Особенности возрастной динамики E . Coli кишечного микробиоценоза поросят Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

УДК 636.4.084.4:579.262

ОСОБЕННОСТИ ВОЗРАСТНОЙ ДИНАМИКИ E.coli КИШЕЧНОГО МИКРОБИОЦЕНОЗА ПОРОСЯТ

FEATURES OF AGE DYNAMICS OF E.coli OF INTESTINAL MICROBIOCENOSIS IN

PIGS

Забашта Николай Николаевич, Скобликов Николай Эдуардович, Москаленко Елена Александровна

ГНУ СКНИИЖ Россельхозакадемии, Российская Федерация, Краснодар

Zabashta Nikolay Nikolaevich, Skoblikov Nikolay Eduardovich, Moskalenko Elena Aleksandrovna

North-Caucasus Research Institute of Animal Husbandry under Russian Academy of Agricultural Sciences, Krasnodar, Russia

Зимин Андрей Антонович

Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К.Скрябина РАН (ИБФМ РАН), г. Пущино, Московская обл., Россия

Zimin Andrey Antonovich

Institute of Biochemistry and Physiology of Microorganisms RAS, Pushchino, Moscow reg., Russia

Аннотация: в результате работы установлена характерная динамика коли-титра кишечника поросят первых двух месяцев жизни, в т.ч. - при применении экспериментальных пробиотического и фагового препаратов; выявлены минимальные значения коли-титра всех четырёх групп животных в 53 дня.

Summary: the study showed the characteristic dynamics of intestinal coli-titer in pigs of first two months of life, including - under the application of experimental probiotic and phage preparations; minimum values of coli-titer are revealed in all four groups of animals at the age of 53 days.

Ключевые слова: свиньи; кишечный микробиоценоз; E. coli; возрастная динамика.

Key words: pigs; intestinal microbiocenosis; E.coli; age dynamics

Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ в рамках научных проектов № 11-04-96575-р_юг_ц и

12-04-90864-мол_рф_нр.

Исследованию патогенной E.coli в свиноводстве посвящено множество работ, отчасти потому, что кишечная палочка является экономически одной из наиболее важных патогенных бактерий в свиноводстве [1]. Однако, публикаций о составе комменсальной (непатогенной) кишечной палочки микробиоты свиней значительно меньше [2]. Тем более, немногочисленные публикации, посвящённые исследованию возрастной динамики энтеробактерий (в т.ч. - и E.coli) кишечника свиней были опубликованы относительно недавно [3]. И до сих пор отсутствуют работы, посвящённые детальному исследованию возрастной динамики E.coli при применении пробиотиков, при том, что данные препараты находят самое широкое применение в животноводстве [4].

Целью работы было исследование динамики количества изолятов E.coli в кишечном микробиоценозе поросят первых двух месяцев жизни как при содержании на основном рационе, так и при применении экспериментальных пробиотического и фагового препаратов.

Методика. Были сформированы четыре группы животных, каждая из которых представляла собой гнездо с поросятами (от 8 до 10 поросят), содержавшиеся в одинаковых условиях на одинаковом рационе. Для наблюдения в каждой группе были выбраны по три поросёнка, каждый из которых был промаркирован согласно его принадлежности к группе: от I-1 до ГУ-3.

Разделение животных на группы имело целью изучение качественных и количественных изменений содержания бактерий E. coli в кишечном микробиоценозе свиней, как при содержании на основном рационе, так и при применении экспериментальных пробиотического и фагового препаратов.

Сформированные группы животных отличались следующими особенностями. Животные группы I содержались только на основном рационе, не получая в течение периода наблюдения экспериментальных препаратов; животные группы II и группы III получали пробиотический препарат на 17-й, 21-й,

24-й, 27-й, 31-й, 35-й, 39-й, 42-й день жизни; животные группы ГГГ и группы IV получали фаговый

препарат на 27-й, 31-й, 35-й день жизни. Отъём поросят от свиноматок во всех группах проводился на 35-й день жизни.

