CC BY
32
УДК 616:619
НЕКОТОРЫЕ АСПЕКТЫ ДИАГНОСТИКИ И МОНИТОРИНГА ТРИХИНЕЛЛЕЗА ЖИВОТНЫХ
Жданова О.Б.***, НаписаноеаЛЛ.*, Дамский И.А.***, Окулова И.И.***, Мартусевич А.К.**
* ФГБНУ «ВНИИ фундаментальной и прикладной паразитологии животных и растений им. К.И.Скрябина» (napisanova@vniigis.ru) **ГБОУ ВПО «Кировский государственный медицинский университет» ***ФБГНУ «ВНИИ охотничьего хозяйства и звероводства им. Б.М.Житкова»
Ввдение. Мониторинг трихинеллеза животных базируется на высокоэффективной и точной диагностике (посмертной и прижизненной). В наших предшествующих исследованиях было показано, что исследование кристаллогенных свойств биологических субстратов организма человека и животных позволяет получить новые данные о патогенезе многих паразитозов [1]. Следует отметить возможность прижизненного исследования домашних, синантропных и диких животных. Обнаружение специфических трансформаций кристаллогенеза биологических жидкостей при патологии паразитологического профиля предопределяет возможность диагностики тканевых гельминтозов с помощью кристаллоскопического исследования биоматериала. Реализация подобных диагностических алгоритмов была осуществлена нами на примере фасциолеза и альвеококкоза, для которых сформированы «паттерны» собственного и инициированного раствором хлорида натрия кристаллообразования [3, 5].
Материалы и методы. С целью изучения кристаллоскопических модуляций при трихинеллезе исследовалась кровь, полученная от здоровых свиней породы «Крупная белая» и свиней, экспериментально зараженных трихинеллами и кровь диких кабанов. Забранную кровь стабилизировали раствором гепарина в отношении 1:1. Перед взятием крови было сформировано 3 группы животных различного пола, возраст которых составил 1, 3 и 6 месяцев. Готовили микропрепараты методом диффере нциальной тезиграфии, используя в качестве базисных веществ 0,9% раствор хлорида натрия [3-5]. Изучение оптической плотности биокристаллов, образующихся в процессе дегидратации, осуществлялось на спектрофотометре PowerWave XS (Bio-Tek, USA), с использованием диапазона длин волн 300-400 нм. Показатели оптической плотности получены для следующих образцов: 1) базисного вещества, 2) смеси базисного вещества и гепарина, 3) комплекса базисного вещества и плазмы, 4) смеси базисного вещества, гепарина и плазмы. Статистическая обработка результатов осуществлялась с помощью электронных таблиц Microsoft Excel 2003. Полученные фации биожидкостей различных животных сравнивались и систематизировались.
Результаты. В результате установлено, что оптическая плотность фации относительно сравниваемых показателей достигает наивысших значений при длине волны, равной 300 нм, при этом исключением является комплексная биосистема «гепарин-плазма». В результате спектрометрического исследования биокристаллов
дегидратированной крови свиней показаны достаточно четкие половозрастные особенности данных параметров фаций биоматериала животных. В частности, у кастрированных хрячков крупной белой породы оптическая плотность сокристаллизата «базисное вещество+гепарин+плазма» ниже, чем у самок, что обусловлено особенностями физических свойств плазмы крови. Возрастные изменения направлены в сторону умеренного снижения значений оптической плотности у животных с 1 до 3-х месяцев. Результаты исследования оптической плотности кристаллоскопических фаций крови с учетом возраста свиней следующие: одномесячные свиньи 300 нм - 0,18; 350 нм- 0,12; 400 нм - 0,14, шестимесячные свиньи 300 нм - 0,45; 350 нм - 0,42; 400 нм - 0,43. При трихинеллезе оптическая плотность (ОП) в 1,8 раза превышала норму у 6-месячных животных. Учитывая, что у младших половозрастных групп ОП значительно меньше, при скрининговых исследованиях сыворотки свиней, превышающих показатель 0,5 необходимо проводить уточняющие диагностические исследования на трихинеллез методами, предложенными Написановой Л.А и дугами исследователями [2, 6].
Рис. Тезиграфия (а,б) и классическая кристаллоскопия (в,г) сыворотки крови кабана (сеголетки) увеличение 4 (а,в) и 10 (б,г)
Однако следует учитывать, что высота титров антител в ПФР и дот-ИФА, по данным Написановой Л.А., не имела прямой корреляции с интенсивностью заражения животных Т.spiralis, кристаллы же характеризуются четкой корреляцией с патогенезом. Антитела в минимальных диагностических титрах у большинства животных регистрировались в обеих реакциях с 30-го дня по 150-й день и более. Все исследованные сыворотки диких животных (кабанов) характеризовались большей кристаллизуемостью, основные и дополнительные параметры соответствовали таковым здоровых животных, характеризуясь лишь более выраженной краевой зоной и снижением аморфного компонента. ОП не превышала показатели, характерные для здоровых свиней. В реакции кольцепреципитации в капилляре (РКПК) и компрессорной трихинеллоскопией (КТ) подтвержден отрицательный
диагноз на трихинеллез. Интересно, что на протяжении ряда лет сотрудники ВНИИОЗа не выявляли трихинеллез кабана, в то время как он регистрировался при ветеринарно-санитарной экспертизе на местах. Таким образом, массовые исследования сыворотки крови могли бы уточнить мониторинг гельминтоза.
Заключение. Таким образом, иммунологические и кристаллоскопические методы исследования биологических субстратов организма свиньи, кабана и других животных представляют собой огромный интерес, т.к. способны стать значительным подспорьем как для экспериментально-теоретической паразитологии и биологии, так и практической (ветеринарно-санитарной экспертизы).
Литература: ¡.Жданова О.Б.:Автореф. дисс.... докт. биол. наук., М - ВИГИС,-2007. 2.Бережко В.К., Написанова Л.А.,Успенский А.В., Шеховцов Н.В.//С6.: Мат. докл. седьмой науч. конф. по трихинеллезу человека и животных., М.-1996.-С. 7-10. З.Мартусевич А.К., Жданова О.Б.//Известия высших учебных заведений. Поволжский регион.-2006.-№1.-С.30-38. 4.Мартусевич А.К., Жданова О.Б.//Труды ВИГИС,- 2007,- Т. 45,- С. 153-163. 5.Написанова Л.А., Жданова О.Б., Ашихмин С.И., Окулова ИИ, Андреянов О.Н., Тхакахова А.А.//Матер. докл. научн. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями».-2016.-Вып.17.-С. 280282. б.НаписановаЛ.А.: Автореф. дис. ... канд. биол. наук,- ВИГИС-М.-2004.-24с.
Some aspects of diagnostics and monitoring of Trichinella spiralis infection in animals. Zhdanova O.B., Napisanova L.A., Domsky I.A., Okulova I.I., Martusevich A.K. All-Russian K.I. Skryabin Scientific Research Institute of Fundamental and Applied Parasitology of Animals and Plants; Kirov State Medical University; B.M. Zhitkov Russian Game Management and Fur Farming Research Institute.
Summary. Immunological and crystalloscopic methods for investigation of biological substrates of pig, boar and other animals are of great interest since they can become a significant help both for experimental-theoretical parasitology and biology, and for practical (veterinary and sanitary) inspection.
