CC BY
63
УДК 615.216.2
А. П. ГАЛЕНКО-ЯРОШЕВСКИЙ12, Г. А. АЛФЕРОВА12, В. А. АНИСИМОВА3
МЕСТНОАНЕСТЕЗИРУЮЩИЕ СВОЙСТВА ПРОИЗВОДНОГО ИМИДАЗОБЕНЗИМИДАЗОЛА РУ-1203
1Кафедра фармакологии Адыгейского филиала Кубанского государственного медицинского университета,
2Краснодарский филиал Южного бюро РАМН,
3НИИфизической и органической химии Ростовского государственного университета
Одной из важнейших задач современной фармакологии является создание высокоактивных обезболивающих лекарственных средств, в том числе местных анестетиков [6].
Известно, что местные анестетики не всегда проявляют достаточной глубины и продолжительности обезболивающий эффект, могут оказывать различные побочные действия [2, 11].
Недавно показано, что производные имидазобен-зимидазола способны проявлять местноанестезирующие свойства [3, 4].
Цель работы - выявить местноанестезирующие свойства у производного имидазобензимидазола с лабораторным шифром РУ-1203, определить направленность дальнейших исследований.
Материалы и методы
Опыты проведены на белых нелинейных 75 мышах-самцах и 20 крысах-самцах, 48 морских свинках и 26 кроликах (52 глаза) массой 0,018-0,034, 0,215-0,245, 0,310-0,365 и 2,6-3,5 кг соответственно.
В основу проведенных исследований положены методические указания по изучению местноанестезирующей активности фармакологических веществ [5, 10].
Поверхностную анестезию исследовали в экспериментах на роговице глаз кроликов с использованием метода Ренье-Валета [8], при этом параллельно изучали возможное раздражающее действие по Эе^юаг [13].
Инфильтрационную анестезию исследовали в опытах на морских свинках [5, 12].
Исследуемые вещества (включая препарат сравнения лидокаин) при поверхностной и инфильтра-ционной анестезии применяли в широком диапазоне концентраций, находили средние эффективные концентрации (ЭК50), позволяющие дать сравнительную количественную оценку местноанестезирующей активности испытуемых веществ. Кроме того, учитывали временные интервалы всех этапов обезболивания: наступление анестезии (НА), начало (НПА) и окончание полной анестезии (ОПА), при которой индексы Ренье, Бюльбринг и Уэйд равны соответственно 1300,0 (в случаях поверхностной анестезии) и 36,0 (при инфильтрационной анестезии), окончание анестезии (ОА), то есть общую ее продолжительность.
Спинальную анестезию изучали в экспериментах на крысах «бескровным» методом [5]. При этом измене-
ние болевого порога определяли путем механического раздражения корня хвоста. В качестве препарата сравнения был взят маркаин.
Острую токсичность исследовали (определяли среднюю летальную дозу - ЛД50) в опытах на мышах при подкожном введении [7].
Статистическую обработку данных, учитываемых в градированной форме, проводили по М. Л. Беленькому [1] и с помощью таблиц Н. Н.Самойлова [9]. Учет результатов исследований, выраженных в альтернативной форме, определение ЛД50, ЭК50, границ доверительных интервалов и терапевтических индексов (ЛД50/ЭК50) или широты терапевтического действия (ШТД) осуществляли по методам, описанным В. Б. Прозоровским [7] и М. Л. Беленьким [1].
Результаты исследования
Установлено, что в условиях поверхностной анестезии в опытах на роговице глаз кроликов РУ-1203 проявляет более значимый обезболивающй эффект, чем лидокаин: индексы Ренье для первого вещества (в 0,25, 0,5 и 1%-ном растворах) составили 210,7±60,8, 1078,8±63,3 и 1204,7±48,8, для второго (в 1, 2 и 5%-ном растворах) - 297,9±20,7, 354,8±17,8 и 676,9±21,3 соответственно. Соединение РУ-1203, как и лидокаин, в исследованных растворах не оказывает раздражающего действия на конъюнктиву.
Временные интервалы НА и НПА при инстилляции в конъюнктивальный мешок глаза растворов РУ-1203 (0,5 и 1%) и лидокаина (1, 2 и 5%) были в пределах 2 и 3 мин соответственно; исключение составляет 0,25%-ный раствор РУ-1203, для которого первый показатель был равен 3-5 мин, второй - 5-8 минут. Время ОПА и ОА под влиянием 0,25, 0,5 и 1%-ного растворов РУ-1203 составляет 12,5 и 31,7, 34,2 и 66,7, 55,8 и 75,0 мин, а при использовании 1, 2 и 5%-ного растворов лидокаина - 5,8 и 18,8, 7,4 и 22,5, 25,6 и 35,4 мин
соответственно (табл. 1).
