CC BY
55
ПЕДИАТРИЯ
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2015
РАСТВОРИМАЯ ФОРМА РЕЦЕПТОРА ИНТЕРЛЕЙКИНА-8 CXCR2 В КАЧЕСТВЕ МАРКЕРА ВОСПАЛЕНИЯ ПРИ ПАТОЛОГИИ ПЕРИНАТАЛЬНОГО ПЕРИОДА
Ю.В. КОТЛИНСКАЯ*, И.М. КРАСТЕЛЁВА**, Ю.А. УСТИНОВИЧ**, Е.В. ШИЛКИНА**,
Г.А. ШИШКО**, Н.Н. ВОЙТЕНОК***
*ГУ «Республиканский научно-практический центр трансфузиологии и медицинских биотехнологий», г.Минск, Республика Беларусь
**ГУО «Белорусская медицинская академия последипломного образования», г.Минск, Республика Беларусь
***Фонд молекулярной гематологии и иммунологии, г.Москва, Российская Федерация
Вестник ВГМУ. - 2015. - Том 14, №6. - С. 70-77.
THE SOLUBLE FORM OF INTERLEUKIN-8 RECEPTOR CXCR2 AS A MARKER OF AN INFLAMMATION IN PERINATAL PATHOLOGY
Y.V. KATLINSKAYA*, I.M. KRASTELYOVA**, Y.A. USTINOVICH**, E.V. SHILKINA**,
G.A. SHISHKO**, N.N. VOYTENOK***
*State Establishment «Republican Scientific-Practical Center of Transfusiology and Medical Biotechnologies», Minsk, Republic of Belarus
**State Educational Establishment «Belarusian Medical Academy of Post-Graduate Education», Minsk, Republic of Belarus
***Fund of molecular humatology and immunology, Moscow, Russian Federation Vestnik VGMU. 2015;14(6):70-77.
Резюме.
Целью данного исследования являлось определение уровней растворимого рецептора интерлейкина-8 второго типа CXCR2 ^CXCR2) в качестве маркера вовлечения нейтрофильных лейкоцитов крови в воспалительный процесс при патологии беременности, а также респираторном дисстресс-синдроме (РДС) недоношенных новорожденных.
Материал и методы. Уровень рCXCR2 в супернатантах активированных нейтрофилов и биологических жидкостях человека определяли «сэндвич» вариантом иммуноферментного анализа.
Результаты. Растворимый CXCR2 обнаружен в амниотической жидкости во втором триместре беременности при патологии, причем уровни рCXCR2 прямо коррелировали с уровнями растворимого рецептора фактор некроза опухолей а (ФНО-а) р55, что может свидетельствовать о продукции рCXCR2 нейтрофилами в ответ на ФНО-а, концентрация которого повышается при инфекции. Нами также обследованы группы недоношенных новорожденных с РДС без доказанной инфекционной патологии и с РДС на фоне пневмонии, внутриутробной инфекции и сепсиса. Показано, что уровни рCXCR2 в моче новорожденных в течение первых суток после рождения достоверно понижены в группах пациентов с РДС и инфекцией в сравнении с группой новорожденных с РДС, что может отражать степень выраженности воспалительных изменений при РДС и являться сигналом для раннего начала проведения системы лечебных мероприятий. Заключение. Таким образом, уровнь рCXCR2 в моче новорожденных c РДС может выступать в качестве маркера оценки тяжести состояния, определение которого не будет сопряжено с проведением инвазивных процедур.
Ключевые слова: системный воспалительный ответ, инфекция, амниотическая жидкость, моча, растворимый CXCR2.
Abstract.
Objectives. To determine the levels of interleukin-8 soluble receptor CXCR2 (sCXCR2) as a marker of neutrophilic
70
ВЕСТНИК ВГМУ, 2015, ТОМ 14, №вб
leukocytes involvement in the inflammatory process during the pathology of pregnancy and respiratory distress syndrome (RDS) in premature infants.
Material and methods. Soluble sCXCR2 level in the supernatants of activated neutrophils and human biological fluids was determined by «sandwich» enzyme-linked immunoassay.
