CC BY
125
МИНЕРАЛИЗАЦИЯ СКЕЛЕТА, КОСТНЫЙ МЕТАБОЛИЗМ И ГЕНЕТИЧЕСКИЙ ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА а1-ЦЕПИ КОЛЛАГЕНА I ТИПА У ПОДРОСТКОВ С ХРОНИЧЕСКИМ ГАСТРОДУОДЕНИТОМ
Гузеева О. В. 1- Новикова В. П. 2, Кузьмина Д. А.1, Мельникова И. Ю.1, Ларионова В. И.1
ГБОУВПО СЗГМУ им. И. И. Мечникова Минздрава России, 191015, ул. Кирочная, д. 41, Санкт-Петербург, Россия.
2ФГБУ»Федеральный медицинский исследовательский центр им. В. А. Алмазова» Минздрава России, 197341, Ул Аккуратова, д. 2, Санкт-Петербург, Россия
GENETIC POLYMORPHISM OF THE GENEal-CHAINOF TYPE I COLLAGEN (COL1a1), BONE MINERAL CONTENT AND BONE METABOLISM IN ADOLESCENTS WITH CHRONIC GASTRODUODENITIS
Guzeeva O. V.1, Novikova V. P.2, Kuzmina D. A. 1, Melnikova I. Y.1, Larionova V. I.1
St. Petersburg State Medical Academy named after 1.1. Mechnikov, Russian Ministry of Health 2FGBU «Federal Almazov Medical Research Center», Russian Ministry of Health
О. В. Гузеева ', ГБОУ ВПО СЗГМУ им. И. И. Мечникова Минздрава России, кафедра педиатрии и детской кардиологии, ассистент В. П. Новикова2, ФГБУ «Федеральный медицинский исследовательский центр им. В. А. Алмазова» Минздрава России, кафедра детских болезней, докт. мед. наук, профессор
Д. А. Кузьмина ', ГБОУ ВПО СЗГМУ им. И. И. Мечникова Минздрава России, кафедра терапевтической стоматологии, докт. мед. наук, доцент
И. Ю. Мельникова ', ГБОУ ВПО СЗГМУ им. И. И. Мечникова Минздрава России кафедра педиатрии и детской кардиологии, зав. кафедрой, докт. мед. наук, профессор
В. И. Ларионова ', ГБОУ ВПО СЗГМУ им. И. И. Мечникова Минздрава России, кафедра педиатрии и детской кардиологии, докт. мед. наук, профессор
Guzeeva O. V. ', St. Petersburg State Medical Academy named after 1.1. Mechnikov, Russian Ministry of Health, Department of Pediatrics and Pediatric Cardiology, assistant.
Novikova V. P.2, FGBU «Federal Almazov Medical Research Center», Russian Ministry of Health, Department of Childhood Illness, Doctor of Medical sciences. Professor.
Kuzmina D. A.', St. Petersburg State Medical Academy named after 1.1. Mechnikov, Russian Ministry of Health, Department of Therapeutic Dentistry, Doctor of Medical sciences. Associate Professor.
Melnikova I. Y. ', St. Petersburg State Medical Academy named after 1.1. Mechnikov, Russian Ministry of Health, Department of Pediatrics and Pediatric Cardiology, Doctor of Medical sciences. Professor.
Larionova V. I.', St. Petersburg State Medical Academy named after 1.1. Mechnikov, Russian Ministry of Health, Department of Pediatrics and Pediatric Cardiology, Doctor of Medical sciences. Professor.
Гузеева
Ольга Владимировна Guzeeva O. V. E-mail:
olgagil2012 @yandex. ru
Резюме
Обследован 51 подросток с хроническим гастродуоденитом (ХГД), верифицированным морфологически и 19 практически здоровых подростков. Целью нашего исследования было изучение распространенности полиморфизма гена а1-цепи коллагена I типа (COLIA1) и изучение влияния полиморфных генотипов и аллелей данного гена на состояние костной минерализации и метаболизма у подростков при ХГД. Выявлены изменения костного метаболизма и минеральной плотности костной ткани (МПКТ), ассоциированные с носительством Sp1 полиморфных аллелей гена COL1A1, наличием хеликобактерной инфекции. Анализируя полученные результаты, нами было установлено, что у детей с ХГД, как НР (+), так и НР (-) достоверно чаще, чем у здоровых встречается Ss-генотип гена COL1A1, что сопровождается снижением показателей МПКТ. Кроме того, подростки-носители S-аллеля гена COL1A1 имели низкий уровень остеокальцина и высокий уровень С-концевых телопептидов в сыворотке крови, что ассоциировалось с повышение уровня ионизированного кальция в сыворотке крови и свидетельствует о нарушении у них процессов моделирования и ремоделирования костной ткани, причем эти изменения по-разному выражены у пациентов с НР (+) и НР (-) ХГД.
