CC BY
27
ЛИТЕРАТУРА
1. Бадьина, В.М. Сельскохозяйственная экология / В.М Бадьина. - Минск: БГЭУ, 2000. - С. 84.
2. Банников, А.Г. Основы экологии и охраны окружающей среды / А.Г. Банников, А.А. Вакулии, А.К. Рустамов. - М.: Колос, 1999. - С. 30.
3. Брило, И.В. Качество питьевой воды и здоровье животных / И.В. Брило, А.Ф. Трофимов, Н.А. Садомов // Ученые записки. - Витебск, 2007. - Т. 43. - Вып. 1. - С. 39-42.
4. Мiжнародны экалапчны досвед i яго выкарыстанне на Беларус // сб. навук. арт.; пад агул. рэд. У.К. Слабша. - Вщебск, 2003. - С. 275.
5. Плященко, С.И. Санитарно-гигиенические качества питьевой воды артезианских скважин, снабжающих свиноводческие фермы и комплексы Минской области / С.И. Плященко, О.И Чернов // Весщ Акадэми навук БССР. Сер. Сельскагаспадарчых навук. - 1989. - № 3. - С. 116-118.
6. Позин, С.Г. О микробиологическом критерии эпидемических водных вспышек острых кишечных инфекций. / С.Г. Позин, В.С. Голуб, В.П. Филонов [и др.] // Вода: экология и технология: 4-й Междунар. Конгресс. - М., 2000. - С. 76-78.
7. Савенок, А.Ф. Основы экологии и рациональное природопользование / А.Ф. Савенок, Е.И. Савенок. - Минск: Сер-Вит, 2004. - С. 42-49.
8. Трофимов А.Ф. Влияние качества питьевой воды на продуктивность и здоровье КРС / А.Ф. Трофимов, И.В. Брыло // Весщ НАН Беларуси Сер. аграр. навук. - 2009. -№ 4. - С. 92-96.
УДК 619:616-07:615.37:636.5:612.119
МИКРОБИОЦЕНОЗ, КЛИНИКА И ГЕМАТОЛОГИЯ ПРИМЕНЕНИЯ ЦЫПЛЯТАМ-БРОЙЛЕРАМ ПРЕБИОТИКА-ЛИЗАТА «БИФИЛИЗ-N»
А.С. БОРОЗНОВА, Л.М. ПИВОВАР УО «Витебская ордена «Знак Почета» академия ветеринарной медицины» г. Витебск, Республика Беларусь, 210026
(Поступила в редакцию 29.02.2012)
Введение. Применяемые в птицеводстве препараты оказывают влияние на микробиоценоз, морфологические и гематологические параметры организма птиц. В технологии современного промышленного мясного птицеводства широко используются пробиотики, пребиотики и симбиотики. Пробиотики (pro - для, bios - жизнь) - это препараты, представляющие собой культуры симбионтных микроорганизмов, применяемые для улучшения пищеварения и восстановления нарушенного микробного пейзажа желудочно-кишечного тракта птицы. Пребиотики - (pre - располагаю, bios -жизнь) - это препараты, представляющие собой моносахариды, олигосахариды, полисахариды, стимулирующие рост и развитие микрофлоры в желудочно-кищечном тракте птицы. Симбиотики (sym - соединяю, bios - жизнь) - это комплексные препараты, состоящие из пробиотиков, представляющих собой культуры симбионтных микроорганизмов и пребиотиков, препаратов, стимулирующих рост и развитие симбионтной микрофлоры [1-8].
Новым направлением в пребиотикотерапии и пребиотикопрофи-лактике является разработка, апробация и применение пребиотиков -лизатов, представляющих собой компоненты питательных сред и продукты лизиса микробных клеток. Они не дают побочных эффектов, обладают выраженным системным антимикотическим, иммуностимулирующим и вакциноподобным действием.
Цель работы - выяснить влияние пребиотика-лизата «Бифилиз-N» на микробиоценоз кишечника, клинические и гематологические показатели цыплят-бройлеров.
