CC BY
289
МЕХАНИЗМЫ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ САНАЗОЛА
Н.В. Чердынцева, ИА Щепеткин, И.В. Кондакова, В.Т. Кагия*
НИИ онкологии Томского научного центра СО РАМН, Россия Инвестиционный Центр Кинки, г. Киото 606, Япония *
Саназол был впервые разработан как гипок-сический радиосенсибилизатор для снижения дозы облучения при лучевой терапии онкологических больных. Начиная с 1960-х годов в качестве радиосенсибилизаторов были предложены различные нитроимидазолы, среди которых наиболее востребованными оказались метронидазол и мисонидазол. Тем не менее из-за высокой нейротоксичности нитроимидазолы не получили широкого клинического применения. При разработке более эффективных радиосенсибилизаторов с наименьшим побочным действием был синтезирован ряд нитросоединений, имеющих другую кольцевую структуру, таких как тиазолы, тетразолы и пиридины [57]. Среди них наиболее эффективным оказался препарат АК-2123, получивший название «саназол».
Клинические испытания саназола подтвердили его высокую радиосенсибилизирующую активность, особенно при внутриопухолевом введении [19, 25, 26]. Дальнейшие экспериментальные исследования выявили, что саназол обладает не только радиосенсибилизирующим, но и химиосенсибилизирующим, противоопухолевым, антиметастатическим и иммуномодулирующим действием [14, 32]. Кроме того, на основе саназола синтезирован неинвазивный гипоксический зонд 99тТс-циклам АК-2123 для определения степени гипоксии тканей при ишемии миокарда, головного мозга и других органов, а также опухолевой ткани. Соотношение содержания "тТс-циклама АК-2123 в опухолевой и мышечной тканях (О/М) было 8,5, что сравнимо с другими известными гипоксическими зондами, такими как 99™Тс-(У) БЫ8Л (3.07), 99тТс-цитрат (5.29) и 201Т1С1 (3.29) [45]. Предполагается, что использование в онкологии гипоксических зондов по-
зволит в будущем перейти к более обоснованной индивидуализации противоопухолевой терапии [9].
Являясь нитроазольным соединением, саназол относится к классу нитрогетероциклических биоредуктивных агентов, молекулярный механизм цитотоксического действия которых состоит в образовании высокореакционных метаболитов, которые ковалентно связываются с нуклеиновыми кислотами, небелковыми тиолами, белками, ненасыщенными липидами и другими макромолекулами [9].
Структурная формула саназола (Ы-(2'-ме-токсиэтил)-2- [3"-нитро-1 "-триазолил] ацетамида) представлена на рис. 1.
Потенциал одноэлектронного восстановления саназола в водной среде, определенный методом пульсивного радиолиза, оценивается в — 0,33 ± 0,02 В [29]. Его растворимость в воде при 30 °С составляет 3,8 г; коэффициент распределения в системе октанол/вода равен 0,14—0,17.
Саназол оказывает радиосенсибилизирующий эффект при его введении в дозе 20—30 мг/кг массы перорально, внутривенно или интратумо-рально. Концентрация в сыворотке крови в первые минуты после внутривенного вливания взрослому человеку 2 г саназола может превышать 0,85 мМ (или 0,2 мг/мл), а при внутриопу-холевом введении концентрация в опухоли и регионарных тканях достигает 2,1—3,0 мМ (или 0,5— 0,7 мг/мл) [28]. В то же время противоопухолевое и антиметастатическое действие саназола проявляется при значительно более низких концентрациях (0,001-1,0 мг/кг массы) [32].
Свободнорадикальные механизмы действия саназола
В настоящее время показано, что для проявления как терапевтического, так и побочного действия нитрогетероциклических соединений необходимо их ферментативное или неферментативное восстановление [12]. Ферментативное восстановление биоредуктивных агентов в клетках организма может катализироваться внутриклеточными флавопротеиновыми редуктазами, включая ферменты, локализованные в цитозоле и микросомах, а также во внешней митохондриальной мембране [44]. Одноэлектронное восстановление биоредуктивных агентов выявлено такими ферментами, как липоамиддегидрогеназа, адре-нодоксин редуктаза, трипанотион редуктаза, КАБ(Р)Н-шггохроМ Р-450-редуктаза, N0-
синтаза, изоферменты цитохрома Р-450 (сур2Ь,, сур2с, сурЗс), цитохром с-редуктаза и NЛDH-дегадрогёназа дыхательной цепи, альдегидокси-даза, ксантиндегидрогеназа и ксантиноксидаза [8, 20, 37, 39, 41, 58-60]. Одноэлектронное восстановление саназола обнаружено такими ферментами, как ксантиноксидаза и NADPH-цитохром Р-450-редуктаза [6, 54, 56].
