in breast cancer // HER2 and Cancer, ed. S.I. Williams. N. Y.: Nova Science Publ., Inc, 2011.

31. Witters L., Scherle P., Friedman S., Fridman J., Caulder E., Newton R., Lipton A. Synergistic inhibition with a dual epidermal growth factor receptor/HER-2/neu tyrosine kinase inhibitor and a disintegrin and metalloprotease inhibitor // Cancer Res. 2008. V. 68 (17). P. 70837089.

32. Codony-Servat J., Albanell J., Lopez-Talavera J.C., Arribas J., Basel-ga J. Cleavage of the HER2 ectodomain is a pervanadate-activable process that is inhibited by the tissue inhibitor of metalloproteases-1 in breast cancer cells // Cancer Res. 1999. V. 59 (6). P. 1196-1201.

33. Molina M.A., Codony-Servat J., Albanell J., Rojo F., Arribas J., Baselga J. Trastuzumb (Herceptin), a humanized anti-HER-2/neu receptor monoclonal antibody inhibits basal and activated HER2 ectodomain cleavage in breast cancer cells // Cancer Res. 2001. V. 61 (12). P. 4744-4749.

34. Vazquez-Martin A., Fernandez-Real J.M., Oliveras-Ferraros C., Navarrete J.M., Martin-Castillo B., Del Barco S., Brunet J., Menendez J.A. Fatty acid synthase activity regulates HER2 extracellular domain shedding into the circulation of HER2-positive metastatic breast cancer patients // Int. J. Oncol. 2009. V. 35 (6). P. 1369-1376.

35. Schaller G., Evers K., Papadopoulos S., Ebert A., Buhler H. Current use of HER2 tests // Ann. Oncol. 2001. V. 12 (Suppl. 1). P. S97-S100.

36. Price-Schiavi S.A., Jepson S., Li P., Arango M., Rudland P.S., Yee L., Carraway K.L. Rat Muc4 (sialomucin complex) reduces binding of an-ti-ErbB2 antibodies to tumor cell surfaces, a potential mechanism for herceptin resistance // Int. J. Cancer. 2002. V. 99 (6). P. 783-791.

37. Disis M.L., Pupa S.M., Gralow J.R., Dittadi R., Menard S., Che-ever M.A. High-titer HER-2/neu protein-specific antibody can be detected in patients with early-stage breast cancer // J. Clin. Oncol. 1997. V. 15 (11). P. 3363-3367.

38. Slamon D.J., Clark G.M., Wong S.G., Levin W.J., Ullrich A., McGuire W. Human breast cancer: correlation of relapse and survival with am-

plification of the HER-2/neu oncogene // Science. 1987. V. 235 (4785). P. 177-182.

39. Slamon D.J., Godolphin W., Jones L.A., Holt J.A., Wong S.G., Keith D.E. et al. Studies of the HER-2neu proto-oncogene in human breast and ovarian cancer // Science. 1989. V. 244 (4905). P. 707-712.

40. Ross J.S., Fletcher J.A. HER-2/neu (c-erbB2) gene and protein in breast cancer // Am. J. Clin. Pathol. 1999. V. 112 (1 Suppl. 1). P. S53-S67.

41. Latta E.K., Tjan S., Parkes R.K., O'Malley F.P. The role of HER-2/neu overexpression/amplification in the progression of ductal carcinoma in situ to invasive carcinoma of the breast // Mod. Pathol. 2002. V. 15 (12). P. 1318-1325.

42. Hayes D.F., Thor A.D. c-erbB-2 in breast cancer: development of a clinically useful marker // Semin. Oncol. 2002. V. 29 (3). P. 231-245.

43. Ross J.S. Breast cancer biomarkers and HER2 testing after 10 years of anti-HER2 therapy // Drug News Perspect. 2009. V. 22 (2). P. 93-106.

44. Dandaci N., Dietze O., Hauser-Kronberger C. Chromogenic in situ hybridization: a novel approach to a practical and sensitive method for the detection of HER-2 oncogene in archival human breast carcinoma // Lab. Invest. 2002. V. 82 (8). P. 1007-1014.

45. Arnould L., Denoux Y., MacGrogan G., Penault-Llorca F., Fiche M., Treilleux I., Mathieu M.C., Vincent-Salomon A., Vilain M.O., Couturier J. Agreement between chromogenic in situ hybridization (CISH) and FISH in the determination of HER2 status in breast cancer // Int. J. Cancer. 2003. V. 88 (10). P. 1587-1591.

46. Mass R.D., Sanders C., Charlene K., Johson L., Everett T., Anderson S. The concordance between the clinical trials assay (CTA) and fluorescence in situ hybridization (FISH) // Proc. Am. Soc. Clin. Oncol. 2000. V. 19. P. 291.

47. Vogel C.L., Cobleigh M.A., Tripathy D., Gutheil J.C., Harris L.N., Fehrenbacher L. et al. Efficacy and safety of trastuzumab as a single agent in first-line treatment of HER-2 overexpressing metastatic breast cancer // J. Clin. Oncol. 2002. V. 20. P. 719-726.

48. Gancberg D., Di Leo A., Cardoso F., Rouas G., Pedrocchi M., Paesmans M., Verhest A., Bernard-Marty C., Piccart M.J., Larsimont D. Comparison of HER-2 status between primary breast cancer and corresponding distant metastatic sites // Ann. Oncol. 2002. V. 13 (7). P. 1036-1043.

49. Edgerton S.E., Merkel D., Moore D.H., Thor A.D. HER-2/neu/erbB2 status by immunohistochemistry and FISH: clonality and regression with recurrence and metastases [Abstract] // Breast Cancer Res. Treat. 2003. V. 64. P. 54.

50. Zidan J., Dashkovsky I., Stayerman C., Basher W., Cozacov C., Hadary A. Comparison of HER-2 overexpression in primary breast cancer and metastatic sites and its effect on biological targeting therapy of meta-static disease // Br. J. Cancer. 2005. V. 93 (5). P. 552-556.

51. Santinelli A., Pisa E., Stramazzotti D., Fabris G. HER-2 status discrepancy between primary breast cancer and metastatic sites. Impact on target therapy // Int. J. Cancer. 2008. V. 122 (5). P. 999-1004.

52. Amir E., Miller N., Geddie W., Freedman O., Kassam F., Simmons C., Oldfield M., Dranitsaris G., Tomlinson G., Laupacis A., Tannock I.F., Clemons M. Prospective study evaluating the impact of tissue confirmation of metastatic disease in patients with breast cancer // J. Clin. Oncol. 2012. V. 30 (6). P. 587-592.

53. Chia S. Testing for discordance at metastatic relapse: does it matter? // J. Clin. Oncol. 2012. V. 30 (6). P. 575-576.

54. Watanabe N., Miyamoto M., Tokuda Y., Kubota M., Ando Y., Tajima T., Mitomi T. Serum c-erbB-2 in breast cancer patients // Acta Oncol. 1994. V. 33 (8). P. 901-904.

55. Volas G.H., Leitzel K., Teramoto Y., Grossberg H., Demers L., Lipton A. Serial serum c-erbB-2 levels in patients with breast carcinoma // Cancer. 1996. V. 78 (2). P. 267-272.

56. Payne R.C., Allard J.W., Anderson-Mauser L., Humphreys J.D., Tenney D.Y., Morris D.L. Automated assay for HER-2/neu in serum // Clin. Chem. 2000. V. 46 (2). P. 175-182.

57. Schwartz M.K., Smith C., Schwartz D.C., Dnistrian A., Neiman I. Monitoring therapy serum HER-2/neu // Int. J. Biol. Markers. 2000. V. 15 (4). P. 324-329.

58. Cook G.B., Neaman I.E., Goldblatt J.L., Cambetas D.R., Hussain M., Lüftner D., Yeung K.K., Chan D.W., Schwartz M.K., Allard W.J. Clinical utility of serum HER-2/neu testing on the Bayer Immuno 1 automated system in breast cancer // Anticancer Res. 2001. V. 21 (2B). P. 1465-1470.

59. Mathelin C., Croce S., Rault S., Gharbi M., Eichler F., Gairard B., Coumaros G., Koehl C. Clinical usefulness of circulating ECD/HER-2 measurement for breast cancer patients' management // Presse Med. 2011. V. 40 (2). P. 126-137.

60. Tchou J., Lam L., Li Y.R., Edwards C., Ky B., Zhang H. Monitoring serum HER2 levels in breast cancer patients // Springerplus. 2015. V. 4. P. 237. doi: 10.1186/s40064-015-1015-6.

61. Lee S.B., Lee J. W., Yu J.H., Ko B.S., Kim H.J., Son B.H., Gong G., Lee H.J., Kim S.B., Jung K.H., Ahn J.H., Lee W., Sung J., Ahn S.H. Pre-operative serum HER2 extracellular domain levels in primary invasive breast cancer // BMC Cancer. 2014. V. 14. P. 929. doi:10.1186/1471-2407-14-929.

2186

62. Yeh I.T. Measuring HER-2 in breast cancer. Immunohistochemistry, FISH, or ELISA? // Am. J. Clin. Pathol. 2002. V. 117 (1). P. S26-S35.

63. Lam L., Czerniecki B.J., Fitzpatrick E., Xu S., Schuchter L., Xu X., Zhang H. Interference-free HER2 ECD as a serum biomarker in breast cancer // J. Mol. Biomark. Diagn. 2014. V. 4 (3). P. 151. doi:10.4172/2155-9929.1000151.

64. S0rensen P.D., Jakobsen E.H., Langkjer S.T., Bokmand S., 0stergaard B., Olsen D.A., Madsen J.S., Brandslund I. Serum HER-2 concentrations for monitoring women with breast cancer in a routine oncology setting // Clin. Chem. Lab. Med. 2009. V. 47 (9). P. 1117-1123.

65. Di Gioia D., Dresse M., Mayr D., Nagel D., Heinemann V., Kahlert S., Stieber P. Serum HER2 supports HER2-testing in tissue at the time of primary diagnosis of breast cancer // Clin. Chim. Acta. 2014. V. 430. P. 86-91.

66. Ma L., Yang H.Y., Han X.H., Li J., Wang F., Zhang C.L., Yao J.R., Shi Y.K. Relationship between serum HER2 extracellular domain levels, tissue HER2 expression, and clinico-pathological parameters in early stage breast cancer // Chin. Med. J. 2012. V. 125 (22). P. 41044110.

67. Wang T., Zhou J., Zhang S., Bian L., Hu H., Xu C., Hao X., Liu B., Ye Q., Liu Y., Jiang Z. Meaningful interpretation of serum HER2 ECD levels requires clear patient clinical background, and serves several functions in the efficient management of breast cancer patients // Clin. Chim. Acta. 2016. V. 458. P. 23-29. doi: 10.1016/j.cca.2016.04.025.

68. Neumann R., Eggers H.J., Zippel H.H., Remy B., Nelles G., Heiles B., Molitor E., Schulz K.D. Clinical relevance of nucleic acid detection of human papillomaviruses (HPV) in cells from smears of the cervix uteri // Geburtshilfe Frauenheilkd. 1989. Bd. 49 (1). S. 11-16.

69. Fornier M.N., Seidman A.D., Schwartz M.K., Ghani F., Thiel R., Norton L., Hudis C. Serum HER2 extracellular domain in metastatic breast cancer patients treated with weekly trastuzumab and paclitaxel: association with HER2 status by immunohistochemistry and fluorescence in situ hybridization and with response rate // Ann. Oncol. 2005. V. 16 (2). P. 234-239.

70. Tse C., Brault D., Gligorov J., Antoine M., Neumann R., Lotz J.P., Capeau J. Evaluation of the quantitative analytical methods real-time PCR for HER-2 gene quantification and ELISA of serum HER-2 protein and comparison with fluorescence in situ hybridization and im-munohistochemistry for determining HER-2 status in breast cancer patients // Clin. Chem. 2005. V. 51 (7). P. 1093-1101.

71. Ardavanis A., Kountourakis P., Kyriakou F., Malliou S., Mantzaris I., Garoufali A., Yiotis I., Scorilas A., Baziotis N., Rigatos G. Trastuzumab plus paclitaxel or docetaxel in HER-2-negative/HER-2 ECD-positive anthracycline- and taxane-refractory advanced breast cancer // Oncologist. 2008. V. 13 (4). P. 361-369.

