CC BY
50
УДК 618.177:616-003.96
Л.И. Колесникова, Н.В. Семенова, А.В. Лабыгина, л.Ф. Шолохов, Л.В. Натяганова,
О.В. Старостенко
некоторые аспекты компенсаторно-приспособительных механизмов при эндокринном бесплодии у женщин
Учреждение Российской академии медицинских наук Научный центр проблем здоровья семьи
и репродукции человека Сибирского отделения РАМН (Иркутск)
В работе представлены результаты исследования состояния липидного обмена и процессов перекисного окисления липидов — антиоксидантной защиты, у 71 женщины, с эндокринным, бесплодием по сравнению с группой контроля. Были, установлены выраженная, дислипопротеидемия, накопление субстратов ПОЛ при. неизменном, уровне промежуточных продуктов липопероксидации и. снижении конечного продукта — малонового диальдегида. В системе АОЗ были отмечены, следующие изменения: возрастание уровня, общей антиокислительной активности при. снижении содержания, в крови а-токоферола, ретинола, аскорбата и восстановленного глутатиона.
Ключевые слова: липидный обмен, пероксидация липидов, антиоксидантный статус, эндокринное бесплодие
some aspects of coMpENsATORY-ADApTivE MEcHANisMs iN woMEN
wiTH ENDOCRiNE iNFERTiLiTY
L.I. Kolesnikova, N.V. Semenova, A.V. Labygina, L.F. Sholokhov, L.V. Natyaganova,
O.V. Starostenko
Scientific Center of Family Health Problems and Human Reproduction SB RAMS, Irkutsk
The article presents the results of the study of processes of lipid, peroxidation and antioxidant protection in 71 women with endocrine sterility compared, with the control group. In infertile women we revealed, dislipoproteinemia, lipid, peroxidation, activation, with reduction of its final product — malonic dialdehyde. There were registered the following changes in the system, of antioxidant protection: increase of general antioxidant activity, reduction of a-tocopherol, retinol, ascorbate, and reduced, glutathione levels.
Key words: lipid metabolism, lipid peroxidation, antioxidants, endocrine sterility
Охрана репродуктивного здоровья женщин — важная задача современной медицины, так как нарушение его отражается не только на фертильности, но и на здоровье будущих поколений. Согласно данным литературы, частота бесплодных браков на территории РФ колеблется от 8 до 21 % [1, 2, 10]. Несмотря на развитие медицины, разработку и внедрение новых репродуктивных технологий, число бесплодных браков продолжает увеличиваться. При этом одно из основных мест по частоте занимает эндокринное бесплодие. Несмотря на широкое изучение патогенеза этого заболевания в настоящее время, данных об изменениях неспецифических адаптивных механизмов, к числу которых относятся процессы перекисного окисления липидов — антиоксидантной защиты (ПОЛ — АОЗ) недостаточно [4,
5, 7, 8, 9, 11-15].
Таким образом, целью данного исследования явилось изучение состояния липидного обмена и процессов перекисного окисления липидов -антиоксидантной защиты при эндокринном бесплодии у женщин.
методика
Обследована 101 женщина репродуктивного возраста. Группу сравнения (1-я группа) составили 30 женщин, не страдающих бесплодием и какими-
либо эндокринными заболеваниями. Средний возраст женщин — 22 ± 1,2 года. В основную группу вошли женщины с эндокринным бесплодием (71 пациентка, средний возраст — 30 ± 2,1 лет). Исследования на здоровых испытуемых выполнены неинвазивными методами с информированного согласия испытуемых и соответствуют этическим нормам Хельсинской декларации (2000 г.). Всем женщинам проводилось анкетирование с учетом анамнестических данных, общеклиническое, гинекологическое и лабораторное исследования. Забор крови у женщин с эндокринным бесплодием проводили из локтевой вены, натощак, с 8 до 9 часов утра в соответствии с общепринятыми требованиями.