Results. Soluble CXCR2 was found in the amniotic fluid in the second trimester in the pathology of pregnancy. The levels of sCXCR2 directly correlated with the levels of soluble tumor necrosis factor a (TNF-a) receptor p55, which can indicate that sCXCR2 is produced by neutrophils in response to the increasing concentration of TNF-a caused by infection. We have also examined the groups of preterm infants with RDS devoid of infectious pathology and with RDS associated with pneumonia, intrauterine infection and sepsis. It has been shown that the levels of sCXCR2 in the urine of newborns on the 1st day after birth were significantly reduced in patients with RDS and infection in comparison with the group of infants with RDS without accompanying infectious pathology. Conclusions. Thus the levels of sCXCR2 may reflect the severity of inflammatory changes during RDS, and serve as a signal for an early treatment. Moreover, the determination of sCXCR2 in newborns urine is not associated with conducting invasive procedures.
Key words: systemic inflammatory response, infection, amniotic fluid, urine, soluble CXCR2.
Одной из актуальных проблем современной неонатологии в Республике Беларусь является высокая заболеваемость новорожденных детей инфекционной патологией, основной причиной которой является незрелость защитных механизмов иммунитета, особенно у недоношенных новорожденных. В современной перинатологии высока вероятность комбинации гипоксических и инфекционных процессов. В то же время нет четких критериев системного воспалительного ответа (СВО) у новорожденных детей, и роль медиаторов воспаления у них изучена недостаточно. Критерии СВО, используемые у взрослых, не применимы в не-онатологии в силу возрастных различий нормативных показателей витальных функций, проявлений пограничного состояния адаптации и вариабельности нормативных показателей «белой крови» у новорожденных. Существующие диагностические критерии инфекционного процесса у новорожденных детей очень часто неспецифичны, что вызывает определенные трудности в диагностике. Поэтому особую ценность могли бы представлять маркеры, позволяющие разграничить инфекцию и асептическое воспаление.
Привлечение лейкоцитов в участок проникновения патогенов является ключевым этапом в реализации ответа на инфекцию и опосредовано хемоаттрактантами, в частности хемокинами. Так, в очаге проникновения бактерий клетки иммунной системы в ответ на фактор некроза опухолей a (ФНО-a) и другие провоспалительные цитокины, а также под действием бактерий и их токсинов, способны синтезировать интерлейкин-8 (ИЛ-
8/CXCL8), один из основных хемоаттрактантов нейтрофилов [1]. ИЛ-8 действует на клетки через мембранные рецепторы первого (CXCR1) и второго (CXCR2) типов, относящихся к «серпентиновому» семейству рецепторов, связанных с G-белками. Привлеченные в очаг воспаления нейтрофилы активируются под действием ФНО-a и бактериальных продуктов, которые непосредственно вызывают снижение экспрессии CXCR2 на поверхности нейтрофилов, сопровождающееся переходом CXCR2 в растворимую форму ^CXCR2) [24]. Следствием такого отщепления рецептора CXCR2 может быть резкое снижение миграционных свойств нейтрофилов, приводящее к остановке клеток в участке воспаления.
Растворимый CXCR2 гликозилирован, имеет низкое значение изоэлектрической точки и может накапливаться в участках воспаления. Наличие гликозилирования увеличивает молекулярный радиус молекулы рCXCR2 с 13 кДа в денатурирующих условиях до 40 кДа в физиологических условиях [3, 5].
Мы предположили, что определение уровней рCXCR2 может служить маркером воспаления и прогноза течения патологического процесса, а также являться перспективным подходом к раннему выявлению внутриутробной инфекции (ВУИ).
