CC BY
78
ЭКОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ
Экология животных/ Ecology of animals Оригинальная статья / Original article УДК 598.2 - 578.4
DOI: 10.18470/1992-1098-2016-2-50-58
O РОЛИ ДИКИХ ПТИЦ В СОХРАНЕНИИ И РАСПРОСТРАНЕНИИ ПТИЧЬЕГО ПАРАМИКСОВИРУСА СЕРОТИПА 1 (ВИРУС БОЛЕЗНИ НЬЮКАСЛА) НА ТЕРРИТОРИИ СИБИРИ И ДАЛЬНЕГО ВОСТОКА, РОССИЯ
1 Александра В. Глущенко*, 2Ксения С. Юрченко, 3Александр К. Юрлов, Юрий Г. Юшков, 67Михаил Ю. Щелканов,15Александр М. Шестопалов
1 лаборатория экспериментального моделирования и патогенеза инфекционных заболеваний,
Научно-исследовательский институт экспериментальной и клинической медицины, Новосибирск, Россия, rimmaaltai@rambler.ru 2лаборатория структурных основ патогенеза социально значимых заболеваний, Научно-исследовательский институт экспериментальной и клинической медицины, Новосибирск, Россия 3группа экологии птиц, Институт Систематики и экологии животных Сибирское отделение РАН, Новосибирск, Россия 4лаборатория болезней птиц, Институт экспериментальной ветеринарии
Сибири и Дальнего Востока, Новосибирск, Россия Новосибирский национальный исследовательский государственный
Университет, Новосибирск, Россия 6кафедра современных методов диагностики и медицинских технологий, Дальневосточный федеральный университет, Владивосток, Россия 7Биолого-почвенный институт ДВО РАН, Владивосток, Россия
Резюме. Цель. Изучить экологическое разнообразие диких птиц на территории Сибири и Дальнего Востока, являющихся переносчиками вируса болезни Ньюкасла, который относится к потенциально опасным возбудителям заболевания для птицеводства. Методы. Биологический материал в виде клоакальных смывов и фрагментов кишечника от диких мигрирующих птиц был собран в период 2008-2014 гг. Вирус был наработан в аллантоисной полости развивающихся куриных эмбрионов. Наличие вируса определяли в реакции гемагглютинации, а первичную идентификацию вируса болезни Ньюкасла подтверждали методом ОТ-ПЦР. Патогенность полученных изолятов была определена в тестах ICPI и MDT. Результаты. Было собрано и исследовано 4443 проб, полученных от диких мигрирующих птиц 11 отрядов. Вирус болезни Ньюкасла выявлен у 40 птиц из четырех отрядов. Основную роль в циркуляции ВБН на территории Сибири и дальнего Востока играют представители семейства Утиных (Anatidae) отряда Гусеобразных (Anseriformes), а именно виды - чирок-свистунок (Anas crecca), чирок-трескунок (Anas querquedula), кряква (Anas platyrhynchos) и широконоска (Anas clypeata). Все изоляты ВБН апато-гены за исключением двух задепонированных штаммов. Заключение. Дикие мигрирующие птицы отрядов Гусеобразные (Anseriformes) и Ржанкообразные (Charadriiformes) являются носителями вируса болезни Ньюкасла и могут занести патогенные варианты вируса на территорию России. Ключевые слова: вирус болезни Ньюкасла, дикие птицы, МЭБ - международное эпизоотическое бюро, патогенность, распространение, наблюдение.
