CC BY
61
УДК 575.17
ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ ЦИТОКИНОВ И ФОРМИРОВАНИЕ САХАРНОГО ДИАБЕТА У БОЛЬНЫХ ГИПЕРТОНИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ
И.В. КРИВОШЕЙ1 П.К. АЛФЕРОВ2 ІУ1.И.ЧУРН0С0В
Белгородский государственный национальный исследовательский университет
Белгородская областная клиническая больница Святителя Иоасафа
В статье изложены результаты исследования полиморфизмов генов цитокинов ЮТа и 1,1а у больных гипертонической болезнью. Генетическим фактором риска развития сахарного диабета второго типа у пациентов страдающих гипертонической болезнью следует считать аллель +25<эО гена 1,1а (р<0,05).
Ключевые слова: гипертоническая болезнь, сахарный диабет, полиморфизм генов цитокинов.
e-mail: Krivoshei.i.v@yandex.ru
В Российской Федерации, как и во всем мире, гипертоническая болезнь (ГБ) остается одной из наиболее значимых проблем, что обусловлено как широким распространением данного заболевания (около 40% взрослого населения РФ имеет повышенный уровень артериального давления), так и тем, что более 3 млн. ежегодно умирает от осложнений ГБ, что выводит данную патологию за рамки чисто кардиологической проблемы, придавая ей многодисциплинарный и социально значимый характер [1-3]. Одним из определяющих факторов риска развития осложнений у больных ГБ является наличие сахарного диабета (СД). ГБ и СД - две патогенетически взаимосвязанные патологии, которые обладают мощным взаи-моусиливающим повреждающим действием. Их сочетание повышает риск развития ишемической болезни сердца, сердечной недостаточности, церебральных осложнений и заболеваний периферических сосудов [4-7].
ГБ - мультифакториальное заболевание, в основе которого лежит генетический по-лигенный структурный дефект [8]. Полигены, или гены-кандидаты, относятся к полиморфным генам, продукты экспрессии которых могут участвовать в развитии и прогрессировании заболевания. Общая концепция роли генетических факторов в этиопатогенезе ГБ обоснована, но остается много неясных вопросов относительно вклада конкретных генов. Большая часть исследований посвящена ограниченному набору генов ренин-ангиотензин-альдостероновой системы. Относительно недавно стал изучаться вопрос об участии генов цитокинового каскада в развитии ГБ. Вместе с тем результаты клинических и экспериментальных исследований по изучению взаимосвязи показателей неспецифического воспаления и ГБ немногочисленны и противоречивы.
Целью нашей работы стало изучение роли полиморфизмов генов цитокинов -308А/С ТОТа, +2,5оС/А 1Л:а в формировании СД второго типа у больных ГБ.
Материалом для исследования послужили образцы ДНК, выделенные из цельной венозной крови методом фенол-хлороформной экстракции: 97 больных ГБ и 489 человек популяционного контроля. Больные были разделены на две группы: первая - с изолированной ГБ (п=58), вторая - с ГБ и СД второго типа (п=39). Группы были сопоставимы по возрасту, полу, длительности гипертонической болезни, проводимому лечению и сопутствующим заболеваниям. В выборки больных и популяционного контроля включались индивидуумы русской национальности, являющиеся уроженцами Центрального Черноземья и не имеющие родства между собой. Пациенты включались в соответствующую группу больных только после установления диагноза заболевания, подтвержденного с помощью клинических и лабораторноинструментальных методов обследования. Клинико-лабораторное обследование больных проводилось на базе кардиологического отделения Белгородской областной клинической больницы Святителя Иоасафа.
Анализ изучаемых локусов осуществлялся с использованием стандартных олигонуклео-тидных праймеров и зондов методом полимеразной цепной реакции синтеза ДНК на амплифи-
каторе IQs (Bio-Rad) с последующим анализом полиморфизма методом дискриминации аллелей. Статистическая обработка данных проводилась с использованием программных пакетов «STATISTICA for Windows 6.0» и «Microsoft Excel 2007». Для сравнения частот аллелей и генотипов между различными группами использовали критерий х2 с поправкой Йетса на непрерывность. Вычисления производили в таблицах сопряженности 2x2 [9].