Кроме того, ранее полученные клинические данные свидетельствуют, что повышение уровня провоспалительных цитокинов, таких как ИЛ-8, ИЛ-6, ФНО-a, ИЛ-1 [6] в амниотической жидкости женщин с инфекциями урогенетального тракта является прогностическим фактором неблагоприятного течения
71
РАСТВОРИМЫЙ CXCR2 ПРИ ПАТОЛОГИИ ПЕРИНАТАЛЬНОГО ПЕРИОДА
беременности: преждевременных родов и, как следствие, развития дыхательной недостаточности у новорожденных [7-9]. ФНО-а является плейотропным цитокином, принимающим участие в активации и регуляции воспалительного ответа. Короткий период нахождения в кровотоке ФНО-а ограничивает его диагностическую ценность. При связывании ФНО-а с рецепторами происходит феномен «шеддин-га» внеклеточного эктодомена, т. е. его протеолитическое отщепление. Эти растворимые рецепторы длительно циркулируют в крови, определяются в различных биологических жидкостях (слезной, спинномозговой, бронхиальном секрете) и экскретируются в мочу, где их можно определить количественным способом и оценить выраженность воспалительного ответа [10]. Повышение уровня растворимого р55 было обнаружено в амниотической жидкости пациенток с преэклампсией в сравнении с контрольной группой беременных [11]. Предполагается, что при данной патологии возрастание уровня растворимого р55 представляет собой защитный механизм в ответ на высокие уровни ФНО-а и является маркером активации иммунной системы.
Целью данного исследования было определение уровней растворимого CXCR2 и некоторых других маркеров воспаления в амниотической жидкости при патологии беременности, а также в моче недоношенных новорожденных с респираторным дисстресс-синдромом.
Материал и методы
Уровень рCXCR2 в супернатантах активированных нейтрофилов и биологических жидкостях человека определяли «сэндвич» вариантом иммуноферментного анализа (ИФА) [4]. Моноклональное антитело (МКА) Е, специфически распознающее последовательность 26-33 в составе рCXCR2 и его синтетического аналога пептида 1-33 и не взаимодействующее с последовательностью 26-33 в составе линейного пептида 6-48 или мебраносвязан-ной формы CXCR2, сорбировали на твердой фазе в концентрации 10 мкг/мл в фосфатно-солевом буфере (ФСБ), рН 7,4, в течение 12-18 часов при +4°С. Разведения антигенов в трис-солевом буфере (ТСБ), содержащем 0,05% Твин-20, 0,15 М NaCl и 0,5% желатин (ТСБ-Т),
вносили и инкубировали 40-50 мин при встряхивании. Биотинилированные МКА А [3], а затем и конъюгат стрептавидин-пероксидазы хрена («Zymed») в ТСБ-Т вносили и инкубировали аналогично предыдущему шагу. Ферментативная активность пероксидазы измерялась в присутствии тетраметилбензидина при длине волны 450 нм. Определение ИЛ-8, а также растворимого рецептора ФНО-а р55 в биологических жидкостях человека проводили по описанным ранее методикам [12, 13].
В работе использованы образцы амниотической жидкости 18 беременных женщин, полученные на базе УЗ «Клинического родильного дома Минской области». Возраст пациенток варьировал от 21 до 37 лет. В исследование были включены пациентки, которым проводился амниоцентез во втором триместре беременности по показаниям, перечисленным в Инструкции по пренатальной диагностике врождённой патологии (Приказ Министерства здравоохранения Республики Беларусь 23.12.2004 N 288). Пациентки имели в анамнезе в течение данной беременности генитальные и экстрагенитальные воспалительные заболевания: кольпит, цервицит, обострение хронического пиелонефрита, острые респираторные инфекции, что повышало риск внутриутробного инфицирования.
В работе использованы образцы мочи от 63 новорожденных детей с респираторным дистресс-синдромом, родившихся в сроке гестации 28-36 недель и находившихся в отделении интенсивной терапии и реанимации ГУ РНПЦ «Мать и дитя» г. Минска. Было проведено комплексное клинико-лабораторное обследование новорожденных пациентов и исключены дети с сопутствующей гемолитической болезнью новорожденных или врожденной наследственной патологией. Мочу для лабораторного исследования забирали в 1-е сутки жизни с помощью мочеприемника. При заборе клинического материала было получено информированное согласие пациента и/или его родителей или опекунов. После сбора образцы биологических жидкостей центрифугировали (400g) и хранили при -20°С.
Статистический анализ полученных результатов проводили с использованием пакета прикладных программ Microsoft Excel, «Статистика 6.0» и GraphPad Prizm 6. Результаты представлены в виде Me (Q1-Q2), где Me - ме-
72
ВЕСТНИК ВГМУ, 2015, ТОМ 14, №б
диана, Q1 и Q2 - верхняя и нижняя квартили. Сравнение групп по одному признаку проводили с помощью U-критерия Манн-Уитни для непараметрических данных. Связь между изучаемыми показателями оценивали по результатам корреляционного анализа с вычислением коэффициента корреляции Спирмена (R). Различия считали достоверными при значении p < 0,05.