Материал и методика исследований. Работа выполнена в клинике кафедры внутренних незаразных болезней и центральной научно -исследовательской лаборатории института прикладной ветеринарной медицины и биотехнологии УО «ВГАВМ». Исследования проведены на цыплятах-бройлерах 1-40-дневного возраста, сформированных в 8 групп по принципу аналогов: две контрольные, не получавшие пре-биотик и шесть опытных групп, получавших разведенный «Бифилиз-N» энтерально и аэрозольно в дозе 5, 10, 15 мл на 100 цыплят в течение 7 суток (с 3-го по 6-й; на 14, 16, 17-й дни жизни). За всей птицей велось клиническое наблюдение, учитывались клинический статус, заболеваемость и сохранность цыплят-бройлеров. В крови на 1, 7, 14, 21, 28 и 40-й дни жизни определяли содержание гемоглобина гемоглобин-цианидным методом, эритроцитов и лейкоцитов - путем подсчета в камере Горяева, а также выводили лейкограмму. Для определения в кишечнике содержания количества жизнеспособных клеток бифидобак-терий, молочнокислых бактерий, кишечной палочки и микроскопических грибов проводили последовательные десятикратные разведения содержимого от 10-1 до 10-10 в стерильном изотоническом растворе натрия хлорида с последующим нанесением на соответствующие ага-ризованные питательные среды: Bifidobacterium agar, MRS, Эндо, Са-буро. Полученные данные обрабатывали статистически с определением достоверности средних арифметических разных выборок.
Результаты исследований и их обсуждение. Проведенными исследованиями было установлено, что большую часть жизни цыплята-бройлеры были клинически здоровыми: имели хорошее общее состояние, температуру, пульс и дыхание в пределах физиологических колебаний, охотно принимали корм и воду. С 5-го по 10-й дни жизни цыплята болели диспепсией. Гастроэнтерит у цыплят отмечался первый раз в 17-21-возрасте и второй раз в 27-39-дневном возрасте. Клинически заболевания проявлялись вялостью, снижением аппетита, повышенной жаждой, увеличенной чувствительностью и усиленной перистальтикой желудка и кишечника, частым актом дефекации, загрязнением в области клоаки жидкими, темно-коричневого цвета каловыми массами. Болели диспепсией и гастроэнтеритом все цыплята как контрольных, так и опытных групп. У цыплят опытных групп отмечались легкие формы патологии, продолжительность заболевания составила 7 дней. Цыплята контрольных групп болели тяжелее и дольше. Лечебная помощь больным не оказывалась, большинство цыплят (98,8 %) выздоравливали самостоятельно и только 2 цыпленка пали (1,3 %).
315
Уровень гемоглобина в крови однодневных цыплят-бройлеров находился в пределах от 111,5 до 143,9 г/л. С 7-го по 21-й дни жизни происходило снижение содержание гемоглобина в крови цыплят как при энтеральном, так и при аэрозольном применении. В дальнейшем к 21-му дню жизни содержание гемоглобина снижалось до 51,3± ±12,88 г/л. Показатели гемоглобина у цыплят опытных групп были значительно выше и составили от 59,3 до 103,7 г/л. В последующем, к 28-му дню жизни, происходило увеличение содержания гемоглобина в крови цыплят как контрольных, так и опытных групп. На 40-й день жизни уровень гемоглобина в крови цыплят-бройлеров колебался от 46,6 до 89,0 г/л. Следует отметить, что более высокий и стабильный уровень гемоглобина отмечался в первой опытной группе при аэрозольном применении препарата. Удержание эритроцитов в крови однодневных цыплят находилось в пределах от 1,3 до 1,5х1012/л. К 7-му дню происходило уменьшение количества эритроцитов у цыплят второй опытной группы при энтеральном применении, первой и второй опытных группах при аэрозольном применении и увеличение в остальных опытных группах. Дальнейшая динамика содержания эритроцитов имела колебательный характер с более высоким уровнем эритроцитов в третьей опытной группе - 26,7±3,33х1012 г/л при аэрозольном применении препарата. Уровень лейкоцитов в крови однодневных цыплят колебался от 14 до 52х109/л. К 7-му дню происходило повышение количества лейкоцитов в крови цыплят контрольной, первой и третьей опытных групп и снижение содержания лейкоцитов во второй опытной группе при энтеральном и аэрозольном применении до 10,0±5,77х109/л и 13,3±3,33*Ш9/л и третьей опытной группы при энтеральном применении препарата до 6,7±3,33х109/л. В последующем содержание лейкоцитов, как и эритроцитов, имело колебательный характер с более стабильным высоким уровнем лейкоцитов в первой опытной группе - 20,0±5,77х109/л при энтеральном применении и меньшим их содержанием при аэрозольном применении - 10,0±5,77 х х109/л. В лейкограмме цыплят-бройлеров находилось следующее количество псевдоэозинофилов: миелоцитов - от 3,4 до 4,4 %, юных - от 5,8 до 7,0 %, палочкоядерных - от 17,2 до 19,6 %, сегментоядерных -от 39,6 до 44,0 %, моноцитов - от 6,2 до 8,6 %, лимфоцитов - от 20,6 до 25,0 %. Среди лимфоцитов Т-клеток обнаруживалось от 16,0 до 18,8 %, а В-лимфоцитов - от 4,2 до 6,4 %. Микробиологическим исследованием установлено, что у суточных цыплят в желудочно-кишечном тракте содержались все разновидности симбионтной микрофлоры: бифидо-бактерии, лактобактерии, кишечная палочка.