72. Bramwell V.H., Doig G.S., Tuck A.B., Wilson S.M., Tonkin K.S., Tomiak A., Perera F., Vandenberg T.A., Chambers A.F. Changes over time of extracellular domain of HER2 (ECD/HER2) serum levels have prognostic value in metastatic breast cancer // Breast Cancer Res. Treat. 2009. V. 114 (3). P. 503-511.

73. Carney W.P. Hidden HER-2/neu-positive breast cancer: how to maximize detection // IDrugs. 2009. V. 12 (4). P. 238-242.

74. Molina R., Augé J.M., Escudero J.M., Filella X., Zanon G., Pahisa J., Farrus B., Muñoz M., Velasco M. Evaluation of tumor markers (HER-2/neu oncoprotein, CEA, and CA 15.3) in patients with locoregional breast cancer: prognostic value // Tumour Biol. 2010. V. 31 (3). P. 171-180.

75. Kandl H., Seymour L., Bezwoda W.R. Soluble c-erbB-2 fragment in serum correlates with disease stage and predicts for shortened survival in patients with early-stage and advanced breast cancer // Br. J. Cancer. 1994. V. 70 (4). P. 739-742.

76. Andersen T.I., Paus E., Nesland J.M., McKenzie S.J., Borresen A.L. Detection of c-erbB-2 related protein in sera from breast cancer patients // Acta Oncol. 1995. V. 34 (4). P. 499-504.

77. Molina R., Jo J., Filella X., Zanon G., Pahisa J., Muñoz M., Farrus B., LatreM.L., Gimenez N., Hage M., Estape J., Ballesta A.M. Utility of c-erbB-2 in tissue and serum in the early diagnosis of recurrence in breast cancer patients: comparison with carcinoembryonic antigen and CA 15.3 // Br. J. Cancer. 1996. V. 74 (7). P. 1126-1131.

78. Krainer M., Brodowicz T., Zeillinger R., Wiltschke C., Scholten C., Seifert M., Kubista E., Zielinski C.C. Tissue expression and serum levels of HER-2/neu in patients with breast cancer // Oncology. 1997. V. 54 (6). P. 475-481.

79. Fehm T., Gebauer G., Jáger W. Clinical utility of serial serum c-erbB-2 determinations in the follow-up of breast cancer patients // Breast Cancer Res. Treat. 2002. V. 75 (2). P. 97-106.

80. Niikura N., Liu J., Hayashi N., Mittendorf E.A., Gong Y., Palla S.L., Tokuda Y., Gonzalez-Angulo A.M., Hortobagyi G.N., Ueno N.T. Loss of human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) expression in metastatic sites of HER2-overexpressing primary breast tumors // J. Clin. Oncol. 2012. V. 30 (6). P. 593-599.

81. Turner N.H., Di Leo A. HER2 discordance between primary and meta-static breast cancer: assessing the clinical impact // Cancer Treat. Rev. 2013. V. 39 (8). P. 947-957.

82. Pestrin M., Bessi S., Galardi F., Truglia M., Biggeri A., Biagioni C., Cappadona S., Biganzoli L., Giannini A., Di Leo A. Correlation of HER2 status between primary tumors and corresponding circulating tumor cells in advanced breast cancer patients // Breast Cancer Res. Treat. 2009. V. 118 (3). P. 523-530.

83. Ito Y., Iwase T., Hatake K. Eradication of breast cancer cells in patients with distant metastasis: the finishing touches? // Breast Cancer. 2012. V. 19 (3). P. 206-211.

84. Kumyoshi R.K., Gehrke Fde S., Alves B.C., Vilas-Boas V., Coló A.E., Sousa N., Nunes J., Fonseca F.L., Del Giglio A. Gene profiling and circulating tumor cells as biomarker to prognostic of patients with locoregional breast cancer // Tumour Biol. 2015. V. 36 (10). P. 80758083.

85. Liu Y., Liu Q., Wang T., Bian L., Zhang S., Hu H., Li S., Hu Z., Wu S., Liu B., Jiang Z. Circulating tumor cells in HER2-positive metastatic breast cancer patients: a valuable prognostic and predictive biomarker // BMC Cancer. 2013. V. 13. P. 202. doi: 10.1186/1471-2407-13-202.

86. Ludovini V., Gori S., Colozza M., Pistola L., Rulli E., Floriani I., Pacifico E., Tofanetti F.R., Sidoni A., Basurto C., Rulli A., Crino L. Evaluation of serum HER2 extracellular domain in early breast cancer patients: correlation with clinicopathological parameters and survival // Ann. Oncol. 2008. V. 19 (5). P. 883-890.

87. Witzel I., Loibl S., von Minckwitz G., Mundhenke C., Huober J., Hanusch C., Henschen S., Hauschild M., Lantzsch T., Tesch H., Latos K., Just M., Hilfrich J., Barinoff J., Eulenburg C.Z., Roller M., Untch M., Müller V. Monitoring serum HER2 levels during neoadjuvant trastuzumab treatment within the GeparQuattro trial // Breast Cancer Res Treat. 2010. V. 123 (2). P. 437-445.

88. Witzel I., Loibl S., von Minckwitz G., Eidtmann H., Fehm T., Khandan F., Schmatloch S., Hauschild M., Bischoff J., Fasching P.A., Mau C., Schem C., Rack B., Meinhold-Heerlein I., Liedtke C., Karn T., Huober J., Zu Eulenburg C., Issa-Nummer Y., Untch M., Müller V. Predictive value of HER2 serum levels in patients treated with lapatinib or trastuzumab - a translational project in the neoadjuvant GeparQuinto trial // Br. J. Cancer. 2012. V. 107 (6). P. 956-960.

89. Kong Y., Dai S., Xie X., Xiao X., Lv N., Guo J., Li L., Jia W., Zhang Y., Liu W., Wei W., Xie X. High serum HER2 extracellular domain levels: correlation with a worse disease-free survival and overall survival in primary operable breast cancer patients // J. Cancer Res. Clin. Oncol. 2012. V. 138 (2). P. 275-284.

90. Ryu D. W., Lee C.H. Impact of Serum HER2 Levels on Survival and Its Correlation with Clinicopathological Parameters in Women with Breast Cancer // J. Breast Cancer. 2012. V. 15 (1). P. 71-78.

91. Thureau S., Clatot F., Laberge-Le-Couteulx S., Baron M., Basuyau J.P., Blot E. Elevated HER2 extracellular domain level in primary breast cancer with HER2 overexpression predicts early failure of adjuvant trastuzumab // Anticancer Res. 2012. V. 32 (4). P. 1429-1433.

92. Moreno-Aspitia A., Hillman D.W., Dyar S.H., Tenner K.S., Gralow J., Kaufman P.A., Davidson N.E., Lafky J.M., Reinholz M.M., Lingle W.L., Kutteh L.A., Carney W.P., Dueck A.C., Perez E.A. Soluble human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) levels in patients with HER2-positive breast cancer receiving chemotherapy with or without trastuzumab: results from North Central Cancer Treatment Group adjuvant trial N9831 // Cancer. 2013. V. 119 (15). P. 2675-2682.

93. Esteva F.J., Valero V., Booser D., Guerra L.T., Murray J.L., Pusztai L., Cristofanilli M., Arun B., Esmaeli B., Fritsche H.A., Sneige N., Smith T.L., Hortobagyi G.N. Phase II study of weekly docetaxel and trastuzumab for patients with HER2-overexpressing metastatic breast cancer // J. Clin. Oncol. 2002. V. 20 (7). P. 1800-1808.

94. Esteva F.J., Cheli C.D., Fritsche H., Fornier M., Slamon D., Thiel R.P., Luftner D., Ghani F. Clinical utility of serum HER2/neu in monitoring and prediction of progression-free survival in metastatic breast cancer patients treated with trastuzumab-based therapies // Breast Cancer Res. 2005. V. 7 (4). P. R436-R443.

95. Carney W.P. The emerging role of monitoring serum HER-2/neu oncoprotein levels in women with metastatic breast cancer // Lab. Med. 2003. V. 34 (1). P. 58-64.

96. Köstler W.J., Schwab B., Singer C.F., Neumann R., Rücklinger E., Brodowicz T., Tomek S., Niedermayr M., Hejna M., Steger G.G., Krainer M., Wiltschke C., Zielinski C.C. Monitoring of serum HER-2/neu predicts response and progression-free survival to trastuzumab-based treatment in patients with metastatic breast cancer // Clin. Cancer Res. 2004. V. 10 (5). P. 1618-1624.

97. Schippinger W., Regitnig P., Bauernhofer T., Ploner F., Hofmann G., Krippl P., Wehrschütz M., Lax S., Carney W., Neumann R., Wernecke K.D., Samonigg H. The course of serum HER-2/neu levels as an independent prognostic factor for survival in metastatic breast cancer // Oncol. Rep. 2004. V. 11 (6). P. 1331-1336.

98. Pichon M.F., Hacene K., Guepratte S., Neumann R. Serum HER-2 extracellular domain (ECD) before the first metastasis in 128 breast cancer patients // Clin. Lab. 2004. V. 50 (3-4). P. 163-170.

99. S0rensen P.D., Madsen J.S., Brandslund 1. Serum HER-2/ECD analysis in monitoring breast cancer patients // Clin. Chem. Lab. Med. 2012. V. 50 (1). P. 175-176.

2187

100. Valero V., Roche H., Pienkowski T., Canon J., Zhao Y., Carney W., Mackey J., Taupin H., Buyse M., Slamon D. BCIRG 007: Serum HER2 levels in women with metastatic HER2-amplified breast cancer // J. Clin. Oncol. 2007. V. 25 (18S). P. 1020.

101. Molina R., Jo J., Filella X., Zanon G., Pahisa J., Munoz M., Farrus B., Latre M.L., Gimenez N., Hage M., Estape J., Ballesta A.M. C-erbB-2 oncoprotein in the sera and tissue of patients with breast cancer. Utility in prognosis // Anticancer Res. 1996b. V. 16 (4B). P. 2295-2300.

102. Eskelinen M., Kataja V., Hamalainen E., Kosma V.M., Penttila I., Alhava E. Serum tumor markers CEA, AFP, CA15-3, TPS and neu in diagnosis of breast cancer // Anticancer Res. 1997. V. 17 (2B). P. 231234.

103. Bewick M., Chadderton T., Conlon M., Lafrenie R., Morris D., Stewart D. et al. Expression of c-erbB-2/HER-2 in patients with metastatic breast cancer undergoing high-dose chemotherapy and autologous blood stem cell support // Bone Marrow Transplant. 1999. V. 24. P. 377-384.

104. Ali S.M., Leitzel K., Chinchilla V.M., Engle L., Demers L., Harvey H.A., Carney W., Allard J.W., Lipton A. Relationship of serum HER-2/neu and serum CA 15-3 in patients with metastatic breast cancer // Clin. Chem. 2002. V. 48 (8). P. 1314-1320.

105. Lipton A., Leitzel K., AH S.M., Demers L., Harvey H.A., Chaudri-Ross H.A., Evans D., Lang R., Hackl W., Hamer P., Carney W. Serum HER-2/neu conversion to positive at the time of disease progression in patients with breast carcinoma on hormone therapy // Cancer. 2005. V. 104 (2). P. 257-263.

106. Sandri M.T., Johansson H.A., Zorzino L., Salvatici M., Passerini R., Maisonneuve P., Rocca A., Peruzzotti G., Colleoni M. Serum EGFR and serum HER-2/neu are useful predictive and prognostic markers in metastatic breast cancer patients treated with metronomic chemotherapy // Cancer. 2007. V. 110 (3). P. 509-517.

107. Finn R.S., Gagnon R., Di Leo A., Press M.F., Arbushites M., Koehler M. Prognostic and predictive value of HER2 extracellular domain in metastatic breast cancer treated with lapatinib and paclitaxel in a randomized phase III study // J. Clin. Oncol. 2009. V. 27 (33). P. 55525558.

108. Burstein H.J., Harris L.N., Marcom P.K., Lambert-Falls R., Havlin K., Overmoyer B., Friedlander R.J. Jr., Gargiulo J., Strenger R., Vogel C.L., Ryan P.D., Ellis M.J., Nunes R.A., Bunnell C.A., Campos S.M., Hallor M., Gelman R., Winer E.P. Trastuzumab and vinorelbine as first-line therapy for HER2-overexpressing metastatic breast cancer: multicenter phase II trial with clinical outcomes, analysis of serum tumor markers as predictive factors, and cardiac surveillance algorithm // J. Clin. Oncol. 2003. V. 21 (15). P. 2889-2895.