Результаты генотипирования данных индивидуумов по локусам -308A/G TNFa, +250G/A Lta представлены в табл. 1. При изучении полиморфизма гена TNFa частоты аллелей и генотипов распределились у больных ГБ следующим образом: -308G - 85,57%; -308А -14,43%; -308GG - 73,20%; -308AG - 24,74%; -308АА - 2,06%; в популяционном контроле: -308G -88,75%; -308А - 11,25%; -308GG - 79.35%; -3o8AG-i8,8i%; -308АА -1,84%. Распределение частот аллелей и генотипов для локуса Lta в группе больных: +250G - 34,02%; +250А -65,98%; +250GG - 12,37%; +250AG - 43,30%; +250АА - 44,33%. В контрольной группе получены следующие генетические характеристики: +250G -24,95%; +250А -75,05%; +250GG -4,70%; +250AG -40,49%; +250АА -54,81%. Анализ полученных данных показывает, что для исследуемых локусов в группе больных ГБ и в популяционной выборке эмпирическое распределение генотипов соответствует теоретически ожидаемому при равновесии Харди-Вайнберга (р>0,05). Установлена более высокая частота маркеров +250G (34,02%) и +250GG (12,37%) лимфотоксина альфа среди больных ГБ по сравнению с контрольной группой, где анализируемые показатели составили 24,95% (х2=6,39, p=o,oi) и 4,70% (х2=7Дб, p=o,oi). Статистически достоверных отличий в концентрациях аллелей и генотипов по локусу TNFa у больных ГБ и в популяционной выборке не было выявлено (р>0,05).
При изучении распределения полиморфных генетических маркеров цитокинов среди двух групп больных ГБ в зависимости от наличия СД второго типа, а также в контрольной группе выявлены статистически достоверные различия в частотах генотипов и аллелей по локусу +250G/A Lta. Выявлена высокая концентрация аллеля +250G у больных ГБ с СД второго типа (46,15%) в сравнении как с контрольной группой (24,95%, х2=15,6о, p=o,oi, 0R=2,s8, 95%С11,57-4,22), так и с группой пациентов без СД второго типа (29,31%, х2=5,оз, р=о,оз) (рис. l).
Контрольная группа Больные ГБ без СД Больные ГБ с СД второго
второго типа типа
Рис. 1. Частота аллеля +250(11,1а среди больных ГБ в зависимости от наличия СД второго типа и в контрольной группе, %
Наряду с этим выявлена наибольшая концентрация генотипа +25оОО (17,95%) среди больных ГБ с СД второго типа в сравнении как с популяционным контролем (4,70%, х2=9>48, р=0,01, СЖ=4,43, 95%С1 1,59"11>94), так и с пациентами без СД второго типа (8,62%, х2=1Д1, р=0,29) (рис. 2).
второго типа типа
Рис. 2. Частота генотипа +25<эОО 1,1а среди больных ГБ в зависимости от наличия СД второго типа и в контрольной группе, %
Установлена низкая концентрация генотипа +250АА (25,64%) в группе больных ГБ с СД второго типа в сравнении как с контрольной группой (54,81%, х2=ид8, р=0,01, СЖ=0,28, 95%С1 0,13-0,63), так и с группой пациентов без СД второго типа (50,00%, х2=4,79> р=о,оз) (рис. 3).
611
зо-
а 20-
Контрольная группа
Больные ГБ без СД Больные ГБ с СД второго
второго типа типа
Рис. 3. Частота генотипа +250АА 1,1а среди больных ГБ в зависимости от наличия СД второго типа и в контрольной группе, %
Сравнительный анализ частот аллелей и генотипов полиморфных маркеров генов цитокииов у больных ГБ, в зависимости от наличия СД второго типа и в контрольной группе
Поли- мор- физм Аллели, генотипы Контрольная группа (п=489) 1 Больные ГБ (п=97) 2 Больные ГБ без СД второго типа (п=58) 3 Больные ГБ с СД второго типа (п=39) 4 Х2 (Р) 1-2 ОИ (95% С1) 1-2 Х2 (Р) 1-3 ОИ (95% С1) 1-3 Х2 (Р) 1-4 ОИ (95% С1) 1-4 Х2 (Р) 3-4
п % п % п % п %
-3080 868 88,75 166 85,57 102 87,93 64 82,05 1,29 (0,26) 0,75 (0,47-1,21) 0,01 (0,91) 0,92 (0,50-1,75) 2,52 (0,11) 0,58 (0,30-1,12) 0,87 (0,35)
а & -308А 110 11,25 28 14,43 14 12,07 14 17,95 1,33 (0,83-2,12) 1,08 (0,57-2,02) 1,73 (0,89-3,29)