К 7-му дню жизни количество бифидобактерий увеличивалось в тонком кишечнике у цыплят всех групп при энтеральном и парентеральном аэрозольном применении и в толстом кишечнике у цыплят контрольной, 1-й опытной групп при энтеральном и 2-й опытной группе при парентеральном аэрозольном применении препарата. В дальнейшем бифидобактерии исчезали из содержимого толстого кишечника у цыплят третьей опытной группы при парентеральном применении, во всех остальных группах их содержание было достаточно высоким. На 21 -й день жизни происходило уменьшение содержания
316
бифидобактерий в тонком кишечнике цыплят всех групп и в толстом кишечнике 2-й и 3-й опытных групп при энтеральном применении, а также в тонком кишечнике 1-й опытной группы и толстом кишечнике
1-й и 2-й опытных групп при парентеральном аэрозольном применении препарата. К 28-му дню отмечалось увеличение количества бифи-добактерий в содержимом тонкого кишечника у цыплят всех групп и в содержимом толстого кишечника во 2-й, 3-й опытных групп при энтеральном применении пребиотика-лизата до 13,0±0,01 ^ КОЕ/г. Уменьшение количества бифидобактерий наблюдалось в тонком кишечнике 2-й (8,7±4,35 ^ КОЕ/г), 3-й (12,1±0,53 ^ КОЕ/г) и контрольной (10,8±0,30 ^ КОЕ/г) групп, а также в толстом кишечнике 3-й (11,9±1,10^ КОЕ/г) и контрольной (10,4±0,38 ^ КОЕ/г) групп. К 40-му дню жизни происходило увеличение содержания бифидобактерий при энтеральном применении в тонком кишечнике у цыплят контрольной группы до 13,0±0,01 ^ КОЕ/г, а также в тонком кишечнике у цыплят
2-й опытной группы - до 11,8±0,55 ^ КОЕ/г и толстом кишечнике у цыплят 3-й опытной и контрольной групп - до 13,0±0,01 ^ КОЕ/г при парентеральном аэрозольном применении препарата.
