Научная статья на тему 'Некоторые иммунологические особенности клещевого энцефалита в Пермском крае'

Некоторые иммунологические особенности клещевого энцефалита в Пермском крае Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
191
38
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
КЛЕЩЕВОЙ ЭНЦЕФАЛИТ / ФАГОЦИТАРНАЯ АКТИВНОСТЬ / ПРОГРЕДИЕНЦИЯ / TICK-BORNE ENCEPHALITIS / PHAGOCYTIC ACTIVITY / PROGREDIENCE

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Быкова Лилия Павловна, Годовалов Анатолий Петрович, Кузяев Рафаель Зиафутдинович, Лебединская Ольга Витальевна

Показано, что взаимоотношение вируса клещевого энцефалита с организмом человека идёт двумя путями: развитием острой формы инфекции с исходом в реконвалесценцию и путём длительного пребывания вируса в организме, его персистенции в нервной ткани с периодической реактивацией и длительной циркуляцией иммуноглобулинов класса М. Несмотря на то, что вирус клещевого энцефалита обладает тропизмом к нервной ткани, вовлечение в процесс клеток крови является неотъемлемым компонентом этой инфекции. Комплексное изучение соотношения факторов врождённого и приобретённого иммунитета при клещевом энцефалите позволит приблизиться к пониманию особенностей хронизации заболевания.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Быкова Лилия Павловна, Годовалов Анатолий Петрович, Кузяев Рафаель Зиафутдинович, Лебединская Ольга Витальевна

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Some immunological features of tick-borne encephalitis in the Perm region

It is shown that the relationship of tick-borne encephalitis virus with the human body comes in two ways: the development of acute infection with the outcome in convalescence and long stay of the virus in the body, its persistence in the nervous tissue with periodic reactivation and prolonged circulating immunoglobulin M. In spite of the fact that tickborne encephalitis virus has a tropism for nerve tissue, involvement in the process of blood cells is an integral component of the infection. Comprehensive study of the relation of factors of innate and adaptive immunity in the tick-borne encephalitis providing insight into the features of chronic disease.

Текст научной работы на тему «Некоторые иммунологические особенности клещевого энцефалита в Пермском крае»

правого желудочков. Причем более выраженные изменения в структуре миокарда нарастали по мере увеличения давления в легочной артерии.

Таким образом, у больных с циррозом печени класса

В согласно критериям Чайлд-Пью происходит изменение структуры и функции миокарда левых и правых отделов сердца, нарастающие по мере увеличения давления в легочной артерии.

ЛИТЕРАТУРА

1. Берестень Н.Ф. Допплерэхография в комплексной оценке нарушений печеночной и сердечной гемодинамики: Автореф. дис.... д-ра мед. наук. — М., 2000. — 42с.

2. Гупьман М.И. Роль допплерографии в оценке степени фиброзирования ткани печени при хронических гепатитах и циррозе печени / М.И. Гупьман, Ю.С. Винник, С.И. Жестовская и др. // Сибирский медицинский журнал (г. Иркутск). — 2005. — Т. 55. — № 6. — С. 39-41.

3. Денисов A.A. Оценка функции левого и правого желудочков с позиций структурно-функциональных изменений миокарда у больных хроническими гепатитами и циррозом печени в процессе // Вестник новых медицинских технологий. — 2007. — № 2. — С. 38-45.

4. Дерюгин М.В. Хронические инфекционно обусловленные миокардиты как проблема в практике кардиолога // Сердце. — 2004. — №4. — С. 172-180.

5. КуликовВ.Е., Апексов О.Л., Мамчур В.Н. и др. Особенности диагностики портальной гипертензии у больных с хрониче-

скими диффузными заболеваниями печени методом ультразвуковой допплеросонографии // Актуальные проблемы современной медицины. — Великий Новгород, 2006. — Т. 8. Ч. 2. — С. 365-371.