Процесс восстановления саназола (^N02) одноэлектронными редуктазами и сопутствующую генерацию аниона супероксида (01~) в условиях гипоксии можно представить в следующем виде:
Я-Ш2—е-> Я-Ш2"-е-2Н+-* Я-Ш -е-»
-» Я-ЫСТ-А 2н+_> ЯЖН0Н (1)
R-N02" + О2 -* R-N02 + О2- (2)
Мы предполагаем, что биологическая активация саназола в организме состоит в одно-
электронном восстановлении его электронноакцепторной группы (нитрогруппы) до радикала нитроаниона. В гипоксических условиях нитрорадикалы быстро окисляются с образованием О2~, который затем подвергается спонтанной или ферментативной дисмутации с продукцией гидроксильного радикала (ОН) и перекиси водорода (Н2О2). В нормооксических условиях саназол не способен эффективно конкурировать с кислородом в качестве акцептора электронов [6].
Нами было показано, что в течение 3-часовой инкубации саназол переводит оксигемоглобин в метгемоглобин. Возможный биохимический механизм данного процесса может состоять в восстановлении саназола до его нитрозопроизводных, диссоциации N0-группы и образовании свободного оксида азота (N0). При инкубации саназола с опухолевыми клетками мастоцитомы Р-815 и лимфомы БЬ-4 было подтверждено образование в среде нитрит-ионов, что косвенно свидетельствует о продукции в среде N0.
Восстановление саназола до его радикалов может также происходить неферментативно. Для ряда биоредуктивных агентов было показано неферментативное восстановление, например с участием аскорбиновой кислоты [50], катехоламинов [51] или гипоксантина [40]. Хотя активные промежуточные метаболиты биоредуктивных агентов, по-видимому, могут мигрировать из одних клеток в соседние, тем не менее локальное внутриклеточное восстановление и последующая гаптеноконъюгация с макромолекулами является основным механизмом токсического действия фармакологических агентов с электронноакцепторными свойствами.
Саназол способен взаимодействовать с гидратированным электроном (еЛ-) и радикалом СОг~, образующимися при радиолизе воды, с продукцией нитрорадикалов саназола [29]. Возможно, что радикалы саназола взаимодействуют непосредственно с ДНК опухолевых клеток. Изучение механизма радиосенсибилизирующего действия саназола на грибках 8ассИагошусе8 сегеу181ае показало, что оно преимущественно обусловлено повреждением ДНК, а не нарушением активности системы ее репарации [47]. Тем не менее не исключается, что радиосенсибилизирующее действие саназола может быть связано с влиянием на метаболизм опухолевых клеток.
Модулирующее действие саназола на эффективность противоопухолевой терапии
Феномен усиления терапевтического действия противоопухолевых препаратов описан для ряда биоредуктивных агентов. Так, мисонидазол усиливает действие мелфалана [i2], тирапазамин потенцирует действие цисплатина ^б, i7, 43]. Подобный сенсибилизирующий эффект также описан для саназола в отношении других препаратов. Показано, что саназол усиливает повреждающее действие адриамицина, винкристина и цикло-фосфана на опухолевые клетки in vitro [24, б!], но не влияет на противоопухолевое действие цисплатина [42]. В экспериментах на животных с перевиваемыми опухолями установлено, что саназол в низких дозах (G,i—iG,G мг/кг) значительно повышал эффективность средних и низких доз циклофосфана; при этом наиболее выраженный эффект наблюдался в отношении процесса мета-стазирования, а не первичного опухолевого узла. Так, у мышей с карциномой легких Льюис и меланомой В^б использование саназола в сочетании с низкими дозами циклофосфана практически полностью подавляло метастазирование в легкие [3, 35].
На модели экспериментально полученных лекарственно-устойчивых штаммов лейкоза Р388, характеризующихся высокой экспрессией генов множественной лекарственной устойчивости, было выявлено, что саназол в дозах i,G—iG,G мг/кг повышает чувствительность опухолевых клеток к митомицину С. Авторами было отмечено, что величина модулирующего эффекта саназола зависит от исходной чувствительности штамма к митомицину С и ассоциирована с наличием в клетках гена сорцина (цитозольный Са^-связы-вающий белок) [2i]. Это позволило предположить, что действие саназола определяется его влиянием на активный транспорт Са2+. Предполагается также, что саназол может усиливать проникновение алкилирующих противоопухолевых препаратов через поры в ядерной мембране и тем самым облегчать их взаимодействие с ДНК опухолевых клеток [3i].