Формат цитирования: Глущенко А.В., Юрченко К.С., Юрлов А.К., Юшков Ю.Г., Щелканов М.Ю., Шестопалов А.М. O роли диких птиц в сохранении и распространении птичьего парамиксовируса серотипа 1 (вирус болезни Ньюкасла) на территории Сибири и Дальнего Востока, Россия // Юг России: экология, развитие. 2016. Т.11, N2. C.50-58. DOI: 10.18470/1992-1098-2016-2-50-58
THE ROLE OF WILD BIRDS IN PRESERVATION AND PREVALENCE OF AVIAN PARAMYXOVIRUS SEROTYPE 1 (NEWCASTLE DISEASE VIRUSES) IN SIBERIA AND THE FAR EAST, RUSSIA
Alexandra V. Glushchenko*, 2Kseniya S. Yurchenko, 3Alexander K. Yurlov, 4Yurii G. Yushkov, 67Mikhail Yu. Shchelkanov, 15Alexander M. Shestopalov
laboratory of experimental modeling and pathogenesis of infectious diseases, Research Institute of Experimental and Clinical Medicine, Novosibirsk, Russia, rimmaaltai@rambler.ru laboratory of structural basesof the pathogenesis ofsocially significant diseases, Research Institute of Experimental and Clinical Medicine, Novosibirsk, Russia 3Research group of bird ecology Institute of systematic and ecology of
animals SB RAS, Novosibirsk, Russia 4 Laboratory of avian disease, Institute of experimental veterinary of Siberia
and the Far East, Novosibirsk, Russia Novosibirsk state University, Novosibirsk, Russia 6Department of modern methods of diagnostics and medical technology, Far Eastern Federal University, Vladivostok, Russia institute of Biology and Soil Science FEB RAS, Vladivostok, Russia
Abstract. The aim is to evaluate ecological diversity of wild birds in Siberia and the Russian Far East, which are carriers of Newcastle disease virus that belongs to potentially dangerous pathogen for poultry. Methods. Biological materials (cloacal swabs and intestinal fragments) of wild migratory birds were collected in 20082014. The viral isolates were propagated in the allantoic cavity of developing chicken embryos. The presence of virus was determined in hemagglutination tests and primary identification of Newcastle disease virus was confirmed by RT-PCR. Pathogenicity of the obtained isolates was determined in tests ICPI and MDT. Results. 4443 samples were obtained from wild migratory birds of 11 avian orders and were investigated. Newcastle disease virus was detected in 40 birds from 4 orders. The Duck family (Anatidae) of the Waterfowl order (An-seriformes) plays the leading role in the circulation of Newcastle disease virus in Siberia and the Far East.The main species among them - a teal (Anas crecca), a garganey (Anas querquedula), a mallard (Anas platyrhyn-chos) and a shoveler (Anas clypeata). All studied isolatesof Newcastle disease virus are apatogenic except for two deponated strains. Main conclusions. Wild migratory birds from orders Anseriformes and Charadriiformes are capable of carrying Newcastle diseasevirus and could transfer pathogenic variants of this virus to the Russian territory.
Keywords: Newcastle disease virus, wild birds, OIE - World Organisation for Animal Health, pathogenicity, prevalence, surveillance.
For citation: Glushchenko A.V., Yurchenko K.S., Yurlov A.K., Yushkov Yu.G., Shchelkanov M.Yu., Shestopalov A.M. The role of wild birds in preservation and prevalence of avian paramyxovirus serotype 1 (Newcastle disease viruses) in Siberia and the Far East, Russia. South of Russia: ecology, development. 2016, vol. 11, no. 2, pp. 50-58. (In Russian) DOI: 10.18470/1992-1098-2016-2-50-58
ВВЕДЕНИЕ
Болезнь Ньюкасла (БН) представляет широко распространенное по всему миру вирусное заболевание птиц. Для ряда стран болезнь считается эндемической и имеет серьезное экономическое значение. Возбудителем заболевания являются вирулентные штаммы птичьего парамиксовируса первого серотипа (ППМВ-1), известные также под названием вирус болезни Ньюкасла (ВБН). Вирус принадлежит к семейству парамиксо-вирусов (Рагатухвутёав), роду Ауы1ау1гш [1]. Естественным резервуаром ВБН являются дикие птицы-вирус выделен от птиц всех
возрастных категорий среди более 240 видов из 27 отрядов [2]. ВБН считается условно патогенным для человека - инфекция может поразить человека через слизистую оболочку глаза и протекает с признаками простуды, вызывая легкую форму лихорадки [3].
