CC BY
49
ISSN 2307-9266 e-ISSN 2413-2241
ФАРМАЦИЯ И ФАРМАКОЛОГИЯ
УДК 615.22'012
(ее)]
ОПТИМИЗАЦИЯ СПОСОБА ПОЛУЧЕНИЯ НАНОКАПСУЛ, РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТЕПЕНИ ВКЛЮЧЕНИЯ ЦИННАРИЗИНА В ПРОЛОНГИРОВАННУЮ ЛЕКАРСТВЕННУЮ ФОРМУНА ОСНОВЕ ПОЛИ-Р^-ЛАКТИД-КО-ГЛИКОЛИДА И ЕЕ ВАЛИДАЦИЯ
М.В. Сорокоумова, Н.В. Благоразумная, В.А. Компанцев, Л.И. Щербакова, Н.С. Зяблицева, Ю.Г. Медвецкая, Т.М. Васина, К. А. Мирошниченко
Пятигорский медико-фармацевтический институт -
филиал ФГБОУ ВО Волгоградский государственный медицинский университет Минздрава России 357532, Россия, Ставропольский край, г. Пятигорск, пр. Калинина, 11.
Распространенными патологиями сердечно-сосудистой системы являются цереброваскулярные расстройства, для лечения которых назначают препарат циннаризин. Разработана инновационная пролонгированная лекарственная форма в виде нанокапсул на основе поли^^-лактид-ко-гликолид (PLGA).
Целью исследования явилось совершенствование технологии и разработка методики определения уровня включения циннаризина в нанокапсулы. Исследовательская проблема заключалась в наличии множества особенностей инкапсулирования препарата, а также различных физико-химических свойств веществ, которые невозможно учесть в имеющихся методиках определения.
Материалы и методы. В ходе исследования были использованы субстанция циннаризина, PLGA (50:50), поливиниловый спирт (ПВС). Остальные реактивы и растворители соответствовали категории х.ч. Для разработки методики количественного определения циннаризина и ее валидации, использован спектрофотометрический метод анализа. Были приготовлены модельные смеси, которые использовались как объекты исследования. Валидационную оценку методики проводили по таким показателям, как специфичность, линейность, предел обнаружения, повторяемость, воспроизводимость.
Результаты. Разработана методика спектрофотометрического определения степени включения циннаризина. Установлено, что инкапсуляция составляет 63,74%. Осуществлено валидационное тестирование методики. Результаты таких испытаний, как специфичность, линейность, предел обнаружения, повторяемость, воспроизводимость соответствуют допустимому интервалу значений, регламентированных нормативной документацией. Скорректирована технология получения нанокапсул, в связи с невозможностью определения степени включения циннаризина при использовании стандартной методики получения.
Заключение. Оптимизирована технология и разработана методика, позволяющая провести достоверный анализ степени включения циннаризина в нанокапсулы, с учетом особенностей производства и физико-химических свойств компонентов. Относительная погрешность разработанной методики определения не превышает ±2,67%. Исходя из результатов валидационой оценки, по всем показателям методика валидна.
Ключевые слова: циннаризин, поли^^-лактид-ко-гликолид, микрочастицы, степень включения, УФ-спектрометрия
Для цитирования: М.В. Сорокоумова, Н.В. Благоразумная, В.А. Компанцев, Л.И. Щербакова, Н.С. Зяблицева, Ю.Г. Медвецкая, Т.М. Васина, К.А. Мирошниченко. Оптимизация способа получения нанокапсул, разработка методики определения степени включения циннаризина в пролонгированную лекарственную форму на основе поли^^-лактид-ко-гликолида и ее валидация. Фармация и фармакология. 2019;7(3): 138-147. DOI: 10.19163/2307-9266-2019-7-3-138-147
© М.В. Сорокоумова, Н.В. Благоразумная, В.А. Компанцев, Л.И. Щербакова, Н.С. Зяблицева, Ю.Г. Медвецкая, Т.М. Васина, К.А. Мирошниченко, 2019
For citation: M.V. Sorokoumova, N.V. Blagorazumnaya, V.A. Kompantsev, L.I. Shcherbakova, N.S. Zyablitseva, Y.G. Medvetskaya, T.M. Vasina, K.A. Miroshnichenko. Optimization of the method for obtaining nanocapsules, development of the methods of determining the degree of cinnarizine inclusion in a prolonged dosage form based on poly-d, l-lactid-co-glicolide, and its validation. Pharmacy & Pharmacology. 2019;7(3): 138-147. DOI: 10.19163/2307-9266-2019-7-3-138-147
E-mail: mariya_026@mail.ru
Получено 26.01.2019 Рецензия 1 29.03.2019 Рецензия 2 15.05.2019
Принята к печати 10.06.2019
Scientific and Practical Journal
PHARMACY & PHARMACOLOGY
RESEARCH ARTICLE
DOI: 10.19163/2307-9266-2019-7-3-138-147
OPTIMIZATION OF THE METHOD FOR OBTAINING NANOCAPSULES, DEVELOPMENT OF THE METHODS OF DETERMINING THE DEGREE OF CINNARIZINE INCLUSION IN A PROLONGED DOSAGE FORM BASED ON POLY-D, L-LACTID-CO-GLICOLIDE, AND ITS VALIDATION
Maria V. Sorokoumova, Natal'ya V. Blagorazumnaya, Vladislav A. Kompantsev, Larisa I. Shcherbakova, Nadezhda S. Zyablitseva, Yulia G. Medvetskaya, Tatiana M. Vasina, Kirill A. Miroshnichenko
Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute - branch of Volgograd State Medical University 11, Kalinin ave., Pyatigorsk, Russia, 357532
