CC BY
78
[гиена и санитария 1/2014
latipes) and the cladoceran Daphnia magna. Nanotoxicology. 2011; 5(2): 208-14.
6. Zhao C.M., Wang W.X. Importance of surface coatings and soluble silver in silver nanoparticles toxicity to Daphnia magna. Nanotoxicology. 2012; 6: 361-70.
7. Kim S., Choi J.E., Choi J., Chung K.H., Park K., Yi J. Oxidative stress-dependent toxicity of silver nanoparticles in human hepatoma cells. Toxicology in Vitro. 2009; 23(6):1076-84.
8. Foldbjerg R., Olesen P., Hougaard M., Dang D.A., Hoffmann H.J., Autrup H. PVP-coated silver nanoparticles and silver ions induce reactive oxygen species, apoptosis and necrosis in THP-1 monocytes. Toxicology Letters. 2009; 190: 156-62.
9. Kawata K., Osawa M., Okabe S. In vitro toxicity of silver nanoparticles at noncytotoxic doses to HepG2 human hepatoma cells. Environmental Science & Technology. 2009; 43(15): 6046-51.
10. Powers C.M, Badireddy A.R., Ryde I.T., Seidler F.J., Slotkin T.A. Silver nanoparticles compromise neurodevelopment in PC12 cells: critical contributions of silver ion, particle size, coating, and composition. Environmental Health Perspectives. 2011; 119(1): 37-44.
11. Jiang H.S., Li M., Chang F.Y., Li W., Yin L.I. Physiological analysis of silver nanoparticles and AgNO3 toxicity to Spirodela polyrhiza. Environmental Toxicology and Chemistry. 2012; 31(8): 1880-6.
12. Lee Y.J., Kim J., Oh J., Bae S., Lee S., Hong I.S. Ion-release kinetics and ecotoxicity effects of silver nanoparticles. Environmental Toxicology and Chemistry. 2012; 31(1): 155-9.
13. Srivastava M., Singh S., Self W.T. Exposure to silver nanoparticles inhibits selenoprotein synthesis and the activity of thi-oredoxin reductase. Environmental Health Perspectives. 2012; 120(1): 56-61.
14. YangX., Gondikas A.P., Marinakos S.M., Auffan M., Liu J., Hsu-Kim H. Mechanism of silver nanoparticle toxicity is dependent on dissolved silver and surface coating in Caenorhabditis elegans. Environmental Science & Technology. 2012; 46(2): 1119-27.
15. Kim Y.S., SongM.Y., Park J.D., Song K.S., Ryu H.R., Chung Y.H. et al. Subchronic oral toxicity of silver nanoparticles. Particle and Fibre Toxicology. 2010; 6: 7-20.
16. Smirnova V.V. Toxico-hygienic characteristic of some materials usable in foodstuffs packing. Cand. med. sci. diss. Moscow; 2012. (in Russian).
17. Yousef J., Hendi H., Hakami F.S., Awad M.A., Alem A.F., Hendi A.A. et al. Toxicity of silver nanoparticles after injected intraperito-neally in rats. Journal of American Science. 2012; 8(3): 589-93.
18. Tiwari D.K., Jin T., Behari J. Dose-dependent in vivo toxicity assessment of silver nanoparticle in Wistar rats. Toxicology Mechanisms and Methods. 2011; 21(1): 13-24.
19. Toxnet: Silver Compounds; Silver Nitrate. Avaible at: http://tox-net.nlm.nih.gov
20. Abuin E., Lissi E., OrtizP., Henriquez C. Uric acid reaction with DPPH radicals at the micellar interface. Boletin de la Sociedad Chilena de Qrnmica. 2002; 47(2): 145-9.
21. Vander Jagt D.L., Hunsaker L.A., Vander Jagt T.J., Gomez M.S., Gonzales D.M,. Deck L.M. Inactivation of glutathione reductase by 4-hydroxynonenal and other endogenous aldehydes. Biochemical Pharmacology. 1997; 53(8): 1133-40.
22. Baldi C., Minoia C., Nucci A.D., Capodaglio E., Manzo L. Effects of silver in isolated rat hepatocytes. Toxicology Letters. 1988; 41: 261-8.