Ключевые слова: хронический гастродуоденит, ген а1-цепи коллагена I типа (COL1A1), минеральная плотность кости, молекулярные маркеры костного метаболизма.
Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология 2014; 106 (6):13-18
Summary
The study included 51 adolescent with chronic gastroduodenitis (CGD), verified morphologically and 19 healthy adolescents. The aim of our study was to investigate the prevalence of gene polymorphism al- chain of type I collagen (COLIA1) and study the effect of polymorphic genotypes and alleles of this gene on the state of bone mineralization and metabolism in adolescents with CGD. The changes in bone metabolism and bone mineral density (BMD) associated with carriage of polymorphic alleles Spl COL1A1, the presence of H. pylori infection. Analyzing the results obtained, we have found that children with CGD, like HP (+) and HP (-) significantly more frequently than in healthy Ss- common genotype gene COL1A1, which is accompanied by a decrease in BMD. In addition, adolescents carrier S- allele of the gene COL1A1 had low levels of osteocalcin and a high level of C-terminal telopeptide in serum, which was associated with elevated levels of ionized calcium in serum and constitutes a violation of their processes of modeling and remodeling of bone, and these changes differently expressed in patients with Hp (+) and HP (-) CGD.
Keywords: chronic gastroduodenitis, gen a1-chain of type I collagen (COLIA1), bone mineral density, bone metabolic molecular markers.
Eksperimental'naya i Klinicheskaya Gastroenterologiya 2014; 106 (6):13-18
Введение
В настоящее время считается, что состояние костной ткани — это показатель, отражающий не только качество общего развития детей и подростков, их функциональный статус, но также уровень общего здоровья ребенка. Несвоевременная диагностика метаболических нарушений кости приводит к торможению линейного роста, а также формированию необратимых изменений со стороны скелета, сколиозу, ювенильному остеопорозу [9].
Даже среди практически здоровых детей в возрасте 5-16 лет снижение костной минеральной плотности имеется у 10-30 % обследованных [7]. Хронические заболевания гастродуоденальной зоны, наряду с другими экзогенными факторами риска, способствуют нарушению костного метаболизма [1, 5] и часто сочетаются с ортопедической патологией у детей [2, 5, 8].
Генетические факторы определяют вариабельность минеральной плотности кости на 60-80 %, тогда как роль экзогенных факторов составляет 20-25 % [9]. На основе литературных данных были определены две
Материал и методы исследования
Обследован 51 подросток с ХГД, верифицированным морфологически. Возраст детей составил от 10 до 17 лет (средний возраст 13,69+2,39 года). Группу сравнения составили 19 практически здоровых детей аналогичного возраста. В исследование включались дети, проживающие в Санкт-Петербурге и Ленинградской области, посещающие общеобразовательные школы, имеющие нормальную двигательную активность, нормальный индекс массы тела, получающие питание 3-4 раза в день, не имеющие наследственных и приобретенных заболеваний костно-мышечной системы, хронических болезней печени, почек, сахарного диабета, тиреотоксикоза, синдрома мальабсорбции, давшие информированное согласие на участие в исследовании. Пациенты группы№ 1 отбирались для исследования методом случайной выборки при установлении эндоскопическим способом диагноза ХГД. Если подтверждение диагноза ХГД морфологическим методом
наиболее значимые мутации для предрасположенности к остеопорозу: это нуклеотидные замены в генах ССЯЛА1 @р1) и VDR3 (В$т1) [7]. Известно, что полиморфизм в регуляторной области гена СОЬ1Л1 приводит к изменению соотношения а1- и а2-цепей белка и, как следствие, к нарушениям структуры коллагена кости [10]. Носительство полиморфных генотипов и аллелей гена а1-цепи коллагена I типа было ассоциировано с нарушением минерализации костной ткани, повышенным риском переломов кости, ортопедической патологии и кариеса у детей и взрослых [10, 11, 12]. Единичные исследования свидетельствуют о взаимосвязи полиморфизма гена а1-цепи коллагена I типа и фиброза слизистой оболочки желудка при хроническом гастродуодените у детей [3].
Целью нашего исследования было изучение ассоциации Sp1 полиморфизма гена а1-цепи коллагена I типа (COL1A1) и аллелей данного гена и состояния костной минерализации и метаболизма у подростков при хроническом гастродуодените (ХГД).