E-mail: mariya_026@mail.ru
Received 26.01.2019 Review 1 29.03.2019 Review 2 15.05.2019 Accepted for publication: 10.06.2019
Common pathologies of the cardiovascular system are cerebrovascular disorders, for which cinnarizine is prescribed. An innovative, prolonged nanocapsule dosage form based on poly-D, L-lactide-co-glycolide (PLGA) has been developed. The aim of the research was improvement of the technology and development of the methods for determining the level of cinnarizine inclusion in nanocapsules. The research problem consisted of a great number of drug encapsulation peculiarities, as well as various physicochemical properties of the substances that cannot be taken into account in the existing methods of determination.
Materials and methods. In the study, the following substances were used: cinnarizine, PLGA (50:50), polyvinyl alcohol (PVA). The remaining reagents and solvents fitted into the category of chemically pure. For development of the methods for quantitative determination of cinnarizine and its validation, a spectrophotometric method of analysis was used. Model mixtures used as objects of the study, had been prepared. Validation assessment of the methods was carried out upon such indicators as specificity, linearity, detection limit, repeatability, reproducibility.
Results. Methods for spectrophotometric determination of the degree of cinnarizine inclusion has been developed. It has been established that encapsulation reaches 63.74%. Validation testing methods has been carried out. The results of such tests as specificity, linearity, detection limit, repeatability, reproducibility correspond to the safe range of values regulated by Product specification file. Due to the impossibility of determining the degree of cinnarizine inclusion on the basis of standard methods of preparation, the technology of producing nanocapsules has been adjusted.
Conclusion. The technology has been optimized and new techniques have been developed. Taking into account the characteristics of production and the physicochemical properties of the components, they make a reliable analysis of the degree of cinnarizine inclusion in nanocapsules possible. The relative error of the developed methods of determination does not exceed ± 2.67%. Based on the results of the validation assessment, this methods is valid for all indicators. Keywords: cinnarizine, poly-D,L-lactide-co-glycolide, microparticles, degree of incorporation, UV spectrometry
ВВЕДЕНИЕ
При цереброваскулярных расстройствах отмечается прогрессирующее повреждение нейронов с последующим их апоптозом вследствие метаболических нарушений,недостатка питательных веществ и кислорода. Это геморрагический и ишемический инсульт, энцефалопатия, мигрень, деменция, нарушение когнитивных функций. Одним из ведущих патогенетических факторов развития данных расстройств является изменение свойств церебральных сосудов, под воздействием таких факторов, как атеросклероз, артериальная гипертензия, приводящих к нарушению мозгового кровообращения [1-4]. Основной группой лекарственныхпрепаратов, назначаемых при данной патологии, являются блокаторы кальциевых каналов,в частности циннаризин, эффективность которого доказана многочисленными клиническими исследованиями [5]. Существующие лекарственные формы цин-
наризина имеют ряд недостатков, а именно: частота приема, наличие побочных эффектов [6, 7]. Решением по нивелированию данных нежелательных факторов является разработка пролонгированной формы цин-наризина, позволяющей уменьшить частоту приемов и тем самым избежать резких изменений концентрации препарата в организме, то есть способной поддерживать концентрацию препарата в организме относительно постоянной и терапевтический эффективной. Современные фармацевтические технологии позволяют создавать пролонгированные лекарственные формы нано- и микроразмеров с контролируемым высвобождением активных субстанций на основе полимерных носителей при помощи метода инкапсулирования [8, 9]. Одним из перспективных полимеров является сополимер молочной и гликолевой кислот (50:50) - по-ли^^-лактид-ко-гликолид (PLGA). Нанокапсулы на основе данного биополимера обеспечивают высокий
ISSN 2307-9266 e-ISSN 2413-2241
ФАРМАЦИЯ И ФАРМАКОЛОГИЯ
уровень сорбции,пролонгируемое и программируемое высвобождение препаратов. Также полимер является биосовместимым и биодеградируемым, в организме метаболизируется до эндогенных соединений - молочной кислоты (разлагается до углекислого газа и воды) и гликолевой кислоты (выводится в неизменном виде). Разработана инновационная пролонгированная лекарственная форма циннаризина в виде микро- и нано-капсулна основе биодеградируемого полимера PLGA, предположительно способная нивелировать побочные эффекты препарата.