109. Fehm T., Jager W., Kraemer S., Sohn C., Solomayer-Meyberg G., Solomayer E.F., Kurek R., Wallwiener D., Gebauer G. Changes of serum HER2 status during clinical course of metastatic breast cancer patients // Anticancer Res. 2004. V. 24 (6). P. 4205-4210.

110. Saghatchian M., Guepratte S., Hacene K., Neumann R., Floiras J.L., Pichon M.F. Serum HER-2 extracellular d main: relationship with clinicobiological presentation and prognostic value before and after o primary treatment in 701 breast cancer patients // Int. J. Biol. Markers. 2004. V. 19 (1). P. 14-22.

111. Samy N., Ragab H.M., El MaksoudN.A., ShaalanM. Prognostic significance of serum Her2/neu, BCL2, CA15-3 and CEA in breast cancer patients: a short follow-up // Cancer Biomark. 2010. V. 6 (2). P. 63-72.

112. Ali S.M., Carney W.P., Esteva F.J., Fornier M., Harris L., Kostler W.J., Lotz J.P., Luftner D., Pichon M.F., Lipton A. Serum HER-2/neu Study Group. Serum HER-2/neu Study Group. Serum HER-2/neu and relative resistance to trastuzumab-based therapy in patients with meta-static breast cancer // Cancer. 2008. V. 113 (6). P. 1294-1301.

113. Petersen E.R., S0rensen P.D., Jakobsen E.H., Madsen J.S., Brands-lund I. Serum HER-2 predicts response and resistance to trastuzumab treatment in breast cancer // Clin. Chem. Lab. Med. 2013. V. 51 (7). P. 1483-1492.

114. Lipton A., Leitzel K., Ali S.M., Carney W., Platek G., Steplewski K., Westlund R., Gagnon R., Martin A.M., Maltzman J. Human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) extracellular domain levels are associated with progression-free survival in patients with HER2-positive metastatic breast cancer receiving lapatinib monotherapy // Cancer. 2011. V. 117 (21). P. 5013-5020.

115. Darlix A., Lamy P.J., Lopez-Crapez E., Braccini A.L., Firmin N., Romieu G., Thezenas S., Jacot W. Serum HER2 extra-cellular domain, S100B and CA 15-3 levels are independent prognostic factors in metastatic breast cancer patients // BMC Cancer. 2016. V. 16. P. 428. doi: 10.1186/s12885-016-2448-1.

116. Lipton A., Ali S.M., Leitzel K., Demers L., Chinchilli V., Engle L., Harvey H.A., Brady C., Nalin C.M., Dugan M., Carney W., Allard J. Elevated serum HER-2/neu level predicts decreased response to hormone therapy in metastatic breast cancer // J. Clin. Oncol. 2002. V. 20 (6). P. 1467-1472.

117. Yamauchi H., O'Neill A., Gelman R., Carney W., Tenney D.Y., Hosch S., Hayes D.F. Prediction of response to antiestrogen therapy in advanced breast cancer patients by pretreatment circulating levels of ex-

tracellular domain of the HER-2/c-neu protein // J. Clin. Oncol. 1997. V. 15 (7). P. 2518-2525.

118. Wright C., Cairns J., Cantwell B.J., Hall A.G., Harris A.L., Horne C.H. Response to mitoxantrone in advanced breast cancer: correlation with expression of c-erbB-2 protein and glutathione S-transferases // Br. J. Cancer. 1992. V. 65 (2). P. 271-274.

119. Hayes D.F., Yamauchi H., Broadwater G., Cirrincione C.T., Rodrigue S.P., Berry D.A., Younger J., Panasci L.L., Millard F., Duggan D.B., Norton L., Henderson I.C. Cancer and Leukemia Group B. Circulating HER-2/erbB-2/c-neu (HER-2) extracellular domain as a prognostic factor in patients with metastatic breast // Clin. Cancer Res. 2001. V. 7 (9). P. 2703-2711.

120. Lipton A., Ali S.M., Leitzel K., Demers L., Harvey H.A., Chaudri-Ross H.A., Brady C., Wyld P., Carney W. Serum HER-2/neu and response to the aromatase inhibitor Letrozole versus Tamoxifen // J. Clin. Oncol. 2003. V. 21 (10). P. 1967-1972.

121. Fehm T., Maimonis P., Weitz S., Teramoto Y., Katalinic A., Jäger W. Influence of circulating c-erbB-2 serum protein on response to adjuvant chemotherapy in node-positive breast cancer patients // Breast Cancer Res. Treat. 1997. V. 43 (1). P. 87-95.

122. Colomer R., Montero S., Lluch A., Ojeda B., Barnadas A., Casado A., Massuti B., Cortes-Funes H., Lloveras B. Circulating HER2 extracellular domain and resistance to chemotherapy in advanced breast cancer // Clin. Cancer Res. 2000. V. 6 (6). P. 2356-2362.

123. Luftner D., Henschke P., Flath B., Akrivakis C., Schnabel S., Prinz B., Geppert R., Wernecke K.D., Possinger K. Serum HER-2/neu as a prediction and monitoring parameter in a phase II study with weekly paclitaxel in metastatic breast cancer // Anticancer Res. 2004. V. 24 (2B). P. 895-906.

124. Muller V., Witzel I., Luck H.J., Kohler G., von Minckwitz G., Mobus V., Sattler D., Wilczak W., Loning T., Janicke F., Pantel K., Thomssen C. Prognostic and predictive impact of the HER-2/neu extracellular domain (ECD) in the serum of patients treated with chemotherapy for metastatic breast cancer // Breast Cancer Res. Treat. 2004. V. 86 (1). P. 9-18.

125. Slamon D.J., Leyland-Jones B., Shak S., Fuchs H., Paton V., Bajamonde A., Fleming T., Eiermann W., Wolter J., Pegram M., Baselga J., Norton L. Use of chemotherapy plus a monoclonal antibody against HER2 for metastatic breast cancer that overexpresses HER2 // N. Engl. J. Med. 2001. V. 344 (11). P. 783-792.

126. Wolff A.C., Hammond M.E., Hicks D.G., Dowsett M., McShane L.M., Allison K.H., Allred D.C., Bartlett J.M., Bilous M., Fitzgibbons P., Hanna W., Jenkins R.B., Mangu P.B., Paik S., Perez E.A., Press M.F., Spears P.A., Vance G.H., Viale G., Hayes D.F. American Society of Clinical Oncology; College of American Pathologists. Recommendations for human epidermal growth factor receptor 2 testing in breast cancer: American Society of Clinical Oncology/College of American Pathologists clinical practice guideline update // Arch. Pathol. Lab. Med. 2014. V. 138 (2). P. 241-256.

127. Brunelli M., Manfrin E., Martignoni G., Bersani S., Remo A., Reghellin D., Chilosi M., Bonetti F. HER-2/neu assessment in breast cancer using the original FDA and new ASCO/CAP guideline recommendations: impact on selecting patients for herceptin therapy // Am. J. Clin. Pathol. 2008. V. 129 (6). P. 907-911.

128. Dnistrian A.M., Schwartz M.K., Schwartz D.C., Ghani F., Kish L. Significance of serum HER-2/neu oncoprotein, CA 15-3 and CEA in the clinical evaluation of metastatic breast cancer // J. Clin. Ligand. Assay. 2003. V. 25. P. 215-220.

129. Hoopmann M., Neumann R., Tanasale T., Schondorf T. HER-2/neu determination in blood plasma of patients with HER-2/neu overex-pressing metastasized breast cancer: a longitudinal study // Anticancer Res. 2003. V. 23 (2A). P. 1031-1034.

130. Nahta R., Shabaya S., Ozbay T., Rowe D.L. Personalizing HER2-targeted therapy in metastatic breast cancer beyond HER2 status: what we have learned from clinical specimens // Curr. Pharmacogenomics Person. Med. 2009. V. 7 (4). P. 263-274.

131. Spector N.L., Blackwell K.L. Understanding the mechanisms behind trastuzumab therapy for human epidermal growth factor receptor 2-positive breast cancer //. J. Clin. Oncol. 2009. V. 27 (34). P. 58385847.

132. Lee C.K., Davies L., Gebski V.J., Lord S.J., Di Leo A., Johnston S., Geyer C. Jr., Cameron D., Press M.F., Ellis C., Loi S., Marschner I., Simes J., de Souza P. Serum Human Epidermal Growth Factor 2 Extracellular Domain as a Predictive Biomarker for Lapatinib Treatment Efficacy in Patients With Advanced Breast Cancer // J. Clin. Oncol. 2016. V. 34 (9). P. 936-944.

133. Lennon C., Barton L., Banken L., Marty M., Baselga J., Leyland-Jones B. Utility of serum HER2 extracellular domain assessment in clinical decision making: pooled analysis off our trials of Trastuzumab in meta-static breast cancer // J. Clin. Oncol. 2009. V. 27 (10). P. 1685-1693.

134. Leary A.F., Hanna W.M., van de Vijver M.J., Penault-Llorca F., Rüschoff J., Osamura R.Y., Bilous M., Dowsett M. Value and limitations of measuring HER-2 extracellular domain in the serum of breast cancer patients // J. Clin. Oncol. 2009. V. 27 (10). P. 1694-1705.

2188

135. Leyland-Jones B., Smith B.R. Serum HER2 testing in patients with HER2-positive breast cancer: the death knell tolls // Lancet Oncol. 2011. V. 12 (3). P. 286-295.

136. Harris L., Fritsche H., Mennel R., Norton L., Ravdin P., Taube S., SomerfieldM.R., Hayes D.F., Bast R.C. Jr. American Society of Clinical Oncology. American Society of Clinical Oncology 2007 update of

recommendations for the use of tumor markers in breast cancer // J. Clin. Oncol. 2007. V. 25 (33). P. 5287-5312.

Поступила в редакцию 21 июля 2016 г.

Кушлинский Николай Евгеньевич, Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина, г. Москва, Российская Федерация, доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент РАМН, руководитель лаборатории клинической биохимии, e-mail: biochimia@mtu-net.ru

Герштейн Елена Сергеевна, Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН, г. Москва, Российская Федерация, доктор биологических наук, профессор, ведущий научный сотрудник лаборатории клинической биохимии, e-mail: esgershtein@gmail.com

Овчинникова Лариса Константиновна, Московский областной онкологический диспансер, г. Балашиха, Московская область, Российская Федерация, кандидат медицинских наук, руководитель хирургического отделения опухолей молочных желез, e-mail: ognerubov_n.a@mail.ru

Огнерубов Николай Алексеевич, Тамбовский государственный университет им. Г.Р. Державина, г. Тамбов, Российская Федерация, доктор медицинских наук, кандидат юридических наук, профессор, зав. кафедрой анатомии, оперативной хирургии и онкологии, заслуженный работник высшей школы РФ, e-mail: ognerubov_n.a@mail.ru

UDC 618.19-006.6-074:577.08

DOI: 10.20310/1810-0198-2016-21 -6-2177-2194

A SOLUBLE EXTRACELLULAR DOMAIN OF THE RECEPTOR HER2/neu IN BREAST CANCER PATIENTS

© N.E. Kushlinskii 1), E.S. Gershtein 1), L.K. Ovchinnikova 2), N.A. Ognerubov 3)

1)1 Russian Cancer Research Center named after N.N. Blokhin RAMS of Ministry of Health of Russia 23 Kashirskoe highway, Moscow, Russian Federation, 115478 E-mail: biochimia@mtu-net.ru 2) Moscow Regional Oncology Dispensary 6 Karbysheva St., Balashikha, Moscow region, Russian Federation, 143900

3) Tambov State University named after G.R. Derzhavin 33 Internatsionalnaya St., Tambov, Russian Federation, 392000 E-mail: ognerubov_n.a@mail.ru

The data of the current literature on the clinical significance of soluble receptor HER2/neu (sHER2) in the blood of breast cancer patients with the main clinical and morphological characteristics of the disease are presented. Analysis of the literature suggests that in the majority of studies on sHER2 in breast cancer, presented encouraging results. To be considered promising sHER2 determination in serum of patients with breast cancer for the prediction, prediction of response to anti-HER2 therapy, and as a marker to monitor the clinical course of the disease.