В качестве материала для биохимических исследований использовали сыворотку крови и гемолизат, приготовленный из эритроцитов. На спектрофлюорофотометре Shimadzu RT-5000 (Япония) измеряли содержание малонового диальдегида (МДА, мкмоль/л) по методу В.Б. Гаврилова с соавт. (1987); измерение активности супероксиддисмутазы (СОД, усл. ед.) проводили методом Н.Р. Misra, I. Fridovich (1972); определение концентраций а-токоферола и ретинола (мкмоль/л) — методом Р.Ч. Черняускене с соавт. (1984); уровни восстановленного и окисленного глутатиона (GSH, GSSG, мкмоль/л) — методом
P.Y. Hissin, R. Hilf (1976). Спектрофотометрическими методами определяли содержание в сыворотке крови общих липидов (ОЛ, г/л) с помощью набора реагентов PLIVA-Lachema (Чешская Республика); общего холестерина (ОХС, ммоль/л), липопротеидов высокой плотности (ХСЛПВП, ммоль/л) и триглицеридов (ТГ, ммоль/л) — с использованием коммерческих наборов Bio Systems (Испания). Измерения производили на биохимическом анализаторе BTS-330 (Испания). Содержание субстратов с сопряженными двойными связями (Дв. св., усл. ед.), диеновых коньюгатов (ДК, мкмоль/л), кетодиенов и сопряженных три-енов (КД-СТ, усл. ед.) регистрировали по методу И.А. Волчегорского с соавт. (1989), оценку общей антиокислительной активности крови (АОА, усл. ед.) — по методу Г.И. Клебанова с соавт. (1988). Определение аскорбиновой кислоты (мкмоль/л) проводили колориметрическим методом (Портя-ная Н.И. с соавт., 1990).
При анализе межгрупповых различий для независимых выборок использовались методы математической статистики, реализованные в лицензионном интегрированном статистическом пакете комплексной обработки данных STATIS-TICA 6.1 (Stat-Soft Inc., США) (правообладатель лицензии — УРАМН НЦ проблем здоровья семьи и репродукции человека СО РАМН).
результаты
При рассмотрении показателей липидного обмена и процессов ПОЛ — АОЗ в группе женщин с эндокринным бесплодием нами была проведена оценка частоты встречаемости пациенток с тем или иным содержанием в крови субстратов и продуктов ПОЛ, а также с уровнем общей АОА сыворотки крови (границы нормы показателей процессов ПОЛ — АОЗ для группы
контроля рассчитывались с учетом коэффициента Йетса (М ± t х m)). Результаты представлены в таблице 1.
По результатам таблицы видно, что у 93 % пациенток с эндокринным бесплодием снижено содержание в крови ХСЛПОНП, у 94 % — ТГ, а у 63 % больных повышено содержание в крови ХСЛПНП. Скорее всего, это связано с активацией липопротеидлипазы и триглицеридлипазы, которые под действием высоких концентраций гормонов гидролизуют с высокой скоростью ХСЛПОНП и ТГ до ХСЛПНП. При этом нами отмечена функциональная взаимосвязь между ХСЛПНП и содержанием субстратов с сопряженными Дв. св. (r = +0,31), уровень которых повышен у 72 % пациенток. Таким образом, уровень субстратов с сопряженными Дв. св. связан с тем классом липидтранспортной системы, который осуществляет доставку холестерина к периферическим тканям. Следует отметить, что у 72 % пациенток повышен коэффициент атеро-генности (КА), что предполагает риск развития у этих женщин сердечно-сосудистых заболеваний. Содержание первичных и вторичных продуктов ПОЛ у женщин с эндокринным бесплодием не отличается от контрольных значений. А у 83 % пациенток снижено содержание в крови МДА. Такое течение процессов липопероксидации происходит на фоне повышения уровня общей АОА сыворотки крови, регистрируемое у 92 % больных женщин. При этом была отмечена корреляционная связь между содержанием субстратов с сопряженными Дв. св. и повышенным уровнем общей АОА сыворотки крови (r = +0,30). Данная корреляция позволяет предполагать, что система АОЗ направляет свое действие уже на стадии инициации процессов липопероксидации. Увеличение мощности антиоксидантной системы создает
Таблица 1
Частота встречаемости пациенток с эндокринным бесплодием с различным содержанием в крови субстратов,
продуктов ПОЛ и общей АОА крови
Показатель Доверительный интервал Выше доверительного интервала Соответствует доверительному интервалу Ниже доверительного интервала Значение х2 Уровень значимости
ОЛ 6,40-7,15 19,72% 14,08% 66,20% 9,51 0,00862
ОХС 3,99-4,43 36,62% 21,13% 42,25% 2,86 0,23904
ХСЛПВП 1,38-1,58 12,68% 11,27% 76,06% 18,97 0,00008
ХСЛПНП 2,06-2,43 63,38% 19,72% 16,90% 11,48 0,00321
ХСЛПОНП 0,44-0,52 5,63% 1,41% 92,96% 39,90 0,00000
ТГ 0,96-1,07 5,63% 0,00% 94,37% 41,38 0,00000
КА 1,71-2,07 71,83% 16,90% 11,27% 14,98 0,00056
субстраты с Дв. св. 1,63-1,90 71,83% 15,49% 12,68% 17,71 0,00014
ДК 1,11-1,37 39,44% 26,76% 33,80% 1,04 0,59583
КД-СТ 0,22-0,37 40,85% 29,58% 29,58% 4,16 0,12467
МДА 1,56-1,86 11,27% 5,63% 83,10% 27,52 0,00000
Общая АОА 10,36-11,82 91,55% 4,23% 4,23% 44,34 0,00000
определенную гарантию против чрезмерной активации ПОЛ. При этом ограничение пероксидации липидов в клетке на разных этапах реализуется различными системами как ферментативной, так и неферментативной природы [6].