отсутствовало, пациенты из обследования исключались. Также, критериями исключения из отобранной группы были пациенты с неясным НР-статусом; дети с гиподинамией: лежачие больные, со сниженной физической активностью; профессиональные спортсмены; дети, страдающие лактазной недостаточностью; дети, страдающие ожирением; дети, находящиеся на строгой алиментарной диете; дети, получающие Са, вит. Д, гормонотерапию по поводу коморбидной патологии; пациенты, страдающие алиментарной дистрофией; дети, имеющие эндокринные опухоли; дети с наследственными рахитоподобными заболеваниями.
Группа сравнения включала в себя практически здоровых детей, без каких-либо гастроэнтерологических жалоб. Отсутствие Helicobacter pylori HP) в этой группе установлено прибором Хеликосенс. Молекулярно-ге-нетические исследования: анализ Spl полиморфизма гена с^-цепи коллагена I типа осуществлялся методом
HP (-) X^ (1) n=31 HP (+ЖГД (2) Всего X^ (3) n=20 n=51 Здоровые (4) n=19
SS 11(35,5%) 6(30%) 17(33,3%) 19(100%)
pl,2>0,05; pl,4<0,00l,x2= =20,43; p2,4<0,00l,x2=20,75;p4,3 <0,001 x2=24,63
Ss 20(64,5%) 12(60%) 32(62,7%) 0
pl,2>0,05; pl,4<0,00l, x2^ =20,43; p2,4<0,00l, x2=l6,47; p4,3<0,00l,x2=2l,96
ss 0 2(10%) 2(4%) 0
p2,3;4,3>0,05
Таблица 1
Варианты Sp1 полиморфизма гена а1-цепи коллагена I типа (COL1A1) у детей с ХГД и здоровых (абс. ч. и %).
Примечание.
ХДГ — хронический гастро-дуоденит, НР — НеНсоЬасГег pylori.
HP (-) X^ (1) HP (+) X^ (2) Всего XW3) Здоровые(4)
n=31 n=20 n=51 n=19
S-аллель 31(100%) 18(90%) 49(96,1%) 19(100%)
pl,2; 2,4; 4,3>0,05
s-аллель 14(45,2%) 20(100%) 34(66,7%) 0
pl,2<0,00l, x2=l6,43; pl,4<0,00l, x2=ll,92;p2,4<0,00l,x2= =39,00; p4,3<0,00l,x2= 24,63
Таблица 2
Частота аллелей S и s гена а1-цепи коллагена I типа (COL1A1) у детей с ХГД и здоровых (абс. ч. и %).
Примечание.
ХДГ — хронический гастро-дуоденит, НР — НеНсоЬасГег pylori.
SS Ss
Показатели HP (-) X^ n=11(1) HP(+) XГД XГД n=6(2) n=17(3) Здоровые n=19 (4) HP(-) XГД n=20 (5) HP(+) XГД n=12 (6) XГД n=32(7)
МПКТ г/см2 0,79+ 0,18 0,78+ 0,80+ 0,22 0,19 0,97+ 0,06 0,87+ 0,17 0,86+ 0,17 0,88+ 0,17
pl,2=0,765; F= = 12,84, pl,4=0,00l;F=l2,34, p2,4=0,002; F = 13,72, p3,4=0,000; p3,7=0,l42
МПКТ, Z-score -0,52+ 1,31 -0,25+ -0,43 + 1,58 1,37 1,10+ 0,71 -0,1+ 0,96 0,43+ 1,34 -0,16+ 1,13
p1,2 = 0,7l0;F=l9,5l,pl,4=0,0004;F=8,87, p2,4 = =0,007; F=18,26, p4,3=0,000; p3,7= 0,463 p5,6=0,203
Таблица 3
Остеоденситометриче-ские показатели у детей с хроническим гастродуоде-нитом в зависимости от Sp1 полиморфизма гена а1-цепи коллагена I типа (COL1A1).
Примечание.
ХДГ — хронический гастро-дуоденит, НР — НеНсоЬасГег pylori, МПКТ — минеральная плотность костной ткани.
полимеразной цепной реакции (ПЦР) с последующим рестрикционным анализом по ранее описанным методикам [28, 29, 34]. Праймеры были подобраны таким образом, что при обработке продукта ПЦР, содержащего полиморфный маркер Sp1, рестриктазой Bse1I образовывались следующие фрагменты: 63 и 22 п.н. для аллели Sp1 G (S), 85 п.н. для аллели Sp1 T (s). Размеры образовавшихся фрагментов оценивали при помощи электрофореза в полиакриламидном геле. В связи с низкой частотой встречаемости генотипа TT (ss) Sp1 полиморфного маркера для проведения сравнительного анализа сравнивались между собой генотипы, содержащие аллель T (генотипы TT и GT аналогичны генотипам ss и Ss), и не содержащие аллель T (генотип GG аналогичен генотипу SS).