6. Левитан Б.Н., Гринберг Б.А. Особенности портального кровотока при хронических гепатитах и циррозах печени // Визуализация в клинике. — 2001. — №18. — С. 16-20.

7. Осипенко М.Ф. Цирротическая кардиомиопатия // Клиническая медицина. — 2007. — №9. — С. 80-83.

8. Прибылое С.А. Дисфункция миокарда у больных с циррозом печени // Сердце. — Т.5. — №6. — С.305-307.

9. Lindqvist P., Waldenstrom A., Wikstrom G., Kazzam E. The use of isovolumic contraction ve-locity to determine right ventricular state of contractility and filling pressures. A pulsed Doppler tissue imaging study // European Journal of Echocardiography. — 2005. — Vol. 6. — № 4. — Р. 264-270.

10. Ratti L., Redaelli E., Guidi C., et.al. Diastolic dysfunction in liver cirrhosis // Gastrocnterol hepatol. — 2005. — №28 (10). — S. 649-655.

Информация об авторах: Чистякова Марина Владимировна — ассистент, к.м.н., e-mail: m.44444@yandex.ru;

Говорин Анатолий Васильевич — ректор ЧГМА, д.м.н., профессор; Гончарова Елена Валерьевна — професор курса, д.м.н.; Радаева Евгения Владимировна — ассистент, к.м.н.; Пустотина Зинаида Михайловна — ассистент, к.м.н.; Морозова Евгения Ивановна — ассистент.

© БЫКОВА Л.П., ГОДОВАЛОВ А.П., КУЗЯЕВ Р.З., ЛЕБЕДИНСКАЯ О.В. — 2012 УДК 612.017.1:616.9

НЕКОТОРЫЕ ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА В ПЕРМСКОМ КРАЕ

Лилия Павловна Быкова, Анатолий Петрович Годовалое, Рафаель Зиафутдинович Кузяев, Ольга Витальевна Лебединская (Пермская государственная медицинская академия имени академика Е.А. Вагнера, ректор — д.м.н., проф.

И.П. Корюкина, кафедра микробиологии и вирусологии, зав. — д.м.н., проф. Э.С. Горовиц)

Резюме. Показано, что взаимоотношение вируса клещевого энцефалита с организмом человека идёт двумя путями: развитием острой формы инфекции с исходом в реконвалесценцию и путём длительного пребывания вируса в организме, его персистенции в нервной ткани с периодической реактивацией и длительной циркуляцией иммуноглобулинов класса М. Несмотря на то, что вирус клещевого энцефалита обладает тропизмом к нервной ткани, вовлечение в процесс клеток крови является неотъемлемым компонентом этой инфекции. Комплексное изучение соотношения факторов врождённого и приобретённого иммунитета при клещевом энцефалите позволит приблизиться к пониманию особенностей хронизации заболевания.

Ключевые слова: клещевой энцефалит, фагоцитарная активность, прогредиенция.

SOME IMMUNOLOGICAL FEATURES OF TICK-BORNE ENCEPHALITIS IN THE PERM REGION

L.P. Bykova, A.P. Godovalov, R.Z. Kuziaev, O.V. Lebedinskaya (Acad. E.A. Wagner Perm State Medical Academy)

Summary. It is shown that the relationship of tick-borne encephalitis virus with the human body comes in two ways: the development of acute infection with the outcome in convalescence and long stay of the virus in the body, its persistence in the nervous tissue with periodic reactivation and prolonged circulating immunoglobulin M. In spite of the fact that tickborne encephalitis virus has a tropism for nerve tissue, involvement in the process of blood cells is an integral component of the infection. Comprehensive study of the relation of factors of innate and adaptive immunity in the tick-borne encephalitis providing insight into the features of chronic disease.

Key words: tick-borne encephalitis, phagocytic activity, progredience.