Свое название болезнь Ньюкасла получила в 1927 году после первой зарегистрированной в Европе вспышки болезни в окрестностях города Ньюкасл-апон-Тайн в Англии [4]. Согласно положениям кодекса здоровья наземных животных под редакцией Международного Эпизоотического Бюро
(МЭБ) 2012 г, современное определение болезни Ньюкасла подразумевает инфекцию домашней птицы, вызываемую любым птичьим парамиксовируса первого серотипа с индексом интрацеребральной патогенности (1СР1) у однодневных цыплят выше 0,7 и/или наличием в аминокислотной последовательности сайта расщепления белка слияния белок) на С-конце не менее трех основных аминокислот (аргинина или лизина), начиная с позиции 113, в сочетании с фенилаланином в позиции 117 [6, 7].
Несмотря на многочисленные программы профилактики и борьбы с болезнью, БН остается одной из самых значимых инфекций в мире среди домашней птицы. В настоящее время в России заболевание относится к контролируемым инфекциям в промышленных птицеводческих хозяйствах. В частных хозяйствах, зачастую, птиц не вакцинируют, поэтому болезнь Ньюкасла представляет потенциальную угрозу для птицеводческих хозяйств. Кроме того высокая эпизоотологическая опасность заболевания связана с возможным распространением возбудителя болезни с птицеводческой продукцией не только между странами, но и между континентами [2].
Экономический ущерб от БН значительный ввиду высокой заболеваемости непривитой птицы (среди цыплят до 100 %) и высокой смертности (до 90%). Кроме того,
переболевшие цыплята плохо растут, отмечается снижение яйценоскости и ухудшение качества яиц. Увеличение затрат в птицеводстве связано с проведением жестких карантинных мероприятий и уничтожением больной и подозрительной по заболеванию птицы [7].
На сегодняшний день мониторинг циркуляции вируса болезни Ньюкасла среди дикой птицы не проводится ни в одной стране. Вместе с тем, миграции диких птиц на длительные расстояния могут способствовать распространению вируса среди разных видов, особенно в регионах, пролегающих на путях сезонных миграций, а также приводить к потенциальной возможности передачи вируса от дикой птицы к домашней. На территории России проходят маршруты миграции диких птиц, среди которых пролетные пути (Восточно-Африканский-Западно-Азиатский, Центрально-Азиатский, Восточно-Азиатско-Австралийский), связывающие регионы Сибири и Дальнего Востока с территорией Китая, Центральной, Юго-Восточной Азией [8].
Поэтому цель настоящей работы заключалась в изучении разнообразия вируса болезни Ньюкасла, циркулирующего у диких перелетных птиц на территории Сибири и Дальнего Востока, и определения видовую принадлежность птиц, вовлеченных в поддержание циркуляции ВБН в природе.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Сбор полевого материала. Сбор биологического материала осуществляли в рамках проведения мониторинга вируса птичьего гриппа в пределах миграционных маршрутов диких птиц на территории Сибири и Дальнего Востока. Птицы отлавливались общепринятыми методами с помощью паутинных сетей, а также учитывались во время сезонной спортивной охоты в осенние периоды 2008-2014 годов.
В качестве материала для исследований у диких птиц брали клоакальные смывы и фрагменты кишечника, которые собирались в 2мл пробирки с 0,8 мл фосфатно-солевым буфером (ФСБ) и глицерином в соотношении 1:1, содержащими антибиотики (пенициллин 40,000 ед/мл, стрептомицин 20 мг/мл, канамицин 20 мг/мл). Для дальнейшего исследования биологический материал замораживали в жидком азоте при -196°С
[9].
Изоляция вируса. Все работы с собранным биологическим материалом были проведены в лабораториях 2-го уровня биологической безопасности (biosafety ^е1-2). Выделение вируса проводили по стандартной методике путем инокуляции в алланто-исную полость 10-дневных развивающихся куриных эмбрионов (РКЭ) в соответствии со стандартными процедурами из рекомендаций ВОЗ [9]. Вирус-содержащая аллантоис-ная жидкость была предварительно очищена через последовательные пористые фильтры 0,45 мкм и 0,2 мкм и хранилась при -80°С.
Наличие вируса болезни Ньюкасла в аллантоисной жидкости определяли с помощью реакции гемагглютинации (РГА) и методом ОТ-ПЦР в реальном времени со специфическими праймерами [10].
