CC BY
49
УДК 612.017:636
Л.М. Масягутова, И.Д. Рыбаков, М.К. Гайнуллина, Г.А. Янбухтина
ПОКАЗАТЕЛИ ИММУННОГО СТАТУСА И СПЕЦИФИЧЕСКОЙ СЕНСИБИЛИЗАЦИИ РАБОТНИЦ СОВРЕМЕННЫХ ПТИЦЕФАБРИК
Уфимский научно-исследовательский институт медицины труда и экологии человека (Уфа)
Представлены результаты изучения иммунологических показателей у работниц современных птицефабрик методом, непрямой иммунофлюоресценции. Проведено иммунофенотипирование лимфоцитов с использованием, моноклональных антител (CD3+, CD4+, CD8+, CD16+, CD19+, CD95, HLA DR). Определена концентрация иммуноглобулинов классов A, M, Е, G. Изучена функциональная активность гранулоцитов периферической крови. Показано, что под воздействием, профессиональных факторов страдают, все звенья, иммунитета. Выявлено, что более трети работниц занятых в основном производстве страдают, различной аллергопатологией. Проведен корреляционный, анализ показателей, показаны, взаимозависимости в системе гомеостаза. Изучена сенсибилизация, к грибковым, аллергенам.. Ключевые слова: птицеводство, пух перо птицы, грибковая сенсибилизация, иммунный статус
INDICATORS OF THE IMMUNE STATUS AND SPECIFIC SENSIBILIZATION OF POULTRY FEMALE WORKERS
L.M. Masyagutova, I.D. Rybakov, M.K. Gainullina, G.A. Yanbuhktina
Ufa Scientific Research Institute of Occupational Health and Human Ecology, Ufa
The results from studies on immunologic indicators in poultry female workers are presented, in this paper. Lymphocyte immunophenotyping using monoclonal antibodies (CD3+, CD4+, CD8+, CD16+, CD19+, CD95, HLA DR) has been conducted, by the method, of indirect immunofluorescence. We have determined, concentrations of classes A, M, E, G immunoglobulins as well as functional activity of peripheral blood granulocytes. All immunity links have been shown to be exposed, to the impact of occupational factors. It has been detected, that more than one third, of female workers engaged in the basic production, suffer from a variety of allergopatholo-gies. We have conducted, correlation, analysis of indicators and revealed, interrelationships in the homeostasis system.. Sensibilization, to fungal allergens has been studied.
Key words: poultry production, fungal sensibilization, immune status
Птицеводческая отрасль — наиболее динамично развивающийся сектор в агропромышленном комплексе республики Башкортостан. По данным современной литературы [1] специфика ведения технологических процессов в промышленном птицеводстве не исключает неблагоприятного влияния на организм работающих комплекса производственных факторов: пера и пуха птицы, компонентов кормов, формальдегида, хлорамина и др. Согласно классификации промышленных аллергенов, сенсибилизирующая активность категории 2 — «умеренно опасных» промышленных аллергенов доказана в отношении белково-витаминного концентрата (по белку) и пыли растительного и животного происхождения с примесью диоксида кремния от 2 до 10 % [3]. Рядом авторов отмечается высокая микробиологическая обсемененность воздуха рабочей зоны птицеводческих комплексов [2]. Совокупность длительного воздействия неблагоприятных факторов воздуха рабочей зоны, даже на уровне предельно-допустимых концентраций, повышает риск формирования статуса поливалентной сенсибилизации.
Характерной особенностью иммунной системы является неодинаковая чувствительность отдельных ее звеньев к одному и тому же фактору. Эти различия обусловлены высокой структурно-метаболической гетерогенностью иммунной системы, а также значительной сложностью сетевых взаимодействий
отдельных ее компонентов. В целом иммунная система является мишенью для большого числа ксенобиотиков и экстремальных физических факторов. В системе гомеостаза существуют множественные коррелятивные связи между отдельными показателями и зачастую, недостаток одного фактора нивелируется работой другого [4].
Целью исследования является выявление особенностей нарушения иммунитета, оценка гиперчувствительности организма к биологическим факторам производственной среды, а также оценка особенностей иммунологической реактивности по направленности и интенсивности взаимосвязей между компонентами.