Эпидемиологическая ситуация по заболеваемости клещевым вирусным энцефалитом (КЭ) в Пермском крае продолжает оставаться напряженной. В 2011 году зарегистрировано 262 больных с диагнозом клещевой энцефалит, показатель заболеваемости на 100 тыс. населения составил 9,9, что в 4,3 раза выше показателя Российской Федерации. Клещевой энцефалит отличается широким спектром проявлений с преобладанием лихорадочной и менингеальной форм заболевания. В 1-3%

случаев КЭ приобретает хроническое, прогредиентное течение, которое приводит к инвалидизации больных и серьёзно сокращает их жизнь. Определить ход развития инфекционного процесса по пути хронизации зачастую затруднительно [11]. Детальное изучение хронического процесса принадлежит преимущественно экспериментальным исследованиям, которые показали, что существенное значение в патогенезе хронических форм заболевания имеет длительная персистенция вируса.

Обнаружение вируса, формирующего скрытую инфекцию, у больных людей в хронической стадии болезни было нечастым явлением из-за недостаточной чувствительности и трудоёмкости лабораторных методик [5, 6, 9]. В настоящее время определение РНК вируса стало возможным благодаря молекулярно-генетическим методам. В связи с этим появился новый импульс для изучения проявлений врождённого и приобретённого иммунитета при КЭ и их зависимости от циркуляции вируса. Полагают, что колебания формы и тяжести КЭ зависят от состояния индивидуальной защиты, которая определяется в первую очередь совокупностью защитных механизмов врождённого иммунитета [2, 3, 10]. Ранее считалось, что полиморфноядерные лейкоциты, малоактивные в фагоцитозе вирусных элементов, не играют существенной роли в защитных реакциях против вирусных инфекций. Более существенная роль отводится макрофагам и моноцитам крови. Работами отечественных учёных [1, 7, 12] показано, что макрофаги могут фагоцитировать заражённые вирусом клетки. Однако, неясна судьба поглощённых вирусных частиц и истинность фагоцитарной реакции. Интерес представляет степень участия макрофагов в патогенезе острых и хронических форм КЭ и проявления гуморального ответа при очередной вирусной атаке.

Цель работы: изучение особенностей врождённого и приобретённого иммунитета у людей, инфицированных вирусом КЭ при разных формах заболевания.

Материалы и методы

Проведено обследование 48 больных КЭ и 30 здоровых доноров. Диагноз КЭ был подтверждён при помощи иммуноферментного и молекулярно-генетического методов. Материалом служили пробы гепаринизиро-ванной крови, ликвора, сывороток крови. Сыворотки крови больных и ликвор исследовали в ИФА для определения иммуноглобулинов класса М (IgM) и G (IgG) при помощи тест-систем ЗАО «Вектор-Бест». РНК вируса КЭ определяли в вирусологической лаборатории ФГУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Пермском крае» при помощи тест-системы «Векто-ВКЭ-РНК-ампли100». Детекцию амплифицированной ДНК после ПЦР проводили методом гель электрофореза в 8-10% полиакриламидном геле.

Оценку фагоцитарной активности лейкоцитов (ФАЛ) больных проводили по модифицированной методике [4] с использованием в качестве объектов фагоцитоза эритроцитарного иммуноглобулинового сорбента, дополнительно нагруженного антигеном вируса КЭ. Прилипающую активность лейкоцитов к стеклу в присутствии антигена вируса КЭ и неродственных антигенов изучали по методике, предложенной P.G. Holt [13].

Статистический анализ результатов проводили с использованием f-критерия Стьюдента. Различия считали статистически значимыми при p<0,05.