Key words: soluble receptor HER2/neu; breast cancer; prognosis

REFERENCES

1. Campbell L.L., Polyak K. Breast tumor heterogeneity: cancer stem cells or clonal evolution? Cell Cycle, 2007, vol. 6 (19), pp. 23322338.

2. Duru N., Candas D., Jiang G., Li J.J. Breast cancer adaptive resistance: HER2 and cancer stem cell repopulation in a heterogeneous tumor society. J. Cancer Res. Clin. Oncol., 2014, vol. 140 (1), pp. 1-14.

3. Sverdlov E.D. Mnogomernaya slozhnost' raka. Nuzhny prostye resheniya [Multidimensional Complexity of Cancer: Simple Solutions are Needed (review)]. Biokhimiya - Biochemistry, 2016, vol. 81, no. 7, pp. 962-970. (In Russian).

4. Kushlinskiy N.E. Molekulyarno-biologicheskie priznaki zlokachestvennykh opukholey [Molecular biological characteristics of malignant tumors]. Molekulyarnaya meditsina - Molecular medicine, 2015, no. 2, pp. 13-18. (In Russian).

5. Hanahan D., Weinberg R.A. The hallmarks of cancer. The next generation. Cell, 2011, vol. 144 (4), pp. 646-674.

6. Kushlinskiy N.E., Nemtsova M.V. Molekulyarnye mekhanizmy opukholevogo rosta [Molecular mechanisms of tumor growth]. Patogenez - Pathogenesis, 2014, vol. 12, no. 1, pp. 4-14. (In Russian).

2189

7. Pauletti G., Godolphin W., Press M.F., Slamon D.J. Detection and quantitation of HER-2/neu gene amplification in human breast cancer archival material using fluorescence in situ hybridization. Oncogene, 1996, vol. 13 (1), pp. 63-72.

8. Nemtsova M.V., Kushlinskiy N.E. Nauchnyy i klinicheskiy aspekty opukholevoy klonal'nosti [Scientific and clinical aspects of tumoral clonality]. Byulleten' eksperimental'noy biologii i meditsiny — Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2014, vol. 158, no. 8, pp. 214-220. (In Russian).

9. Aaronson S.A. Growth factors and cancer. Science, 1991, vol. 254 (5035), pp. 1146-1153.

10. Gershteyn E.S., Kushlinskiy N.E. Faktory rosta, ikh retseptory i nizhelezhashchie signal'nye belki: ot eksperimenta k klinike [Factors of growth, their sensory organs and downstream signal proteins: from the experiment to clinics]. Molekulyarnyy kantserogenez [Molecular cancer formation]. Moscow, ABV-press Publ., 2016. 416 p. (In Russian).

11. Coussens L., Yang-Feng T.L., Liao Y.-C., Chen E., Gray A., McGrath J. et al. Tyrosine kinase receptor with extensive homology to EGF receptor shares chromosomal location with neu oncogene. Science, 1985, vol. 230 (4730), pp. 1132-1139.

12. Carney W.P., Leitzel K., Ali S., Neumann R., Lipton A. HER-2/neu diagnostics in breast cancer. Breast Cancer Res., 2007, vol. 9 (3), p. 207.

13. Carney W.P., Thiel R. Serum HER-2 levels as a predictor of clinical outcome in metastatic breast cancer (MBC) patients treated with trastuzumab-based therapies. Ann. Oncol., 2013, vol. 24 (Suppl. l3), pp. iii32-iii33.

14. Baric M., Kulic A., Sirotkovic-Skerlev M., Dedic Plavetic N., Vidovic M., Horvatic-Herceg G., Vrbanec D. Circulating Her-2/neu extracellular domain in breast cancer patients-correlation with prognosis and clinicopathological parameters including steroid receptor, Her-2/neu receptor coexpression. Pathol. Oncol. Res., 2015, vol. 21 (3), pp. 589-595.

15. Ross J.S., Gray G.S. Targeted therapy for cancer: the HER-2/neu and Herceptin story. Clin. Leadersh Manag. Rev., 2003, vol. 17 (6), pp. 333-340.

16. Molina R., Escudero J.M., Muñoz M., Augé J.M., Filella X. Circulating levels of HER-2/neu oncoprotein in breast cancer. Clin. Chem. Lab. Med., 2012, vol. 50 (1), pp. 5-21.

17. S0rensen P.D., Jakobsen E.H., Madsen J.S., Petersen E.B., Andersen R.F., 0stergaard B., Brandslund I. Serum HER-2: sensitivity, specificity, and predictive values for detecting metastatic recurrence in breast cancer patients. J. Cancer Res. Clin. Oncol., 2013, vol. 139 (6), pp. 1005-1013.

18. Brandt-Rauf P.W., Pincus M.R., Carney W.P. The c-erbB-2 protein in oncogenesis: molecular structure to molecular epidemiology. Crit. Rev. Oncog., 1994, vol. 5 (2-3), pp. 313-329.

19. Abu-Khalaf M.M., Harris L. The prognostic and predictive values of circulating HER-2/neu extracellular domain in patients with metastaticbreast cancer. Breast Cancer Res. Treat., 2009, vol. 114 (3), pp. 513-515.

20. Miles D.W. Update on HER-2 as a target for cancer therapy: herceptin in the clinical setting. Breast Cancer Res., 2001, vol. 3 (6), pp. 380-384.

21. Nunes R.A., Harris L.N. The HER2 extracellular domain as a prognostic and predictive factor in breast cancer. Clin. Breast Cancer, 2002, vol. 3 (2), pp. 125-135.

22. McKenzie S.J., Marks P.J., Lam T., Morgan J., Panicali D.L., Trimpe K.L., Carney W.P. Generation and characterization of monoclonal antibodies specific for the human neu oncogene product, p185. Oncogene, 1989, vol. 4 (5), pp. 543-548.

23. Zabrecky J.R., Lam T., McKenzie S.J., Carney W. The extracellular do-main of p185 is released from the surface of human breast carcinoma cells, SK-BR-3. J. Biol. Chem., 1991, vol. 266 (3), pp. 1716-1720.

24. Carney W.P., Hamer P.J., Petit D., Retos C., Greene R., Zabrecky J.R., Mckenzie S., Hayes D., Kufe D., Delellis R., Naber S., Wolfe H. Detection and quantitation of the human neu oncoprotein. J. Tumor Marker Oncol., 1991, vol. 6, pp. 53-72.

25. Carney W.P., Neumann R., Lipton A., Leitzel K., Ali S., Price C.P. Monitoring the circulating levels of the HER2/neu oncoprotein in breast cancer. Clin. Breast Cancer, 2004, vol. 5 (2), pp. 105-116.

26. Leitzel K., Teramoto Y., Sampson E., Mauceri J., Langton B.C., Demers L. et al. Elevated soluble c-erbB-2 antigen levels in the serum and effusions of a preparation of breast cancer patients. J. Clin. Oncol., 1992, vol. 10, pp. 436-443.

27. Kong S.Y., Nam B.H., Lee K.S., Kwon Y., Lee E.S., Seong M.W., Lee D.H., Ro J. Predicting tissue HER2 status using serum HER2 levels in patients with metastatic breast cancer. Clin Chem., 2006, vol. 52 (8), pp. 1510-1515.

28. Quaranta M., Daniele A., Coviello M., Savonarola A., Abbate I., Venneri M.T., Paradiso A., Stea B., Zito A., Labriola A., Schittulli F. c-erbB-2 protein level in tissue and sera of breast cancer patients: a possibly useful clinical correlation. Tumori, 2006, vol. 92 (4), pp. 311-317.

29. Fehm T., Becker S., Duerr-Stoerzer S., Sotlar K., Mueller V., Wallwiener D., Lane N., Solomayer E., Uhr J. Determination of HER2 status using both serum HER2 levels and circulating tumor cells in patients with recurrent breast cancer whose primary tumor was HER2 negative or of unknown HER2 status. Breast Cancer Res., 2007, vol. 9 (5), p. R74.

30. Lamy P.-J., Guachez A.-S., Tse C. The HER2 shedding and its consequences in breast cancer. HER2 and Cancer, ed. S.I. Williams. New York, Nova Science Publ., Inc, 2011.

31. Witters L., Scherle P., Friedman S., Fridman J., Caulder E., Newton R., Lipton A. Synergistic inhibition with a dual epidermal growth factor receptor/HER-2/neu tyrosine kinase inhibitor and a disintegrin and metalloprotease inhibitor. Cancer Res., 2008, vol. 68 (17), pp. 7083-7089.

32. Codony-Servat J., Albanell J., Lopez-Talavera J.C., Arribas J., Baselga J. Cleavage of the HER2 ectodomain is a pervanadate-activable process that is inhibited by the tissue inhibitor of metalloproteases-1 in breast cancer cells. Cancer Res., 1999, vol. 59 (6), pp. 11961201.

33. Molina M.A., Codony-Servat J., Albanell J., Rojo F., Arribas J., Baselga J. Trastuzumb (Herceptin), a humanized anti-HER-2/neu receptor monoclonal antibody inhibits basal and activated HER2 ectodomain cleavage in breast cancer cells. Cancer Res., 2001, vol. 61 (12), pp. 4744-4749.

34. Vazquez-Martin A., Fernandez-Real J.M., Oliveras-Ferraros C., Navarrete J.M., Martin-Castillo B., Del Barco S., Brunet J., Menendez J.A. Fatty acid synthase activity regulates HER2 extracellular domain shedding into the circulation of HER2-positive metastatic breast cancer patients. Int. J. Oncol., 2009, vol. 35 (6), pp. 1369-1376.

35. Schaller G., Evers K., Papadopoulos S., Ebert A., Buhler H. Current use of HER2 tests. Ann. Oncol., 2001, vol. 12 (Suppl. 1), pp. S97-S100.

36. Price-Schiavi S.A., Jepson S., Li P., Arango M., Rudland P.S., Yee L., Carraway K.L. Rat Muc4 (sialomucin complex) reduces binding of anti-ErbB2 antibodies to tumor cell surfaces, a potential mechanism for herceptin resistance. Int. J. Cancer, 2002, vol. 99 (6), pp. 783791.

37. Disis M.L., Pupa S.M., Gralow J.R., Dittadi R., Menard S., Cheever M.A. High-titer HER-2/neu protein-specific antibody can be detected in patients with early-stage breast cancer. J. Clin. Oncol., 1997, vol. 15 (11), pp. 3363-3367.

38. Slamon D.J., Clark G.M., Wong S.G., Levin W.J., Ullrich A., McGuire W. Human breast cancer: correlation of relapse and survival with amplification of the HER-2/neu oncogene. Science, 1987, vol. 235 (4785), pp. 177-182.

2190

39. Slamon D.J., Godolphin W., Jones L.A., Holt J.A., Wong S.G., Keith D.E. et al. Studies of the HER-2neu proto-oncogene in human breast and ovarian cancer. Science, 1989, vol. 244 (4905), pp. 707-712.

40. Ross J.S., Fletcher J.A. HER-2/neu (c-erbB2) gene and protein in breast cancer. Am. J. Clin. Pathol., 1999, vol. 112 (1 Suppl. 1), pp. S53-S67.

41. Latta E.K., Tjan S., Parkes R.K., O'Malley F.P. The role of HER-2/neu overexpression/amplification in the progression of ductal carcinoma in situ to invasive carcinoma of the breast.Mod. Pathol., 2002, vol. 15 (12), pp. 1318-1325.

42. Hayes D.F., Thor A.D. c-erbB-2 in breast cancer: development of a clinically useful marker. Semin. Oncol., 2002, vol. 29 (3), pp. 231245.

43. Ross J.S. Breast cancer biomarkers and HER2 testing after 10 years of anti-HER2 therapy. Drug News Perspect., 2009, vol. 22 (2), pp. 93-106.

44. Dandaci N., Dietze O., Hauser-Kronberger C. Chromogenic in situ hybridization: a novel approach to a practical and sensitive method for the detection of HER-2 oncogene in archival human breast carcinoma. Lab. Invest., 2002, vol. 82 (8), pp. 1007-1014.