23. Hussain S., Meneghini E., Moosmayer M., Lacotte D., Anner B.M. Potent and reversible interaction of silver with pure Na,K-ATPase and Na,K-ATPase-liposomes. Biochimica et Biophysica Acta. 1994; 2: 402-8.
24. Solter P, Liu Z, Guzman R. Decreased hepatic ALT synthesis is an outcome of subchronic microcystin-LR toxicity. Toxicology and Applied Pharmacology. 2000; 164(2): 216-20.
25. Arzate-Cardenas M.A., Martmez-Jeronimo F. Age-altered susceptibility in hexavalent chromium-exposed Daphnia schodleri (Anomopoda: Daphniidae): integrated biomarker response implementation. Aquatic Toxicology. 2011; 105(3-4): 528-34.
26. Barata C., Varo I., Navarro J.C., Arun S., Porte C. Antioxidant enzyme activities and lipid peroxidation in the freshwater cladoceran Daphnia magna exposed to redox cycling compounds. Comparative Biochemistry and Physiology. 2005; 140(2): 175-86.
27. Banakou E., Dailianis S. Involvement of Na+/H+ exchanger and respiratory burst enzymes NADPH oxidase and NO synthase in Cd-induced lipid peroxidation and DNA damage in haemocytes of mussels. Comparative Biochemistry and Physiology. 2010; 152(3): 346-52.
28. Canesia L., Ciaccib C., Bettib M., Fabbria R., Canonicoc B. et al. Immunotoxicity of carbon black nanoparticles to blue mussel hemocytes. Environment International. 2008; 34(8): 1114-9.
29. Chang M., Wang W., Wang A., Tian T., Wang P. et al. Effects of cadmium on respiratory burst, intracellular Ca2+ and DNA damage in the white shrimp Litopenaeus vannamei. Comparative Biochemistry and Physiology. 2009; 149 (4): 581-6.
Поступила 20.03.13
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2014 УДК 612.35.06:546.57].084
Н.Н. Беляева, З.М. Гасимова, Р.И. Михайлова, О.Н. Савостикова, А.В. Алексеева
МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНАЯ КЛЕТОЧНАЯ ОЦЕНКА ДИНАМИКИ ВОЗДЕЙСТВИЯ НАНОЧАСТИЦ СЕрЕБрА НА Печень КрЫС
ФГБУ «НИИ экологии человека и гигиены окружающей среды им. А. Н. Сысина» Минздрава РФ, 119121, Москва
Изучена динамика 1-, 3- и 6-месячного воздействия 4 доз наночастиц серебра размером 14,3 ± 0,05 нм, стабилизированных аравийской камедью, и 4 доз сульфата серебра на печень самцов беспородных крыс по 13 морфофункциональным клеточным показателям. В качестве растворителя для получения рабочего раствора использовали дистиллированную воду, растворы разной концентрации получали на основе доочищенной угольным фильтром московской водопроводной воды. Животные имели свободный доступ к поилкам с исследуемой водой. Для сульфата серебра контролем служили интактные крысы, для наночастиц серебра - аравийская камедь. Показано, что повышение числа высокоплоидных гепатоцитов, микронекрозов и балочной дискомплексации при уменьшении числа клеток РЭС в печени позволяет расценивать эффект 6-месячного воздействия наносеребра на печень в дозе 0,3 мг/кг как выраженное вредное (Fel), 0,023 мг/кг - как LOAEL, а 0,0028 и 0,0006мг/кг - как NOEL. Воздействие сульфата серебра в дозах 0,28 и 0,03 мг/кг расценивается как выраженное вредное (Fel), 0,0028 мг/кг - как LAOEL, а 0,0005 мг/кг - как NOEL. Более раннее выявление токсичности сульфата серебра как Fel (в 3 мес) и в меньших дозах говорит о его большей токсичности на печень, чем наночастиц серебра.
Ключевые слова: наночастицы серебра; печень; токсичность; морфофункциональные исследования.