Результаты и обсуждение

Изучение вовлечённости фагоцитирующих клеток в патологический процесс при хронической форме КЭ начали с оценки количества лейкоцитарных клеток. Было установлено, что при хроническом КЭ на фоне лейкоцитоза наблюдается увеличение относительного количества нейтрофилов и эозинофилов и снижение количества моноцитов и лимфоцитов. Абсолютные количественные характеристики имели те же тенденции, но количество моноцитов было одинаковым в сравниваемых группах. Индекс Кальф-Калифа, который отражает взаимоотношение гуморального и клеточного звена, в группе больных хронической формой составил 2,8±1,5 у.е., а у здоровых доноров — 0,3±0,1. Известно, что повышение этого индекса говорит о высокой эндогенной интоксикации и активации тканевого распа-

да [8], что подтверждает наличие цитодеструктивного действия вируса КЭ на этапах хронизации. При анализе изменений соотношения клеток неспецифической и специфической защиты установлено снижение клеток специфической защиты, что говорит о направленности цитодеструктивного действия вируса на клетки моно-цитарного ряда. Наши исследования выявили, что показатель прилипания лейкоцитов к стеклу в присутствии антигена КЭ при остром КЭ составил 12,6±3,35 у.е. Что достоверно ниже, чем у здоровых доноров (22,2±3,07; р<0,05). У пациентов в стадии поздней реконвалес-ценции показатель прилипания составил 10,6±2,2 (по сравнению со здоровыми р<0,05). При хроническом КЭ этот показатель составил 12,5±1,3 (по сравнению со здоровыми донорами (р<0,05).Прилипающая способность лейкоцитов в присутствии неродственного антигена у больных острым КЭ составила 21,0±3,3, в стадии поздней реконвалесценции — 19,9±1,9; при хроническом КЭ — 20,6±2,0 у.е., у здоровых доноров 6,3±1,2 при р<0,05). Поскольку макрофагальный барьер при вирусных инфекциях не всегда эффективен, интерес представляет гранулоцитарная реакция. Один из видов гранулоцитов — нейтрофилы — могут осуществлять фагоцитарную функцию. Фагоцитарная активность в присутствии антигена вируса КЭ у больных острой формой заболевания составила 56,4±3,5%, при поздней реконвалесценции — 53,7±3,9%, у здоровых доноров — 53,4±3,4%; р>0,05). Фагоцитарная активность нейтрофи-лов при хронической форме КЭ составила 58,6±0,3% и была достоверно выше, чем в группе здоровых доноров (33,8±2,9%; р<0,05). Изучение фагоцитарной реакции в присутствии специфического антигена показало несущественное повышение активности фагоцитов (р>0,05), в результате которой, согласно современным представлениям о кооперации клеток в ходе иммунного ответа, происходит презентация антигенов вируса и реализация клеточного и гуморального иммунного ответа.

Исследование специфического гуморального ответа показало, что у больных в фазу манифестации в сыворотке крови присутствуют ^М в титре 8,23±1,01, а IgG — в титре 1,29± 1,86. У больных с остаточными явлениями острого периода, условно обозначенного как переходный период, ^М регистрировались в титре 4,15±2,10 (р>0,05), IgG обнаружены в титре 2,0±2,0 (р>0,05). У больных с хроническим течением КЭ средняя геометрическая титра ^М в сыворотках крови составила лишь 0,66±0,66 (р>0,05), а титр ^ — 5,72±1,60 (р>0,05). Для максимального исключения серонегатив-ных результатов и оценки участия нервной системы в поддержании вируса дополнительно провели исследование на наличие антител не только сывороток, но и ликвора. При оценке ликвора у больных острой формой заболевания средняя геометрическая титра специфических иммуноглобулинов класса М составила 7,37±0,35. Средняя геометрическая титра иммуноглобулинов класса М в сыворотке крови составила 6,35±1,13, а иммуноглобулинов класса G — 6,73±1,41. Отмечена тесная связь между уровнем специфических иммуноглобулинов класса М в сыворотке и ликворе (г=+0,82). Полученные результаты могут говорить о преимущественной локализации вируса КЭ в тканях нервной системы и согласуются с классическими представлениями о формировании гуморального иммунного ответа при КЭ. Для определения связи реализации иммунного ответа с циркуляцией вируса проведено молекулярно-ге-нетическое исследование проб крови пациентов на наличие РНК вируса КЭ. Результат был положительным у всех больных острой формой заболевания. У пациентов с длительным периодом реконвалесценции РНК в пробах крови найдена в 25% случаев. При хроническом течении болезни в период активации РНК обнаружена в 60% случаев. Проведён анализ зависимости между циркуляцией вируса и образованием антител. При острой форме КЭ выявлена одновременная циркуляция вируса КЭ и ^М. Следует учитывать, что серологический ме-