ЦЕЛЬ исследования - корректировка стандартной технологии, разработка и валидация методики определения степени включения циннаризина в полученные микрочастицы, с учётом особенностей инкапсулирования и физико-химических свойств соединений, используемых при производстве.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
В данном исследовании была использована субстанция циннаризина, PLGA (50:50), ПВС. Остальные реактивы и растворители соответствовали марке х.ч.
1. Методика определения степени
включения циннаризина в нанокапсулы
Методика 1
Объектом исследования послужил водный раствор супернатанта, получаемый после центрифугирования [10-14]. Супернатант помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводили до метки водой очищенной (раствор А). Учитывая растворимость циннаризина в спирте этиловом и данные литературы по определению степени включения лекарственных веществ в микрокапсулах на основе PLGA, была предложена следующая методика. Степень включения циннаризина устанавливали спектрофотоме-трически [15-21]. Для этого определяли содержание свободного циннаризина, а затем содержание циннаризина включенного в микрочастицы. Из раствора А отбирали аликвоту объемом 0,4 мл и помещали в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводили до метки спиртом этиловым 95% [22-24].
Методика 2
Из раствора А отбирали аликвоту, объемом 20 мл, помещали в делительную воронку, добавляли 5 мл хлороформа и экстрагировали. Спектр хлороформного извлечения измеряли в интервале 220-360 нм на спектрофотометре СФ-56 в кюветах с толщиной слоя 1 см, в качестве раствора сравнения использовали хлороформ. Предварительно измеряли спектр стандартного образца циннаризина в хлороформе. Полноту извлечения циннаризина из раствора А контролировали повторным прибавлением 5 мл хлороформа к водному раствору, полученному после первого экстрагирования. Спектр второго хлороформного извлечения измеряли в интервале 220-360 нм на спектрофотоме-
тре СФ-56 в кюветах с толщиной слоя 1 см, в качестве раствора сравнения использовали хлороформ.
Методика 3
В данном случае объектом исследования служил раствор супернатанта в хлористоводородной кислоте. Весь объем переносили в мерную колбу вместимость 50 мл, доводили до метки 0,1 М раствором кислоты хлористоводородной. Предварительно был измерен спектр стандартного образца циннаризина в 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной, наблюдали максимум поглощения А=0,576 при длине волны 253 нм.
Оценку степени включения циннаризина в нанокапсулы проводили, измеряя спектр поглощения в области 220-360 нм на спектрофотометре СФ-56 в кюветах с толщиной слоя 1 см, в качестве раствора сравнения использовали раствор кислоты хлористоводородной 0,1 М.
2. Оптимизация способа получения нанокапсул
Из литературных данных известно, что циннари-зин растворим в 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной, соответственно было проведено исследование на растворимость PLGA в 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной.
Навеску PLGA помещали в 50 мл 0,1 М раствора кислоты хлористоводородной. При перемешивании в течение трех часов полимер не растворился, в связи с чем, было предложено изменить стандартную технологию нанокапсул.
Стандартная технология нанокапсул
Для получения микрочастиц циннаризина на основе PLGA был использован метод соосаждения. Точные навески циннаризина и PLGA растворяют в небольшом объеме хлороформа, а затем по каплям вводят в водный раствор ПВС, при гомогенизации с помощью аппарата иКга-ТиггахТ-18 (1КА, ФРГ). Полученный раствор, содержащий микрочастицы, центрифугируют при скорости вращения 10000 об/мин в течение 20 минут. Надмикрокапсульную жидкость - супернатант декантируют.