50
N.N. Belyaeva, Z.M. Gasimova, R.I. Mikhaylova, O.N. Savostikova, A.VAlekseeva — MORPHOFUNCTIONAL CELL ASSESSMENT OF DYNAMICS OF SILVER NANOPARTICLES EXPOSURE ON THE RAT LIVER
A.N. Sysin Research Institute of Human Ecology and Environmental Health, Moscow, Russian Federation, 119121
There was investigated the dynamics of 1-, 3- and 6-month exposure to 4 doses of silver nanoparticles of size 14,3 ± 0,05 nm stabilized with gum arabic, and 4 doses of silver sulfate on the liver of male outbred rats by 13 cell morphofunctional indices. As the solvent to obtain a working solution there was used distilled water, solutions of different concentrations were obtained on the base of Moscow tap water cleaned out by a charcoal filter. The animals had free access to the drinkers with the studied water. For silver sulfate as a control intact rats served, for silver nanoparticles - acacia gum. The increase in the number of polyploid hepatocytes, micronekroses and discomplexation of hepatic beams and the decreasing the number of reticular endothelial system cells in the liver were shown to permit to evaluate the effect of 6-month nanosilver exposure to the liver at a dose of 0.3 mg/kg as pronounced harmful (Fel), 0,023 mg / kg - as LOAEL, and 0.0028 and 0.0006 mg/kg - as NOEL. The effect of silver sulfate in doses of 0.28 and 0.03 mg/ kg is assessed as pronounced harmful (Fel), 0,0028 mg/kg - as LAOEL and 0.0005 mg/kg - as NOEL. More earlier detection of toxicity of silver sulfate as Fel (at 3 months) and in smaller doses indicates its greater toxicity to the liver than silver nanoparticles.
Key words: silver nanoparticles; liver; toxicity; morphological and functional studies.
Серебро - один из немногих элементов, морфофункциональное воздействие наночастиц которого изучалось на примере печени крыс [1] и морских свинок [2]. Однако ранее исследовались значительные дозы наночастиц и их субхроническое воздействие (13 нед). Потому задача данной работы была оценить динамику структурнофункциональной клеточной реакции печени на воздействие меньших доз наночастиц серебра и сравнить их с референсным веществом (сульфат серебра).
Материалы и методы
Проведена структурно-функциональная клеточная оценка 1-, 3- и 6-месячного воздействия наночастиц серебра и сульфата серебра на печень самцов беспородных крыс разводки Научного центра биомедицинских технологий РАМН (филиал «Столбовая»). В эксперименте использовали наночастицы серебра размером 14,3 ± 0,05 нм (ТУ 9197-009-77342998-11) типа «КНД-Металл», стабилизированные аравийской камедью (OOO «НПП «Сентоза Факторинг НП» (Россия), и сульфат серебра (ТУ 6-09-370374 хч). В качестве растворителя для получения рабочего раствора использовали дистиллированную воду, соответствующую требованиям ГОСТа 6709-72 «Вода дистиллированная. Технические условия», растворы разной концентрации получали на основе доочищенной (угольным фильтром) московской водопроводной воды. Экспериментальные животные имели свободный доступ к поилкам с исследуемыми растворами. Исследовались 8 групп подопытных животных, из них 4 - на воздействие наночастиц серебра и 4 - сульфата серебра в разных дозах. 2 группы были контрольными: воздействие сульфата серебра сравнивали с интактными животными, которым давали доочищенную московскую водопроводную воду, а наночастиц серебра - с группой, получавшей воду с аравийской камедью. В каждой группе исследовали по 6 крыс.
Эксперименты проводили в соответствии с правилами, принятыми Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных целей (Страсбург, 1986), и этическим комитетом ФГБУ «НИИ ЭЧ и ГОС им. А. Н. Сысина» Минздрава России. Животных содержали на стандартной диете в виварии института, в условиях свободного доступа к воде и пище.
После декапитации животных печень фиксировали в забуференном формалине, проводили по стандартной
Для корреспонденции: Беляева Наталия Николаевна, belnatnik@mail.ru
методике до получения срезов, которые окрашивали гематоксилином и эозином [3].