МЕТОДИКА
Работа выполнена в рамках отраслевой научноисследовательской программы Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека «Гигиеническая безопасность России: пути обеспечения» (на 2006 — 2010 гг.). Обследовано 167 женщин-работниц птицефабрик. Из них 100 — работники основных профессий, контактирующие с вредными факторами производственной среды в течение всего рабочего времени, 67 человек — внутренний контроль, работающие на птицефабрике без контакта с вредными воздействиями (работники административно-хозяйственной службы). Состояние здоровья изучено во
время проведения периодического медицинского осмотра врачами-специалистами: терапевтом, невропатологом, отоларингологом, окулистом.
В оценке различных звеньев иммунитета использованы иммунологические тесты I — II уровней. Для определения специфических IgG-антител использован метод твердофазного иммуноферментного анализа со стандартными панелями 11 грибковых (Candida albicans, Candida kruzei, Aspergilus niger, Penicilillum expansum и др.) и 11 бактериальных (Staphilococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Neisseria perflava и др.) аллергенов, производства ЗАО «Иммунотех», Ставрополь. Трактовка полученных результатов проведена в соответствии с прилагаемой инструкцией. Степень сбалансированности в системе иммунологической защиты изучена на основании корреляционного анализа показателей иммунного статуса.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Изучение состояния здоровья показало, что патологией, имеющей в генезе аллергический компонент, страдают 37,0 ± 4,8 % обследованных лиц основной группы и 17,9 ± 4,7 % в группе сравнения (р < 0,05). Ведущими нозологическими формами в данной группе заболеваний являлись: бронхиальная астма — 40 % случаев, контактный дерматит и профессиональная экзема — 30 %; аллергический ринит, ринопатия — 25 %, хроническая крапивница, отек Квинке — 5 %. Преимущественно, аллергопатология выявляется у лиц с длительным стажем работы в данной профессии: у 23 % обследованных при стаже 15 — 20 лет и у 30 % — более 21 года.
Изучение частоты встречаемости отклонений от литературных норм (табл. 1) свидетельствует, что лейкоцитоз встречается у 11 % обследованных птичниц, лимфоцитоз — в 85 %. Показательно, что снижение количества зрелых Т-лимфоцтов-СD3 + и Т-хелперов- CD4+ клеток выявлено нами у 77,8 и 61 % сотрудников, работающих в неблагоприятных условиях труда. Также у работников основного производства практически в два раза реже отмечается повышение цитотоксической активности лимфоцитов CD8 + , чем у работников вспомогательной сферы (50,0 ± 11,98 против 100,0). Повышенная экспрессия маркеров апоптоза — CD95+ отмечена в этой же группе в 61,16 % случаев, что абсолютно нехарактерно для группы сравнения. Изучение функциональной активности фагоцитов выявило однонаправленное снижение в обеих группах. В системе гуморального иммунитета у работающих во вредных условиях преобладают тенденции к дефициту содержания основных классов иммуноглобулинов (IgA — 50,0 %, M — 20,69 %, G — 24,14 %), за исключением общего IgE, как маркера аллергической патологии.
С целью изучения особенностей иммунологической реактивности по направленности и интенсивности взаимосвязей между компонентами проведен корреляционный анализ. Степень
сбалансированности в системе иммунологической защиты изучена в сравнительном аспекте в группах, объединенных по степени воздействия неблагоприятных факторов окружающей среды. Нашими исследованиями выявлено, что связь с производственным стажем более характерна для клеточного звена иммунной системы. Выявлена умеренная отрицательная корреляция между стажем и относительным содержанием в периферической крови Т-лимфоцитов — СD3 + (г = - 0,57), 1дМ, G (г = -0,48 и г = -0,4). Отрицательная корреляции высокой степени отмечается у СD4+ хелперов (г = -0,96), СD8+ эффекторов (г = -0,65), спонтанного НСТ-теста (г = -0,62). Положительная корреляция со стажем выявлена в группе сравнения от умеренной степени с СD95 + (0,47) до высокой с СD16+ и СD19+ (0,65 и 0,91), HLA-DR (0,91).