Способность саназола в низких дозах повышать эффективность цитостатической терапии может быть связана с его влиянием на процессы мембранного ионного транспорта, проявлением самостоятельного противоопухолевого и антиме-тастатического эффекта, регуляцией активности
эффекторных клеток иммунной системы, моду-И ляцией опухолевых антигенов с повышением их иммуногенности.
Некоторые исследователи выявили увеличение саназолом противоопухолевой активности локальной гипертермии [15, 38, 46, 49], однако другие авторы не смогли обнаружить такого эффекта саназола [36, 42].
Противоопухолевое и антиметастатическое действие саназола
В экспериментах по изучению химиосенсибилизирующей активности саназола было показано, что он оказывает также существенное самостоятельное ингибирующее влияние на метастазирование карциномы легких Льюис и меланомы В-16, однако при этом подавление роста первичного опухолевого узла было отмечено только у мышей с меланомой в умеренной степени (около 20%) [32]. Впоследствии на модели меланомы В-16 эти авторы показали, что противоопухолевое и антиметастатическое действие саназола в низких и ультранизких концентрациях (от 10 мг/кг до 1СИ мг/кг) зависит от схемы его введения. Десятидневное курсовое введение препарата перед трансплантацией опухолевых клеток приводило к умеренному торможению роста первичной опухоли, частоты и интенсивности метастазирования (на 20—25%), в то время как его использование в течение 10 дней после опухолевой трансплантации было более эффективным. Наиболее выраженный терапевтический эффект наблюдался в том случае, когда саназол применяли как до, так и после трансплантации клеток меланомы В-16: торможение роста первичного опухолевого узла составило 50—60%, частоты метастазирования -60—70%, интенсивности метастазирования — 8098% [32, 33].
Высокоэффективное антиметастатическое действие саназола было также показано на моде-1 ли экспериментального метастазирования в печень аденокарциномы кишечника АКАТОЛ, которое было индуцировано внутриселезеночным введением опухолевых клеток. Курсовое введение саназола в дозе 10 мг/кг со 2-го по 9-й день после опухолевой трансплантации на 80—90% подавляло появление метастатических колоний в печени; по эффективности это соответствовало применению 5-фторурацила в терапевтической дозе [34].
Таким образом, введение саназола в низких дозах мышам-опухоленосителям приводило к торможению роста опухоли и ингибированию метастазирования. При этом в эксперименте in vitro мы показали, что саназол не оказывает прямого повреждающего действия на клетки меланомы В^б и не подавляет их пролиферацию. Этот факт, наряду с более эффективным действием препарата на процесс метастазирования, чем на рост первичной опухоли, свидетельствует об участии эффекторных клеток иммунной системы организма в реализации биологической активности саназола.
Иммуномодулирующее действие саназола
Выше мы уже отмечали, что противоопухолевое и антиметастатическое действие саназола может быть обусловлено его модулирующим влиянием на активность клеток иммунной системы. Нами было показано, что повышение терапевтической эффективности циклофосфана при его сочетанном использовании с саназолом у мышей с карциномой легких Льюис было связано с усилением активности естественных киллерных клеток и цитостатических эффекторов селезенки [2].
На модели меланомы В^б у мышей мы показали, что наибольший антиметастатический эффект саназола при его введении до и после трансплантации опухоли ассоциировался с максимальной цитостатической активностью перитонеальных макрофагов, лимфоцитов селезенки, а также с их высокой литической активностью [4].
Тестирование влияния саназола на иммуно-компетентньге клетки при курсовом введении препарата здоровым мышам (i,G—iG,G мг/кг, внутрибрюшинно) выявило его стимулирующий эффект на функциональную активность перитонеальных макрофагов и естественную киллерную активность спленоцитов на фоне повышения клеточности селезенки [i3]. Саназол также существенно усиливал пролиферативную активность лимфоцитов [3, 27], которая служит одним из важных интегральных показателей, характеризующих способность к адекватному иммунному ответу на антигенные раздражители. Известно, что регуляция функциональной активности им-мунокомпетентных клеток осуществляется цито-кинами, которые продуцируются в процессе клеточной активации. Мы показали, что саназол ин-
дуцирует экспрессию целого ряда ключевых им-мунорегуляторных цитокинов — интерлейкина-1, фактора некроза опухоли-Сі;, интерферона-ОС [3]. Все эти данные указывают на возможность регуляции саназолом не только противоопухолевой активности клеток естественной резистентности, но и клеток, участвующих в формировании специфического иммунного ответа.
