CC BY
21
УДК 575.174.015.3
ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА IL1B У ПАЦИЕНТОВ С ЭНТЕЗИТНЫМ АРТРИТОМ ИЗ
РЕСПУБЛИКИ БАШКОРТОСТАН Назарова Л.Ш., Данилко К.В., Каримов Д.О., Таймасова И.А., Малиевский В.А., Викторова Т.В.
ФГБОУ ВПО "Башкирский государственный медицинский университет", Уфа, Россия
Одним из наиболее частых и самых инвалидизирующих ревматических заболеваний в современной педиатрической практике является ювенильный артрит (ЮА).
Результаты исследования свидетельствуют о связи полиморфного локуса -511C>T гена IL1B с повышенным риском формирования энтезитного артрита у детей из Республики Башкортостан. Ключевые слова: ювенильный артрит, энтезитный артрит, ассоциация, полиморфизм, интерлейкин-1в.
IL1B GENE POLYMORPHISM IN PATIENTS WITH ENTHESITIS-RELATID ARTHRITIS IN
THE REPUBLIC OF BASHKORTOSTAN
Nazarova L. Sh., Danilko K.V.,Karimov D. O.,Taimasova I.A., Malievskiy V.A., Viktorova T. V.
Bashkir State Medical University Ufa,Russia
One of the most frequent and incapacitating rheumatic diseases is juvenile arthritis in modern pediatric practice.
Research results show the connection of polymorphic locus 511C>T of IL1B gene with increased risk of formation of enthesitis-relatid arthritis in children of the Republic of Bashkortostan.
Key words: juvenile arthritis, enthesitis-relatid arthritis, association, polymorphism, interleukin-1в
Одним из наиболее частых и самых инвалидизирующих ревматических заболеваний в современной педиатрической практике является ювенильный артрит (ЮА), т.е. артрит неустановленной причины, развивающийся у детей в возрасте не старше 16 лет, продолжительностью более 6 недель при исключении другой патологии. Распространенность ЮА в России достигает 62,3, а первичная заболеваемость - 16,2 на 100 тыс. детей до 18 лет. Согласно классификации Международной лиги ревматологических ассоциаций (ILAR) выделяется 7 типов ЮА, и среди них - энтезитный артрит (ЭА). Основными клиническими проявлениями последнего являются артрит и энтезит, или артрит либо энтезит с двумя из следующих признаков: чувствительность сакроилеальных сочленений и/или воспалительная боль в спине; наличие HLA-B27; семейный анамнез c подтвержденными врачами НLA-В27-ассоциированными болезнями у лиц первой или второй степени родства; передний увеит, как правило, ассоциированный с болью, покраснением и светобоязнью; начало артрита у мальчика после 8 лет [1]. Этиология ЭА, как и ЮА в целом, остается неизвестной. Предполагается роль инфекционных агентов в возникновении данной патологии, однако убедительные доказательства приведенной гипотезы в настоящее время отсутствуют. Кроме того, сильная ассоциация с HLA-B27
свидетельствует о значительном вкладе наследственных факторов в развитие ЭА. Предполагается, что важную роль в патогенезе ЭА играет активация T-хелперов 1 типа с образованием лимфоцитарных и моноцитарных инфильтратов. Известно, что поражение суставов при ЭА сопровождается их энхондральной и капсулярной оссификацией. При этом патологический процесс в крестцово-подвздошных суставах на ранних стадиях характеризуется скорее субхондральным воспалением с формированием грануляционной ткани, чем синовитом. В свою очередь, энтезит характеризуется развитием неспецифического воспаления. Грануляционная ткань, инфильтрированная лимфоцитами и плазматическими клетками, вызывает локальный остеит и нарушает фиксацию связок и сухожилий к костям и хрящам [2]. Показано, что целый ряд провоспалительных медиаторов обладает способностью вызывать повреждение костных и хрящевых структур при артрите, и одним из наиболее важных является интерлейкин-1 (IL-1). Данный цитокин стимулирует пролиферацию синовиальных клеток и продукцию ими, а также хондроцитами матричных металлопротеиназ, что приводит к разрушению хряща. Кроме того, IL-1 увеличивает экспрессию лиганда рецепторного активатора нуклеарного фактора kappa в (RANKL), который, в свою очередь, способствует активации остеокластов и усилению костной резорбции [3, 4]. Суперсемейство IL-1 включает 11 цитокинов, среди которых хорошо изучен IL-1B [5]. Ген IL1B локализован на 2 хромосоме в локусе 2q14. В ряде исследований показана взаимосвязь полиморфных вариантов гена IL1B с развитием некоторых ревматических болезней [6, 7].