Патогенность изолятов вируса болезни Ньюкасла определяли при помощи интраце-ребрального теста (1СР1) на суточных цып-
лятах и методом определения среднего времени смерти (MDT) 10-ти дневных РКЭ согласно стандартным лабораторным методикам, описанным в рекомендациях Продовольственной и сельскохозяйственной организации ООН ^АО) [5]. Оценка результатов методов проводилась по стандартной методике, рекомендованной МЭБ, согласно которой вирусные изоляты с индексом близким к 2 считаются высоко патогенными для цыплят, а с индексом близким к 0 считаются апатогенными. Результаты теста МDT оцениваются по времени, в течение которого исследуемые вирусы приводят к смерти эм-
брионов. Изоляты, не приводящие к смерти эмбрионов в течение 90 часов и более, считались авирулентными [6].
ОТ-ПЦР. Вирусная РНК была выделена из вирус-содержащей аллантоисной жидкости. Первичная идентификация изолированного вируса болезни Ньюкасла осуществлялась методом ОТ-ПЦР с детекцией результатов в закрытой пробирке в режиме реального времени с использованием прай-меров и зонда, специфичных к консервативным участкам М-гена вируса болезни Ньюкасла, согласно [11].
ПОЛУЧЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЯ
В рамках мониторинга вируса гриппа за период с 2008 по 2014 год были собраны клоакальные смывы, фрагменты кишечника от 4443 диких птиц на территории Сибири и Дальнего Востока (табл.1). Из обследованного биологического материала вирус болезни Ньюкасла был выделен от птиц на террито-
рии семи административных регионов РФ: Алтайский край, Новосибирская область (Западная Сибирь), Республика Тыва (Восточная Сибирь) и (Амурская область, Камчатский край, Республика Саха (Якутия), Сахалинская область (Дальний Восток).
Таблица 1
Таксономическая характеристика и количество исследованных диких птиц
Table 1
Overview of orders and number of studied wild birds
Отряд Order Количество образцов Number of samples Доля от общего количества (%) Part of the total in %
Anseriformes 2848 64
Podicipediformes 105 2,4
Gaviiformes 2 0,04
Charadriiformes 556 12,5
Passeriformes 629 14,1
Columbiformes 212 4,8
Ciconiiformes 18 0,4
Gruiformes 34 0.8
Falconiformes 24 0,5
Strigiformes 11 0,2
Galliformes 4 0,09
Всего образцов Total number of samples 4443
Как видно из таблицы 1, птицы, обследованные на наличие вирусов, принадлежат к 11 отрядам. Наибольшее количество проб было собрано от птиц, принадлежащих к трем отрядам - Гусеобразные (Anseriformes), Воробьинообразные (Passer-
iformes)и Ржанкообразные (Charadriiformes), которые являются дальними мигрантами и способны переносить вирусы на большие расстояния. Соотношение представителей перечисленных отрядов от общего числа составило 64,0%, 14,1%, и 12,5%, соответ-
ственно. Наиболее редко встречались представители отрядов Гагарообразные (Gaviiformes) (0,04%) и Курообразные (Galliformes) (0,09%).
При проведении вирусологических исследований в 40 пробах от диких птиц
(0,9% от общего числа исследованных проб) были обнаружены и выделены на развивающихся куриных эмбрионах изоляты вируса болезни Ньюкасла (табл. 2).