Всем детям основной группы проведено стандартное гастроэнтерологическое обследование, в том числе фиброгастродуоденоскопия, морфологическое исследование биоптатов слизистой оболочки желудка, идентификация HelKobacter pylori при помощи Хелпил-теста, а также с применением прибора «Хе-ликосенс». Всем обследованным определены уровни ионизированного кальция, фосфора, щелочной фос-фатазы в сыворотке крови. Остеокальцин в сыворотке
Результаты исследования
При изучении распространенности вариантов Sp1 полиморфизма гена cij-цепи коллагена I типа (COL1A1) у детей с ХГД разной этиологии и здоровых выявлено, что большинство детей с ХГД (62,7 %) являлись носителями Ss-генотипа, в то время, как у здоровых детей
крови определен иммуноферментным методом при помощи тест-системы «NordicBioscienceDiagnostics A/S N-MID TM». Тест-система основана на использовании двух высокоспецифических моноклональных антител (Mabs) к человеческому остеокальцину. Для определения продуктов деградации коллагена I типа в сыворотке крови, С-концевых телопептидов (СКТ) использована тест-система «Elecsys b-CrossLaps/serum».
Содержание минерала в костной ткани (bone mineral content) и минеральная плотность костной ткани (МПКТ) оценивались методом DXA (L1-L4) на остео-денситометре «Hologic QDR-4500C», оснащенного педиатрической референтной базой. В соответствии с критериями International Society ofClinical Densitometry, 2007, нормальная минеральная плотность кости диагностировалась при Z-sœre>-2,0 SD; низкая — по отношению к хронологическому возрасту при Z-sœre<-2,0 SD.
Результаты исследования, представленные в виде среднего арифметического (М) и стандартного отклонения (о), обработаны на компьютере с помощью пакета статистических программ Microsoft Excel и SPSS ver S.14. Для выявления статистических связей между признаками использовался однофакторный дисперсионный анализ.
данный генотип не выявлен ни у одного обследованного; различия между группой детей с ХГД и здоровыми достоверны, Р<0,001. Данные представлены в таблице 1.
При этом и у НР+ и у НР- пациентов частота но-сительства Ss-генотипа была одинакова и каждая из
Таблица4
Остеоденситометрические показатели у детей с хроническим гастродуоденитом в зависимости от носи-тельства аллелей S и s гена а1-цепи коллагена I типа (COL1A1).
Примечание.
ХДГ — хронический гастро-дуоденит, НР — НеНсоЬас1ег pylori, МПКТ — минеральная плотность костной ткани.
S-аллель s-аллель
Показатели НР (-) ХГД (1) n=31 НР(+) ХГД ХГД (3) n= (2) n= 18 ХГД (3) П= Здоровые 49 (4) n= 19 НР(-) ХГД (5) n=19 HP(+) ХГД (6) n=14 ХГД (7) n=33
МПКТ 0,85+ 0,83+ 0,84+ 0,98+ 0,87+ 0,85+ 0,86+
г/см2 0,17 0,18 0,18 0,07 0,17 0,17 0,17
p1,2= = 0,699;F=10,0 , p1,4= 0,003; F = 11,39, p2,4=0,002; F = 10,78 ,p4,3 = 0,002;
p3,7=0 ,615, p5,6 = 1,0
МПКТ, -0,26+ -0,37+ -0,30+ 1,10+ -0,10+ -0,41+ -0,23+
Z-score 1,10 1,38 1,20 0,71 0,96 1,24 1,08
p1,2= 0,762;F=22,90, P1,4 = =0,000;F = 16,87 , p2,4=0,007; F =22,65, p4,3 = 0,000;
p3,7=0,788; p5,6=0,424
Таблица5
Биохимические показатели у детей с хроническим гастро-дуоденитом в зависимости от Sp1 полиморфизма гена а1-цепи коллагена I типа (COL1A1).
Примечание.
ХДГ — хронический гастро-дуоденит, НР — НеНсоЬас1ег pylori, ОК — остеокальцин, СКТ — С-концевые тело-пептиды, ПТГ — паратирео-идный гормон.