тод определяет только количество антител не связанных в иммунных комплексах. У 22% обследованных гуморальный иммунный ответ был слабо выражен при наличии циркулирующего вируса в крови. Отсутствие IgG на фоне обследования может свидетельствовать о реализации первичного иммунного ответа и начале циркуляции иммунных комплексов. В периоде поздней реконвалесценции вирус в крови у большинства обследованных (75%) не обнаруживался на фоне циркулирующих антител класса М и G. В 25% случаев при полном отсутствии свободных антител, вирус был обнаружен в крови, что может свидетельствовать о его тесной связи с клетками крови. У 40% больных хронической формой КЭ вирус в крови не был обнаружен, а титр IgG был высоким. В 60% случаев выявлена противоположная ситуация, при низком титре IgG была установлена циркуляция вируса в крови, что говорит о его выходе в кровяное русло и очередной стадии вирусемии.

Проведённые исследования показали, что взаимоотношение вируса КЭ с организмом человека идёт двумя путями, развитием острой формы инфекции с исходом в реконвалесценцию и путём длительного пребывания вируса в организме, его персистенции в нервной ткани с периодической реактивацией и длительной циркуляцией иммуноглобулинов класса М. Несмотря на то,

что вирус КЭ обладает тропизмом к нервной ткани, вовлечение в процесс клеток крови является неотъемлемым компонентом этой инфекции. Было показано изменение функциональной активности лейкоцитов при острой и хронической форме КЭ. При острой форме заболевания это выражалось в торможении прилипающей способности лейкоцитов, усилении фагоцитарной реакции в период манифестации инфекции и некотором снижении её в период поздней реконвалесценции. При хронической форме заболевания значительной активации этих клеток под влиянием специфического антигенного стимула не выявлено. Подобные изменения могут говорить о недостаточной эффективности барьерной функции моноцитарно-макрофагальной системы при хронической форме КЭ. Вирусы оказываются внутри лейкоцитов, что обеспечивает их определённую неуязвимость при наличии специфических антител в организме. Поддержание размножения вируса в клетках иммунной системы создаёт благоприятные условия для подавления специфических механизмов защиты, что в свою очередь способствует хронизации заболевания. Комплексное изучение соотношения факторов врождённого и приобретённого иммунитета при КЭ позволит приблизиться к пониманию особенностей хронизации заболевания.

ЛИТЕРАТУРА

1.Баринский И.Ф., Шубладзе А.К. Лейкоцитарные реакции в вирусологических исследованиях. — М.: Медицина, 1980. — 176 с.

2. Иванов В.Г., Иванов Г.Г., Барсуков А.К., Кузнецова А.И. Взаимоотношения между содержанием циркулирующих иммунных комплексов, концентрацией сывороточных иммуноглобулинов и титров специфических антител у больных клещевым энцефалитом // ЖМЭИ. — 2004. — №3. — С. 93-95.

3.Иерусалимский А.П. Клещевой энцефалит: Рук-во для врачей. — Новосибирск: Гос. Мед. Академия, 2001. — 360 с.

4.Каппин В.Н. Нетрадиционная иммунология инфекций. — Пермь: ПГМА, 1996. — 163 с.

5.Кветкова Э.А. Серологические реакции при клещевом энцефалите: Автореф. дис... канд. мед. наук. — Л., 1966. — 22 с.