Результаты
Для того, чтобы установить корреляционные связи растворимого CXCR2 с уровнями провоспалительных факторов при патологии беременности, был проведен анализ содержания рCXCR2 в амниотической жидкости пациенток, которые имели в анамнезе генитальные и экстрагенитальные воспалительные заболевания: кольпит, цервицит, обострение хронического пиелонефрита, острые респираторные инфекции. Уровни рCXCR2 в амниотической жидкости составили Me 2,79 (2,12 - 4,12) нг/мл и прямо коррелировали с уровнями растворимого р55 (R=0,78; p<0,0001) и ИЛ-8 (R=0,51; p=0,03).
Механизмом продукции растворимого CXCR2 является протеолитическая конверсия с поверхности нейтрофилов под воздействием факторов нелигандной природы, таких как ФНО-а) или продуктов бактериального происхождения (липополисахарида Escherichia coli (ЛПС) и хемотактического пептида fMet-Leu-Phe (fMLP)) (рис. 1). Примечательно, что разработаный нами «сэндвич»-ИФА обладает повышенной специфичностью к C-концевой аминокислоте лейцин 33 в составе определяемого антигена и, таким образом, выявляя 1-33
форму рCXCR2, подтверждает универсальность механизма протеолитической конверсии под воздействием разнообразных факторов нелигандной природы. В отличие от факторов нелигандной природы, лиганды рецептора CXCR2 а-хемокины CXCL1 и CXCL8 в концентрации 500 и 50 нг/мл вызывают снижение экспрессии CXCR2, которое не связано с появлением рCXCR2 в клеточном супернатанте (рис. 1), что согласуется с описанным механизмом интернализации под действием специфических лигандов, сопровождающейся перераспределением мембранного пула рецепторов внутрь клетки.
Известно, что ВУИ является одной из возможных причин развития респираторного дистресс-синдрома (РДС) новорожденных. Прогноз РДС зависит от наличия и степени тяжести сопутствующей патологии. В связи с этим, ранняя идентификация степени выраженности воспалительных изменений при РДС важна для своевременного проведения системы лечебных мероприятий. Нами было проведено исследование по определению уровня рCXCR2 в группах недоношенных новорожденных, родившихся в сроке гестации 28-36 недель, с РДС без подтвержденной инфекционной патологии и с РДС в сочетании с инфекцией (пневмония, ВУИ, сепсис новорожденного в форме септицемии) в течение первых суток после рождения. Для оценки взаимосвязи уровней растворимого CXCR2 c клиническими факторами были проанализировали такие показатели, как длительность респираторной поддержки методами искусственной вентиляции легких (ИВЛ) и спонтанного дыхания под постоянным положительным дав-
Рисунок 1 - Протеолитическая конверсия рCXCR2 с поверхности очищенных нейтрофилов и выявление образовавшейся 1-33 формы рCXCR2 в супернатантах. Прерывистая линия показывает уровень экспрессии поверхностного CXCR2 или выявление рCXCR2 в контрольных образцах.
Представлены средние значения ± SD, n=3.
73
РАСТВОРИМЫЙ CXCR2 ПРИ ПАТОЛОГИИ ПЕРИНАТАЛЬНОГО ПЕРИОДА
лением (Continuous Positive Airway Pressure - СРАР), а также длительность терапии кислородом и антибиотикотерапии. Полученные результаты представлены в таблице 1.
Таким образом, пониженный уровень рCXCR2 в моче новорожденных с РДС свидетельствует о неблагоприятном прогнозе и ассоциирован c необходимостью пролонгированного лечения в постнатальном периоде.