SS Ss
Показатели НР (-) ХГД HP(+) ХГД ХГД Здоровые НР(-) ХГД HP(+) ХГД ХГД
n=11(1) n=6(2) n=17(3) n=19 (4) n=20 (5) n=12 (6) n=32(7)
ОК, нг/мл 67,70+ 37,92 111,20+30,99 83,05+ 40,72 94,64+38,03 62,69+ 30,91 77,74+ 34,86 69,08+ 32,99
F= =7,66 ,p1,2=0,014;F=3,50, p1,4= = 0,072;p2,4 = 0,344, p4,3=0,383; F = 1,69, p3,7= =0,200, p5,6=0,125
СКТ, нг/мл 1,34+ 1,29+ 1,32+ 0,96+ 1,99+ 1,50+ 1,74+
0,89 0,53 0,77 0,50 1,04 0,88 1,00
p1,2= = 0,902;P1,4=0,143;p2,4=0,178; p4,3 = 0,199;p3,7= 0,141; p5,6 = 0,183
ПТГ, пк-моль/л 28,55+ 37,23+ 31,62+ 33,42+16,07 41,41+ 29,76+ 37,34+
15,04 16,10 15,52 27,20 19,83 24,74
p1,2= =0,284; P1,4= 0,420; p2,3 = 0,618, p4,3 = 0,735;p3,7= = 0,392, p5,6= 0,207
Са++, ммоль/л 1,07+ 0,07 1,05+ 0,06 1,07+ 1,05+ 0,07 0,05 1,12+ 0,04 1,09+ 0,06 1,11+ 0,05
p1,2= = 0,564; p1,4= = 0,370; F=1,0 i, p2,4=0,000 ; p4,3 = 0,327; F=5,36, p3,7=0,025; F =2,89, p5,6= 0,099
Р неор-га-нический, ммоль/л 1,55+ 0,24 1,59+ 0,18 1,56+ 1,57+ 0,22 0,19 1,49+ 0,23 1,44+ 0,11 1,48+ 0,19
p1,2= = 0,727; p1,4= 0,803; p2,4=0,822, p4,3=0,885;p3,7= =0,191, p5,6 = 0,487
Общая Щ™аЯ 443,45+138,90 фосфатаза, Ед./л 494,33+ 73,56 461,41+ 499,89+ 119,91 141,67 408,05+ 173,22 495,67+ 179,17 458,03+ 185,12
p1,2= 0,421; p1,4= 0,299; p2,4 =0,928; p1,4=0,388; p3,7= =0,946; p5,6 = 0,182
Таблица 6
Биохимические показатели у детей с хроническим гастро-дуоденитом в зависимости от носительства аллелей S и s гена а1-цепи коллагена I типа (COL1A1).
Примечание.
ХДГ — хронический гастро-дуоденит, НР — НеНсоЬас1ег pylori, ОК — остеокальцин, СКТ — С-концевые тело-пептиды, ПТГ — паратирео-идный гормон.
S-аллель s-аллель
Показатели Нр)(+)Х1ГЙД ХГД (3) n=49 З(д4^р0в1ь9е (1) n=31 (2) n= 18 н (4) n= 19 НР(-) ХГД HP(+) ХГД (5) n=19 (6) n=14 ХГД (7) n=33
ОК, нг/мл 64,53 + 91,54+ 74,66+ „„ „„ 33,09 366,59 366,53 94,64+38,03 62,69+ 77,74+ 30,91 34,86 69,08+ 32,99
F =7,11, p1,2=0,010;F=8,71, p1,4=0,005;p2,4=0,802; F=3,98, p3,4= 0,050; p3,7=0,588, P5,6=0,200
СКТ, нг/мл 1,75+ 1,43+ 1,63+ 0,96+ 1,02 0,77 0,94 0,50 1,99+ 1,38+ 1,04 0,86 1,74+ 1,00
p1,2= 0,255;F=9,88, p1,4=0,003;F=4,90, p2,4=0,033; F=8,65, p3,4=0,005; p3,7=0,611; F=3,25,p5,6=0,081
ПТГ, пк-моль/л 36,69+ 32,25+ 35,03+ „„ ,,„„ 24,02 18,54 222,02 33,42+16,07 41,41+ 31,83 + 27,20 20,62 37,34+ 27,74
p1,2=0,503; p1,4=0,602; p2,4=0,838; p3,4=0,773; p3,7= =0,674; p5,6=0,275
Са++, ммоль/л 1,10+ 1,08+ 1,09+ 1,05+ 0,05 0,06 0,94 0,06 1,12+ 1,09+ 0,04 0,05 1,11+ 0,05
p1,2=0,216; F=10,11, p1,4=0,003; p2,4=0,137, p3,4=0,854; p3,7 =0,902; F=3,77 p5,6=0,061
Р неорга-ни-ческий, ммоль/л 1,51+ 1,49+ 1,51+ 1,57+ 0,23 0,15 0,20 0,20 1,49+ 1,45+ 0,23 0,12 1,48+ 0,19
p1,2= 0,743; p1,4=0,352; p2,4=0,179; p3,4=0,271; p3,7= 0,495; p5,6=0,556
Общая щелочная фосфатаза, Ед./л
420,61+160,41 495,22+149,55 448,02+159,13 499,89+141,67
408,05+ 173,22
511,93+195,31
450,82+ 187,07
p1,2=0,115; p1,4=0,083; p2,4=0,923; p3,4=0,219; p3,7=0,942; p5,6=0,112