Скорректированная технология нанокапсул
Точные навески циннаризина и PLGA растворяют в небольшом объеме хлороформа, а затем по каплям вводят в 0,1 М хлористоводородный раствор ПВС, при гомогенизации с помощью аппарата иКга-Тиггах Т-18 (1КА, ФРГ). Полученный раствор, содержащий микрочастицы, центрифугируют при скорости вращения 10000 об/мин в течение 20 минут. Надмикрокапсульную жидкость - супернатант декантируют.
3. Методика количественного определения
циннаризина в нанокапсулы и ее валидация
3.1. Количественное определение
На основе данных, полученных при определении
PHARMACY & DOI: 10.19163/2307-9266-2019-7-3-138-147
PHARMACOLOGY
уровня включения циннаризина в нанокапсулы, для количественного анализа были выбраны условия, соответствующие методике №3.
Измерения проводились при комнатной температуре шестикратно, данные усреднялись.
Расчет содержания циннаризина в супернатанте-производилипо формуле 1:
A.XCg.XWiXWj A^-xaxV.
(1),
где
Ах - оптическая плотность супернатанта;
Crm - концентрация СО циннаризина, г/мл;
W, W2 - объем мерных колб, мл;
Arm - оптическая плотность СО циннаризина;
a - навеска циннаризина, г;
V - объем аликвоты, мл.
a '
3.2. Валидация методики количественного
определения циннаризина в нанокапсулы
Осуществлена валидационная оценка разработанной методики количественного определения циннаризина в микрочастицах.
Разработанную методику оценивают по следующим показателям: специфичность, линейность, предел обнаружения, повторяемость, воспроизводимость.
Определение специфичности
При испытании на специфичность методики определяют влияние растворителя и вспомогательных веществ на оптическую плотность раствора модельной смеси.
В качестве растворителя используют 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты. Готовят два раствора: первый - раствор модельной смеси микрочастиц с циннаризином, второй - растворитель и вспомогательные вещества.
Определение линейности методики
Определение линейности методики количественного анализа циннаризина осуществляют спек-трофотометрическим методом. Для этого проводят 6 параллельных определений в навесках модельной смеси микрочастиц.
Приготовление модельных смесей
Навески микрочастиц циннаризина равные соответственно 0,01 г, 0,02 г, 0,03 г, 0,04 г, 0,05 г и 0,06 г помещают в мерные колбы вместимостью 100 мл, растворяют в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты, доводят тем же растворителем до метки, перемешивают. Измеряют оптическую плотность полученных растворов на спектрофотометре СФ-56 в максимуме поглощения при длине волны 253 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.
Определение предела обнаружения
При определении предела обнаружения готовят модельную смесь: 0,03 г микрочастиц циннаризина помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 0,1М растворе хлористоводородной кислоты и доводят до метки тем же растворителем (раствор А).
Из раствора А готовили модельные растворы с концентрацией 1-10-3 г/мл, 1-10-4 г/мл, 1-10-5 г/мл циннаризина. Определение начинали с раствора с наибольшей концентрацией, устанавливая концентрацию, при которой будет отсутствовать максимум поглощения циннаризина при длине волны 253 нм.
Определение сходимости
Сходимость характеризуется, такими показателям, как повторяемость и воспроизводимость методики.
Для определения использовали спектрофотоме-трический метод анализа, в диапазоне длин волн 220-360 нм.
Повторяемость исследуют на образце модельной смеси микрочастиц циннаризина в 10 повторностях.
Воспроизводимость методики оценивают на пяти образцах модельных смесей в двух повторностях.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ
Используя методику определения № 1, было установлено, что при добавлении спирта этилового в водный раствор супернатанта наблюдается образование белой опалесценции и помутнение. Причиной этих явлений является взаимодействие ПВС со спиртом этиловым, в связи с чем, данную методику невозможно использовать для спектрофотометриче-ского определения степени включения циннаризина.
Используя методику № 2, в супернатанте было определено количественное содержание циннаризина в размере 1% от введенной навески циннаризина, что подтверждается растворимостью циннаризина в воде [25].
Исходя из полученных результатов, было предложено изменить стандартную технологию микрочастиц путем использования хлористоводородного раствора ПВС, взамен водного раствора, что позволит перевести невключившийся циннаризин в раствор, с последующим определением степени включения [26, 27].
Применение методики №3, позволило определить количественное содержание циннаризина в хлористоводородном растворе супернатанта. Соответственно по разности концентраций представляется возможным вычислить степень инкапсуляции препарата в микрочастицы.
Произведя серию определений, получены следующие данные.