45. Arnould L., Denoux Y., MacGrogan G., Penault-Llorca F., Fiche M., Treilleux I., Mathieu M.C., Vincent-Salomon A., Vilain M.O., Couturier J. Agreement between chromogenic in situ hybridization (CISH) and FISH in the determination of HER2 status in breast cancer. Int. J. Cancer, 2003, vol. 88 (10), pp. 1587-1591.

46. Mass R.D., Sanders C., Charlene K., Johson L., Everett T., Anderson S. The concordance between the clinical trials assay (CTA) and fluorescence in situ hybridization (FISH). Proc. Am. Soc. Clin. Oncol., 2000, vol. 19, p. 291.

47. Vogel C.L., Cobleigh M.A., Tripathy D., Gutheil J.C., Harris L.N., Fehrenbacher L. et al. Efficacy and safety of trastuzumab as a single agent in first-line treatment of HER-2 overexpressing metastatic breast cancer. J. Clin. Oncol., 2002, vol. 20, pp. 719-726.

48. Gancberg D., Di Leo A., Cardoso F., Rouas G., Pedrocchi M., Paesmans M., Verhest A., Bernard-Marty C., Piccart M.J., Larsimont D. Comparison of HER-2 status between primary breast cancer and corresponding distant metastatic sites. Ann. Oncol., 2002, vol. 13 (7), pp. 1036-1043.

49. Edgerton S.E., Merkel D., Moore D.H., Thor A.D. HER-2/neu/erbB2 status by immunohistochemistry and FISH: clonality and regression with recurrence and metastases [Abstract]. Breast Cancer Res. Treat., 2003, vol. 64, p. 54.

50. Zidan J., Dashkovsky I., Stayerman C., Basher W., Cozacov C., Hadary A. Comparison of HER-2 overexpression in primary breast cancer and metastatic sites and its effect on biological targeting therapy of metastatic disease. Br. J. Cancer, 2005, vol. 93 (5), pp. 552556.

51. Santinelli A., Pisa E., Stramazzotti D., Fabris G. HER-2 status discrepancy between primary breast cancer and metastatic sites. Impact on target therapy. Int. J. Cancer, 2008, vol. 122 (5), pp. 999-10-1004.

52. Amir E., Miller N., Geddie W., Freedman O., Kassam F., Simmons C., Oldfield M., Dranitsaris G., Tomlinson G., Laupacis A., Tan-nock I.F., Clemons M. Prospective study evaluating the impact of tissue confirmation of metastatic disease in patients with breast cancer. J. Clin. Oncol., 2012, vol. 30 (6), pp. 587-592.

53. Chia S. Testing for discordance at metastatic relapse: does it matter? J. Clin. Oncol., 2012, vol. 30 (6), pp. 575-576.

54. Watanabe N., Miyamoto M., Tokuda Y., Kubota M., Ando Y., Tajima T., Mitomi T. Serum c-erbB-2 in breast cancer patients. Acta Oncol., 1994, vol. 33 (8), pp. 901-904.

55. Volas G.H., Leitzel K., Teramoto Y., Grossberg H., Demers L., Lipton A. Serial serum c-erbB-2 levels in patients with breast carcinoma. Cancer, 1996, vol. 78 (2), pp. 267-272.

56. Payne R.C., Allard J.W., Anderson-Mauser L., Humphreys J.D., Tenney D.Y., Morris D.L. Automated assay for HER-2/neu in serum. Clin. Chem., 2000, vol. 46 (2), pp. 175-182.

57. Schwartz M.K., Smith C., Schwartz D.C., Dnistrian A., Neiman I. Monitoring therapy serum HER-2/neu. Int. J. Biol. Markers, 2000, vol. 15 (4), pp. 324-329.

58. Cook G.B., Neaman I.E., Goldblatt J.L., Cambetas D.R., Hussain M., Lüftner D., Yeung K.K., Chan D.W., Schwartz M.K., Allard W.J. Clinical utility of serum HER-2/neu testing on the Bayer Immuno 1 automated system in breast cancer. Anticancer Res., 2001, vol. 21 (2B), pp. 1465-1470.

59. Mathelin C., Croce S., Rault S., Gharbi M., Eichler F., Gairard B., Coumaros G., Koehl C. Clinical usefulness of circulating ECD/HER-2 measurement for breast cancer patients' management. Presse Med., 2011, vol. 40 (2), pp. 126-137.

60. Tchou J., Lam L., Li Y.R., Edwards C., Ky B., Zhang H. Monitoring serum HER2 levels in breast cancer patients. Springerplus, 2015, vol. 4, p. 237. doi: 10.1186/s40064-015-1015-6.

61. Lee S.B., Lee J.W., Yu J.H., Ko B.S., Kim H.J., Son B.H., Gong G., Lee H.J., Kim S.B., Jung K.H., Ahn J.H., Lee W., Sung J., Ahn S.H. Preoperative serum HER2 extracellular domain levels in primary invasive breast cancer. BMC Cancer, 2014, vol. 14, p. 929. doi:10.1186/1471-2407-14-929.

62. Yeh I.T. Measuring HER-2 in breast cancer. Immunohistochemistry, FISH, or ELISA? Am. J. Clin. Pathol., 2002, vol. 117 (1), pp. S26-S35.

63. Lam L., Czerniecki B.J., Fitzpatrick E., Xu S., Schuchter L., Xu X., Zhang H. Interference-free HER2 ECD as a serum biomarker in breast cancer. J. Mol. Biomark. Diagn., 2014, vol. 4 (3), p. 151. doi:10.4172/2155-9929.1000151.

64. S0rensen P.D., Jakobsen E.H., Langkjer S.T., Bokmand S., 0stergaard B., Olsen D.A., Madsen J.S., Brandslund I. Serum HER-2 concentrations for monitoring women with breast cancer in a routine oncology setting. Clin. Chem. Lab. Med., 2009, vol. 47 (9), pp. 1117-1123.

65. Di Gioia D., Dresse M., Mayr D., Nagel D., Heinemann V., Kahlert S., Stieber P. Serum HER2 supports HER2-testing in tissue at the time of primary diagnosis of breast cancer. Clin. Chim. Acta, 2014, vol. 430, pp. 86-91.

66. Ma L., Yang H.Y., Han X.H., Li J., Wang F., Zhang C.L., Yao J.R., Shi Y.K. Relationship between serum HER2 extracellular domain levels, tissue HER2 expression, and clinico-pathological parameters in early stage breast cancer. Chin. Med. J., 2012, vol. 125 (22), pp. 4104-4110.

67. Wang T., Zhou J., Zhang S., Bian L., Hu H., Xu C., Hao X., Liu B., Ye Q., Liu Y., Jiang Z. Meaningful interpretation of serum HER2 ECD levels requires clear patient clinical background, and serves several functions in the efficient management of breast cancer patients. Clin. Chim. Acta, 2016, vol. 458, pp. 23-29. doi: 10.1016/j.cca.2016.04.025.

68. Neumann R., Eggers H.J., Zippel H.H., Remy B., Nelles G., Heiles B., Molitor E., Schulz K.D. Clinical relevance of nucleic acid detection of human papillomaviruses (HPV) in cells from smears of the cervix uteri. Geburtshilfe Frauenheilkd, 1989, vol. 49 (1), pp. 11-16.

69. Fornier M.N., Seidman A.D., Schwartz M.K., Ghani F., Thiel R., Norton L., Hudis C. Serum HER2 extracellular domain in metastatic breast cancer patients treated with weekly trastuzumab and paclitaxel: association with HER2 status by immunohistochemistry and fluorescence in situ hybridization and with response rate. Ann. Oncol., 2005, vol. 16 (2), pp. 234-239.

70. Tse C., Brault D., Gligorov J., Antoine M., Neumann R., Lotz J.P., Capeau J. Evaluation of the quantitative analytical methods real-time PCR for HER-2 gene quantification and ELISA of serum HER-2 protein and comparison with fluorescence in situ hybridization and immunohistochemistry for determining HER-2 status in breast cancer patients. Clin. Chem., 2005, vol. 51 (7), pp. 1093-1101.

2191

71. Ardavanis A., Kountourakis P., Kyriakou F., Malliou S., Mantzaris I., Garoufali A., Yiotis I., Scorilas A., Baziotis N., Rigatos G. Trastuzumab plus paclitaxel or docetaxel in HER-2-negative/HER-2 ECD-positive anthracycline- and taxane-refractory advanced breast cancer. Oncologist, 2008, vol. 13 (4), pp. 361-369.

72. Bramwell V.H., Doig G.S., Tuck A.B., Wilson S.M., Tonkin K.S., Tomiak A., Perera F., Vandenberg T.A., Chambers A.F. Changes over time of extracellular domain of HER2 (ECD/HER2) serum levels have prognostic value in metastatic breast cancer. Breast Cancer Res. Treat., 2009, vol. 114 (3), pp. 503-511.

73. Carney W.P. Hidden HER-2/neu-positive breast cancer: how to maximize detection. IDrugs, 2009, vol. 12 (4), pp. 238-242.

74. Molina R., Augé J.M., Escudero J.M., Filella X., Zanon G., Pahisa J., Farrus B., Muñoz M., Velasco M. Evaluation of tumor markers (HER-2/neu oncoprotein, CEA, and CA 15.3) in patients with locoregional breast cancer: prognostic value. Tumour Biol., 2010, vol. 31 (3), pp. 171-180.

75. Kandl H., Seymour L., Bezwoda W.R. Soluble c-erbB-2 fragment in serum correlates with disease stage and predicts for shortened survival in patients with early-stage and advanced breast cancer. Br. J. Cancer, 1994, vol. 70 (4), pp. 739-742.

76. Andersen T.I., Paus E., Nesland J.M., McKenzie S.J., Borresen A.L. Detection of c-erbB-2 related protein in sera from breast cancer patients. Acta Oncol., 1995, vol. 34 (4), pp. 499-504.

77. Molina R., Jo J., Filella X., Zanon G., Pahisa J., Muñoz M., Farrus B., Latre M.L., Gimenez N., Hage M., Estape J., Ballesta A.M. Utility of c-erbB-2 in tissue and serum in the early diagnosis of recurrence in breast cancer patients: comparison with carcinoembryonic antigen and CA 15.3. Br. J. Cancer, 1996, vol. 74 (7), pp. 1126-1131.

78. Krainer M., Brodowicz T., Zeillinger R., Wiltschke C., Scholten C., Seifert M., Kubista E., Zielinski C.C. Tissue expression and serum levels of HER-2/neu in patients with breast cancer. Oncology, 1997, vol. 54 (6), pp. 475-481.

79. Fehm T., Gebauer G., Jäger W. Clinical utility of serial serum c-erbB-2 determinations in the follow-up of breast cancer patients. Breast Cancer Res. Treat., 2002, vol. 75 (2), pp. 97-106.

80. Niikura N., Liu J., Hayashi N., Mittendorf E.A., Gong Y., Palla S.L., Tokuda Y., Gonzalez-Angulo A.M., Hortobagyi G.N., Ueno N.T. Loss of human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) expression in metastatic sites of HER2-overexpressing primary breast tumors. J. Clin. Oncol., 2012, vol. 30 (6), pp. 593-599.

81. Turner N.H., Di Leo A. HER2 discordance between primary and metastatic breast cancer: assessing the clinical impact. Cancer Treat. Rev., 2013, vol. 39 (8), pp. 947-957.

82. Pestrin M., Bessi S., Galardi F., Truglia M., Biggeri A., Biagioni C., Cappadona S., Biganzoli L., Giannini A., Di Leo A. Correlation of HER2 status between primary tumors and corresponding circulating tumor cells in advanced breast cancer patients. Breast Cancer Res. Treat., 2009, vol. 118 (3), pp. 523-530.

83. Ito Y., Iwase T., Hatake K. Eradication of breast cancer cells in patients with distant metastasis: the finishing touches? Breast Cancer, 2012, vol. 19 (3), pp. 206-211.

84. Kuniyoshi R.K., Gehrke Fde S., Alves B.C., Vilas-Bôas V., Coló A.E., Sousa N., Nunes J., Fonseca F.L., Del Giglio A. Gene profiling and circulating tumor cells as biomarker to prognostic of patients with locoregional breast cancer. Tumour Biol., 2015, vol. 36 (10), pp. 8075-8083.

85. Liu Y., Liu Q., Wang T., Bian L., Zhang S., Hu H., Li S., Hu Z., Wu S., Liu B., Jiang Z. Circulating tumor cells in HER2-positive metastatic breast cancer patients: a valuable prognostic and predictive biomarker. BMC Cancer, 2013, vol. 13, p. 202. doi: 10.1186/14712407-13-202.