групп имела достоверные различия с группой здоровых по этому показателю. Только 33,3 % детей с ХГД являлись носителями 88-генотипа, в то время, как у здоровых детей данный генотип выявлен в 100 % случаев; различия между группой детей с ХГД и здоровыми достоверны, Р<0,001. Частота носительства SS-генотипа у НР+ и у НР- пациентов была одинакова, при этом каждая из групп имела достоверные различия с группой здоровых. Носительство ББ-генотипа обнаружилось только у 2 пациентов с НР+ ХГД, различий по частоте выявления этого генотипа в изучаемых группах не найдено. Частота носительства аллелей S и б гена а1-цепи коллагена I типа (COL1A1) у детей с ХГД и здоровых представлена в таблице2. Частота S-аллеля у больных ХГД и здоровых не имела достоверных различий, в то время, как носительство Б-аллеля отмечено у 100 % больных с НР (+) ХГД, у 45,2 % больных с НР (-) ХГД и у 66,7 % всех больных ХГД, что достоверно чаще, чем у здоровых. Носительство Б-аллеля при НР (-) ХГД встречалось реже, чем при НР (+) ХГД.
Остеоденситометрические показатели у детей с хроническим гастродуоденитом в зависимости от Sp1 полиморфизма гена а1-цепи коллагена I типа (COL1A1) представлены в таблице 3.
Как следует из таблицы № 3, при носительстве SS-генотипа у детей с ХГД, как при хеликобактериозе, так и без него, минеральная плотность костной ткани оказалась ниже, чем у здоровых детей, носителей этого же генотипа. При носительстве 8Б-генотипа МПКТ у больных с ХГД была одинакова при НР+ и НР- ХГД.. Обращает на себя внимание тот факт, что МПКТ при ХГД при носительстве гомозиготного генотипа SS или гетерозиготного Ss была одинаковой. Из таблицы 4 следует, что все различия в показателях МПКТ у больных с ХГД и здоровых детей были выявлены только при носительстве S-аллеля гена COL1A1, а при носительстве Б-аллеля подобных различий не наблюдалось. Для исключения влияния возрастных, половых и антропометрических показателей на МПКТ у детей с ХГД нами было изучен пол, средний возраст, масса тела и рост у детей с ХГД и здоровых в зависимости от 8р1 полиморфизма гена COL1A1. Не выявлено достоверных различий между массой, ростом, половым составом во всех восьми изучаемых группах; единственным различием являлся более старший возраст детей с НР (+) ХГД в сравнении со здоровыми детьми (14,17+0,98лет и 12,26+1,24лет, р=0,002) у носителей SS-генотипа. Во всех остальных группах возраст обследованных детей не имел достоверных различий. Нами также проанализирован пол, средний возраст, масса тела и рост у детей с ХГД и здоровых в зависимости от носительства S или Б-ал-леля гена COL1A1. Оказалось, что среди носителей
Обсуждение полученных результатов
Нами установлено, что для здоровых детей характерно 100 % носительство SS-генотипа гена а1-цепи коллагена I типа (COL1A1), в то время, как у детей с ХГД, как НР (+), так и НР (-) достоверно чаще, чем у здоровых встречается 8Б-генотип гена СОЬ1А1. Известно, что носители гетерозиготного Ss генотипа содержат меньше неорганического и больше органического компонента, что приводит к снижению минерализации и костной прочности [10]. По нашим
S-аллеля дети с ХГД имели более старший возраст, чем здоровые (13,45+2,25лет и 12,26+1,24, Р =0,033), причем только дети с НР (-) ХГД имели подобные различия (13,61+2,19лет и 12,26+1,24, Р =0,018), а дети с НР (+) ХГД имели одинаковый возраст со здоровыми. Во всех остальных изучаемых группах не выявлено достоверных различий между массой, ростом, половым составом и возрастом обследованных детей.