ISSN 2307-9266 e-ISSN 2413-2241
ФАРМАЦИЯ И ФАРМАКОЛОГИЯ
На рисунке 1 представлен УФ-спектр поглощения раствора супернатанта, полученного по скорректиро-
ванной технологии. Данный УФ-спектр поглощения совпадает с результатами предыдущих исследований.
Рисунок 1 - УФ-спектр супернатанта.
Исходя из результатов исследования, усреднен- „ 0,447 0,001- 50 10
ная оптическая плотность при длине волны 253 нм составила 0,447.
Содержание циннаризина в супернатанте рассчитывали по формуле 1.
X =-
= 36,26%
0,576 0,0107 1 По разности вычисляют степень включения циннаризина:
100% - х = 100 - 36,26=63,74% (таб. 1)
Таблица 1 - Данные о степени инкапсулирования
Образец № Оптическая плотность раствора Количество несвязанного циннаризина,% Количество связанного циннаризина,% Метрологические данные
1 0,425 34,48 65,52
2 0,482 39,10 60,90
3 0,447 36,26 63,74 S=1,62 Sx=0,6635
4 0,450 36,51 63,49
5 0,430 34,88 65,12 £ =±2,67
6 0,448 36,34 63,66
X
0,447
36,26
63,74
Валидационная оценка методики Определение специфичности
Полученные растворы анализировали спек-трофотометрическим методом. На рисунке 2 представлен УФ-спектр модельной смеси микрочастиц с циннаризином, как видно, в области 230-270 нм на-
блюдается максимум поглощения характерный для препарата. На рисунке 3 приведен спектр поглощения второго раствора, состоящего из растворителя и вспомогательных веществ. Наглядно представлено, что поглощение в области 230-270 нм практически отсутствует.
DOI: 10.19163/2307-9266-2019-7-3-138-147
PHARMACOLOGY
Исходя из полученных данных определения, можно судить о специфичности разработанной методики [28].
Рисунок 2 - УФ-спектр модельной смеси микрочастиц
Рисунок 3 - Уф-спектр растворителя с вспомогательными веществами
ISSN 2307-9266 e-ISSN 2413-2241
ФАРМАЦИЯ И ФАРМАКОЛОГИЯ
Определение линейности методики
По результатам испытаний был построен гра-дуировочный график зависимости значения оптической плотности от навески модельной смеси и
коэффициент корреляции. График представлен на рисунке 4.
Показатель линейности характеризуется коэффициентом корреляции, его значение составило 0,998875,
рассчитано уравнение градуировочного графика и что соответствует требованию не ниже 0,995.
1,2
У 0,8
х
I-
0
1
к 0,6
и у
È о,4
о
0,2
0,01
0,02 0,03 0,04
Навеска модельной смеси, г
0,05
0,06
Рисунок 4 - Градуировочный график зависимости значения оптической плотности циннаризина
от навески модельной смеси микрочастиц
Градуировочный график подчиняется линейной зависимости. Показатель коэффициента корреляции соответствует установленным требованиям НД [28]. Следовательно, можно утверждать, что линейная зависимость наблюдается в области концентраций циннаризина, во взятой навески модельной смеси микрочастиц 0,000345-0,002%.
Определение предела обнаружения
Данные, полученные в ходе исследования, отражены в таблице 2. Разработанная методика позволяет определить предел обнаружения, концентрацию, при которой не будет наблюдаться характерное поглощение для циннаризина при длине волны 253 нм. Установлен предел обнаружения циннаризина в микрочастицах, который составил 1-10-4 г/мл.
Таблица 2 - Данные о пределе обнаружения
Концентрация циннаризина Оптическая
в растворе, г/мл плотность раствора
1-10-3 0,498
1-10-4 0,0508
1-10-5 0,0048
Определение сходимости
Сходимость характеризуется такими показателями, как повторяемость и воспроизводимость методики.
Повторяемость оценивают по показателю -коэффициент вариации, его значение по требованию НД
не должно превышать 2,0% [28]. Данные о повторяемости методики приведены в таблице 3.
Установленный коэффициент вариации составил 1,4%, что входит в область допустимых значений.
Результаты тестирования по показателю воспроизводимость методики представлены в таблице 4.
Scientific and Practical Journal
PHARMACY & PHARMACOLOGY
RESEARCH ARTICLE
DOI: 10.19163/2307-9266-2019-7-3-138-147
Таблица 3 - Данные о повторяемости методики
№ измерения Оптическая плотность
1 0,498
2 0,505
3 0,504
4 0,497
5 0,496
6 0,507
7 0,503
8 0,500
9 0,494
10 0,496
Среднее значение 0,500
Степень вариации, % 1,4
Установленный коэффициент вариации составил Результаты тестирования по показателю воспро-
1,4%, что входит в область допустимых значений. изводимость методики представлены в таблице 4.