86. Ludovini V., Gori S., Colozza M., Pistola L., Rulli E., Floriani I., Pacifico E., Tofanetti F.R., Sidoni A., Basurto C., Rulli A., Crinó L. Evaluation of serum HER2 extracellular domain in early breast cancer patients: correlation with clinicopathological parameters and survival. Ann. Oncol., 2008, vol. 19 (5), pp. 883-890.

87. Witzel I., Loibl S., von Minckwitz G., Mundhenke C., Huober J., Hanusch C., Henschen S., Hauschild M., Lantzsch T., Tesch H., Latos K., Just M., Hilfrich J., Barinoff J., Eulenburg C.Z., Roller M., Untch M., Müller V. Monitoring serum HER2 levels during neoadjuvant trastuzumab treatment within the GeparQuattro trial. Breast Cancer Res Treat., 2010, vol. 123 (2), pp. 437-445.

88. Witzel I., Loibl S., von Minckwitz G., Eidtmann H., Fehm T., Khandan F., Schmatloch S., Hauschild M., Bischoff J., Fasching P.A., Mau C., Schem C., Rack B., Meinhold-Heerlein I., Liedtke C., Karn T., Huober J., Zu Eulenburg C., Issa-Nummer Y., Untch M., Müller V. Predictive value of HER2 serum levels in patients treated with lapatinib or trastuzumab - a translational project in the neoadjuvant GeparQuinto trial. Br. J. Cancer, 2012, vol. 107 (6), pp. 956-960.

89. Kong Y., Dai S., Xie X., Xiao X., Lv N., Guo J., Li L., Jia W., Zhang Y., Liu W., Wei W., Xie X. High serum HER2 extracellular domain levels: correlation with a worse disease-free survival and overall survival in primary operable breast cancer patients. J. Cancer Res. Clin. Oncol., 2012, vol. 138 (2), pp. 275-284.

90. Ryu D.W., Lee C.H. Impact of Serum HER2 Levels on Survival and Its Correlation with Clinicopathological Parameters in Women with Breast Cancer. J. Breast Cancer, 2012, vol. 15 (1), pp. 71-78.

91. Thureau S., Clatot F., Laberge-Le-Couteulx S., Baron M., Basuyau J.P., Blot E. Elevated HER2 extracellular domain level in primary breast cancer with HER2 overexpression predicts early failure of adjuvant trastuzumab. Anticancer Res., 2012, vol. 32 (4), pp. 14291433.

92. Moreno-Aspitia A., Hillman D.W., Dyar S.H., Tenner K.S., Gralow J., Kaufman P.A., Davidson N.E., Lafky J.M., Reinholz M.M., Lingle W.L., Kutteh L.A., Carney W.P., Dueck A.C., Perez E.A. Soluble human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) levels in patients with HER2-positive breast cancer receiving chemotherapy with or without trastuzumab: results from North Central Cancer Treatment Group adjuvant trial N9831. Cancer, 2013, vol. 119 (15), pp. 2675-2682.

93. Esteva F.J., Valero V., Booser D., Guerra L.T., Murray J.L., Pusztai L., Cristofanilli M., Arun B., Esmaeli B., Fritsche H.A., Sneige N., Smith T.L., Hortobagyi G.N. Phase II study of weekly docetaxel and trastuzumab for patients with HER2-overexpressing metastatic breast cancer. J. Clin. Oncol., 2002, vol. 20 (7), pp. 1800-1808.

94. Esteva F.J., Cheli C.D., Fritsche H., Fornier M., Slamon D., Thiel R.P., Luftner D., Ghani F. Clinical utility of serum HER2/neu in monitoring and prediction of progression-free survival in metastatic breast cancer patients treated with trastuzumab-based therapies. Breast CancerRes., 2005, vol. 7 (4), pp. R436-R443.

95. Carney W.P. The emerging role of monitoring serum HER-2/neu oncoprotein levels in women with metastatic breast cancer. Lab. Med., 2003, vol. 34 (1), pp. 58-64.

96. Köstler W.J., Schwab B., Singer C.F., Neumann R., Rücklinger E., Brodowicz T., Tomek S., Niedermayr M., Hejna M., Steger G.G., Krainer M., Wiltschke C., Zielinski C.C. Monitoring of serum HER-2/neu predicts response and progression-free survival to trastuzumab-based treatment in patients with metastatic breast cancer. Clin. Cancer Res., 2004, vol. 10 (5), pp. 1618-1624.

97. Schippinger W., Regitnig P., Bauernhofer T., Ploner F., Hofmann G., Krippl P., Wehrschütz M., Lax S., Carney W., Neumann R., Wernecke K.D., Samonigg H. The course of serum HER-2/neu levels as an independent prognostic factor for survival in metastatic breast cancer. Oncol. Rep., 2004, vol. 11 (6), pp. 1331-1336.

2192

98. Pichón M.F., Hacene K., Guepratte S., Neumann R. Serum HER-2 extracellular domain (ECD) before the first metastasis in 128 breast cancer patients. Clin. Lab., 2004, vol. 50 (3-4), pp. 163-170.

99. S0rensen P.D., Madsen J.S., Brandslund I. Serum HER-2/ECD analysis in monitoring breast cancer patients. Clin. Chem. Lab. Med., 2012, vol. 50 (1), pp. 175-176.

100.Valero V., Roche H., Pienkowski T., Canon J., Zhao Y., Carney W., Mackey J., Taupin H., Buyse M., Slamon D. BCIRG 007: Serum HER2 levels in women with metastatic HER2-amplified breast cancer. J. Clin. Oncol., 2007, vol. 25 (18S), p. 1020.

101.Molina R., Jo J., Filella X., Zanon G., Pahisa J., Muñoz M., Farrus B., Latre M.L., Gimenez N., Hage M., Estape J., Ballesta A.M. C-erbB-2 oncoprotein in the sera and tissue of patients with breast cancer. Utility in prognosis. Anticancer Res., 1996b, vol. 16 (4B), pp. 2295-2300.

102.Eskelinen M., Kataja V., Hamalainen E., Kosma V.M., Penttila I., Alhava E. Serum tumor markers CEA, AFP, CA15-3, TPS and neu in diagnosis of breast cancer. Anticancer Res., 1997, vol. 17 (2B), pp. 231-234.

103.Bewick M., Chadderton T, Conlon M, Lafrenie R, Morris D, Stewart D. et al. Expression of c-erbB-2/HER-2 in patients with metastatic breast cancer undergoing high-dose chemotherapy and autologous blood stem cell support. Bone Marrow Transplant., 1999, vol. 24, pp. 377-384.

104.Ali S.M., Leitzel K., Chinchilli V.M., Engle L., Demers L., Harvey H.A., Carney W., Allard J.W., Lipton A. Relationship of serum HER-2/neu and serum CA 15-3 in patients with metastatic breast cancer. Clin. Chem., 2002, vol. 48 (8), pp. 1314-1320.

105.Lipton A., Leitzel K., Ali S.M., Demers L., Harvey H.A., Chaudri-Ross H.A., Evans D., Lang R., Hackl W., Hamer P., Carney W. Serum HER-2/neu conversion to positive at the time of disease progression in patients with breast carcinoma on hormone therapy. Cancer, 2005, vol. 104 (2), pp. 257-263.

106.Sandri M.T., Johansson H.A., Zorzino L., Salvatici M., Passerini R., Maisonneuve P., Rocca A., Peruzzotti G., Colleoni M. Serum EGFR and serum HER-2/neu are useful predictive and prognostic markers in metastatic breast cancer patients treated with metronomic chemotherapy. Cancer, 2007, vol. 110 (3), pp. 509-517.

107.Finn R.S., Gagnon R., Di Leo A., Press M.F., Arbushites M., Koehler M. Prognostic and predictive value of HER2 extracellular domain in metastatic breast cancer treated with lapatinib and paclitaxel in a randomized phase III study. J. Clin. Oncol., 2009, vol. 27 (33), pp. 5552-5558.

108.Burstein H.J., Harris L.N., Marcom P.K., Lambert-Falls R., Havlin K., Overmoyer B., Friedlander R.J. Jr., Gargiulo J., Strenger R., Vogel C.L., Ryan P.D., Ellis M.J., Nunes R.A., Bunnell C.A., Campos S.M., Hallor M., Gelman R., Winer E.P. Trastuzumab and vinorelbine as first-line therapy for HER2-overexpressing metastatic breast cancer: multicenter phase II trial with clinical outcomes, analysis of serum tumor markers as predictive factors, and cardiac surveillance algorithm. J. Clin. Oncol., 2003, V. 21 (15), P. 28892895.

109.Fehm T., Jager W., Kraemer S., Sohn C., Solomayer-Meyberg G., Solomayer E.F., Kurek R., Wallwiener D., Gebauer G. Changes of serum HER2 status during clinical course of metastatic breast cancer patients. Anticancer Res., 2004, vol. 24 (6), pp. 4205-4210.

110.Saghatchian M., Guepratte S., Hacene K., Neumann R., Floiras J.L., Pichon M.F. Serum HER-2 extracellular d main: relationship with clinicobiological presentation and prognostic value before and after o primary treatment in 701 breast cancer patients. Int. J. Biol. Markers, 2004, vol. 19 (1), pp. 14-22.

111.Samy N., Ragab H.M., El Maksoud N.A., Shaalan M. Prognostic significance of serum Her2/neu, BCL2, CA15-3 and CEA in breast cancer patients: a short follow-up. Cancer Biomark, 2010, vol. 6 (2), pp. 63-72.

112.Ali S.M., Carney W.P., Esteva F.J., Fornier M., Harris L., Köstler W.J., Lotz J.P., Luftner D., Pichon M.F., Lipton A. Serum HER-2/neu Study Group. Serum HER-2/neu Study Group. Serum HER-2/neu and relative resistance to trastuzumab-based therapy in patients with metastatic breast cancer. Cancer, 2008, vol. 113 (6), pp. 1294-1301.

113.Petersen E.R., S0rensen P.D., Jakobsen E.H., Madsen J.S., Brandslund I. Serum HER-2 predicts response and resistance to trastuzumab treatment in breast cancer. Clin. Chem. Lab. Med., 2013, vol. 51 (7), pp. 1483-1492.

114.Lipton A., Leitzel K., Ali S.M., Carney W., Platek G., Steplewski K., Westlund R., Gagnon R., Martin A.M., Maltzman J. Human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) extracellular domain levels are associated with progression-free survival in patients with HER2-positive metastatic breast cancer receiving lapatinib monotherapy. Cancer, 2011, vol. 117 (21), pp. 5013-5020.

115.Darlix A., Lamy P.J., Lopez-Crapez E., Braccini A.L., Firmin N., Romieu G., Thezenas S., Jacot W. Serum HER2 extra-cellular domain, S100ß and CA 15-3 levels are independent prognostic factors in metastatic breast cancer patients. BMC Cancer, 2016, vol. 16, p. 428. doi: 10.1186/s12885-016-2448-1.

116.Lipton A., Ali S.M., Leitzel K., Demers L., Chinchilli V., Engle L., Harvey H.A., Brady C., Nalin C.M., Dugan M., Carney W., Allard J. Elevated serum HER-2/neu level predicts decreased response to hor-mone therapy in metastatic breast cancer. J. Clin. Oncol., 2002, vol. 20 (6), pp. 1467-1472.

117. Yamauchi H., O'Neill A., Gelman R., Carney W., Tenney D.Y., Hösch S., Hayes D.F. Prediction of response to antiestrogen therapy in advanced breast cancer patients by pretreatment circulating levels of extracellular domain of the HER-2/c-neu protein. J. Clin. Oncol., 1997, vol. 15 (7), pp. 2518-2525.

118.Wright C., Cairns J., Cantwell B.J., Hall A.G., Harris A.L., Horne C.H. Response to mitoxantrone in advanced breast cancer: correlation with expression of c-erbB-2 protein and glutathione S-transferases. Br. J. Cancer, 1992, vol. 65 (2), pp. 271-274.