Материал просматривали на двух микроскопах: цифровом биологическом Motic DMBA 300 с программным обеспечением Motic Images Plus 2,0 и 5,0 ML на экране компьютера - и фотографировали на микроскопе Leica при увеличениях: для стереометрического и обзорного анализа - 10*10, 10*20 и 10*40, для морфометрического - 10*100.
В печени проанализировали 13 морфофункциональных показателей: по 5-балльной шкале оценивали жировую дистрофию органа, гемодинамические изменения и пролиферацию желчного эпителия [4]. Морфометрически подсчитывали индексы альтерации (повреждения) ядер гепатоцитов (ИАГ,%), цитоплазмы гепатоцитов (ИАЦ) и как среднее на 10 полей зрения (п/з) сумму высокоплоидных гепатоцитов (ВПГ,%). одноядерных и двуядерных с октоплоидными (8-п) и 16-п ядрами Также морфометрически подсчитывали как среднее количество на 10 полей зрения стандартной площади среза число микронекрозов и количество клеток ретикуло-эндотелиальной системы (РЭС) [4].
Стереометрически по Г. Г. Автандилову [5] (в процентах на 100%) определяли доли (соотношение), приходящиеся на паренхиму, строму и клеточное инфильтрирование, путем наложения на экран компьютера измерительной сетки, где стороны каждого квадрата равнялась 3 см. Помимо этого учитывали и число (процент) крыс с гемодинамическими изменениями и гиперплазией желчного эпителия. Показатели отражают характер и степень повреждения органа, при этом величина полиплоидизации, оцениваемая по возрастанию ВПГ, позволяет ранжировать эффект как выраженное вредное воздействие (Fel), отсутствие увеличения при изменении других показателей - как минимальное воздействие: LOEL (минимальный уровень обнаруживаемых эффектов) или LOAEL (минимальный уровень обнаруживаемых вредных эффектов) [6, 7]. Среднее значение числа клеток ретикуло-эндотелиальной системы (РЭС) характеризует ее состояние: увеличение популяции этих клеток расценивается как компенсация, уменьшение - как повреждение [4].
Определяли среднюю арифметическую (М), ошибку средней арифметической, доверительные границы средней арифметической с уровнем достоверности, равным 95%.
Результаты исследования показали: месячное воздействие сульфата серебра в дозах 0,28 и 0,03 мг/кг достоверно увеличивает число микронекрозов в печени (см. табл. 1). Остальные показатели достоверно не менялись.
51
гиена и санитария
1/2014
Таблица 1
Достоверные изменения показателей по отношению к контрольным группам
Показатели Воздействие наночастиц серебра в дозах, мг/кг Воздействие AgSO4 в дозах, мг/кг
0,3 0,023 0,0028 0,0006 0,28 0,03 0,0028 0,0005
1-месячное
ИАГ
ВПГ
Микронекрозы
ИАЦ
РЭС
Балочная дис-комплексация
ИАГ
ВПГ
Микронекрозы
ИАЦ
РЭС
Балочная дис-комплексация
ИАГ
ВПГ
Микронекрозы
РЭС
Балочная дис-комплексация
3-месячное
6-месячное
Примечание. При 1-месячном воздействии достоверность определялась по отношению к интактным животным, при 3- и 6-месячном воздействии достоверность измененных показателей для наночастиц серебра определялась при сравнении с показателями при воздействии аравийской камеди, для сульфата серебра - с показателями интактных животных.
Вместе с тем месячное воздействие аравийской камеди оказалось небезразлично для оценки структурнофункциональных показателей печени, вызывая, с одной стороны, компенсирующее воздействие в виде достоверного (по отношению к интактным животным) снижения ИАЦ и микронекрозов, с другой - увеличение доли стромы и инфильтратов, что приводило к достоверному снижению доли паренхимы печени. Через 3 мес воздействия в группе животных, получавших камедь, достоверно увеличивалось число ВПГ и клеток РЭС, а через 6 сут показатели достоверно не отличались от аналогичных у интактных крыс.