Для определения прогностической ценности измерения растворимого CXCR2 в моче недоношенных новорожденных мы использовали метод ROC-анализа (Receiver Operating
Characteristic). Было выявлено, что уровень рCXCR2 в моче 6,49 нг/мл является прогностически значимым для РДС, осложненного инфекцией и площадь под ROC-кривой составила достаточно высокое значение (пневмония - AUC=0,84; ВУИ - AUC=0,78; сепсис - AUC=0,88), что свидетельствует о хорошей диагностической эффективности показателя и позволяет рассматривать рCXCR2 в качестве показателя степени выраженности воспалительных изменений у новорожденных с РДС (рис. 2, табл. 2). Следует отметить, что нами не было выявлено корреляционной связи между
Таблица 1 - Зависимость продолжительности лечения недоношенных новорожденных с РДС от уровня растворимого CXCR2 в моче
Показатель Без инфекции Пневмония ВУИ Сепсис
n 8 25 26 4
pCXCR2, нг/мл 9,8 (4,49-16,79) 2,63 (0,9-6,41)** 4,56 (3,41-6,67)* 2,68 (1,68-3,2)*
Длительность ИВЛ, ч 7,2 (1,02-28,8) 72,0 (4,5-96,00) 13,5 (4,08-24,00) 228,0 (179,4-534,0)**
СРАР, ч 1,5 (0,0-18,75) 72,0 (15,6-228)** 60 (24-174)*** 72,0 (12-492)
Кислородотерапия, сут 0,35 (0,1-1,0) 5 (1,75-22,0)** 5 (1,0—7,0)* 14,0 (11,0-15,00)*
Антибиотикотерапия, сут 22,5 (21,0-32,25) 41,0 (30,0-51,5)** 32,5 (22,5-43,25) 25,5 (15,25-68,75)
Примечание. * - статистически значимые различия по сравнению с группой РДС без инфекции: *р<0,05; **р<0,01; ***р<0,0001; приведены (Ме (Q1-Q2)).
в моче недоношенных новорожденных с РДС и наличие инфекции).
Таблица 2 - Площадь под кривой, пределы тестовых переменных и 95% доверительный интервал при проведении ROC-анализа
Группа AUC 95% доверительный интервал р
Нижняя граница Верхняя граница
Пневмония 0,84 0,68 1 0,004
ВУИ 0,78 0,54 1 0,02
Сепсис 0,88 0,67 1 0,042
74
ВЕСТНИК ВГМУ, 2015, ТОМ 14, №вб
уровнями pCXCR2 и уровнем нейтрофилов крови новорожденных (R=0,118; p=0,357).
Обсуждение
В нашем исследовании уровни рCXCR2 в амниотической жидкости при патологии беременности прямо коррелировали с уровнями растворимого р55, что может свидетельствовать о продукции рCXCR2 нейтрофилами в ответ на ФНО-а, концентрация которого повышается при инфекции. Интересно, что рCXCR2 выявляется в образцах амниотической жидкости с концентрацией ИЛ-8 более 50 нг/мл, которая, по нашим данным, способна вызвать интернализацию поверхностного CXCR2 in vitro, что может свидетельствовать о доминировании процесса протеолитической конверсии над интернализацией in vivo в месте воспаления. Протеолитическая конверсия, в отличии от интернализации, является необратимым процессом и может проводить к полной остановке нейтрофила, мигрировавшего из периферического пула в участок проникновения патогена.
В свою очередь, ВУИ может приводить к развитию дыхательной недостаточности у новорожденных. В настоящее время многие клиникопатологические черты РДС связывают с особенностями течения воспалительного ответа: исследования бронхоальвеолярной жидкости новорожденных с РДС показали повышенную продукцию лейкоцитарных протеаз, ФНО-а и ИЛ-8 [14-17]. Можно предположить, что, как и при описанном нами ранее остром перитоните [3], сопровождающемся уменьшением концентрации рCXCR2 в моче и возрастанием концентрации рCXCR2 в перитонеальной жидкости, сниженная концентрация рCXCR2 в моче новорожденных с РДС является неблагоприятным фактором прогноза, ассоциирована c необходимостью пролонгированного лечения и свидетельствует о протекании неконтролируемого воспалительного процесса c накоплением рCXCR2 в тканях.
Заключение
Растворимый CXCR2 впервые обнаружен в амниотической жидкости при патологии беременности, где его уровни прямо коррелируют с уровнями растворимого р55 и ИЛ-
8. Уровни рCXCR2 в моче новорожденных в течение первых суток после рождения достоверно понижены в группах пациентов с РДС и инфекцией в сравнении с группой новорожденных с РДС без доказанной инфекционной патологии, что может отражать степень выраженности воспалительных изменений при РДС и являться сигналом для раннего начала лечебных мероприятий. Таким образом, полученные результаты обосновывают проведение дальнейших исследований, которые позволят разработать конкретные рекомендации по использованию «сэндвич»-ИФА для выявления рCXCR2 в качестве диагностического метода в клинической практике.