119.Hayes D.F., Yamauchi H., Broadwater G., Cirrincione C.T., Rodrigue S.P., Berry D.A., Younger J., Panasci L.L., Millard F., Dug-gan D.B., Norton L., Henderson I.C. Cancer and Leukemia Group B. Circulating HER-2/erbB-2/c-neu (HER-2) extracellular domain as a prognostic factor in patients with metastatic breast. Clin. Cancer Res., 2001, vol. 7 (9), pp. 2703-2711.

120.Lipton A., Ali S.M., Leitzel K., Demers L., Harvey H.A., Chaudri-Ross H.A., Brady C., Wyld P., Carney W. Serum HER-2/neu and response to the aromatase inhibitor Letrozole versus Tamoxifen. J. Clin. Oncol., 2003, vol. 21 (10), pp. 1967-1972.

121.Fehm T., Maimonis P., Weitz S., Teramoto Y., Katalinic A., Jäger W. Influence of circulating c-erbB-2 serum protein on response to adjuvant chemotherapy in node-positive breast cancer patients. Breast Cancer Res. Treat., 1997, vol. 43 (1), pp. 87-95.

122.Colomer R., Montero S., Lluch A., Ojeda B., Barnadas A., Casado A., Massuti B., Cortes-Funes H., Lloveras B. Circulating HER2 extracellular domain and resistance to chemotherapy in advanced breast cancer. Clin. Cancer Res., 2000, vol. 6 (6), pp. 2356-2362.

123.Luftner D., Henschke P., Flath B., Akrivakis C., Schnabel S., Prinz B., Geppert R., Wernecke K.D., Possinger K. Serum HER-2/neu as a prediction and monitoring parameter in a phase II study with weekly paclitaxel in metastatic breast cancer. Anticancer Res., 2004, vol. 24 (2B), pp. 895-906.

124.Muller V., Witzel I., Luck H.J., Kohler G., von Minckwitz G., Mobus V., Sattler D., Wilczak W., Loning T., Janicke F., Pantel K., Thomssen C. Prognostic and predictive impact of the HER-2/neu extracellular domain (ECD) in the serum of patients treated with chemotherapy for metastatic breast cancer. Breast Cancer Res. Treat., 2004, vol. 86 (1), pp. 9-18.

125.Slamon D.J., Leyland-Jones B., Shak S., Fuchs H., Paton V., Bajamonde A., Fleming T., Eiermann W., Wolter J., Pegram M., Basel-ga J., Norton L. Use of chemotherapy plus a monoclonal antibody against HER2 for metastatic breast cancer that overexpresses HER2. N. Engl. J. Med., 2001, vol. 344 (11), pp. 783-792.

2193

126.Wolff A.C., Hammond M.E., Hicks D.G., Dowsett M., McShane L.M., Allison K.H., Allred D.C., Bartlett J.M., Bilous M., Fitzgibbons P., Hanna W., Jenkins R.B., Mangu P.B., Paik S., Perez E.A., Press M.F., Spears P.A., Vance G.H., Viale G., Hayes D.F. American Society of Clinical Oncology; College of American Pathologists. Recommendations for human epidermal growth factor receptor 2 testing in breast cancer: American Society of Clinical Oncology/College of American Pathologists clinical practice guideline update. Arch. Pathol. Lab. Med., 2014, vol. 138 (2), pp. 241-256.

127.Brunelli M., Manfrin E., Martignoni G., Bersani S., Remo A., Reghellin D., Chilosi M., Bonetti F. HER-2/neu assessment in breast cancer using the original FDA and new ASCO/CAP guideline recommendations: impact on selecting patients for herceptin therapy. Am. J. Clin. Pathol., 2008, vol. 129 (6), pp. 907-911.

128.Dnistrian A.M., Schwartz M.K., Schwartz D.C., Ghani F., Kish L. Significance of serum HER-2/neu oncoprotein, CA 15-3 and CEA in the clinical evaluation of metastatic breast cancer. J. Clin. Ligand. Assay, 2003, vol. 25, pp. 215-220.

129.Hoopmann M., Neumann R, Tanasale T, Schondorf T. HER-2/neu determination in blood plasma of patients with HER-2/neu overex-pressing metastasized breast cancer: a longitudinal study. Anticancer Res., 2003, vol. 23 (2A), pp. 1031-1034.

130.Nahta R., Shabaya S., Ozbay T., Rowe D.L. Personalizing HER2-targeted therapy in metastatic breast cancer beyond HER2 status: what we have learned from clinical specimens. Curr. PharmacogenomicsPerson. Med., 2009, vol. 7 (4), pp. 263-274.

131.Spector N.L., Blackwell K.L. Understanding the mechanisms behind trastuzumab therapy for human epidermal growth factor receptor 2-positive breast cancer. J. Clin. Oncol., 2009, vol. 27 (34), pp. 5838-5847.

132.Lee C.K., Davies L., Gebski V.J., Lord S.J., Di Leo A., Johnston S., Geyer C. Jr., Cameron D., Press M.F., Ellis C., Loi S., Marschner I., Simes J., de Souza P. Serum Human Epidermal Growth Factor 2 Extracellular Domain as a Predictive Biomarker for Lapatinib Treatment Efficacy in Patients With Advanced Breast Cancer. J. Clin. Oncol., 2016, vol. 34 (9), pp. 936-944.

133.Lennon C., Barton L., Banken L., Marty M., Baselga J., Leyland-Jones B. Utility of serum HER2 extracellular domain assessment in clinical decision making: pooled analysis off our trials of Trastuzumab in metastatic breast cancer. J. Clin. Oncol., 2009, vol. 27 (10), pp. 1685-1693.

134.Leary A.F., Hanna W.M., van de Vijver M.J., Penault-Llorca F., Ruschoff J., Osamura R.Y., Bilous M., Dowsett M. Value and limitations of measuring HER-2 extracellular domain in the serum of breast cancer patients. J. Clin. Oncol., 2009, vol. 27 (10), pp. 1694-1705.

135.Leyland-Jones B., Smith B.R. Serum HER2 testing in patients with HER2-positive breast cancer: the death knell tolls. Lancet Oncol., 2011, vol. 12 (3), pp. 286-295.

136.Harris L., Fritsche H., Mennel R., Norton L., Ravdin P., Taube S., Somerfield M.R., Hayes D.F., Bast R.C. Jr. American Society of Clinical Oncology. American Society of Clinical Oncology 2007 update of recommendations for the use of tumor markers in breast cancer. J. Clin. Oncol., 2007, vol. 25 (33), pp. 5287-5312.

Received 21 July 2016

Kushlinskiy Nikolay Evgenevich, Russian Cancer Research Center named after N.N. Blokhin, Moscow, Russian Federation, Doctor of Medicine, Professor, Correspondent-Member of Russian Academy of Medical Sciences, Head of Clinical Biochemistry Laboratory, e-mail: biochimia@mtu-net.ru

Gershtein Elena Sergeevna, Russian Cancer Research Center named after N.N. Blokhin of Russian Academy of Medical Sciences, Moscow, Russian Federation, Doctor of Biology, Professor, Leading Scientific Worker of Laboratory of Clinical Biochemistry, e-mail: esgershtein@gmail.com

Ovchinnikova Larisa Konstantinovna, Moscow Regional Oncologic Dispensary, Balashikha, Moscow oblast, Russian Federation, Candidate of Medicine, Head of Mammary Gland Tumours Department, e-mail: ognerubov_n.a@mail.ru

Ognerubov Nikolay Alekseevich, Tambov State University named after G.R. Derzhavin, Tambov, Russian Federation, Doctor of Medicine, Candidate of Jurisprudence, Professor, Head of Anatomy, Operative Surgery and Oncology Department, Honored Worker of Higher School of Russian Federation, e-mail: ognerubov_n.a@mail.ru

Информация для цитирования:

Кушлинский Н.Е., Герштейн Е.С., Овчинникова Л.К., Огнерубов Н.А. Растворимый внеклеточный домен рецептора HER2/neu при раке молочной железы // Вестник Тамбовского университета. Серия Естественные и технические науки. Тамбов, 2016. Т. 21. Вып. 6. С. 2177-2194. DOI: 10.20310/1810-0198-2016-21-6-2177-2194

Kushlinskii N.E., Gershtein E.S., Ovchinnikova L.K., Ognerubov N.A. Rastvorimyy vnekletochnyy domen retseptora HER2/neu pri rake molochnoy zhelezy [A soluble extracellular domain of the receptor HER2/neu in breast cancer patients]. Vestnik Tambovskogo universiteta. Seriya Estestvennye i tekhnicheskie nauki — Tambov University Review. Series: Natural and Technical Sciences, 2016, vol. 21, no. 6, pp. 2177-2194. DOI: 10.20310/1810-0198-2016-21-6-2177-2194 (In Russian).

2194

УДК 618.19-006.6-091.8:575.224.22.088 DOI: 10.20310/1810-0198-2016-21 -6-2195-2201

РАК МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ И СОМАТИЧЕСКИЕ МУТАЦИИ ГЕНА Р1К3СА В ОПУХОЛИ

© М.Л. Филипенко1*, Н.А. Оськина1*, И.А. Оскорбин1*, О.В. Мишукова1*, Л.К. Овчинникова2*, Н.А. Огнерубов3*, Е.С. Герштейн4*, Н.Е. Кушлинский4*

Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН 630090, Российская Федерация, г. Новосибирск, пр. Ак. Лаврентьева, 8 E-mail: mlfilipenko@gmail.com 2) Московский областной онкологический диспансер 143900, Российская Федерация, Московская обл., г. Балашиха, ул. Карбышева, 6 3) Тамбовский государственный университет им. Г.Р. Державина 392000, Российская Федерация, г. Тамбов, ул. Интернациональная, 33 E-mail: ognerubov_n.a@mail.ru 4) Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН Минздрава России 115478, Российская Федерация, г. Москва, Каширское шоссе, 23 E-mail: biochimia@mtu-net.ru

Методом мультиплексной аллель-специфичной полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени изучено наличие активирующих соматических мутаций в кодонах 542 и 545 экзона 9 (p.E542K c.1624G>A и p.E545K c.1633G>A) и в кодоне 1047 экзона 20 (p.H1047R c.3140A>G и p.H1047L c.3140A>T) гена PIK3CA каталитической p110a субъединицы фосфатидилинозит-3 киназы в опухолях 473 больных раком молочной железы. Выявлено 58 различных мутаций, что составило 12,3 %. Продемонстрировано увеличение частоты встречаемости мутаций PIK3CA по мере прогрессирования заболевания (с 2,4 % при I—IIa до 28,7 % — при III—IV стадии; p = 0,0001) и тенденция к ее увеличению в опухолях с неблагоприятными прогностическими признаками (высокая степень злокачественности, «тройной негативный» фенотип). Установлено, что наличие исследованных мутаций PIK3CA в опухолях статистически значимо ухудшает безрецидивную выживаемость как во всей группе, так и при III стадии заболевания.

Ключевые слова: аллель-специфичная ПЦР в режиме реального времени (АС-ПЦР-РВ); ген PIK3CA; мутации; рак молочной железы; клинико-морфологические факторы; прогноз

ВВЕДЕНИЕ

Сигнальный путь Р13К/АКТ - один из ключевых внутриклеточных сигнальных каскадов, запускающихся при активации практически всех трансмембранных тирозинкиназных рецепторов факторов роста, включая рецепторы эпидермального фактора роста, рецептор 1 типа инсулиноподобных факторов роста, рецепторы УЕОЕ и др. Первое звено этого каскада - фосфатиди-линозит-3 киназа (Р13К) - фермент, фосфорилирующий инозитное кольцо в положении Б-3, - считается в настоящее время одним из важнейших регуляторных белков, поскольку, находясь на пересечении различных сигнальных путей, она контролирует ключевые функции клетки, такие как пролиферация, апоптоз, миграция, реорганизация цитоскелета. На самом деле, Р13К -это целая группа ферментов, делящаяся на 3 класса в зависимости от структуры и субстратной специфичности, но только для Р13К класса 1А доказано участие в канцерогенезе [1]. 1А Р13К - это также группа гетеро-димеров, состоящих из двух субъединиц: каталитической р110 (р110а, р110р, и р1105) и регуляторной р85 (р85а, р85р, р85у, р50а, и р55а). Изоформы как каталитической, так и регуляторной части фермента кодиру-

ются 3 разными генами, соответственно, PIK3CA, PIK3CB, PIK3CD и PIK3R1, PIK3R2, PIK3R3.