Видовая принадлежность диких птиц, от которых были выделены изоляты вируса болезни Ньюкасла
Таблица 2
Table 2
Overview of speciesof wild birds sampled for Newcastle disease virus isolates
Отряд птиц Bird order Вид птиц Bird species Число Number Место сбора проб Sampling location
2008
Anseriformes Anas querquedula 3 Алтайский край, Новосибирская обл./ Altai Territory, Novosibirsk region
Anas strepera 1 Алтайский край/ Altai Territory
Anas platyrhynchos 1 Новосибирская обл./ Novosibirsk region
Anas clypeata 2 Новосибирская обл./ Novosibirsk region
Passeriformes Locustella certhiola 1 Амурская обл./ Amur region
2009
Anseriformes Anas querquedula 1 Алтайский край/ Altai Territory
Anas platyrhynchos 3 Амурская обл., Новосибирская обл., Республика Саха/ Amur region, Novosibirsk region, Republic of Sakha
Anas clypeata 1 Новосибирская обл./ Novosibirsk region
Anas crecca 3 Новосибирская обл./ Novosibirsk region
Mergus merganser 1 Новосибирская обл./ Novosibirsk region
Charadriiformes Larus canus 1 Камчатская обл./ Kamchatka Territory
Larus schistisagus 1 Камчатская обл./ Kamchatka Territory
2010
Anseriformes Anas platyrhynchos 1 Алтайский край/ Altai Territory
Anas formosa 1 Амурская обл./ Amur region
Anas crecca 5 Новосибирская обл., Сахалинская обл./ Novosibirsk region, Sakhalin region
Anas querquedula 2 Новосибирская обл./ Novosibirsk region
Anas clypeata 2 Новосибирская обл./ Novosibirsk region
Anas strepera 1 Новосибирская обл./ Novosibirsk region
Anas acuta 2 Сахалинская обл./ Sakhalin region
Anas penelope 1 Сахалинская обл./ Sakhalin region
Columbiformes Columba livia 1 Алтайский край/ Altai Territory
Streptopelia orientalis 1 Амурская обл. / Amur region
2011
Anseriformes Anas platyrhynchos 1 Республика Саха/ Republic of Sakha
Columbiformes Columba livia 1 Алтайский край/ Altai Territory
2014
Anseriformes Anas querquedula 1 Новосибирская обл./ Novosibirsk region
Charadriiformes Larus canuslinnaeus 1 Республика Тыва/ Republic of Tuva
Птицы, от которых были выделены ВБН, принадлежали 14 видам. Идентификацию полученных изолятов ВБН проводили на основе серологических тестов (реакция
гемагглютиниции, реакция торможения ге-магглютинации) и молекулярных методов (ОТ-ПЦР). Как представлено в таблице 2, наибольшее количество изолятов ВБН было
выделено от следующих видов - чирок-свистунок (Anas crecca), чирок-трескунок (Anas querquedula), кряква (Anas platyrhynchos) и широконоска (Anas clypeata) - соответственно 22,0%, 17,1%, 14,6% и 12,2% изолятов вируса болезни Ньюкасла было выделено от перечисленных видов диких мигрирующих птиц. В общей сложности, 34 изолята ВБН (82,9%) были выделены от представителей семейства Утиных (Anatidae), принадлежащих отряду Гусеобразных (Anseriformes).
В отдельных случаях отмечено проявление легких клинических признаков заболевания наряду со сравнительно высокой смертностью инфицированной птицы, что отражает значительную вариабельность вирулентности штаммов вируса болезни Ньюкасла. Течение заболевания после инфицирования ВБН даже с низкой вирулентностью зависит от различных условий, как, например, видовая принадлежность инфицированной птицы, ее возраст, условия окружающей среды и иммунный статус носителя, что в итоге может приводить как к легкой, так и тяжелой форме заболевания.