По местноанестезирующей активности при сопоставлении ЭК50, выраженных в мМ, и терапевтических индексов РУ-1203 соответственно в 20,1 раза более значимо и в 9,6 раза имеет большую ШТД, чем лидокаин (табл. 2).
При инфильтрационной анестезии в экспериментах на морских свинках минимальной обезболивающей концентрацией для РУ-1203 является 0,0156%, для лидокаина - 0,0625%; индексы Бюльбринг и Уэйд равны 16,5 (14,3 + 18,7) и 9,8 (7,2 12,4) соответственно.
Полную анестезию (индекс Бюльбринг и Уэйд для
Таблица 1
Сравнительная характеристика временных параметров действия РУ-1203 и лидокаина при поверхностной анестезии в опытах на роговице глаз кроликов
Соединение и препарат Концент- рация, НА, мин НПА, мин ОПА1, мин ОА1, мин
РУ-1203 0,25 3-5 5-8 12,5 + 0,90 31,7 + 1,77
6
0,5 2 3 34,2 + 1,77 66,7 + 5,30
1 2 3 55,8 + 7,07* 75,0 + 7,95*
Лидокаин 1 2 3 5,8 + 0,66 18,8 + 1,33
2 2 3 7,4 + 0,66 22,5 + 0,66
5 2 3 25,6 + 1,33 35,4 + 1,99
Представлены средние арифметические, вычисленные из 6 (для РУ-1203) и 8 (для лидокаина) опытов, со стандартной ошибкой средней.
*р < 0,001 - относительно лидокаина, взятого в 1%-ной концентрации.
Таблица 2
Сравнительная активность РУ-1203 и лидокаина при поверхностной анестезии в опытах на кроликах
Соединение и препарат Местноанестезирующая активность Токсичность 0,5%-ного раствора при подкожном введении мышам Терапевтический индекс
ЭК50 Относи- тельная ЛД50 Относи- тельная Абсолютный Относи- тельный
% мМ мг/кг мМ/кг
РУ-1203 0,39 (18) 9,3 20,1 210,5 (40) 0,500 0,47 539,7 9,6
(0,28 ^ 0,54) (204,9 ^ 216,3)
Лидокаин 5,05 (24) 187,0 1,0 258,1 (35) 1,056 1,0 56,5 1,0
(3,87 ^ 6,57) (271,9 ± 299,0)
Примечание: в скобках: круглых - доверительные границы при р = 0,05, квадратных - количество опытов.
Таблица 3
Сравнительная активность РУ-1203 и лидокаина при инфильтрационной анестезии в опытах на морских свинках
Соединение и препарат Местноанестезирующая активность Токсичность 0,5%-ного раствора при подкожном введении мышам Терапевтический индекс
ЭК501 Относи- тельная ЛД50 Относи- тельная Абсолютный Относи- тельный
% мМ мг/кг мМ/кг
РУ-1203 0,023 (18) 0,55 6,95 210,5 (40) 0,500 0,47 9152,2 3,30
(0,015 4- 0,035) (204,9 4 216,3)
Лидокаин 0,103 (18) 3,82 1,0 285,1 (35) 1,056 1,0 2765,3 1,0
(0,080 4 0,133) (271,9 4 299,0)
Примечание: в скобках: круглых - доверительные границы при р = 0,05, квадратных - количество опытов.
53
Таблица 4
Сравнительная активность 0,5%-ных растворов РУ-1203 и маркаина при спинальной анестезии в опытах на крысах
Соединение и препарат Количество животных Наступление анестезии, мин Полная (100%-ная) анестезия, мин Продолжительность анестезии, мин
РУ-1203 10 (3) 0,25-0,5 43,3 ± 1,78* 76,0 ± 7,25* (1)
Маркаин 10 (2) 0,25-0,5 31,4 ± 0,76 44,5 ± 3,18 (1)
*р < 0,001.
Примечание: в скобках: круглых - количество крыс, у которых анестезия не наступила, квадратных - количество погибших животных.
которой равен 36,0) РУ-1203 вызывает в 0,125%-ном растворе, лидокаин - в 0,5%-ном.