Для того чтобы понять, вследствие чего повышается АОА крови, была проведена оценка частоты встречаемости различного содержания в сыворотке крови антиоксидантов у этих пациенток. Результаты исследования показали, что у женщин с эндокринным бесплодием активность СОД может быть как повышена, так и понижена, находясь при этом в пределах физиологической нормы. Отмечено, что у большинства больных снижено содержание в крови GSH при накоплении GSSG, что свидетельствует об антиоксидантном действии глутатиона и его участии в работе глутатионпе-роксидазы. При рассмотрении молекулярных антиоксидантов выявлено, что у всех бесплодных женщин наблюдается пониженное содержание в крови ретинола, у 78 % — а-токоферола, у 63 % — аскорбата. Повышенный расход молекулярных антиоксидантов у бесплодных женщин определяется их участием в ингибировании процессов липопероксидации. Известно, что наиболее эффективным антиоксидантом является а-токоферол, а ретинол и аскорбат участвуют в реакциях, направленных на его восстановление. При этом для восстановления токоферильного радикала у бесплодных женщин ретинол окисляется в большей степени [3]. Об этом свидетельствует и функциональная взаимосвязь а-токоферол — ретинол (r = +0,29). Помимо этого как ретинол, так и аскорбат могут выполнять роль самостоятельных антиоксидантов, а последний участвует в поддержании восстановленного состояния глутатиона, что подтверждается корреляционной взаимосвязью аскорбат — GSH (r = +0,33).
заключение
Результаты клинико-биохимических исследований позволяют заключить, что наличие бесплодия эндокринного генеза у женщин сопровождается усилением компенсаторно-приспособительных возможностей организма. На это указывает выраженная дислипопротеидемия, снижение конечного продукта ПОЛ — малонового диальдегида на фоне накопления субстратов для процессов липопероксидации при уровне промежуточных продуктов, соответствующем контрольным значениям. Возрастание общей антиокислительной активности с одновременным расходом компонентов системы антиоксидантной защиты — а-токоферола, ретинола, аскорбата и восстановленного глутатиона также можно рассматривать как компенсаторную реакцию организма в ответ на повышенный уровень субстратов для пероксидации липидов.
литература
1. Корнеева И.Е., Лопатина Т.В. Общая концепция диагностики и классификация форм беспло-
дия // Бесплодный брак. Современные подходы к диагностике и лечению; под ред. В.И. Кулакова. — М., 2005. - С. 19-50.
2. Кузьменко Е.Т. Клинико-эпидемиологические аспекты женского бесплодия (на примере Иркутской области): автореф. дис. ... канд. мед. наук. - Иркутск: ГУ НЦ МЭ ВСНЦ СО РАМН, 2008. - 24 с.
3. Ланкин В.З., Тихадзе А.К., Беленков Ю.Н. Антиоксиданты в комплексной терапии атеросклероза: pro et contra // Кардиология. — 2004. — № 2. - С. 72-81.
4. Магзумова Н.М., Иноятова Ф.Х. Процессы глутатионовой детоксикации у женщин, страдающих бесплодием // Ж. акушерства и женских болезней. - 2002. - Т. LI, Вып. 3. - С. 98-100.
5. Миркасымова Ю.И. Процессы глутатионовой детоксикации у женщин с гиперандрогенией яичникового генеза // Человек и его здоровье. Фундаментальная и клиническая медицина: Матер. Х Всерос. мед.-биол. конф. молодых исследователей, 20-21 апреля 2007 г. - СПб., 2007. - С. 152.
6. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты / Е.Б. Меньщикова [и др.]. - М.: Слово, 2006. - 556 с.
7. Оксидативный стресс в репродуктологии: мифы и реальность / Л.И. Колесникова [и др.] // Мать и дитя: Матер. XI Всерос. науч. форума, 28 сент. — 1окт. 2010 г. - М., 2010. - С. 403-404.
8. Особенности свободнорадикального окисления липидов и гормонального статуса у женщин с гипоталамическим синдромом в различные возрастные периоды / Л.И. Колесникова [и др.] // Журн. акушерства и женских болезней. - 2010. -Т. LIX, № 4. - С. 51-56.
9. Пероксидация липидов и система анти-оксидантной защиты у женщин с эндокринными факторами бесплодия / Л.И. Колесникова [и др.] // Журн. акушерства и женских болезней. - 2008. -Т. LVII, № 1. - C. 52-55.
10. Ринчиндоржиева М.П., Даржаев З.Ю., Сутурина Л.В. Эпидемиология бесплодия в Республике Бурятия // Сиб. мед. журн. - 2007. - № 5. -С. 53-55.
11. Роль дефицита антиоксидантов различной природы у женщин с эндокринным бесплодием / А.В. Лабыгина [и др.] // Мать и дитя: Матер. XI Всерос. науч. форума, 28 сент.-1окт. 2010 г. - М.,
2010. - С. 427-428.
12. Уровень ТБК-активных продуктов и компонентов антиоксидантной защиты у женщин различных популяций с гиперпролактинемией и бесплодием / Л.И. Колесникова [и др.] // Вопросы сохранения и развития здоровья населения Севера и Сибири: Матер. итог. науч.-практ. конф. с между-нар. участием, 8-9 июня 2011 г. - Красноярск,
2011. - С. 49-50.
13. Agarwal A., Gupta S., Sikka S. The role of free radicals and antioxidants in reproduction // Curr. Opin. Obstetr. Gynec. - 2006. - Vol. 18. -P. 325-332.
14. Arumugam K., Dip Y.C. Endometriosis and infertility: the role of exogenous lipid peroxides in the peritoneal fluid // Fertil Steril. — 1995. — Vol. 63. — P. 198-199.
15. The effects of rosiglitazone and metformin on oxidative stress and homocysteine levels in lean patients with polycystic ovary syndrome / M. Yilmaz [et al.] // Human Reproduction. — 2005. — Vol. 20, N 12. — P. 3333 — 3340.
сведения об авторах
Колесникова Любовь Ильинична - член.-корр. РАМН, профессор, директор УРАМН НЦ проблем здоровья семьи и репродукции человека СО РАМН (664003, г Иркутск, ул. Тимирязева, 16; e-mail: iphr@sbamsr.irk.ru)
Семенова Наталья Викторовна - кандидат биологических наук, младший научный сотрудник лаборатории патофизиологии репродукции УРАМН НЦ проблем здоровья семьи и репродукции человека СО РАМН (664003, г. Иркутск, ул. Тимирязева, 16; тел.: 8 (3952) 20-76-36, 20-73-67; e-mail: iphr@sbamsr.irk.ru)
Лабыгина Альбина Владимировна - доктор медицинских наук, заведующая лабораторией гинекологической эндокринологии УРАМН НЦ проблем здоровья семьи и репродукции человека Со РАМН (664003, г. Иркутск, ул. Тимирязева, 16; e-mail: iphr@sbamsr.irk.ru)
Шолохов Леонид Федорович - доктор медицинских наук, профессор, заведующий лабораторией физиологии и патологии эндокринной системы УРАМН НЦ проблем здоровья семьи и репродукции человека СО РАМН (664003, г. Иркутск, ул. Тимирязева, 16; e-mail: iphr@sbamsr.irk.ru)
Натяганова Лариса Викторовна - кандидат биологических наук, научный сотрудник лаборатории патофизиологии репродукции УРАМН НЦ проблем здоровья семьи и репродукции человека СО РАМН (664003, г. Иркутск, ул. Тимирязева, 16; e-mail: iphr@sbamsr.irk.ru)
Старостенко Ольга Владимировна - младший научный сотрудник лаборатории патофизиологии репродукции УРАМН НЦ проблем здоровья семьи и репродукции человека СО РАМН (664003, г. Иркутск, ул. Тимирязева, 16; e-mail: iphr@sbamsr.irk.ru)