Следовательно, важной характеристикой для изоляов вируса болезни Ньюкасла является определение их патогенных свойств. Патотип определяется после выделения вируса с помощью стандартных тестов патогенности - среднего времени смерти
Полученные нами результаты мониторинга вируса болезни Ньюкасла у диких птиц, обитающих на территории Сибири и Дальнего Востока показали наличие циркуляции ВБН у птиц отряда Гусеобразные (Anseriformes) и Ржанкообразные (Charadriiformes). Кроме этого были обнаружены изоляты вируса болезни Ньюкасла у
(MDT) и интрацеребрального индекса пато-генности (ICPI). Исследования по изучению патогенных свойств выделенных изолятов в тестах MDT и ICPI показали, что все изоля-ты ВБН являются не патогенными (MDT>100 ч, ICPI=0,0), за исключением двух штаммов - NDV/Altai/pigeon/770/2011 (GenBank accession no.KJ920204) [12] и NDV/Yakutiya/mallard/852/2011 (GenBank accession no.KJ920203) [13] (табл.3). ШтаммNDV/Altai/pigeon/770/2011 в разведении 10-7 привел к 100% летальности 10-ти дневные РКЭ через 76 часов после инфицирования, однако индекс 1СР1составил 0,68. Штамму NDV/Yakutiya/mallard/852/2011 потребовалось более 90 часов, чтобы при разведении 10-6 привести к 100% летальности РКЭ, при этом индекс ICPI достиг 1.04. Тесты показали принадлежность штаммов к мезогенному патотипу (MDT=76ч для NDV/Altai/pigeon/770/2011 индекс ICPI=1.04 для NDV/Yakutiya/mallard/852/2011). Для этих двух штаммов была получена аминокислотная последовательность сайта протео-литического расщепления белка слияния F, анализ которой подтвердил принадлежность NDV/Altai/pigeon/770/2011 к вирулентной группе штаммов. Последовательность сайта протеолитического расщепления относит NDV/Yakutiya/mallard/852/2011 к лентоген-ной группе.
Таблица3 Table 3
одного представителя отряда Воробьинооб-разные (Passeriformes) и нескольких изоля-тов среди представителей Голубеобразных (Columbiformes). Учитывая, что практически все виды птиц, от которых получены изоля-ты вируса, являются дальними мигрантами, можно предположить, что возможен занос новых, в том числе и высокопатогенных
Характеристика патогенности штаммов ВБН Pathogenic characteristics of NDV strains
Штамм I Strain Вид I Species MDT, ч ICPI Сайт расщепления F-белка F-protein cleavage site
NDV/Altai/pigeon/770/2 011 Columba livia 76 ч 0,68 112-KR-Q-KRF-117
NDV/Yakutiya/mallard/8 52/2011 Anas platyrhynchos 116 ч 1,04 112-GK-Q-GRL-117
форм вируса болезни Ньюкасла на территорию Азиатской части России во время сезонных миграций (осень, весна). Анализ миграционных путей исследованных видов птиц показал, что в основном они прилетают с территории Китая, Индии и стран Юго-Восточной Азии, а также Ближнего Востока, Западной Европы и Африки [14, 15]. По данным международного эпизоотического бюро, только за последние 5 лет наблюдались случаи болезни Ньюкасла у домашних птиц более чем в 25 странах мира [16].
Учитывая высокую плотность домашних птиц в этих странах и возможность контакта между дикими и домашними птицами существует высокая вероятность заноса дан-
ного патогена на территорию России. На сегодняшний день роль диких птиц в распространении вируса болезни Ньюкасла недостаточно изучена, и мы считаем, что она серьезно недооценена.
Если для защиты от вируса болезни Ньюкасла в крупных птицеводческих хозяйствах используют противовирусные вакцины (В1, LaSota, V4, V4-HR) и проводятся необходимые противоэпизоотические мероприятия, то домашние птицы, которые содержатся в небольших хозяйствах и личных подворьях, остаются незащищенными и могут явиться источником распространения данного патогена.
Таким образом, нами показано, что дикие птицы отрядов Гусеобразные (Anseriformes) и Ржанкообразные (Charadriiformes) являются носителями вируса болезни Ньюкасла и могут занести патогенные варианты этого вируса на террито-
рию России. Данный факт указывает на необходимость проведения мониторинга вируса болезни Ньюкасла у диких птиц и учета полученной информации при планировании и проведении противоэпизоотических мероприятий.
Благодарности: 1. Авторы выражают благодарность сотрудникам Института экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Городо-ву В.С., Итэсь Ю.В., Леонову С.В., Толстых Н.А. за совместную работу.
2. Работа выполнена при поддержке Министерства образования и науки РФ в рамках федеральной целевой программы (проект # РРМЕР!61315Х0045).
Acknowledgements 1. Authors are sincerely grateful to colleagues of Institute of experimental veterinary of Siberia and The Far East for working in collaboration with Gorodov V.S., Ites Yu.V., Leonov S.V., Tolstyh N.A.
2. The study is supported by the Ministry of Education and Science of the Russian Federation (project # RFMEFI61315X0045).