Таблица 4 - Данные о воспроизводимости методики
Первая серия измерений
№ образца 1 2 3 4 5
Исследователь № 1 0,502 0,500 0,503 0,498 0,496
Исследователь № 2_0,504_0,503_0,505_0,499_0,502
_Вторая серия измерений_
№ образца_1_2_3_4_5
Исследователь № 1_0,506_0,507_0,500_0,503_0,501
Исследователь № 2_0,504_0,507_0,507_0,501_0,503
Показателем приемлемости выступал коэффициент вариации, его значение, согласно требованиям НД, не должно превышать 3% [28]. Для 10 параллельных измерений в двух сериях он составил 0,60%, что не выходит за пределы допустимого показателя критерия приемлемости.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В ходе проведенных исследований была скорректирована стандартная технология микрочастиц на основе биодеградируемого полимера ПЛГА, путем использова-
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
1. Щукин И.А., Лебедева А.В., Бурд С.Г., Фидлер М.С., Шихкеримов Р.К., Исмаилов А.М., Болотов А.В., Бельгушева М.Х. Хронические цереброва-скулярные заболевания: вопросы диагностики и лечения // Consilium Medicum. - 2016. - №2. -С. 85-94.
2. Smith E.E., Saposnik G., Biessels G.J., Doubal F.N., Fornage M., Gorelick P.B., Greenberg S.M., Higashi-da R.T., Kasner S.E., Seshadri S. American Heart Association Stroke Council; Council on Cardiovascular Radiology and Intervention; Council on Functional Genomics and Translational Biology; and Council on Hypertension. Prevention of Stroke in Patients With Silent Cerebrovascular Disease: A Scientific State-
ния в качестве растворителя 0,1М раствор хлористоводородной кислоты. Разработана методика определения степени включения циннаризина в микрокапсулы методом УФ-спектрофотометрии. Содержание циннаризина в микрокапсулах составило 63,7% от введенной навески циннаризина. Относительная погрешность не превышает ±2,67%. Произведена валидация разработанной методики по показателям: специфичность, линейность, предел обнаружения, повторяемость, воспроизводимость. По результатам тестирования получены данные, по которым можно судить о валидности методики.
ment for Healthcare Professionals From the American Heart Association/American Stroke Association // Stroke. - 2017. - Vol. 48, №2. - P. e44-e71. DOI: 10.1161/STR.0000000000000116.
3. Thrift A.G., Howard G., Cadilhac D.A., Howard V., Rothwell P.M., Thayabaranathan T., Feigin V.L., Nor-rving B., Donnan G.A. Global stroke statistics: An update of mortality data from countries using a broad code of «cerebrovascular diseases» // International Journal of Stroke. - 2017. - Vol. 12, №8. - P. 796801. DOI: 10.1177/1747493017730782.
4. Patel R.A.G., McMullen P.W. Neuroprotection in the Treatment of Acute Ischemic Stroke // Prog Car-diovasc Dis. - 2017. - Vol. 59, №6. - P. 542-548. D0I:10.1016/j.pcad.2017.04.005.
ISSN 2З07-9266 e-ISSN 241З-2241
ФАРМАЦИЯ И ФАРМАКОЛОГИЯ
5. Ashrafi M.R., Salehi S., Malamiri R.A., Heidari M., Hosseini S.A., Samiei M., Tavasoli A.R., Togha M. Efficacy and safety of cinnarizine in the prophylaxis of migraine in children: a double-blind placebo-controlled randomized trial // Pediatr Neurol. - 2014. -Vol. 51, №4. - P. 503-8. D0l:10.1016/j.pediatrneu-rol.2014.05.031.
6. Сорокоумова М.В., Компанцев В.А., Щербакова Л.И., Мирошниченко К.А., Платонова А.Ю. Общая характеристика, применение в медицине, методы качественного и количественного анализа циннаризина // Вестник ВГУ, серия: Химия. Биология. Фармация. - 2017. - №4. - С. 135-140.
7. Raghuvanshi S., Pathak K. Recent Advances in Delivery Systems and Therapeutics of Cinnarizine: A Poorly Water Soluble Drug with AbsorptionWindow in Stomach // Journal of Drug Delivery. - 2014., 2014:479246 D0I:10.1155/2014/479246.
