CC BY
20
ОЦЕНКА ПРОТЕКТИВНОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ АНТИГЕНА TOXOCARA CANIS В КОМПЛЕКСЕ С ИММУНОСТИМУЛЯТОРОМ ПРИ ТОКСОКАРОЗЕ НА ЛАБОРАТОРНОЙ МОДЕЛИ
Руднева О.В., Бережно В.К., Написаноеа Л.А.
ФГБНУ «ВНИИП фундаментальной и прикладной паразитологии животных и растений им.К.И.Скрябина (gny.vigis@yandex.ru, rudneva.olga79@gmail.com)
Введение. Специфические антигенные препараты в основе иммунопрофилактики нашли свое применение против широкого числа различных патогенов, в том числе и гельминтозов. В литературе и периодических изданиях опубликованы многочисленные данные об использовании различных иммуностимулирующих препаратов для профилактики паразитарных заболеваний. Так, по сообщению Исмагилова A.M. [2], применение антипаразитарных препаратов в сочетании с и иммуномодуляторами, способствует скорейшему восстановлению организма при мелофогозе. Применение клеточных антигенов протосколексов E.multilocularis двух, четырех и шестимесячного возраста в комплексе с полным адъювантом Фрейнда обеспечивают высокий процент защиты лабораторных мышей от последующего заражения при экспериментальном альвеококкозе [3]. Использование иммуномодулятора ронколейкин выявило его протективное действие (в пределах 40%) при эхинококкозе собак [1]. Установлено протективное действие иммуностимулирующего противопаразитарного средства на основе цитварного семени при экспериментальном трихинеллезе [5]. Также, исследования иммунопрофилактических свойств циклоферона и ронколейкина при экспериментальном трихинеллезе показали высокую степень защиты от инвазии [4]. На модели экспериментального альвеолярного эхинококоза установлено протективное действие иммуностимулирующего препарата риботан в комплексе с клеточным антигеном [6]. В последние десятилетия во многих странах отмечается увеличение частоты заболеваемости токсокарозом. Этот гельминтоз представляет как ветеринарную, так и медицинскую проблему во всем мире. Однако исследовательских работ, посвященных иммунопрофилактике токсокароза в настоящий момент чрезвычайно мало.
Цель работы - оценить протективную эффективность антигена Toxocara canis в комплексе с иммуностимулятором азоксимера бромид при токсокарозе на экспериментальной модели.
Материалы и методы. Исследование провели на 40 беспородных белых мышах, массой 16-18 г, распределенных на 4 группы по 7 животных в каждой. Комплексный биопрепарат, включающий иммуномодулятор широкого спектра действия, азоксимера бромид в дозе 0,2 мг/кг и соматический белковый антиген-экстракт из половозрелых T.canis в дозе 10,0 мкг белка/мышь соответственно. Исходя из этого, мы провели экспериментальную проверку защитной эффективности при токсокарозе каждого компонента по отдельности
Животным первой контрольной группы вводили стерильный физиологический раствор в дозе 0,2 мл/мышь. Животным второй группы вводили азоксимер бромид в
дозе 0,2 мг/кг (0,004 мг/мышь). Животным третьей группы только антиген в дозе 10,0 мкг/мышь. Животным четвертой группы вводили комплексный препарат, состоящий из иммуностимулятора в дозе 0,2 мг/кг (0,004 мг/мышь) и антигена в дозе 10,0 мкг/мышь. Препараты вводились внутримышечно, двукратно с интервалом 48 часов из расчета 0,2 мл/животное.
Спустя 90 дней после введения препаратов мышей заразили культурой инвазионных яиц Т.еатз в дозе 500±10 экз./мышь. Оценку протективного действия испытуемых препаратов проводили с 7-го дня инвазии. Убой всех мышей производили в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных».