Концентрация лейкоцитов периферической крови также имеет корреляцию высокой степени с натуральными киллерами СD16+ (г = 0,68), В-лимфоцитами СD19+ (г = 0,75), а также с экспрессией маркера активации HLA-DR на поверхности клеток (г = 0,63). Как следовало ожидать выявлена корреляция между СD3+ позитивными Т-лимфоцитами Т-хелперами и Т-эффекторами от умеренной - СD4+ (г = 0,58), до высокой степени СD8+ (г = 0,8). СD4+ имеет умеренную отрицательную корреляцию с СD19-позитивными В-лимфоцитами (г = -0,47), и высокую прямую с СD8+ (г = 0,87). Концентрация натуральных киллеров (СD16 + ) имеет высокую степень корреляции с СD95+ (г = 0,61), СD19+ (г = 0,73) и HLA-DR (г = 0,79).
Исследования функции нейтрофилов периферической крови выявило умеренную отрицательную корреляцию фагоцитарной активности со спонтанным НСТ (г = -0,54). Корреляция фагоцитарной активности лейкоцитов (ФАЛ) с клеточным звеном иммунной системы имела прямую направленность с высокой степенью - СD16 (г = 0,63), СD95 (г = 0,66), СD19 (г = 0,81). Функциональная активность кислород-зависимой бактерицидно-сти нейтрофильных лейкоцитов исследуемая с помощью спонтанного и стимулированного теста восстановления нитросинего тетразолия (НСТ) коррелировала в разной степени значимости с другими показателями иммунограммы. Так спонтанный НСТ имел умеренную отрицательную связь с СD8+ (г = -0,42), и высокую с СD3 (г = -0,61), а с HLA-DR и стимулированным НСТ отмечалась прямая корреляция от умеренной до высокой степени (г = 0,44 и г = 0,74) соответственно. Стимулированный НСТ кроме аналогичной спонтанному корреляции с СD3+ (г = -0,69) и СD8 + (г = -0,58), имел корреляцию с СD16 (г = -0,46) и СD95 (г = -0,62), но терял при этом свою связь с HLA-DR.
Маркер острого воспалительного процесса
- 1дМ с высокой степенью достоверности прямо коррелировал как с содержанием общего пула Т-лимфоцитов СD3+ (0,91), так и СD4+ (0,69) и
Таблица 1
Частота отклонений показателей иммунной системы у работниц птицефабрики
Показатель Ед. измерения % лиц с отклонениями показателей нормы Основная группа Группа сравнения
Лейкоциты 109/л т 10,94 ± 3,9 5,6 ± 3,17
і 3,3 ± 2,17 1,89 ± 1,87
Лимфоциты % т 84,8 ± 5,48 76,32 ± 6,9
і - 2,63 ± 0,26
CD3 % т - -
і 77,78 ± 9,8* 16,67 ± 15,2
CD4 % т 11,11 ± 7,41 -
і 61,11 ± 11,49* 50,0 ± 20,41
CD8 % т 50,0 ± 11,79 100,0
і - -
CD16 % т 22,15 ± 9,8 50,0 ± 20,41
і -
CD19 % т 16,67 ± 8,78 -
і 55,56 ± 11,71 50,0 ± 20,41
CD95 % т 61,16 ± 11,49 -
і 16,67 ± 8,78* 100
HLA-DR % т - -
і - 33,3 ± 19,25
Фагоцитоз % т 4,55 ± 4,4 7,14 ± 6,8
і 72,73 ± 9,50 85,71 ± 9,35
НСТ спонтанный усл. ед т 9,52 ± 6,4 7,14 ± 6,8
і 28,57 ± 9,8 28,57 ± 12,0
НСТ стимулированный усл.ед т - -
і 90,48 ± 6,41 100,0
igM г/л т 3,45 ± 3,0 -
і 20,69 ± 7,52* 5,88 ± 5,71
IgG г/л т - 17,65 ± 9,25
і 24,14 ± 7,95 17,65 ± 9,25
igA г/л т 7,14 ± 4,87 11,76 ± 7,81
і 50,00 ± 9,45* 32,29 ± 11,59
igE МЕ/мл т 24,00 ± 8,54 25,00 ± 12,5
і - -
CD8+ (г = 0,91) Т-лимфоцитами. Концентрация общего IgG имела большее количество коррелятивных связей. Корреляционный анализ свидетельствует о наличии определенных взаимосвязей между показателями иммунного статуса и длительностью контакта с неблагоприятными факторами труда. Частота наличия специфического IgG-ответа у работников основных профессий варьировала от 22,31 % к Aspergilus niger до 76,1 % к Candida albicans.