Однако месячное воздействие наночастиц серебра с аравийской камедью достоверно не отличалось от показателей у интактных крыс (см. табл. 1). При 3- и 6-месячном воздействии показатели печени при воздействии наночастиц серебра с аравийской камедью сравнивались с показателями при воздействии аравийской камеди.
3-месячное воздействие сульфата серебра в дозе 0,03 мг/кг приводило к достоверному (по отношению к аравийской камеди) увеличению числа клеток РЭС, в дозе 0,28 мг/кг достоверно увеличивались ИАГ, ВПГ и число микронекрозов; последний показатель (число микронекрозов) также достоверно повышался при воз-
действии сульфата серебра в дозах 0,023 и 0,0028 мг/кг (см. табл. 1).
Пролонгирование эксперимента до 6 мес при воздействии сульфата серебра в дозе 0,28 мг/кг сохранило достоверно повышенными показатели числа ВПГ и микронекрозов (см. табл. 1, 3). Кроме того, при этой дозе воздействия сульфата серебра достоверно повышался такой интегральный показатель, оценивающий повреждение печени, как балочная дискомплексация. При меньшей дозе воздействия сульфата серебра, равной 0,03 мг/ кг, достоверно повышенным был только показатель суммы ВПГ (см. табл. 1). Как видно из табл. 3, для таких показателей, как число микронекрозов и балочная дискомплексация, прослеживается дозовая зависимость.
6-месячное воздействие наночастиц серебра в дозе 0,3 мг/кг достоверно (по отношению к аравийской камеди) увеличивало сумму ВПГ, число микронекрозов и балочную дискомплексацию, тогда как число клеток РЭС достоверно снижалось (см. табл. 1, 2). Число микронекрозов оставалось достоверно повышенным и при воздействии наночастиц серебра в дозе 0,023 мг/кг. Кроме того, для всех отмеченных достоверно измененных показателей выявляется дозовая зависимость (см. табл. 2).
Как в нашем эксперименте, так и при аналогичном воздействии наночастиц серебра (56 нм) на крыс Фишер-344 [1], а также при накожном его воздействии на морских свинок [2] в печени выявлялись аналогичные изменения, особенно отмечалось появление некрозов. Однако эти изменения в цитируемых работах появлялись при воздействии более значительных доз наночастиц серебра. Так, наименьшая из исследованных доз при воздействия наночастиц серебра, равная 30 мг/кг, через 3 мес не вызвала изменений, на основании чего исследователи ее охарактеризовали как NOAEL [1], тогда как в нашем эксперименте еще меньшая доза наночастиц серебра (0,023 мг/кг) через 3 мес вызвала достоверное увеличение микронекрозов, что можно рассматривать как LOAEL. Более того, пролонгирование воздействия наночастиц серебра до 6 мес в дозе 0,3 мг/кг характеризовало повреждение печени как Fel, так как помимо некрозов отмечалось повышение балочной дискомплексации и снижение числа клеток РЭС. Достоверное повышение числа ВПГ, развивающееся как компенсаторный ответ нескольких волн полиплоидизации на замещение поврежденных гепатоцитов, наблюдается при действии многих токсических веществ на печень и характеризует явно выраженное повреждение органа (Fel) [6, 7]. Сохранение достоверного повышения числа микронекрозов при 6-месячном воздействии наночастиц серебра в дозе 0,023 мг/кг можно охарактеризовать как LOAEL. Расхождение наших экспериментов с данными Y.S. Kim и соавт. [1] объяснимо двумя причинами: 1) обработкой наночастиц серебра аравийской камедью в нашем эксперименте и 0,5% раствором карбоксиметилцеллюло-зой в исследованиях Y.S. Kim с соавт. [1]; 2) пролонгированием срока воздействия в нашем исследовании до 6 мес.