Сопоставление ЭК50, выраженных в мМ, показало, что РУ-1203 в 6,95 раза более активно, чем лидокаин. По ШТД РУ-1203 в 3,3 раза превосходит лидокаин (табл. 3).
В условиях спинальной анестезии в опытах на крысах РУ-1203 и маркаин, взятый для сравнения, индуцируют обезболивающий эффект спустя 0,25-0,5 мин после их введения в спинномозговой канал. Глубина анестезии через 5 мин (для обоих веществ) и в течение последующих 40-45 мин (для РУ-1203) и 30-35 мин (для маркаина) составляет 100%. Длительность обезболивающего действия под влиянием РУ-1203 равна 76,0, при использовании маркаина - 44,5 мин, т. е. по этому показателю первое вещество в 1,7 раза превосходит второе (табл. 4). Следует отметить, что при использовании 0,5%-ных растворов РУ-1203 и маркаина анестезия не наступила у 30 и 20% крыс соответственно, количество погибших животных в каждой группе составило 10%. Соединение РУ-1203, подобно маркаину, вызывает слабовыраженное угнетение дыхания в течение 7-15 мин.
Таким образом, при поверхностной и инфильтраци-онной анестезии в опытах соответственно на роговице глаз кроликов и коже морских свинок РУ-1203 по активности и ШТД значительно превосходит лидокаин.
При спинальной анестезии в экспериментах на крысах РУ-1203 проявляет выраженный обезболивающий эффект, превосходя по длительности действия маркаин.
Соединение РУ-1203 может быть рекомендовано для дальнейшего углубленного изучения в условиях всех трех видов анестезии: поверхностной, инфильтрационной и спинальной.
Поступила 21.09.2006
ЛИТЕРАТУРА
1. Беленький М. Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. Л., 1963. 152 с.
2. Галенко-Ярошевский А. П., Ерохина Л. В., Пономарев В. В. Фармакологические свойства некоторых традиционных и современных местноанестезирующих препаратов (обзор) // Ку-
банский научный медицинский вестник. 2000, № 4. С. 14-17.
3. Галенко-Ярошевский А. П., Ерохина Л. В., Пономарев В. В. Перспективы поиска и создания новых местноанестезирующих средств // Кубанский научный медицинский вестник. 2000, № 4. С. 21-26.
4. Галенко-Ярошевский А. П., Ильиченко К. И., Пономарев В. В. Активность производных имидазобензимидазола РУ-1119 и РУ-1111 в условиях проводниковой и эпидуральной анестезии // Бюл. эксперим. биол. и мед. 2002. Приложение 3. С. 85-88.
5. Игнатов Ю. Д., Червякова И. В., Васильев Ю. Н., Галенко-Ярошевский А. П., Жуков В. Н. Методические указания по изучению местноанестезирующей активности фармакологических веществ // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под общей редакцией члена-корреспондента РАМН, профессора Р У. Хаб-риева. 2-е изд., перераб. и доп. М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. С. 364-392.
6. Машковский М. Л. Лекарственные средства. 15-е изд., перераб. и доп. М.: Медицина, 2000. Ч. 1. С. 371-382.
7. Прозоровский В. Б. Использование метода наименьших квадратов для пробит-анализа кривых летальности // Фарма-кол. и токсикол. 1962. Т. 25, № 1. С. 115-119.
8. Прянишникова Н. Т., Шаров Н. А. Тримекаин. Фармакология и клиническое применение. Л.: Медицина, 1967. 239 с.
9. Самойлов Н. Н. Таблицы значений средней ошибки и доверительного интервала средней арифметической величины вариационного ряда. Томск, 1970. 63 с.
10. Хабриев Р У. (ред.) Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. 2-е изд., перераб. и доп. М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. 832 с.
11. Цибуляк В. Н., Цибуляк Г. Н. Травма. Боль. Анестезия. М., 1994. 224 с.
12. Bulbring E., Wajda J. Biological comparison of local anaesthetica // J. pharmacol. and exp. therap. 1945. Vol. 85, № 1. P. 78-84.
13. Setnicar I. Tolerance indices of some phenoxyethylamino derivatives with local anaesthitic properties // Arzneim. Forsch. 1966. Bd. 16, № 5. Р 623.
A. P. GALENKO-YAROSHEVSKY, G. A. ALPHEROVA, V. A. ANISIMOVA
LOCAL ANESTETIC PROPERTIES OF IMIDA-ZOBEZIMIDAZOL DERIVATIVE RU-1203
It has been showed that in surface and infiltration anesthesia in experiments, carrying out on the cornea of rabbits eyes and on the skin of guinea-pig accordingly, RU-
1203 overcomes lidocaine on the activity and the width of therapeutic action.