8. Shahba A.A., Mohsin K., Alanazi F.K. Novel self-na-noemulsifying drug delivery systems (SNEDDS) for oral delivery of cinnarizine: design, optimization, and in-vitro assessment.//AAPS PharmSciTech. -2012. - Vol. 13. - P. 967-977. D0I:10.1208/s12249-012-9821
9. Nguyen T.H., Hanley T., Porter C.J., Boyd B.J. Nano-structured liquid crystalline particles provide long duration sustained-release effect for a poorly water soluble drug after oral administration // Journal Control Release. - 2011. - Vol. 153, №2. - P. 180186. DOI: 10.1016/j.jconrel.2011.03.033.
10. Сорокоумова М.В., Компанцев В.А., Мирошниченко К.А. Разработка и исследование пролонгированного лекарственного средства циннаризина на основе поли^Д-лактид-ко-гликолида // Евразийский союз ученых. - 2017.
- № 10-1(43). - С. 75-79.
11. Verma S., Nagpal K., Singh S.K., Mishra D.N. Unfolding type gastroretentive film of Cinnarizine based on ethyl cellulose and hydroxypropylmethyl cellulose // International journal of biological macromolecules.
- 2014, Vol. 64. - P. 347-352. DOI: 10.1016/j.ijbio-mac.2013.12.030
12. Shahba A.A., Ahmed A.R., Alanazi F.K., Mohsin K., Abdel-Rahman S.I. Multi-Layer Self-Nanoemulsifying Pellets Delivery System for the Poorly Water-Soluble Drug Cinnarizine // AAPS PharmSciTech. - 2018. -Vol. 19, №5 - P. 2087-2102. DOI: 10.1208/s12249-018-0990-7
13. Sassene P.J., Mosgaard M.D., Lobmann K., Mu H., Larsen F.H., Rades T., Müllertz A.. Elucidating the Molecular Interactions Occurring during Drug Precipitation of Weak Bases from Lipid-Based Formulations: A Case Study with Cinnarizine and a Long Chain Self-Nanoemulsifying Drug Delivery System // Molecular Pharmaceutics - 2015. - Vol. 12, №11.
- P. 4067-4076. DOI: 10.1021/acs.molpharma-ceut.5b00498.
14. Morrison J.S., Nophsker M.J., Haskell R.J. A combination turbidity and supernatant microplate assay to rank-order the supersaturation limits of early drug candidates // Journal of pharmaceutical sciences. -2014. - Vol. 103, №10 - P. 3022-3032. D0l:10.1002/ jps.24090.
15. Ammar H.O., Ghorab M., Kamel R., Salama A.H. Design and optimization of gastro-retentive microbal-loons for enhanced bioavailability of cinnarizine // Drug Delivery and Translational Research. - 2016.
- Vol. 6, №3. - P. 210-224. DOI:1007/s13346-016-0280-4.
16. Haress N.G. Cinnarizine: Comprehensive Profile // Profiles Drug Subst Excip Relat Methodol.
- 2015. - Vol. 40. - P. 1-41. DOI: 10.1016/bs.po-drm.2015.01.001
17. Ciftci Z., Deniz M., Yilmaz I., Ciftci H.G., Sirin D.Y., Gultekin E. In vitro analysis of a novel controlled release system designed for intratympanic administration of N-acetylcysteine: a preliminary report // Am J Otolaryngol. - 2015. - Vol. 36, № 6. - P. 786-793. DOI: 10.1016/j.amjoto.2015.08.004.
18. Портнова С.В., Мцариашвили М.Р. Валидация методики количественного определения циннаризина в смывах // Вестник казанского технологического университета. - 2016. - Т. 19. - №12.
- С. 75-78.
19. Morrison J., Nophsker M., Elzinga P., Donoso M., Park H., Haskell R. A polychromatic turbidity microplate assay to distinguish discovery stage drug molecules with beneficial precipitation properties // Int J Pharm. - 2017. - Vol. 531, №1. - P. 24-34. DOI: 10.1016/j.ijpharm.2017.07.086.
20. Abdelrahman M.M. Simultaneous determination of Cinnarizine and Domperidone by area under curve and dual wavelength spectrophotometric methods // Spectrochim Acta A Mol Biomol Spectrosc.
- 2013. - Vol. 113. - P. 291-296. DOI: 10.1016/j. saa.2013.04.120.
21. Choudhari V.P., Ingale S., Gite S.R., Tajane D.D., Mo-dak V.G., Ambekar A. Spectrophotometric simultaneous determination of Tenofovir disoproxil fuma-rate and Emtricitabine in combined tablet dosage form by ratio derivative, first order derivative and absorbance corrected methods and its application to dissolution study// Pharm Methods. - 2011; Vol. 2, №1 - P. 47-52. DOI:10.4103/2229-4708.81096
22. Lamie N.T. Comparative study of spectrophotomet-ric methods manipulating ratio spectra: an application on pharmaceutical binary mixture of cinnarizine and dimenhydrinate.Spectrochim Acta A Mol Biomol Spectrosc. - 2015 - Vol. 141. - P. 193-201. DOI: 10.1016/j.saa.2015.01.033.