К 7-му дню жизни лактобактерии исчезали из содержимого тонкого и толстого кишечника 3-й опытной группы при энтеральном применении и количественно увеличивались в тонком кишечнике у цыплят первой и второй опытных групп, в толстом кишечнике у цыплят 1-й опытной группы и в тонком кишечнике у цыплят 1-й опытной группы при аэрозольном применении препарата. На 14-й день жизни происходило уменьшение содержания лактобактерий в тонком кишечнике у цыплят 3-й опытной группы до 7,4±3,71 ^ КОЕ/г и в толстом кишечнике у цыплят 2-й опытной группы - до 8,0±3,98 ^ КОЕ/г при парентеральном аэрозольном применении. К 21 -му дню жизни наблюдалось исчезновение лактобактерий в содержимом тонкого кишечника у цыплят 1-й опытной и контрольной групп и в толстом кишечнике 3-й опытной группы при энтеральном применении. В тонком кишечнике количество их у цыплят 3-й опытной группы увеличивалось до 12,0±1,00 ^ КОЕ/г и в толстом кишечнике 2-й опытной группы - до 13,0±0,01 ^ КОЕ/г при энтеральном применении и в содержимом тонкого отдела кишечника в 1-й опытной группе - до 6,9±3,44 ^ КОЕ/г, в
3-й опытной группе - до 9,0±0,58 ^ КОЕ/г и в толстом кишечнике у цыплят 2-й опытной группы - до 11,6±0,37 ^ КОЕ/г при парентеральном аэрозольном применении. На 28-й день жизни лактобактерии исчезали в содержимом тонкого и толстого кишечника цыплят контрольной группы и в толстом кишечнике 1-й опытной группы при эн-теральном применении пребиотика-лизата, в то время как в других группах количество лактобактерий увеличивалось. К концу выращивания исчезновение лактобактерий отмечалось в тонком кишечнике у цыплят 1-й опытной и контрольной групп, а также в толстом кишечнике у цыплят контрольной группы при парентеральном аэрозольном применении препарата. В тонком кишечнике у цыплят 3-й опытной и контрольной групп и толстом кишечнике у цыплят 1-й опытной и контрольной групп при энтеральном применении, а также в толстом кишечнике у цыплят 3-й опытной группы при парентеральном аэрозольном применении пребиотика-лизата «Бифилиз-Ы» содержание лакто-бактерий увеличивалось.
Кишечная палочка у однодневных цыплят выявлялась только в тонком кишечнике. К 7-му дню жизни происходило увеличение содержания кишечной палочки в тонком и толстом кишечнике у цыплят контрольной, 1, 2 и 3-й опытных группах при энтеральном применении, а также в толстом кишечнике у цыплят контрольной и 2-й опытной групп при парентеральном аэрозольном применении пребиотика-лизата и снижение ее уровня в тонком кишечнике у цыплят 1-й и 3-й опытных групп. На 14-й день жизни наблюдалось исчезновение кишечной палочки из содержимого тонкого кишечника у цыплят всех групп как при энтеральном, так и при парентеральном аэрозольном применении препарата. В толстом кишечнике содержание кишечной палочки у цыплят 2-й опытной группы увеличивалось до 11,4± ±1,57 ^ КОЕ/г при энтеральном применении и у цыплят 3-й опытной группы - до 8,9±0,57 ^ КОЕ/г при парентеральном аэрозольном применении, а в остальных группах содержание кишечной палочки снижалось. К 21-му дню жизни наиболее выраженное увеличение кишечной палочки отмечали в толстом кишечнике у цыплят 2-й опытной группы - до 12,0±0,99 ^ КОЕ/г (Р<0,001) и 3-й опытной группы - до 11,4±1,54 lg КОЕ/г (Р<0,01). В остальных группах показатели ее были ниже, а в содержимом тонкого и толстого кишечника контрольных групп кишечная палочка не была обнаружена. На 28-й день жизни полное исчезновение кишечной палочки наблюдалось в тонком кишечнике у цыплят всех групп и толстом кишечнике у цыплят 3-й опытной группы при энтеральном применении и в тонком кишечнике цыплят контрольной группы при аэрозольном применении. Увеличение количества кишечной палочки отмечалось в толстом кишечнике у цыплят всех групп при парентеральном аэрозольном применении препарата и у цыплят контрольной и 1-й опытной групп при энтеральном применении препарата до 8,7±0,48 ^ КОЕ/г. На 40-й день жизни происходил рост количества кишечной палочки в тонком кишечнике 1-й, 2-й опытных и контрольной групп до 11,9±1,13 ^ КОЕ/г, а также в толстом кишечнике контрольной, 2-й и 3-й опытных групп при энте-ральном применении. При парентеральном применении препарата в тонком кишечнике 1-й опытной группы и толстом кишечнике 1-й и 2-й опытных групп содержание кишечной палочки снижалось до 5,2±2,63 ^ КОЕ/г, а у цыплят остальных групп кишечная палочка исчезала из содержимого кишечника.