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
52
Таблица 2
шестимесячное воздействие сульфата серебра на печень крыс
Показатель Интактные Доза сульфата серебра, мг/кг
0,0005 0,0028 0,03 0,28
ИАГ,% 17,7 (14,7-20,7) 12,8 (7,7-17,9) 15,2 (7,5-22,9) 22,5 (18,3-26,7) 22,2 (15,3-29,1)
Среднее число ВПГ на 10 п/з 1 (0,8-1,2) 1 (0.6-1,4) 1,1 (0,7-1,5) 1,9 (1,7-2,1)*** 1,8 (1.4-2,2,)*
ИАЦ,% 52,7 (43,6-61,7) 55,7 (50,1-61,3) 54,3 (50,4-58,2) 56,7 (53,7-59,7,) 58 (55.4-60,6)
Число клеток РЭС на 10 п/з 55 (51,1-68,9) 57 (53,1-60,9) 56,8 (52,9-60,7) 59,5 (56,1-62,9) 49,8 (42,9-56,7)
Гемодинамические сдвиги, баллы 1,3 (0,8-1,7) 1,2 (0,8-1,6 ) 1,5 (1,1-1,9) 1,3 (0,9-1,7) 1,7 (1,3-2,1)
Процент крыс с гемодинамическими сдвигами, М ± м 100 ± 40 100 ± 40 100 ± 40 100± 40 100 ± 40
Среднее число микронекрозов на 10 п/з 0,3 (0,1-0,5) 0,15 (0-0,32) 0,3 (0,22-0,38) 0,7 (0,4-1) 1,4 (0,9-1,9)***
Жировая дистрофия, баллы 1,1 (0,5-1,7) 1,3 (0,7-1,9) 1,3 (0,9-1,7) 1,7 (1,3-2,1) 1,7 (0,8-2,6 )
Доля паренхимы,% 96,5 (95,2-97,8) 97 (96,1-97,9) 97 (95,7-98,3) 96,1 (94,8-97,4) 95,9 (94,6-97,2)
Доля стромы,% 1,7 (0,8-2,6) 1,5 (1,1-1,9) 1,7 (1,3-2,1 ) 2,2 (1,3-3,1) 2,3 (0,6-4)
Доля инфильтратов,% 1,8 (0,9-2,8) 1,5 (0,6-2,1) 1,7 (0,8-2,6) 1,7 (1,3-2,1) 1,8 (0,9-2,7)
Балочная дискомплексация, баллы 1,2 (0,8-1,6) 1,3 (0,9-1,7) 1,2 (0,8-1,6 ) 1,3 (0,9-1,7) 2,3 (1,9-2,7)****
Процент крыс с пролиферацией желчного эпителия 16,6 ± 15,2 16,6 ± 15,2 0 ± 40 0 ± 40 33,3 ± 19,2
Выраженность пролиферации желчного эпителия, баллы 0,2 (0-0,6) 0,2 (0-0,6) 0 0 0,3 (0-0,7)
Примечание. Приведены значения средней (выделены жирным шрифтом) и интервалы средней (в скобках); звездочками отмечены достоверные изменения показателей (при р < 0,05): * - по отношению к контролю; *** - по отношению к контролю и воздействию сульфата серебра в дозах 0,0005 и 0,0028 мг/кг; **** - по отношению к контролю и воздействию сульфата серебра в дозах 0,0005, 0,0028 и 0,03 мг/кг.