1. Mayo M.A. A summary of taxonomic changes recently approved by ICTV. Arch. Virol. 2002. Vol.147. P.1655-1633. doi: 10.1007/s007050200039
2. Alexander D.J., Senne D.A. Newcastle disease, other avian paramyxoviruses, and pneumovirus infections. In Saif Y.M., Barnes H.J., Glisson J.R., Fad-ly A.M., Mc Dougald L.R., Swayne D.E. (Eds.). Diseases of Poultry 12th edn - Iowa, USA: Blackwell Publishing, 2008. P.74-115.
3. Alexander D.J. Newcastle disease and other avian Paramyxoviridae infections. Diseases of poultry. Ed. by B. W. Calneck. Ames; IA. 1997. P. 541569.
4. Thomas N.J., Hunter D.B., Atkinson C.T. Infectious diseases of wild birds. 1st edn. Iowa, USA: Wiley-Blackwell Publishing. 2007. p. 496.
5. Grimes S.E. A Basic Laboratory Manual for the Small Scale Production and Testing of I-2 Newcastle
Disease Vaccine. Food and Agricultural Organization (FAO), Animal Production and Health Commission for Asia and the Pacific (APHCA). 2002.
6. Miller P.J., Decanini E.L., Afonso C.L. Newcastle disease: Evolution of genotypes and the related diagnostic challenges. Infect. Genet. Evol. 2010. Vol. 10. (1). P. 26-35. doi: 10.1016/j.meegid.2009.09.012
7. OIE. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals. 7th ed. Paris, France: Office International des Epizooties, 2012. p.19.
8. Boere G.C., Stroud D.A. The flyway concept: what it is and what it isn't. In: G.C. Boere, C.A. Gal-braith & D.A. Stroud (eds). Waterbirds around the world. The Stationery Office, Edinburgh, UK. 2006. P. 40-47.
9. The National Training Course on Animal Influenza Diagnosis and Surveillance. 2001. Text. Harbin, China (May 20-26, 2001). Harbin. P. 79.
10. Mia Kim L., Suarez D.L., Afonso C.L. Detection of a broad range of class I and II Newcastle disease viruses using a multiplex real-time reverse transcription polymerase chain reaction assay. J. Vet Diagn Invest. 2008. Vol. 20(4). P. 414-425.
11. Miller P.J. Decanini E.L., Afonso C.L. Newcastle disease: evolution of genotypes and the related diagnostic challenges. Infect. Genet. Evol. 2010. Vol. 10 (1). P. 26-35.
12. Yurchenko K.S., Sivay M.V., Glushchenko A.V., Alkhovsky S.V., Shchetinin A.M., Shchelkanov M.Y., Shestopalov A.M. Complete Genome Sequence of a Newcastle Disease Virus Isolated from a Rock Dove (Columba livia) in the Russian Federation. Genome Announ. 2015. Vol. 3(1). pii: e01514-14. doi: 10.1128/genomeA.01514-14. Available at: https://www.researchgate.net/journal/2169-8287_Genome_Announcements). (accessed 27.12.2015)
13. Yurchenko K.S., Sobolev I.A., Glushchenko A.V., Shestopalov A.M. Complete Genome
Sequence of Genotype Ib Newcastle Disease Virus Isolated from a Mallard (Anas platyrhynchos) in Russia. Genome Announ. 2015. Vol. 3(6). pii: e01414-15. doi: 10.1128/genomeA.01414-15. Available at:
https://www.researchgate.net/journal/2169-8287_Genome_Announcements). (accessed
27.12.2015)
14. Galbraith C.A., Jones T., Kirby J., Mundkur T. A. Review of Migratory Bird Flyways and Priorities for Management. Bonn, Germany: UNEP/CMS Secretariat. 2014. 164 p.
15. Veen, J., AS.K. Yurlov, S. Delany, A.I. Mihan-tiev, M.A. Selivanova & G.C. Boere. An atlas of movements of Southwest Siberian waterbirds. Wetlands International, Wageningen, The Netherlands. 2005. 60 p.