Микроскопические грибы в содержимом тонкого и толстого кишечника у цыплят-бройлеров нами не были обнаружены. Вместо их на среде Сабуро отмечался рост грамотрицательных палочковидных микроорганизмов, образующих желтовато-белые, круглые, мажущие колонии. К 7-му дню жизни происходило увеличение их содержания в толстом отделе кишечника у цыплят всех групп и в тонком отделе кишечника у цыплят 1-й опытной и контрольной групп - от 10,9± ±2,08 ^ КОЕ/г до 13,0±0,01 ^ КОЕ/г при энтеральном применении, а также в тонком кишечнике у цыплят 1-й опытной и контрольной групп и в толстом кишечнике у цыплят 1-й, 2-й и контрольной групп при парентеральном аэрозольном применении. В остальных группах
318
количество этих микроорганизмов уменьшалось. К 14-му дню содержание палочковидных микомедиафилов снижалось в тонком кишечнике у цыплят контрольной и 1-й опытной групп и в толстом кишечнике 1-й и 2-й опытных групп как при энтеральном, так и при парентеральном аэрозольном применении пребиотика-лизата. На 21-й день жизни снижение содержания микомедиафилов отмечалось только в толстом кишечнике у цыплят третьих опытных групп как при энтеральном, так и при парентеральнои аэрозольном применении. В дальнейшем к 2840 дням жизни содержание микомедиафилов в тонком и толстом кишечнике цыплят опытных и контрольных групп при энтеральном применении уменьшалось, а у цыплят 1-й опытной и контрольных групп при парентеральном аэрозольном применении пребиотика-лизата «Би-филиз-N» - увеличивалось.
Заключение. Микробиоценоз здоровых, больных диспепсией и гастроэнтеритом цыплят-бройлеров представлен бифидобактериями, лак-тобактериями и кишечной палочкой. Пребиотик-лизат «Бифилиз-N» оказывает влияние на клинические, гематологические и микробиологические показатели цыплят в зависимости от дозы и способа применения препарата. Наиболее выраженные изменения в микробиоценозе, клиническом и гематологическом статусе наблюдались в 1-й опытной группе как при энтеральном, так и при парентеральном аэрозольном применения пребиотика-лизата «Бифилиз-N». Впервые в кишечнике цыплят-бройлеров обнаружены грамотрицательные, палочковидные микроорганизмы, способные культивироваться на среде для роста грибов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Борознова, А.С. Пробиотики и пребиотики для профилактики желудочно-кишечных заболеваний в птицеводстве /А.С. Борознова // Актуальные проблемы интенсивного развития: сб. науч. тр. «БГСХА». - Горки, 2011. - Вып. 14. - Ч. 1. - С. 206-214.
2. Зыкин, Л.Ф. Клиническая микробиология для ветеринарных врачей: учеб. пособие для студентов вузов по спец. «Ветеринария» / Л.Ф. Зыкин, З.Ю. Хапцев; ред. Т.С. Молочаева; Международная ассоциация «Агрообразование». - М.: Колос, 2006. - 96 с.
3. Пробиотики, пребиотики, гербиотики, симбиотики / Н.А. Попков [и др.] // Корма и биологически активные вещества. - Минск: Бел. наука, 2005. - С. 556-572.
4. Степаненко, И.П. Влияние пробиотического препарата стрептобифида-форте на иммуногенез и формирование кишечного микробиоценоза цыплят: автореф. дис. ... канд. биол. наук / И.П. Степаненко // Всероссийский НИИ контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов. - М., 2001. - 21 с.
5. Стимуляция естественной резистентности, иммунной реактивности и продуктивности цыплят-бройлеров пребиотиком «Бифилиз-N» /А.С. Борознова, Л.М. Пивовар // Аграрное производство и охрана природы: Х Международная науч. -практ. конф. молодых ученых, 26-27 мая 2011 г. - Витебск, 2011. - С. 17-18.
6. Тимошко, М.А. Микрофлора пищеварительного тракта молодняка сельскохозяйственных животных / М.А. Тимошко. - Кишинев: Штиинца, 1990. - 169 с.
7. Colonization of gastrointestinal tract of turkeys after probiotics and prebiotics application / M. Kacaniova [et al] // Slovak j. of animal science. - 2006. - Vol. 39. - № 3. - P. 155-159.
8. Effect of housing systems and probiotic supplementation on methane production and body composition of crossbred calves / S.N.Rokde [et al.] // Indian J. anim. Sc. - 2001. - Vol. 71. -№ 5. - P. 468-471.
9. Fuller, R. The chicken gut microflora and probiotic supplements / R. Fuller // Poultry Sc. - 2001. - Vol. 38. - № 3. - P. 189-196.