Шестимесячное воздействие наночастиц серебра и аравийской камеди на печень крыс
Таблица 3
Показатели Воздействие Доза наночастиц серебра, мг/кг
камеди 0,0006 0,0028 0,023 0,3
ИАГ,% 23,3 (16,4-30,2) 14,8 (8,8-20,8) 15,3 (10,2-20,4) 25,7 (19,7-31,7) 24,7 (17,8-31,6)
Среднее число ВПГ на 10 п/з 1 (0,7-1,3) 1,1 (0,5-1,7) 1,4 (0,9-1,9) 1,5 (1-2) 2,5 (2-3)***
ИАЦ,% 58,5 (53,8-63,2) 51,8 (46,7-56,9) 56,2 (51,8-60,6) 55,2 (50,8-59,6) 67,3 (60,9-73,7)
Число клеток РЭС на 10 п/з 56 (54,1-60,7) 56,8 (53,4-60,2) 58 (55,4-60,6) 59 (56,4-61,6) 47,2 (41,2-53,2)****
Гемодинамические сдвиги, баллы 1,2 (0,8-1,6) 1,5 (1,1-1,9) 1,3 (0,9-1,7) 1,5 (1,1-1,9) 1,8 (1,4-2,2)
Процент крыс с гемодинамическими сдвигами, М ± м 100 ± 40 100 ± 40 100 ± 40 100 ± 40 100 ± 40
Среднее число микронекрозов на 10 п/з 0,4 (0-0,7) 0,2 (0,12-0,28) 0,3 (0,2-0,4) 0,8 (0,55-1,1)** 2,2 (1,5-2,9)****
Жировая дистрофия, баллы 1,5 (0,6-2,4) 1,3 (0,9-1,7) 1,5 (1,1-1,9) 1,7 (0,8-2,6) 2,3 (1,4-3,2)
Доля паренхимы,% 96,5 (95,6-97,4) 97,5 (97,4-97,9) 97,1 (96,2-98) 96,8 (95,9-97,7) 95 (92,4-97,6)
Доля стромы,% 1,5 (1,1-1,9) 1,3 (0,9-1,7) 1,7 (1,3-2,1) 1,7 (1,3-2,1) 2,3 (0,6-4)
Доля инфильтратов,% 2 (1,1-2,9) 1,2 (0,8-1,6) 1,2 (0,8-1,6) 1,5 (1,1-1,9) 2,7 (1,4-4)
Балочная дискомплексация, баллы 1,2 (0,8-1,6) 1,5 (1,1-1,92) 1,5 (1,1-1,9) 1,7 (0,8-2,6) 2,8 (2,4-3,2)***
Процент крыс с пролиферацией желчного эпителия 16,6 ± 15,2 16,6 ± 15,2 0 ± 40 33,3 ± 19,2 33,3 ± 19,2
Выраженность пролиферации желчного эпителия, баллы 0,2 (0-0,6) 0,2 (0-0,6) 0 0,3 (0-0,7) 0,3 (0-0,7)
П р и м е ч а н и е . Приведены значения средней (выделены жирным шрифтом) и интервалы средней (в скобках); звездочками отмечены достоверные изменения показателей (при р < 0,05): ** - по отношению к воздействию наночастиц серебра в дозах 0,0006 и 0,0028 мг/кг; *** - по отношению к воздействию аравийской камеди и наночастиц серебра в дозах 0,0006 и 0,0028 мг/кг; **** - по отношению к воздействию аравийской камеди и наночастиц серебра в дозах 0,0006, 0,0028 и 0,03 мг/кг.
При воздействии сульфата серебра повреждения печени более значительны и развиваются уже через 3 мес. Так, при дозе 0,28 мг/кг достоверно повышается число ВПГ, сохраняющееся и через 6 мес воздействия и характеризующееся повышением числа микронекрозов и
появлением достоверно выраженной балочной диском-плексации, что характеризует эту дозу как вызывающую явное повреждение печени (Fel). Доза сульфата серебра 0,03 мг/кг также характеризуется как вызывающая Fel, а 0,0028 мг/кг - как LOAEL.
53
[гиена и санитария 1/2014
Выводы. 1. Аравийская камедь по своему действию на печень не является нейтральным веществом и вызывает в ней разнонаправленные реакции: как повреждения в виде фибробластический реакций, так и компенсации, в частности, снижение степени ИАЦ и числа микронекрозов, а через 3 мес - повышение числа ВПГ.
2. Повышение числа ВПГ, микронекрозов и балочной дискомплексации при уменьшении числа клеток РЭС в печени позволяет расценивать эффект 6-месячного воздействия наночастиц серебра на печень в дозе 0,3 мг/кг как выраженное вредное воздействие (Fel), 0,023 мг/кг -как LOAEL, а 0,0028 и 0,0006 мг/кг - как NOEL.
3. Воздействие сульфата серебра в дозах 0,28 и 0,03 мг/кг расценивается как выраженное вредное воздействие (Fel), тогда как в 0,0028 мг/кг - как LAOEL, а в 0,0005 мг/кг - как NOEL.
4. Более раннее выявление токсичности сульфата серебра (в 3 мес) и в меньших дозах как Fel позволяет говорить о его большей токсичности на печень, чем наночастиц серебра.