23. Благоразумная Е.Ю., Дуккардт Л.Н., Благоразумная Н.В. Качественный и количественный анализ триметилоктадецил аммония бромида в лекарственном средстве бактерицид // Известия вузов.
PHARMACY & DOI: 10.19163/2307-9266-2019-7-3-138-147
PHARMACOLOGY
Северо-Кавказский регион. Серия: Естественные науки. - 2006. - № S23. - C. 60-61.
24. Береговых В.В., Пятигорская Н.В., Беляев В.В., Ала-дышева Ж.И., Мешковский А.П. Валидация в производстве лекарственных средств/ Учебное пособие. - М.: Издательский дом Русский Врач, 2010. - 286 с. https://www.twirpx.com/file/1570313/
25. Mishra B., Sahoo J., Prasanna K.D. Enhanced bioavailability of cinnarizine nanosuspensions by particle size engineering: Optimization and physicochemical investigations // Materials Science and Engineering: - 2016. - Vol. 63. - P. 62-69. DOI: 10.1016/j.msec.2016.02.046.
26. Чмелевская Н.В., Илларионова Е.А. Аналитический контроль однородности дозирования таблеток циннаризина // Сибирский медицинский журнал. - 2009. - №3. - С. 50-52.
27. Илларионова Е.А., Чмелевская Н.В., Муравьева Г.М. Разработка методик обнаружения пи-камилона и циннаризина в комбинированных сочетаниях с психотропными лекарственными средствами. // Сибирский медицинский журнал. - 2015. - №4. - С. 68-71.
28. Общая фармакопейная статья ОФС 1.1.0013.15 «Статистическая обработка результатов химического эксперимента». - ГФ XIV. - М., 2018.
КОНФЛИКТ ИНТЕРЕСОВ
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
АВТОРЫ
Сорокоумова Мария Викторовна - аспирант кафедры неорганической, физической и коллоидной химии, Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ФГБОУ ВО ВолГМУ Минздрава России, г. Пятигорск, Россия. ORCID ID0000-0003-0590-8256. E-mail: mariya_026@mail.ru
Благоразумная Наталья Васильевна - кандидат фармацевтических наук, доцент кафедры фармацевтической химии и токсикологии Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ФГБОУ ВО ВолГМУ Минздрава России, г. Пятигорск, Россия. ORCID ID0000-0002-9302-097X. E-mail: nataliyva@ rambler.ru
Компанцев Владислав Алексеевич - доктор фармацевтических наук, профессор кафедры неорганической, физической и коллоидной химии, Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ФГБОУ ВО ВолГМУ Минздрава России, г. Пятигорск, Россия. ORCID ID0000-0001-9560-5288. E-mail:l.i.sherbakova@pmedpharm.ru
Щербакова Лариса Ивановна - кандидат фармацевтических наук, доцент,зав. кафедрой Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ФГБОУ ВО ВолГМУ Минздрава России, г. Пятигорск, Россия. ORCID ID0000-0002-7806-2805. E-mail: l.i.sherbakova@pmedpharm.ru
Зяблицева Надежда Сергеевна - кандидат фармацевтических наук, доцент преподаватель кафедры неорганической, физической и коллоидной химии, Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ФГБОУ ВО ВолГМУ Минздрава России, г. Пятигорск, Россия. ORCIDID 0000-0001-6007-1204. E-mail: n.s.zyablitseva@yandex.ru
Медвецкая Юлия Георгиевна - кандидат фармацевтических наук, старший преподаватель кафедры неорганической, физической и коллоидной химии, Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ФГБОУ ВО ВолГМУ Минздрава России, г. Пятигорск, Россия.
Васина Татьяна Михайловна - кандидат фармацевтических наук, доцент преподаватель кафедры неорганической, физической и коллоидной химии, Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ФГБОУ ВО ВолГМУ Минздрава России, г. Пятигорск, Россия. ORCID ID0000-0001-6816-3883. E-mail: tatyana.vasina.5959@mail.ru
Мирошниченко Кирилл Александрович - студент 5 курса Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ФГБОУ ВО ВолГМУ Минздрава России, г. Пятигорск. ORCID ID0000-0002-9811-1678. E-mail: k220436@yandex.ru