6.Кветкова Э.А. Вирусологические и иммунологические

аспекты патогенеза клещевого энцефалита: Автореф. дис....

д-ра мед. наук. — Омск, 1984. — 36 с.

7. Леонова Г.Н., Майстровская О.С., Борисевич В.Б. Антигенемия у людей, инфицированных вирусом клещевого

энцефалита // Вопр. вирусологии. — 1996. — №6. — С. 260-263.

8. Мустафина Ж.Г., Краморенко Ю.С., Кобцева В.Ю. Интегральные гематологические показатели в оценке иммунологической реактивности организма у больных с офталь-мопатологией // Клиническая лабораторная диагностика. — 1999. — №5. — С. 47-48.

9. Погодина В.В., Фролова М.П., Ерман Б.А. Хронический клещевой энцефалит. — Новосибирск: Наука, Сиб. отд., 1986. — 256 с.

10. Семенов Б.Ф., Каулен Д.Р., Баландин П.Г. Клеточные и молекулярные основы противовирусного иммунитета. — М.: Медицина, 1982. — 240 с.

11. Смородинцев А.А., Дубов А.В. Клещевой энцефалит и его вакцинопрофилактика. — Л.: Медицина, 1986. — 232 с.

12. ШаповалА.Н. Клещевой энцефаломиелит. — Медицина, 1980. — 253 с.

13. Holt P.G., Roberts L.M., Fimmel P.J., Keast D. The L.A.I. microtest: a rapid and sensitive precedure for the demonstration of cell-mediated immunity in vitro // J. Immunol. Methods. — 1975. — Vol. 8(3). — P. 277-288.

Информация об авторах: Быкова Лилия Павловна — к.м.н., доцент, 614990, г. Пермь, ул. Екатерининская, 85,

ГБОУ ВПО ПГМА им. акад. Е.А. Вагнера Минздравсоцразвития; Годовалов Анатолий Петрович — ассистент, е-mail: AGodovalov@gmail.com; Кузяев Рафаель Зиафутдинович — д.м.н., профессор кафедры; Лебединская Ольга Витальевна — д.м.н., доцент кафедры.

© БАРСКАЯ Л.О., ХРАМЫХ Т.П., ПОЛУЭКТОВ В.Л., ЗАВОДИЛЕНКО К.В., ПОДОЙНИКОВ М.В., МИХЕЕНКО И.Л., ПОЛУЭКТОВ В.В. — 2012 УДК 616.33-002.44-092:616.36-089-06

НЕКОТОРЫЕ ПАТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ ОСТРОГО ПОВРЕЖДЕНИЯ ЖЕЛУДКА ПОСЛЕ РАСШИРЕННОЙ ГЕМИГЕПАТЭКТОМИИ

Любовь Опеговна Барская1, Татьяна Петровна Храмых1, Владимир Леонидович Попуэктов1, Константин Владимирович Заводипенко2, Михаил Владимирович Подойников2, Игорь Леонидович Михеенко1, Владимир Владимирович Полуэктов1 (1Омская государственная медицинская академия, ректор — д.м.н., проф. А.И. Новиков, 2Омская областная клиническая больница, гл. врач — К.Л. Полежаев)

Резюме. В эксперименте изучалась эндотоксемия как один из механизмов острого повреждения желудка после расширенной гемигепатэктомии. При закономерной острой портальной гипертензии после резекции печени в желудочно-кишечном тракте повышается концентрация веществ низкой и средней молекулярной массы с преобладанием катаболического пула в крови воротной вены. Это позволяет констатировать формирование эндоток-семии в раннем послеоперационном периоде после расширенной гемигепатэктомии и расценивать это как один из патогенетических факторов развития острого повреждения желудка. На всех сроках эксперимента выявлены структурные изменения в желудке: уже через 12 часов наблюдается формирование острой язвы.

Ключевые слова: эндотоксемия, гемигепатэктомия, острая язва, желудок.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.