Иформация об источнике поддержки в виде грантов: Тема «Оптимизация лечебнодиагностического процесса при патологии беременных и новорожденных с перинатальной гипоксией на основании исследования маркеров системного воспаления и оксидативного стресса» (2010-2012 гг., № ГР 20100994, зарегистрировано в Государственном реестре НИОК(Т) Р 17.05.2010 г.).
Литература
1. Baggiolini, M. Chemokines in pathology and medicine / M. Baggiolini // J. Intern. Med. - 2001 Aug. - Vol. 250, N 2. - P. 91-104.
2. Phagocytosing neutrophils down-regulate the expression of chemokine receptors CXCR1 and CXCR2 / T. Doroshenko [et al.] // Blood. - 2002 Oct. - Vol. 100, N
7. - P. 2668-2671.
3. Выявление и иммунохимическая характеристика растворимой формы рецептора CXCR2 интерлейкина-8 человека / С. Т. Акалович [и др.] // Докл. Нац. акад. наук Беларуси. - 2008. - Т. 52, № 6. - С. 87-92.
4. Роль металлопротеиназ в регуляции экспрессии рецептора интерлейкина-8 CXCR2 на нейтрофилах человека / Ю. В. Котлинская [и др.] // Докл. Нац. акад. наук Беларуси. - 2011. - Т. 55, № 3. - С. 83-87.
5. Биохимическая характеристика растворимой формы рецептора CXCR2 интерлейкина-8 человека / К. В. Котлинский [и др.] // Весці НАН Беларусь Сер. 6іял. навук. - 2009. - № 2. - С. 85-89.
6. Amniotic fluid cytokines (interleukin-6, tumor necrosis factor-alpha, interleukin-1 beta, and interleukin-8) and the risk for the development of bronchopulmonary dysplasia / B. H. Yoon [et al.] // Am. J. Obstet. Gynecol. - 1997 Oct. - Vol. 177, N 4. - P. 825-830.
7. The fetal inflammatory response syndrome / R. Gomez [et al.] // Am. J. Obstet. Gynecol. - 1998 Jul. - Vol. 179, N 1. - P. 194-202.
8. A systemic fetal inflammatory response and the development of bronchopulmonary dysplasia / B. H.
75
РАСТВОРИМЫЙ CXCR2 ПРИ ПАТОЛОГИИ ПЕРИНАТАЛЬНОГО ПЕРИОДА
Yoon [et al.] // Am. J. Obstet. Gynecol. - 1999 Oct. -Vol. 181, N 4. - P. 773-779.
9. Chorioamnionitis and early lung inflammation in infants in whom bronchopulmonary dysplasia develops / K. L. Watterberg [et al.] // Pediatrics. - 1996 Feb. -Vol. 97, N 2. - P. 210-215.
10. Tumor necrosis factor (TNF)-dependent shedding of the p55 TNF receptor in a baboon model of bacteremia / H. Redl [et al.] // Infect. Immun. - 1995 Jan. - Vol. 63, N 1. - P. 297-300.
11. Soluble tumor necrosis factor receptors in maternal plasma and second-trimester amniotic fluid / M. J. Kupferminc [et al.] // Am. J. Obstet. Gynecol. - 1995 Sep. - Vol. 173, N 3, pt. 1. - P. 900-905.
12. A monoclonal antibody and an enzyme immunoassay for human Ala-IL-8(77) / N. N. Nashkevich [et al.] // J. Immunol. Methods. - 2002 Dec. - Vol. 270, N 1. - P. 37-51.
13. Иммуноферментный метод определения растворимого Р55 рецептора ФНО человека / Н. В. Петёвка [и др.] // Клиническая аллергология и иммунология.
References
1. Baggiolini M. Chemokines in pathology and medicine. J Intern Med. 2001 Aug;250(2):91-104.
2. Doroshenko T, Chaly Y, Savitskiy V, Maslakova O, Portyanko A, Gorudko I, Voitenok NN. Phagocytosing neutrophils down-regulate the expression of chemokine receptors CXCR1 and CXCR2. Blood. 2002 Oct;100(7):2668-71.