Известно, что активирующие соматические мутации в гене PIK3CA, кодирующем каталитическую p110a субъединицу PI3K, играют значительную роль в патогенезе и прогрессии опухолей и часто встречаются при раке молочной железы (РМЖ), колоректальном раке, раке эндометрия, мочевого пузыря, желудка, а также в большинстве других опухолей человека [2—4]. Наиболее частыми соматическими мутациями гена PIK3CA являются p.E542K c.1624G>A, p.E545K c.1633G>A, p.H1047R c.3140A>G и p.H1047L c.3140A>T, составляющие более 90 % всех мутаций. Мутации H1047R и H1047L локализованы в кодоне 1047 экзона 20 киназного домена p110a, а мутации E542K и E545K — в кодонах 542 и 545 экзона 9, принадлежащих домену, ответственному за взаимодействие p110a с регуляторной p85 субъединицей фермента. Показано, что они повышают киназную активность PI3K, ведут к активации нижележащей киназы Akt и, таким образом, являются онкогенными [5—6].

В настоящее время считается, что соматические мутации PIK3CA более часто ассоциированы с опухолями с менее агрессивным поведением, положитель-

2195

ными по рецепторам эстрогенов (РЭ) и имеющими люминальный А молекулярный тип, однако исследования, оценивающие прогностическое или предиктивное значение этих мутаций, весьма противоречивы [7], в частности, из-за различных методов выявления мутаций, популяционных особенностей пациентов и часто малых размеров выборок. Крайне важно, чтобы влияние мутаций гена PIK3CA на патофизиологию опухоли и ее ответ на терапию были более тщательно проанализированы на разных стадиях прогрессии опухоли.

Цель настоящего исследования - оценка взаимосвязи соматических мутаций гена PIK3CA в опухолях больных раком молочной железы с основными клини-ко-морфологическими факторами прогноза и выживаемостью пациенток.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Клинический материал. В исследование вошли 473 больных РМЖ в возрасте от 28 до 82 лет, проходивших обследование и лечение в ФГБУ РОНЦ им. Н.Н. Блохина Минздрава России с 2009 по 2012 г. У 93 пациенток была I (TjNqMo), у 202 - 11а (T2N0Mo), у 135 - III (T1-4N0-3M0) и у 43 - IV (T1-4N0-3M+) стадия заболевания. Во всех случаях диагноз подтвержден гистологическим исследованием опухоли. По гистологическому строению 316 опухолей были отнесены к протоковому инфильтративному раку, 84 - к дольково-му инфильтративному, 16 - к слизистому; у 55 пациенток был смешанный гистологический тип РМЖ и у 2 -рак Педжета. Большинство опухолей (68 %) имели G-2, 23 % - G-3 и всего 9 % - G-1 степень злокачественности.

В опухолях всех обследованных больных иммуно-гистохимическим методом оценена экспрессия РЭ и

рецепторов прогестерона (РП), а также HER2/neu и белка Ki-67. На основании этих исследований выделено 6 молекулярных типов РМЖ: люминальный А ^+Pn+HER2~ Ki-67<20 %) тип выявлен у 134, люминальный В HER2~ ^+Pn+HER2~ Ki-67>20 %) - у 73, люминальный В HER2+ ^+Pn+HER2+ Ki-67 любой) -у 65, HER2+ ^Pn~HER2+ Ki-67 любой) - у 69, «тройной негативный» (РЭ~РП~HER2~ Ki-67 любой) -у 76 больных, и у 56 больных опухоли были РЭ+РП~HER2~ Ki67<20 %.

Анализ соматических мутаций гена PIK3CA. ДНК для мутационного анализа выделяли из парафиновых блоков опухолей, удаленных хирургическим методом или полученных в результате трепанобиопсии у ранее нелеченных больных РМЖ, с помощью QIAamp DNA FFPE Tissue Kit согласно инструкции компании производителя. Для детекции соматических мутаций в кодонах 542 и 545 экзона 9 (p.E542K c.1624G>A и p.E545K c.1633G>A, соответственно) и в кодоне 1047 экзона 20 (p.H1047R c.3140A>G и p.H1047L c.3140A>T) гена PIK3CA проводили мультиплексную аллель-специфичной полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени с детекцией сигнала с помощью TaqMan зондов, как описано ранее [8]. Структура использованных олигонуклеотид-ных праймеров и флуоресцентно меченных зондов представлена в табл. 1.

Статистический анализ изменения частот выявления соматических мутаций оценивали с помощью точного двустороннего теста Фишера, безрецидивную выживаемость - методом Каплана-Мейера. Проведен также многофакторный анализ с использованием регрессионной модели Кокса.

Таблица 1

Список олигонуклеотидных праймеров и флуоресцентно меченных зондов, использованных в работе

№ п/п Название Нуклеотидная последовательность

1 IL17RA-U 5'-CTTGATGCTCTCGCTCTTCG-3'

2 IL17RA-R 5'-TGTAGCCCTGGTCAGACTG-3'

3 IL17RA-PCy5 5'-Cy5-CTGCCGCTGCTCCTCCTCG-BHQ2-3'

4 1047mutN2R 5'-TGTTGTCCAGCCACCATGTC-3'

5 545mutN2 5' -CCATAGAAAATCTTTCTCCTGCct-3'

6 542mutN2 5'-CTTTCTCCTGCTCAGTGATTct-3'

7 UU-542 5'-GGAAAATGACAAAGAACAGCTCA-3'

8 PIC-1047L 5' -TTGTTGTCCAGCCACCATGGA-3'

9 Prob-PIC1 5'-FAM-CAATTTCTACACGAGATCCTCTCTC-BHQ1-3'

10 Prob-PIC3 5'-HEX-TCATGAAACAAATGAATGATGCA-BHQ1

Таблица 2

Распределение типов соматических мутаций в исследуемых опухолях молочной железы в зависимости от стадии заболевания

Стадия Число больных E542K E545K H1047R H1047L Всего

I 93 1 (1,1 %) - - - 1 (1,1 %)

11а 202 2 (1,0 %) 3 (1,5 %) 1 (0,5 %) - 6 (3,0 %)

I-Па 295 3 (1,0 %) 3 (1,0 %) 1 (0,3 %) - 7 (2,4 %)

III 135 16 (11,9 %) 2 (1,5 %) 14 (10,4 %) 6 (4,4 %) 38 (28,1 %)

IV 43 6 (14,0 %) 1 (2,3 %) 4 (9,3 %) 2 (4,7 %) 13 (30,2 %)

III-IV 178 22 (12,4 %) 3 (1,7 %) 18 (10,1 %) 8 (4,5 %) 51 (28,7 %)

Всего 473 25 (8,0 %) 6 (1,3 %) 19 (4,0 %) 8 (1,7 %) 58 (12,3 %)

2196

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Всего в 473 исследованных образцах РМЖ выявлено 58 различных мутаций гена Р1К3СА (25 - р.Е542К; 6 - р.Е545К; 19 - р.Н1047Я, 8 - р.И1047Ь), что составило 12,3 % (табл. 2). Наиболее часто выявляли мутации р.Е542К - в 25 образцах, и р.Н1047Я - в 19. Образцов с несколькими различными мутациями не обнаружено.

Мутация гена Р1К3СА (р.Е542К) обнаружена только в одной из 93 опухолей молочной железы I стадии. Эта же мутация обнаружена в 2 из 202 образцов опухолей молочной железы 11а стадии, еще в 3 из 202 опухолей 11а стадии обнаружена мутация р.Е545К, и в одной из них - р.Н1047Я. В целом, частота выявления соматических мутаций гена Р1К3СА увеличивалась по мере прогрессирования опухолевого процесса и составила 2,4 % в опухолях I-11а стадий против 28,7 % в опухолях Ш-1У стадий (р = 0,0001). Увеличение происходило в большей степени за счет мутаций в 1047 кодоне каталитического домена фермента: они составляют 14 % всех мутаций (1/7) при I-11а стадиях и 46,5 % (26/51) -при Ш-1У (р = 0,007). Частоты выявления мутаций в опухолях при III и IV стадиях статистически значимо не различались.

Далее мы проанализировали взаимосвязь наличия соматических мутаций гена Р1К3СА с такими ключевыми клинико-морфологическими характеристиками РМЖ, как гистологическое строение, степень злокачественности и молекулярный тип (табл. 3). Статистически значимых ассоциаций как общей частоты выявления всех мутаций, так и частоты выявления отдельных мутаций с каким-либо из вышеуказанных факторов не обнаружено. Однако можно отметить несколько большую частоту мутаций в дольковом инфильтративном раке по сравнению с протоковым инфильтративным (в

слизистом и смешанном РМЖ и раке Педжета мутаций не обнаружено), а также выраженную тенденцию к увеличению частоты соматических мутаций гена Р1К3СА с увеличением степени злокачественности - от полного отсутствия при 0-1 до почти 20 % при 0-3.

Что касается молекулярных типов РМЖ, то наиболее часто мутации Р1К3СА встречались в прогностически неблагоприятном и трудно поддающемся лечению «тройном негативном» раке (14,5 %), а наиболее редко -в НЕК2+ РМЖ (8,7 %), также достаточно агрессивном. Частота выявления мутаций в РМЖ люминального В типа (как НЕК2+, так и НЕК2~) была незначительно выше, чем в опухолях люминального А и близкого к нему РЭ+РП-НЕК2- К167<20 % типа. Также отдельно проанализировали взаимосвязь частоты выявления мутаций со статусом РЭ, РП, НЕК2/пеи и белка Кь67, однако и в этом случае значимых ассоциаций выявлено не было (данные не представлены).

Удалось проследить отдаленные результаты лечения 465 из 473 обследованных больных РМЖ на протяжении от 5 месяцев до 6 лет. В общей группе продемонстрировано статистически значимое (р < 0,0001) снижение безрецидивной выживаемости больных при наличии мутаций гена Р1К3СА в опухоли: 1-летняя выживаемость снижалась на 20 %, 2-летняя - на 30 %, 3-летняя - на 50 % и 5-летняя - на 30 % по сравнению с пациентками без мутаций.

Учитывая тот факт, что мутации Р1К3СА, в основном, были обнаружены при распространенном РМЖ, а, следовательно, ухудшение прогноза в данной группе могло быть связано именно с этой закономерностью, мы проанализировали отдаленные результаты лечения больных разных стадий. Оказалось, что все больные I-На стадии, у 7 из которых обнаружены мутации гена Р1К3СА, были живы без рецидива на протяжении всего периода наблюдения. Однако в группе больных РМЖ

Таблица 3

Частота выявления соматических мутаций гена Р1К3СА в зависимости от гистологического строения

и молекулярного типа РМЖ

Обследованные группы Частота выявления мутаций гена Р1К3СА в опухолях больных РМЖ Всего

Мутации

Е542К | Е545К | Н1047Я | Н1047Ь

Гистологический вариант РМЖ

Протоковый инфильтративный рак 17 (5,4 %) 5 (1,6 %) 14 (4,4 %) 6 (1,9 %) 43 (13,6 %)

Дольковый инфильтративный рак 7 (8,3 %) 1 (1,2 %) 5 (6,0%) 2 (2,4 %) 15 (17,9 %)

Степень злокачественности РМЖ

0-1 - - - - -

0-2 15 (4,7 %) 5 (1,6 %) 12 (3,7 %) 4 (1,2 %) 36 (11,2 %)

0-3 10 (9,1 %) 1 (0,9 %) 7 (6,3 %) 4 (3,6 %) 22 (19,8 %)

Молекулярный тип РМЖ

Люминальный А 9 (6,7 %) 1 (0,8 %) 4 (3,0 %) 2 (1,5 %) 16 (11,9 %)

РЭ+РП-НЕК2-К167<20% 6 (10,7 %) - - - 6 (10,7 %)

Люминальный В НЕК2~ 4 (5,5 %) 1 (1,4 %) 4 (5,5 %) 1 (1,4 %) 10 (13,7 %)

Люминальный В НЕК2+ 1 (1,5 %) 1 (1,5 %) 6 (9,2 %) 1 (1,5 %) 9 (13,9 %)

НЕК2+ 2 (2,9 %) - 2 (2,9 %) 2 (2,9 %) 6 (8,7 %)

Тройной негативный 3 (4,0 %) 3 (4,0 %) 3 (4,0 %) 2 (2,6 %) 11 (14,5 %)

2197