Каждый из 144 образцов биоматериала, отбираемого от двенадцати животных за двенадцать возрастных периодов, имел индивидуальный номер согласно его принадлежности к конкретному животному и сроку отбора: от I-1-17 до IV-3-66. Из отобранных образцов биоматериала выделяли изоляты E.coli, учитывая морфологические особенности колоний при росте на среде первичного посева и количество (титр) данных бактерий.

Результаты и обсуждение. Из образцов после учёта первичного посева на среде Эндо было выделено 132 изолятов (от 1 до 3 изолятов от одного образца), E.coli.

Что касается количественных параметров содержания штаммов E. coli в кишечном микробиоценозе животных, то было отмечено, что часто в образце биоматериала, содержащем несколько штаммов, один штамм занимал доминирующее положение, определяясь в титре, на 1 - 3 порядка превосходящем другие штаммы.

Что касается суммарного коли-титра в каждом образце, то его динамика имела различия между группами. В группе I коли-титр колебался в диапазоне около 3 - 4 lg КОЕ/г до 42-дневного возраста, после чего поднимался до 5,75 lg КОЕ/г в 46 дней, резко снижался до 1,44 lg КОЕ/г в 53 дня, и снова возвращался в диапазон 3 - 4 lg КОЕ/г в 59 - 66 дней.

В группе II коли-титр сразу после начала приёма пробиотика резко снижался до 1,18 lg КОЕ/г в 21 день, после чего резко повышался до 5,99 lg КОЕ/г к 27 дню, плавно снижался до 1,96 lg КОЕ/г к 53 дню, а затем также повышался в диапазон 3,34 - 4,33 lg КОЕ/г, достоверно не отличаясь в этот период (с 53 дня) от показателя группы I.

В группе III динамика коли-титра весьма напоминала динамику группы I. Лишь в 46 дней коли-титр в III группе составил 2,07 lg КОЕ/г (таким образом, разница с коли-титром в группе I в этот день составила почти 3,7 lg КОЕ/г); во все остальные дни разница между показателями коли-титра в I и в III группах не привышала 1,0 lg КОЕ/г.

В группе IV динамика коли-титра также почти не имела отличий до 42 дня, когда отмечалось наибольшее значение этого параметра (5,15 lg КОЕ/г), после чего наблюдалось снижение до 1,67 lg КОЕ/г (достоверно не отличаясь от группы I), продолжая снижаться до 1,21 -1,19 lg КОЕ/г в 59 - 66 дней.

Таким образом, можно отметить следующие возрастные колебания коли-титра в группах, отличающиеся от динамики других групп:

• Низкие значения коли-титра в группе II в 21 - 24 дня;

• Высокое значение коли-титра в группе II в 27 дней;

• Снижение коли-титра во всех группах, кроме первой (у которой наблюдался пик) в 46 дней;

• Низкие значения коли-титра в группе IV в 59 - 66 дня.

Кроме того, заслуживает внимания факт минимальных значений коли-титра всех четырёх групп в 53 дня.

По результатам определения идентификации штаммов было установлено, что ни один изолят E. coli не обнаруживался повторно у одного у того же животного во все периоды отбора материала, что свидетельствует о постоянном замещении биоваров E. coli кишечного микробиоценоза в онтогенезе.

Список литературы

1. Nagy, B., Fekete, P. Z. (2005). Enterotoxigenic Escherichia coli in veterinary medicine. Int J Med Microbiol 295, P. 443-454.

2. Schierack, P., Walk N., Reiter, K., Weyrauch, K.D. and Wieler, L.H. Composition of intestinal Enterobacteriaceae populations of healthy domestic pigs. Microbiology 153 (2007). - P. 3830-3837.

3. Katouli, M., Lund, A., Wallgren, P., Kuhn, I., Soderlind, O. & Mollby, R. (1995). Phenotypic characterization of intestinal Escherichia coli of pigs during suckling, postweaning, and fattening periods. Appl Environ Microbiol 61. - Р. 778-783.

4. Янченко, В.В., Чиков, А.Е., Осепчук, Д.В. Рационы с пробиотиком для молодняка свиней, отстающего в росте // Ветеринария Кубани. - 2010. - № 6. - С. 8-9.