3. Kotlinskiy KV, Doroshenko TM, Kotlinskaya YuV, Kirkovskiy LV, Sholukh AM, Chalyy YuV, Voytenok NN. Vyiavlenie i immunokhimicheskaia kharakteristika rastvorimoi formy retseptora CXCR2 interleikina-8 cheloveka [ Identification and immunochemical characteristic of a soluble form of a receptor of CXCR2 interleykina-8 person]. Dokl Nats Akad Nauk Belarusi. 2008;52(6):87-92.
4. Kotlinskaya YuV, Kotlinskiy KV, Doroshenko TM, Akalovich ST, Voytenok NN. Rol' metalloproteinaz v reguliatsii ekspressii retseptora interleikina-8 CXCR2 na neitrofilakh cheloveka [A role of metalproteinases in a regulation of an expression of a receptor interleykina-8 CXCR2 on neutrophils of the person]. Dokl Nats Akad Nauk Belarusi. 2011;55(3):83-7.
5. Kotlinskiy KV, Kotlinskaya YuV, Sholukh AM, Akalovich ST, Doroshenko TM, Chalyy YuV, Voytenok NN. Biokhimicheskaia kharakteristika rastvorimoi formy retseptora CXCR2 interleikina-8 cheloveka [Biochemical characteristic of a soluble form of a receptor of CXCR2 interleykina-8 person]. Vestsi NAN Belarusi Ser Biial Navuk. 2009;(2):85-9.
6. Yoon BH, Romero R, Jun JK, Park KH, Park JD, Ghezzi F, Kim BI. Amniotic fluid cytokines (interleukin-6, tumor necrosis factor-alpha, interleukin-1 beta, and interleukin-8) and the risk for
Иммунодиагностика и иммунореабилитация : тр.
2-й Междунар. конф. и 1-го съезда БААКИ. - Минск ; Витебск, 1998. - С. 193-195.
14. Elastase and alpha 1-proteinase inhibitor activity in tracheal aspirates during respiratory distress syndrome. Role of inflammation in the pathogenesis of bronchopulmonary dysplasia / T. A. Merritt [et al.] // J. Clin. Invest. - 1983 Aug. - Vol. 72, N 2. - P. 656-666.
15. Neonatal lung neutrophils and elastase/proteinase inhibitor imbalance / B. E. Ogden [et al.] // Am. Rev. Respir. Dis. - 1984 Nov. - Vol. 130, N 5. - P. 817-821.
16. Mucosal tumor necrosis factor-alpha production and extensive disruption of sulfated glycosaminoglycans begin within hours of birth in neonatal respiratory distress syndrome / S. H. Murch [et al.] // Pediatr. Res. -1996 Sep. - Vol. 40, N 3. - P. 484-489.
17. Increase in interleukin-8 and soluble intercellular adhesion molecule-1 in bronchoalveolar lavage fluid from premature infants who develop chronic lung disease / S. Kotecha [et al.] // Arch. Dis. Child. Fetal. Neonatal. Ed. - 1995 Mar. - Vol. 72, N 2. - P. F90-96.
Поступила 02.10.2015 г.
Принята в печать 11.12.2015 г.
the development of bronchopulmonary dysplasia. Am J Obstet Gynecol. 1997 Oct;177(4):825-30.
7. Gomez R, Romero R, Ghezzi F, Yoon BH, Mazor M, Berry SM. The fetal inflammatory response syndrome. Am J Obstet Gynecol. 1998 Jul;179(1):194-202.
8. Yoon BH, Romero R, Kim KS, Park JS, Ki SH, Kim BI, Jun JK. A systemic fetal inflammatory response and the development of bronchopulmonary dysplasia. Am J Obstet Gynecol. 1999 Oct;181(4):773-9.
9. Watterberg KL, Demers LM, Scott SM, Murphy S. Chorioamnionitis and early lung inflammation in infants in whom bronchopulmonary dysplasia develops. Pediatrics. 1996 Feb;97(2):210-5.