Дрожжеподобный грибок Candida albicans является, как известно, постоянным обитателем кожи, слизистых человека и относится к категории условно-патогенных. Однако при определенных ус-
ловиях (снижение иммунной защиты в организме) Candida albicans становится активным сенсибилизатором. В связи с этим, высокий процент сенсибилизированных лиц к С. albicans свидетельствует об этиологической значимости грибов рода Candida в формировании производственно обусловленной гиперчувствительности. Как было отмечено, одним из ведущих загрязнителей воздуха рабочей зоны является присутствие стафилококков и стрептококков. Изучение IgG-антител к указанным микроорганизмам позволило выявить важную роль в формировании специфической сенсибилизации. Специфические IgG-антитела к аллергену стафилококка были отмечены в 63,7 % проб.
ВЫВОДЫ
1. Установлено, что у лиц, имеющих постоянный и длительный контакт с птицей, достоверно чаще отмечаются изменения иммунологической реактивности организма. Наиболее значимыми из них явились снижение количества CD3 + , CD4 + и концентрации IgA и IgM в сыворотке крови.
2. Оценка индивидуальной гиперчувствительности у лиц основной группы выявила, что чаще всего сенсибилизация развивается к Candida albicans у 76,1 % и Staphilococcus aureus у 63,7 %.
3. Многообразие и интенсивность взаимосвязей между параметрами отражают, очевидно, синдром «напряжения» адаптационных механизмов в системе гомеостаза.
ЛИТЕРАТУРА
1. Артамонова В.Г., Баянов Э.И. Факторы риска и их роль в развитии заболеваний органов дыхания у рабочих современных птицефабрик // Мед. труда и пром. экология. — 2005. — № 4. — С. 6—12.
2. Воробьев М.В. Состояние здоровья работников крупного сельскохозяйственного предприятия (на примере птицеводческого комплекса): социально-гигиеническое исследование : автореф. дис. ... канд. мед. наук. — Иваново, 2006. — 26 с.
3. Классификация промышленных аллергенов: критерии и перечень-классификатор. Метод. рекомендации. — М., 2004. — 32 с.
4. Ярилин А.А. Основы иммунологии: Учебник.
— М. : Медицина, 1999. — 608 с.
Сведения об авторах
МасягутоваЛяйля Марселевна - к.м.н, заведующая клинико-диагностической лабораторией Уфимского научно-исследовательского института медицины труда и экологии человека (450070, г Уфа, ул. Свердлова, д. 53, кв. 47; тел.: 8 (3472) 55-19-48, 8 (3472) 51-98-36; e-mail: kdl.ufa@rambler.ru)
Рыбаков Иван Дмитриевич - врач клинико-диагностической лаборатории Уфимского научно-исследовательского института медицины труда и экологии человека (452211, Уфимский р-н, с. Михайловка, ул. Садовая, д. 3, кв. 18; тел.: 8 (3472) 55-57-39; e-mail: rybakov8820@mail.ru)
Гайнуллина Махмуза Калимовна - д.м.н., ведущий научный сотрудник отдела охраны здоровья трудящихся Уфимского научно-исследовательского института медицины труда и экологии человека (450106, г. Уфа, ул. Ст. Кувыкина, 94; тел.: 8 (3472) 55-30-57)
Янбухтина Гульназ Альбертовна - научный сотрудник, заведующая организационно-методического отдела Уфимского научно-исследовательского института медицины труда и экологии человека (450106, г. Уфа, ул. Ст. Кувыкина, 94)