Цель данной работы состояла в поиске ассоциаций полиморфного локуса -511C>T гена IL1B с развитием различных клинических вариантов ювенильного артрита.
Материалы и методы.
215 жителей Республики Башкортостан, проходивших лечение в РДКБ в 2010-2014 гг. с диагнозом ЮА, было отобрано для исследования. Соотношение юношей к девушкам составило 1:2. Согласно классификации ILAR, больные были подразделены на 7 подгрупп: системный артрит (N=21); позитивный по ревматоидному фактору (РФ) полиартрит (N=4); РФ-негативный полиартрит (N=65); персистирующий олигоартрит (ПО) (N=95) и распространившийся олигоартрит (N=8); энтезитный артрит (ЭА) (N=13); псориатический артрит (N=3); другие артриты (N=6).
206 добровольцев без аутоиммунных заболеваний в анамнезе составили контрольную группу. Половое соотношение юношей к девушкам - 1:1,5.
Для выделения ДНК из лимфоцитов периферической венозной крови обследуемых индивидов использовался стандартный метод фенольно-хлороформной экстракции.
Изучение полиморфного локуса -511C>T (rs16944) IL1B проводилось методами ПЦР и ПДРФ анализа (эндонуклеаза рестрикции Ama87I, «Сибэнзим»). Математическую обработку результатов исследования проводили с использованием программ Statistica v.6.0, Microsoft Excel, SNPStats [8]. Для сравнения частот генотипов и аллелей в исследуемых группах применялся критерий х2 с поправкой Йетса и метод логистической регрессии. Различия между группами считались статистически достоверными при р<0,05. Для оценки риска развития заболевания использовался показатель отношения шансов (OR) и 95% доверительный интервал (CI).
Результаты.
Распределение частот генотипов изученного полиморфного локуса -511С>Т гена И1Б у больных с ЮА и в контрольной группе соответствовало ожидаемому по Харди-Вайнбергу.
Таблица 1
Частоты генотипов и аллелей полиморфного локуса -511С>Т гена И1В в группах больных
ЮА и здоровых индивидов из Республики Башкортостан
Генотипы Больные ЮА Контроль X2 Р ОР (95% С1)
и аллели % Абс. %
СС 91 42,3 81 39,9 0,163 0,686 1,106 (0,749-1,633)
СТ 91 42,3 95 46,8 0,674 0,412 0,835 (0,567-1,228)
ТТ 33 15,3 27 13,3 0,209 0,647 1,182 (0,683-2,048)
С 273 63,5 257 63,3 0,000 0,988 1,009 (0,761-1,337)
Т 157 36,5 149 36,7 0,000 0,988 0,992 (0,749-1,315)
Сравнительный анализ полученных данных показал отсутствие значимых отличий в распределении частот генотипов и аллелей полиморфного локуса -511С>Т гена И1Б в общей группе детей с ЮА и в контрольной группе (табл. 1). Однако после стратификации больных в соответствии с классификацией ILAR было установлено, что генотип ТТ у детей с ЭА встречается значимо чаще при сравнении с остальными пациентами с ЮА (р=0,036), а также с контрольной группой (р=0,038) (табл. 2). Наиболее удачной моделью наследования, согласно данным программы SNPStats, оказалась рецессивная (ТТ против СС+СТ), то есть гомозиготный рецессивный генотип ТТ ассоциирован с повышенным риском развития ЭА, как при сравнении с остальными клиническими вариантами ЮА (OR=4,13), так и с контрольной группой (OR=4,07) (табл. 2).
Обсуждение.
В нашем исследовании установлена ассоциация генотипа ТТ полиморфного локуса -511С>Т гена И1Б с повышенным риском развития ЭА у детей (OR=4,13). В то же время, учеными из Индии ранее не было выявлено различий в частотах генотипов изучаемого полиморфизма у больных с ЭА и в контроле [9]. Однако, в ряде исследований сообщается о наличии взаимосвязи полиморфных локусов гена И1Б с развитием других ревматических заболеваний. Так, было установлено, что наличие генотипа ТТ полиморфного локуса +3953С>Т гена И1Б ассоциировано с повышенным, а генотипа СТ локуса -511С>Т гена И1Б -со сниженным риском развития ревматоидного артрита (РА) [6]. Кроме того, согласно данным американских ученых, риск формирования системной красной волчанки у носителей аллеля Т полиморфного локуса -511С>Т гена И1Б выше, чем у таковых с генотипом СС [7].