10. Redl H, Schlag G, Adolf GR, Natmessnig B, Davies J. Tumor necrosis factor (TNF)-dependent shedding of the p55 TNF receptor in a baboon model of bacteremia. Infect Immun. 1995 Jan;63(1):297-300.
11. Kupferminc MJ, Peaceman AM, Aderka D, Wallach D, Peyser MR, Lessing JB, Socol ML. Soluble tumor necrosis factor receptors in maternal plasma and second-trimester amniotic fluid. Am J Obstet Gynecol. 1995 Sep;173(3 Pt 1):900-5.
12. Nashkevich NN, Akalovich S, Louneva N, Heavner GA, Voitenok NN. A monoclonal antibody and an enzyme immunoassay for human Ala-IL-8(77). J Immunol Methods. 2002 Dec;270(1):37-51.
13. Petevka NV, Nashkevich NN, Tikhonov II, Kolesnikova TS, Koleda ST, Butenko SS, Doroshenko TM, Voytenok NN. Immunofermentnyi metod opredeleniia rastvorimogo R55 retseptora FNO cheloveka [Immunoenzymatic method of definition of soluble P55 of a receptor TNF of the person]. V: Klinicheskaia allergologiia i immunologiia. Immunodiagnostika i immunoreabilitatsiia: tr 2-i Mezhdunar konf i 1-go
76
ВЕСТНИК ВГМУ, 2015, ТОМ 14, №вб
s"ezda BAAKI. Minsk, RB; Vitebsk, RB; 1998. Р. 1935.
14. Merritt TA, Cochrane CG, Holcomb K, Bohl B, Hallman M, Strayer D, Edwards DK 3rd, Gluck L. Elastase and alpha 1-proteinase inhibitor activity in tracheal aspirates during respiratory distress syndrome. Role of inflammation in the pathogenesis of bronchopulmonary dysplasia. J Clin Invest. 1983 Aug;72(2):656-66.
15. Ogden BE, Murphy SA, Saunders GC, Pathak D, Johnson JD. Neonatal lung neutrophils and elastase/ proteinase inhibitor imbalance. Am Rev Respir Dis. 1984 Nov;130(5):817-21.
16. Murch SH, Costeloe K, Klein NJ, Rees H, McIntosh N, Keeling JW, MacDonald TT. Mucosal tumor necrosis factor-alpha production and extensive disruption of sulfated glycosaminoglycans begin within hours of birth in neonatal respiratory distress syndrome. Pediatr Res. 1996 Sep;40(3):484-9.
17. Kotecha S, Chan B, Azam N, Silverman M, Shaw RJ. Increase in interleukin-8 and soluble intercellular adhesion molecule-1 in bronchoalveolar lavage fluid from premature infants who develop chronic lung disease. Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed. 1995 Mar;72(2):F90-6.
Received 02.10.2015 Accept 11.12.2015
Сведения об авторах:
Котлинская Ю.В. - аспирант ГУ «Республиканский научно-практический центр трансфузиологии и медицинских биотехнологий», г.Минск, Республика Беларусь;
Крастелёва И.М. - к.м.н., доцент кафедры неонатологии и медицинской генетики ГУО «Белорусская медицинская академия последипломного образования», г.Минск, Республика Беларусь;
Устинович Ю.А. - к.м.н., доцент кафедры неонатологии и медицинской генетики ГУО «Белорусская медицинская академия последипломного образования», г.Минск, Республика Беларусь;
Шилкина Е.В. - к.м.н., ведущий лаборант кафедры акушерства и гинекологии ГУО «Белорусская медицинская академия последипломного образования», г.Минск, Республика Беларусь;
Шишко Г.А. - д.м.н., профессор, заведующий кафедрой неонатологии и медицинской генетики ГУО «Белорусская медицинская академия последипломного образования», г.Минск, Республика Беларусь; Войтенок Н.Н. - д.м.н., Фонд молекулярной гематологии и иммунологии, г.Москва, Российская Федерация.
Адрес для корреспонденции: Республика Беларусь, 220013, г. Минск, ул. П.Бровки, 3, корп. 3, ГУО «Белорусская медицинская академия последипломного образования», кафедра неонатологии и медицинской генетики. E-mail: shumaher33@gmail.com - Крастелёва Ирина Михайловна.
77