Анализ биохимических показателей у детей с хроническим гастродуоденитом в зависимости от 8р1 полиморфизма гена СОЬ1А1 показал, что уровень остеокальцина в сыворотке крови у детей- носителей SS-генотипа с НР (+) ХГД был достоверно выше, чем у пациентов с НР (-) ХГД: (111,20+30,99 нг/мл и 67,70+37,92 нг/мл, р=0,014). Также выявлено, что уровень ионизированного кальция в сыворотке крови у детей с ХГД носителей SS-генотипа оказался достоверно ниже, чем у больных с ХГД носителей Ss-гено-типа (1,07+0,07 ммоль/л и 1,11+0,05 ммоль/л, р=0,025). Во всех остальных изучаемых группах уровни ионизированного кальция, фосфора, щелочной фос-фатазы, остеокальцина и С-концевых телопептидов в сыворотке крови не имели достоверных различий в зависимости от 8р1 полиморфизма гена СОЬ1А1. Результаты представлены в таблице 5. Следующая таблица 6 представляет биохимические показатели у детей с хроническим гастродуоденитом в зависимости от носительства аллелей S и б гена COL1A. Как следует из таблицы № 6, уровень остеокальцина в сыворотке крови у детей-носителей S-аллеля с ХГД был достоверно ниже, чем у здоровых детей, носителей того же аллеля (74,66+36,53 нг/мл и 94,64+38,03 нг/мл, р=0,050), при том, что уровень остеокальцина при носительстве S-аллеля у детей с НР (+) ХГД был достоверно выше, чем у пациентов с НР (-) ХГД: (91,54+36,59нг/ мл и 64,53+33,09 нг/мл, р=0,014). Уровень С-концевых телопептидов в сыворотке крови у детей-носителей 8-аллеля с ХГД был достоверно выше, чем у здоровых детей, носителей того же аллеля (1,63+0,94 нг/мл и 0,96+0,50 нг/мл, р=0,005), причем эти закономерности имели место и для НР (-) ХГД (1,75+1,02 нг/мл и 0,96+0,50 нг/мл, р=0,003) и НР (+) ХГД (1,43+0,77нг/мл и 0,96+0,50 нг/мл, р=0,03) в сравнении со здоровыми носителями S-аллеля. Также выявлено, что уровень ионизированного кальция в сыворотке крови у детей с НР (-) ХГД носителей S-аллеля был достоверно выше, чем у здоровых носителей S-аллеля (1,10+0,05ммоль/л и 1,05+0,06ммоль/л, р=0,003). Во всех остальных изучаемых группах уровни ионизированного кальция, фосфора, щелочной фосфатазы, остеокальцина и С-концевых телопептидов в сыворотке крови не имели достоверных различий в зависимости от носительства аллелей S и б гена COL1A.
данным, показатели МПКТ у детей с ХГД, как НР (+), так и НР (-) были достоверно ниже, чем у здоровых детей при носительстве SS-генотипа и S-аллеля гена COL1A1, при этом различий между НР (+) ХГД и НР (-) ХГД не наблюдалось. Сравнить показатели МПКТ у детей с ХГД и у здоровых детей при носительстве Ss-генотипа оказалось невозможным ввиду отсутствия этого генотипа у здоровых. Носительство Б-аллеля гена COL1A1у больных ХГД, как НР (+),
так и НР (-) было выше, чем у здоровых детей, при этом носительство Б-аллеля при НР (-) ХГД встречалось реже, чем при НР (+) ХГД, имеющем более выраженные морфологические изменения слизистой оболочки желудка [2, 4, 6, 8]. Полученные данные согласуются с результатами исследований, продемонстрировавшими взаимосвязь полиморфизма гена а1-цепи коллагена I типа и морфологическими изменениями слизистой оболочки желудка при хроническом гастродуодените у детей [3].
Биохимические исследования показали, что уровень остеокальцина в сыворотке крови у детей-носителей S-аллеля гена COL1A1с ХГД достоверно ниже, чем у здоровых детей, носителей того же аллеля, при этом, что уровень остеокальцина при носительстве 8-аллеля и 88-генотипа у детей с НР (+) ХГД был достоверно выше, чем у пациентов с НР (-) ХГД. Уровень С-концевых телопептидов в сыворотке крови у детей-носителей S-аллеля с ХГД независимо от наличия хеликобактериоза, был достоверно выше, чем у здоровых детей, носителей того же аллеля. Данные результаты свидетельствуют о нарушении процессов моделирования и ремоделирования костной
Выводы
1. У детей с ХГД, как НР (+), так и НР (-) достоверно чаще, чем у здоровых встречается 8Б-генотип гена COL1A1, что сопровождается снижением показателей МПКТ.
2. У детей с ХГД низкий уровень остеокальцина и высокий уровень С-концевых телопептидов в сыворотке крови, повышение уровня ионизированного кальция в сыворотке крови у детей-носителей S-аллеля гена COL1A1 свидетельствуют
Литература
1. Гузеева О. В., Новикова В. П., Кузьмина Д. А. Особенности минерализации костной ткани у детей с хроническим гастритом (по результатам костной денситоме-трии поясничного отдела позвоночника) // Детская медицина Северо-Запада.— 2010.—№ 1 (1).— С. 52-53.