Таблица
Оценка протективной эффективности иммунопрофилактических препаратов при токсокарозе на лабораторной модели
Группы Вводимый препарат Доза Среднее кол-во обнаруженных лич./мышь Эффективность защиты, %
1 стерильный 0,9%-ный№С1 0,2 мл в/м 190,33±34,10 0%
2 азоксимера бромид 0,004 мг/мышь 108,33±35,86 43,17%
3 антиген 10,0 мкг/мышь 113,69±35,26 40,36%
4 азоксимера бромид + антиген 0,004 мг/мышь 10,0 мкг/мышь 92,22±35,057 51,62%
Анализ данных эксперимента, проведенного на 28 белых беспородных мышах с использованием комплексного биопрепарата на основе азоксимера бромида и соматического экстракта токсокар, показал, что спустя 90 дней после введения препаратов наибольший эффект защиты достигался при применении комплексного биопрепарата в группе №4 (табл.). Животные этой группы оказались менее всего подвержены инвазии, количество обнаруженных у них личинок токсокар составляло 92,22±35,057 экз./голову, что по сравнению с контролем было в 2,07 раза меньше.
Защитный эффект также отмечался у мышей, которым ввели отдельно иммуннопрепарат (группа №2) и у животных группы №3, получавших только соматический экстракт токсокар. У мышей этих групп количество обнаруженных личинок Т.еатз оказалось меньше, чем у мышей контрольной группы и составило в среднем 108,33±35,86 и 113,69±35,26 экз./голову. Таким образом, по сравнению с контрольной группой, количество личинок Т.еатз было в1,75 и 1,68 раза меньше.
Заключение. Введение иммуностимулирующих препаратов активизировало защитную реактивность, сохраняющуюся на протяжении 90 дней и снижающую последующую зараженность животных токсокарами. В то же время применение их в комплексе с соматическим белковым экстрактом требует дальнейшего внимательного изучения, особенно в плане корректировки дозы антигенного
препарата, поскольку передозировка может значительно снизить защитный эффект и вызвать угнетение всей иммунной системы, а недостаточное количество вводимого белка-антигена не будет способствовать стимуляции специфической иммунной реакции.
Литература: 1. Бережко В.К., Сасикова М.Р //Сб.мат. науч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». -М.-2010.-Вып. 11.-С. 55-58. 2.Исмагилов А.М.//Там же.-М.-2010.-Вып. 11.-С. 217-218. З.Руднева О.В.: Дисс.... канд. биол. наук - М.-2006.-148с. 4.Napisanova L.A., Rudneva O.V., Berezhko V.K., Thakahova A.A.//VII International Scientific Agriculture Symposium "Agrosym 2016", Jahorina, October 06-09, 2016.-P. 2487-2490. 5.Rudneva O.V., Berezhko V.K., Sasikova M.R.//Ad Alta: Journal of Interdisciplinary Research.-2016,-Vol. 6 Issue l.-P.88-91.4p. 6.Rudneva O.V., Napisanova L.A., Berezhko V.K. //Proceedings of the XXX GIRI Meeting; 2016 Sep. 09-11; Netherland. Int J High Dilution Res. 2016;15(4):17-17.
Assessment of protective efficiency of Toxocara canis antigen in combination with immunostimulant at T. canis infection laboratory model. Rudneva O.V., Berezhko V.K., Napisanova L.A. Ail-Russian K.I. Skryabin Scientific Research Institute ofFundamental and Applied Parasitology of Animals and Plants.
Summary. The results of investigation of immunoprophylactic properties of somatic protein antigen-extract obtained from mature T. canis in combination with immunostimulant azoximer bromide at experimental T. canis infection on mice were represented. It was found that on day 90 following administration of somatic protein antigen-extract from mature T.canis at dose level of 10,0 ^g protein/mouse was protective efficacy 40,36%; at application of azoximer bromide at dose level of 0,004 mg/mouse -43,17%; at application of somatic protein antigen-extract from mature T.canis at dose level of 10,0 ^g protein/mouse in combination with immunostimulant azoximer bromide at dose level of 0,004 mg/mouse - 51,62%. It had been concluded that such approach was promising in immunoprophylaxis of T.canis infection but further correction of doses of the antigen preparation was required.