<: О -30800 388 79,35 71 73,20 44 75,86 27 69,23 1,46 (0,23) 0,71 (0,42-1,21) 0,20 (0,66) 0,82 (0,41-1,63) 1,64 (0,20) 0,59 (0,27-1,27) 0,24 (0,62)
00 о со -3080А 92 18,81 24 24,74 14 24Д4 10 25,64 1,44 (0,23) 1,42 (0,82-2,44) 0,63 (о,43) 1,37 (0,68-2,72) 0,69 (0,41) 1,49 (0,65-3,32) 0,01 (1,01)
-308АА 9 1,84 2 2,Об 0 0 2 5ДЗ 0,01 (1,01) 1,12 (0,16-5,68) 0,25 (0,62) 1,01 (0,90-5,04) 0,64 (0,42) 2,88 (0,42-15,10) 1,03 (0,31)
+2500 244 24,95 66 34,02 34 29,31 36 46,15 6,39 (0,01) 1,55 (1,10-2,19) 0,65 (0,46-0,91) 0,82 (0,36) 1,25 (0,80-1,95) о,8о (0,51-1,26) 15,60 (0,01) 2,58 (1,57-4,22) 0,39 (0,24-0,64) 5,03 (0,03)
а 3 +250А 734 75,05 128 65,98 82 70,69 42 53,85
о о +250АА 268 54,81 43 44,33 29 50,00 10 25,64 3,16 (0,07) 0,66 (0,41-1,04) 0,31 (0,58) 0,83 (0,46-1,47) 11,18 (0,01) 0,28 (0,13-0,63) 4,79 (0,03)
ю (М + +250АО 198 40,49 42 43,30 24 41,38 22 56,41 0,16 (0,69) 1,12 (0,71-1,80) 0,01 (1,01) 1,04 (0,58-1,86) ЗД4 (0,08) 1,90 (0,94-3,86) 1,55 (0,21)
+25000 23 4,70 12 12,37 5 8,62 7 17,95 7,16 (0,01) 2,86 (1,29-6,29) 0,93 (о,34) 1,91 (0,61-5,60) 9,48 (0,01) 4,43 (1,59-11,94) 1,11 (0,29)
Таким образом, в результате проведённого исследования установлено важное патогенетическое значение для ГБ генетического варианта локуса +2,5оС/А У:а, фактором риска развития СД второго типа у больных ГБ следует считать аллель +2,5оС (СЖ=2,58), а протективным фактором - генотип +250АА ІЛа (СЖ=0,28); по гену ТЫ Ра значимых ассоциаций установлено не было.
1. Диагностика и лечение артериальной гипертензии. Рекомендации Российского медицинского общества по артериальной гипертонии и Всероссийского научного общества кардиологов // Кардиоваскулярная терапия и профилактика, прил. 2. — 2008. — № 6. — С. 32.
2. Профилактика, диагностика и лечение артериальной гипертензии: Российские рекомендации (второй пересмотр). Секция артериальной гипертонии ВНОК. - М., 2004. - 1-4 с.
3. Федеральная целевая программа «Профилактика и лечение артериальной гипертонии в Российской Федерации (2002-2008 гг.)». - М., 2005. - 2-6 с.
4. Миртумян, А.М. Кардиоваскулярные осложнения сахарного диабета 2-го типа и особенности коррекции углеводного обмена / А.М. Миртумян //Сердце. - 2003. - №6. - С. 266-272.
5. Мычка В.Б. Сахарный диабет 2-го типа и артериальная гипертония / В.Б. Мычка, И.Е. Чазова // Сердце. - 2004. - №1 (з). - С. 13-16.
6. Sowers J.R. Treatment of hypertension in patients with diabetes / J.R. Sowers // Arch. Intern. Med. - 2004. - Vol.164 (17). - P. 1850-1857.
7. El-Atat F. Diabetes, hypertension and cardiovascular derangements: pathophysiology and management / F. El-Atat, S.I. Farlane, J.R. Sowers // Curr. Hypertens. Rep. - 2004. - Vol. 6 (3). - P. 215-223.
8. Шулутко Б.И. Стандарты диагностики и лечения внутренних болезней // Б.И. Шулутко, С.В. Макаренко. - Спб.: Элби-Спб, 2007. — 13 с.
9. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATTSTICA // О.Ю. Реброва. - М.: Медиасфера, 2006. - 305 с.
Литература
POLYMORPHISM OF CYTOKINE GENES AND THE FORMATION OF DIARETES MELLITUS IN PATIENTS WITH HYPERTENSIVE DISEASE
I.V. KRIVOSHEI1 P.K. ALFEROV2 M l. CHURHOSOV
The article presents a study of cytokine gene polymorphisms and Ltd TNFa in patients with hypertension. Genetic risk factor for diabetes in patients suffering from essential hypertension should be considered +250 G allele of the gene Ltd (p <0,05).
1) Belgorod National Research University
*>Belgorod Regional St. Joasaph Clinical Hospital
Keywords: hypertension, diabetes, gene polymorphism of cyto-
kines.
e-mail:Krivoshei.i.v@yandex.m