2. Гурова М. М. Клинико-патогенетические особенности течения хронических гастродуоденитов у детей старшего возраста в периоде обострения и ремиссии // Журнал Врач-аспирант.— 2011.— 1.3. (44).— С. 412-418.
3. Кузьмина Д. А., Москаленко М. В., Костик М. М., Азанчевская С. В., Сидоркин А. О., Мороз Б. Т., Новикова В. П., Ларионова В. И. Ассоциация генотипов COLLAL с развитием фиброза в слизистой оболочке желудка при хроническом гастродуодените и сопутствующем кариесе у детей // Клинико-лабораторный консилиум.— 2010. — Т. 2-3. — № 33-34.— С. 159.
4. Мельникова И. Ю, Новикова В. П. Эрозивно-язвенное состояние у детей // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология.— 2005.— № 1.— С. 72.
5. Новикова В. П., Гузеева О. В., КузьминаД.А. Хронический гастрит и патология костной ткани у детей // Врач-Аспирант.— 2011.— 4.1 (47).— С. 248-257.
6. Новикова В. П., Китаева Л. В., Евстратова Ю. С., Иванов А. В., Григорян Т. М., Азанчевская С. В. Цитогенети-ческие нарушения в буккальном и желудочном эпителии при хеликобактериозе у детей // Профилактическая и клиническая медицина.— 2008.— № 1.— С. 31-34.
ткани у детей с ХГД при носительстве S-аллеля гена COL1A1, причем эти изменения более выражены у пациентов с НР (+) ХГД. Уровень ионизированного кальция в сыворотке крови у детей с НР (-) ХГД носителей S-аллеля был достоверно выше, чем у здоровых носителей S-аллеля, что может быть связано с повышение резорбции костной ткани (повышение уровня С-концевых телопептидов) в этой группе детей.
Уровень ионизированного кальция в сыворотке крови у детей с ХГД носителей SS-генотипа оказался достоверно ниже, чем у больных с ХГД носителей Ss-генотипа, при том, что остеоденситометрические показатели и все другие изучаемые биохимические данные в этих группах не имели достоверных различий. Механизм взаимосвязи уровня ионизированного кальция в сыворотке крови и полиморфизма гена COL1A1 требует дополнительного изучения.
Можно предположить, что при ХГД, особенно при НР (+) ХГД, не только встречаются чаще носители б- аллеля гена COL1A1, ассоциированного с нарушением минеральной плотности [11], но меняется влияние S-аллеля и SS-генотипа гена COL1A1 на минеральную плотность костей.
о нарушении у них процессов моделирования и ремоделирования костной ткани, причем эти изменения по-разному выражены у пациентов с НР (+) и НР (-) ХГД.
3. Влияние 8-аллеля и 88-генотипа гена COL1A1 на минеральную плотность костей и механизм зависимости уровня ионизированного кальция в сыворотке крови от полиморфизма гена COL1A1 требуют дополнительного изучения.
7. Самохина Е. О., Щеплягина Л. А., Моисеева Т. Ю. Количественная ультрасонометрия в оценке возрастных показателей костной прочности у детей // Российский педиатрический журнал.—2006.—№ 4.— С.12-17.
8. Успенский Ю. П., Суворов А. Н., Барышникова Н. В. Инфекция Helicobacter pylori в клинической практике.— СПб.: ИнформМед, 2011.— 571 с.
9. Щеплягина Л. А., Моисеева Т. Ю., Круглова И. В. Клиническая оценка костной массы у детей // Научно-практическая ревматология. —2005. — № 1.— С.79-84.
10. Blades H. Z., Arundel P., Carlino W. A.et al. Collagen gene polymorphisms influence fracture risk and bone mass acquisition during childhood and adolescent growth // Bone.—2010.— Vol. 47.— P. 989-994.
11. Kuzmina D. A., Moskalenko M. V., Kostik M. M., Azanchevskaya S. V., Sidorkin A. O., Moroz B. T., Noviko-va V.P., Larionova V.I. Association between +12545GT genotypes with different stages of caries in children with chronic gastroduodenitis // Abstracts of European human genetics conference.— Sweden, 2010.— P.214.
12. Posthumus M., September A. V., Schwellnusa M. P., Collins M. Investigation of the Sp1-binding site polymorphism within the COL1A1 gene in participants with Achilles tendon injuries and controls // J Sci Med Sport.— 2009. — Vol.12. — P.184-189.