Литер атур а
1. Kim Y.S., SongM.Y., Park J.D., Song K.S., Ryu H.R., Chug Y.H. et al. Subchronic oral toxicity of silver nanoparticles. Part. Fibre Toxicol. 2010; 7: 20. http;www. particleandfiberetoxicology. com/content/7/1/20
2. Korani M., Rezayat S.M., Gilani K., Arbabi Bidgoli S., Adeli S. Acute and sybchronic dermal toxicity of nanosilver in guinea pig. Int. J. Nanomedicine. 2011; 6: 855-62.
3. Сапожников А.Г., Доросевич А.Е. Гистологическая и микроскопическая техника: Руководство. Смоленск; 2000.
4. Автандилов Г.Г. Основы количественной патологической анатомии. М.: Медицина; 2002.
5. Бонашевская Т.И., Беляева Н.Н., Кумпан Н.Б., Панасюк Л.В. Морфофункциональные исследования в гигиене. М.: Медицина; 1984.
6. Беляева Н.Н. Морфологические критерии риска вредного воздействия факторов окружающей среды на организм. Гигиена и санитария. 2002; 6: 75-6.
7. Беляева Н. Н. Цито- и гистологические критерии риска развития экологически обусловленной патологии. Гигиена и санитария. 2006; 5: 17-9.
Reference s
1. Kim Y.S.,.SongN.Y, Park J.D., SongR.S,, RyuH.R., Chug Y.H. et al. Subchronic oral toxicity of silver nanoparticles. Particle and Fibre Toxicology. 2010.- 7:20 http;www. particleandfiberetoxi-cology.com/content/7/1/20
2. Korani V., Rezayat SM, Gilani R., Arbabi Bidgoli S, Adeli S. Acute and sybchronic dermal toxicity of nanosilver in guinea pig International Journal of Nanomedicine: 2011: (6):855-862.
3. Sapoznikov A.G., Dorosevich A.E. Histologikal and microscopical technique. Handbook. Smolensk: SAY;2000. (in Russian).
4. Avtandilov G.G. Fundamentals of quantitative pathology. Moscow: Meditsina; 2002. (in Russian).
5. Bonashevskay T.I., Belyaeva N.N. Kumpan N.B., Panasuk L.V Morphofunctional study in hygiene. Moscow: Meditsina; 1984. (in Russian).
6. Belyaeva N. N. Morphological criteria for the risk of harmful effects of environmental factors on the body. Gigiena i Sanitarija. 2002; (6): 75-76. (in Russian).
7. Belyaeva N. N. Cytological and histological criteria for the risk of environmentally induced disease. Gigiena i Sanitarija. 2006; (5): 17-19. (in Russian).
Поступила 07.02.13
Профилактика неблагоприятных воздействий на здоровье
О КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2014 УдК 614.777:628.1(470.41)
А.В. Иванов1, Е.А. Тафеева1, Н.Х. Давлетова2
гигиеническая оценка эффективности реализации концепции по улучшению условий водоснабжения населения юго-восточного региона республики Татарстан
1ГБОУ ВПО «Казанский государственный медицинский университет» Минздрава России, 420012, Казань; 2ФГБОУ ВПО «Поволжская государственная академия физической культуры, спорта и туризма», 420138, Казань
В работе представлена гигиеническая оценка эффективности реализации программы, направленной на улучшение условий водоснабжения населения в нефтедобывающих районах Республики Татарстан. В результате реализации мероприятий удалось улучшить качество питьевой воды по показателям химической безвредности и снизить риск здоровью населения. Показано, что в настоящее время наиболее высокий вклад в неблагополучие централизованной системы питьевого водоснабжения вносят следующие факторы: качество воды водоисточника, несоответствие зоны санитарной охраны требованиям санитарного законодательства и несоблюдение режимных мероприятий на ее территории; ухудшение качества воды в процессе транспортировки и несовершенство лабораторного контроля.
Ключевые слова: питьевая вода; водоснабжение; риск здоровью; нефтедобыча.
д ля корреспонденции: Тафеева Елена Анатольевна, tafeeva@mail.ru
54