16. Official site of OIE - World Organisation for Animal Health. Available at: http://www.oie.int/. (accessed 27.12.2015)
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ Принадлежность к организации Александра В. Глущенко* - младший научный сотрудник лаборатории экспериментального моделирования и патогенеза инфекционных заболеваний, Научно-исследовательский институт экспериментальной и клинической медицины, ул. Тимакова, 2, Новосибирск, 630060 Россия, e-mail: rimmaaltai@rambler.ru
Ксения С. Юрченко - аспирант, младший научный сотрудник лаборатории структурных основ патогенеза социально значимых заболеваний, Научно-исследовательский институт экспериментальной и клинической медицины, Новосибирск, Россия.
Александр К. Юрлов - к.б.н., ведущий научный сотрудник, руководитель группы экологии птиц, Институт систематики и экологии животных СО РАН, Новосибирск, Россия. Юрий Г. Юшков - д.с.-х.н., старший научный сотрудник, заведующий лабораторией болезней птиц, Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока, Новосибирск, Россия.
Михаил М. Щелканов - профессор, доктор биологических наук, профессор кафедры Дальневосточного федерального университета, Владивосток, Россия.
Александр М. Шестопалов - профессор, доктор биологических наук, заведующий лабораторией экспериментального моделирования и патогенеза инфекционных заболеваний, Научно-
INFORMATION ABOUT AUTHORS Affiliations
Alexandra V. Glushchenko* - Junior researcher of the laboratory of experimental modeling and pathogenesis of infectious diseases, Research Institute of Experimental and Clinical Medicine, 2 Timakova St. Novosibirsk, 630060 Russia, e-mail: rimmaal-tai@rambler.ru
Kseniya S. Yurchenko - PhD student, Junior researcher of laboratory of structural bases of the pathogenesis of socially significant diseases, Research Institute of Experimental and Clinical Medicine, Novosibirsk, Russia.
Alexander K. Yurlov - PhD in Biological sciences, Leading researcher, Head of the research group of bird ecology, Institute of systematic and ecology of animals SB RAS, Novosibirsk, Russia. Yuri G. Yushkov - Doctor of agricultural sciences, Senior researcher, Head of laboratory of avian disease, Institute of experimental veterinary of Siberia and the Far East, Novosibirsk, Russia.
Mikhail Yu. Shchelkanov- professor, Doctor of biological sciences, professor of the department of Far Eastern Federal University, Vladivostok, Russia.
Alexander M. Shestopalov - professor, Doctor of biological sciences, Head of the laboratory of experimental modeling and pathogenesis of infectious diseases, Research Institute of Experimental and
исследовательский институт экспериментальной и клинической медицины, Новосибирский национальный исследовательский
государственный Университет, Новосибирск, Россия.
Критерии авторства
Александра В. Глущенко собирала биологический материал, проводила наработку изолятов вируса, совместно с Ксенией С. Юрченко вели вирусологические работы по выявлению изолятов вируса болезни Ньюкасла, проводили постановку тестов !СР! и МОТ, анализировали полученные данные. Александр К. Юрлов, Юрий Г. Юшков, Михаил М. Щелканов и Александр М. Шестопалов корректировали рукопись до подачи в редакцию. Все авторы в равной степени участвовали в этой работе. Авторы в равных долях имеют отношение к написанию рукописи и одинаково несут ответственность за плагиат.
Конфликт интересов
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Поступила в редакцию 28.12.2015 Принята в печать 10.02.2016
Clinical Medicine, Novosibirsk state University, Novosibirsk, Russia.
Contribution
Alexandra V. Glushchenko collected biological material, carried out propagation of viral isolates, together with Kseniya S. Yurchenko carried out viral studies for detection of Newcastle disease virus isolates, did ICPI and MDT assays, analyzed the obtaineddata. Alexander K. Yurlov, Yuri G. Yushkov, Mikhail Yu. Shchelkanov and Alexander M. Shestopalov corrected the manuscript prior to submission to the editor. All authors have been equally involved in this research. Authors are equally responsible for the manuscript and for avoiding the plagiarism.
Conflict of interest
The authors declare no conflict of interest.
Received 28.12.2015 Accepted for publication 10.02.2016