In spinal anesthesia in the experiments on rats RU-1203 reveals obvious anesthetic effect and overcomes marcaine on the length of activity.
Combination RU-1203 can be recommended for further thorough studying in condition of all the 3 variaties of anesthesia: surface, infiltration and spinal.
А. П. ГАЛЕНКО-ЯРОШЕВСКИЙ1, 3. Ш. ТЛИШЕВА1, X. П. ТАХЧИДИ3, Б. Э. МАЛЮГИН3, И. А. ВАРЛАШКИНА12
МЕСТНОАНЕСТЕЗИРУЮЩАЯ АКТИВНОСТЬ ФТОРСОДЕРЖАЩЕГО ПРОИЗВОДНОГО ИМИДАЗО[1,2-а]БЕНЗИМИДАЗОЛА РУ-1274
1 Кафедра фармакологии Адыгейского филиала Кубанского государственного медицинского университета,
2 Краснодарский филиал Южного бюро РАМН,
3ФГУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С. Н. Федорова Росздрава»
Поиск и создание высокоактивных местнообезболивающих лекарственных средств является одной из важнейших задач современной фармакологии [9, 19, 20].
Многие местные анестетики - новокаин, дикаин, лидокаин и другие - не всегда проявляют достаточной глубины и продолжительности обезболивающего действия, могут вызывать различные побочные явления [7, 17, 22].
В последние годы показано, что среди производных имидазо[1,2-а] бензимидазола выявлены вещества, проявляющие высокую местноанестезирующую активность в условиях терминального, инфильтраци-онного, проводникового, спинномозгового (субарах-ноидального) и эпидурального методов обезболивания [2-6].
Известно, что введение атома фтора в молекулы гетероциклических веществ позволяет получить соединения с принципиально новым уровнем физиологической активности и фармакокинетическими свойствами, обеспечивающими высокую биодоступность. Повышение активности фторированных соединений связывают с возрастанием их липофильности и высокой электроотрицательностью атомов фтора [14, 15, 18].
Учитывая вышеизложенное, представлялось целесообразным провести исследования местноанестезирующих свойств имеющегося в нашем распоряжении производного имидазо[1,2-а]бензимидазола с лабораторным шифром РУ-1274, являющегося фторированным аналогом ранее исследованного вещества РУ-720 [2].
Цель работы - провести исследования местноанестезирующих свойств фторсодержащего производного имидазо[1,2-а]бензимидазола РУ-1274.
Материалы и методы
Работа выполнена на 100 белых нелинейных мы-шах-самцах, 48 морских свинках, 66 кроликах (132 глаза) обоего пола массой 0,018-0,032, 0,310-0,385 и 2,5-3,2 кг соответственно.
Поверхностную анестезию изучали в экспериментах на роговице глаз кроликов с использованием метода Ренье-Валета [8, 11], при этом параллельно исследовали возможное раздражающее действие по Бе^юаг [21].
Инфильтрационную анестезию изучали в опытах на коже морских свинок [8, 16].
Проводниковую анестезию исследовали в экспериментах на седалищном нерве кроликов [11].
Эпидуральную анестезию изучали в опытах на кроликах [8, 13].
Острую токсичность исследовали (определяли среднюю летальную дозу - ЛД50) в экспериментах на мышах при подкожном введении [10].
В качестве препаратов и вещества (близкого по химической структуре к РУ-1274) сравнения были взяты тетракаин (дикаин), маркаин и РУ-720.
Статистическую обработку данных проводили по М. Л. Беленькому [1] и с помощью таблиц Н. Н. Самойлова [12]. Определение ЛД50, средних эффективных концентраций (ЭК50) и терапевтических индексов или широты терапевтического действия (ЛД50/ЭК50) осуществляли по В. Б. Прозоровскому [10] и М. Л. Беленькому [1].
Результаты исследования
Установлено, что в условиях поверхностной анестезии в опытах на роговице глаз кроликов индексы Ренье при использовании РУ-1274 и взятых для сравнения тетракаина и РУ-720 в 0,0156, 0,0312, 0,0625, 0,125, 0,25, 0,5 и 1%-ном растворах составляют: для РУ-1274 - 196,2, 563,6, 730,4, 959,6, 1121,6, 1300,0 и 1300,0,
УДК 615.216.2+547.785.5