Таблица 2
Сравнение частот генотипов и аллелей полиморфного локуса -511С>Т гена И1В у больных энтезитным артритом с группой других подтипов ЮА и здоровыми индивидами
Геноти Энтезитн Здоровы х2 OR Другие х2 OR
пы и ый артрит е P (95% CI) подтипы P (95% CI)
аллели ЮА
% Абс % Абс %
СС 5 38,5 81 39,9 0,036 0,851 0,942 (0,2982,981) 85 42,9 0,001 0,980 0,831 (0,263-2,632)
CT 3 23,1 95 46,8 1,899 0,169 0,342 (0,0911,278) 87 43,9 1,402 0,237 0,383 (0,102-1,435)
ТТ 4,297 4,075 4,388 4,135
5 38,5 27 13,3 0,038 * (1,2413,374) 26 13,1 0,036 * (1,25713,607)
С 13 50,0 257 63,3 1,321 0,251 0,580 (0,2621,285) 257 64,9 1,748 0,187 0,541 (0,244-1,200)
Т 13 50,0 149 36,7 1,321 0,251 1,725 (0,779-3,82) 13 9 35,1 1,748 0,187 1,849 (0,834-4,099)
Рецессивная модель наследования
CC+CT 8 61,5 176 86,7 1,00 172 86,9 1,00
0,03* 0,028 *
TT 5 38,5 27 13,3 4,07 (1,24-13,37) 26 13,1 4,13 (1,26-13,60)
статистически значимые различия
*
Выводы: В результате проведенного исследования установлена ассоциация полиморфного локуса -511C>T гена IL1B с повышенным риском развития энтезитного артрита у детей из Республики Башкортостан.
Список литературы:
1. Алексеева Е. И. Ювенильный ревматоидный артрит. Этиология. Патогенез. Клиника. Алгоритмы диагностики и лечения : Руководство для врачей, преподавателей, научных сотрудников / Е. И. Алексеева, П. Ф. Литвицкий ; под общ. ред. академика РАМН, профессора А. А. Баранова. — Москва, 2007.
2. Textbook of Pediatric Rheumatology (6th ed.). Edited by Cassidy J.T., Petty R.E., Laxer R.M., Lindsley C.B. Philadelphia: Saunders Elsevier. 2011. 800 p.
3. Goldring S. R. Pathogenesis of bone and cartilage destruction in rheumatoid arthritis / S. R. Goldring //Rheumatology (Oxford). -2003. - Vol. 42 (Suppl 2). - P. 11 - 16.
4. Dayer J. M. The pivotal role of interleukin-1 in the clinical manifestations of rheumatoid arthritis / J. M. Dayer //Rheumatology (Oxford). -2003. - Vol. 42 (Suppl 2). - P. 3-10.
5. IL-1 family nomenclature / C. Dinarello, W. Arend, J. Sims et al. // Nature immunology.-2010. - Vol. 11, №11. - P. 973.
6. Interleukin-1 receptor antagonist (IL-1RN) and interleukin-1B gene polymorphisms in Turkish patients with rheumatoid arthritis / A. Arman, B. Yilmaz, A. Coker, N. Inanc, H. Direskeneli // Clin. Exp. Rheumatol. -2006. - Vol. 24, №6. - P.643 - 648.
7. Systemic lupus erythematosus and genetic variation in the interleukin 1 gene cluster: a population based study in the southeastern United States/ C. Parks, G. Cooper, M. Dooley, E. Treadwell, E. St Clair, G. Gilkeson, J. Pandey // Ann. Rheum. Dis. - 2004. - Vol. 63, №1. - P. 91 - 94.
8. URL: http://bioinfo.iconcologia.net/ index.php?module=Snpstats.
9. IL1 gene polymorphisms in enthesitis related arthritis category of juvenile idiopathic arthritis (ERA-JIA) / A. Aggarwal, R. Srivastava, S. Singh, Kumar P. Dubey // Clin. Rheumatol. -2012. -Vol. 31, №4. - P.607 - 611.