Наши исследования также показали, что саназол в концентрациях от 0,6 до 10 мМ приводит к повышению уровня спонтанной генерации активных форм кислорода (АФК) перитонеальными макрофагами, которая регистрировалась с помощью флуоресцентного красителя дихлор-флуоресцеиндиацетата. Максимальный эффект наблюдался при концентрациях саназола 1,25 и 2,5 мМ. В то же время было зарегистрировано ингибирующее действие саназола на продукцию АФК макрофагами, стимулированными форбол-12-миристат-13-ацетатом (ФМА).
Ранее нами было показано, что саназол подавляет ФМА-стимулированную продукцию АФК нейтрофилами человека, регистрированную в реакции люминолзависимой хемилюминесценции [5, 52]. Ингибирующее действие саназола на ФМА-стимулированную продукцию АФК нейтрофилами и макрофагами может быть связано с подавлением процесса экспрессии и сборки компонентов КАБРИ-оксидазы, а также с проявлением у этого соединения свойств перехватчика свободных радикалов. Другой механизм ингибирующего действия саназола на ФМА-стимулированную продукцию АФК фагоцитами может быть обусловлен подавлением активности CaA/Mg24" АТФазы [35]. В то же время исследование активности нейтрофилов и моноцитов на 5— 7-й дни у больных, оперированных по поводу рака желудка с последующим интраоперационным облученнием (10 Гр) при внутривенном введении саназола (1,2 г/м2), не выявило достоверных изменений функциональной активности этих клеток по сравнению с показателями до лечения [55].
Возможный механизм действия саназола в низких дозах
Как уже было отмечено выше, Н.В. Коновалова с соавт. [33] показали, что максимальное противоопухолевое действие саназола на модели меланомы В-16 наблюдается при его введении в
дозе 1 мг/кг ежедневно по следующей схеме: в течение 10 дней до инокуляции опухолевых клеток и 10 дней после. Введение саназола только до или только после инокуляции клеток опухоли менее эффективно. По этой схеме было исследовано противоопухолевое действие 18 биоредуктивных агентов, в том числе производных 2-нитроимидазола, 2-метил-5-нитроимидазола и 3-нитротриазола [33]. Подавление роста опухоли препаратами варьировало от 10 до 61%. Механизм противоопухолевого действия этих соединений, по-видимому, может быть феноменологически сходен с реакцией контактной чувствительности на высокореакционные низкомолекулярные соединения, являющейся вариантом гиперчувствительности замедленного типа.
Анализируя с этих позиций результаты работ Н.В. Коноваловой с соавт. [32, 33], можно предположить, что введение саназола до инокуляции опухолевых клеток приводит к сенсибилизации организма, а последующее введение препарата после трансплантации опухоли вызывает развитие воспалительной реакции и цитотоксического действия на опухолевые клетки клеточных факторов (Т-киллеры) иммунной системы вследствие селективного образования конъюгатов «саназол— опухолеассоциированный антиген» в гипоксиче-ской опухолевой ткани. Действительно, трансплантация опухоли меланомы В-16 путем введения под кожу мыши 5х10б клеток в объеме 0,2 мл должна создавать зону локальной гипоксии и приводить к селективному накоплению в этом участке электронно-акцепторных соединений. Связывание саназола с макромолекулами гипок-сической ткани в организме показано с помощью
99'Рт'
недавно синтезированного препарата Т с-цик-
лам АК-2123 [45]. Антиметастатическая активность саназола может быть объяснена тем, что опухолевые клетки, несущие эпитопы неоантигенов, на этапах метастазирования более доступны для действия цитотоксических иммунных факторов, чем в зоне первичной опухоли.
Исходя из этого, можно предположить, что один из механизмов противоопухолевого действия саназола при его использовании в низких дозах состоит в индукции иммунного ответа на опухоль в организме хозяина в результате образования «противоопухолевой вакцины in vivo» путем конъюгации активированного саназола с антигенами опухолевой ткани. Новые антигенные де-
терминанты способны индуцировать синтез антител и формирование специфических Т-киллеров. Для этого гаптены должны презентироваться на поверхности лазматической мембраны после внутри- или внеклеточного образо- j вания. Более подробно данная гипотеза изложена •, нами в работах [7, 53].
Саназол, однако, может модулировать активность опухолевых или иммунокомпетентных кле-; ток в результате связывания с другими, отличными от молекул главного комплекса гистосовместимости, поверхностными или внутриклеточными макромолекулами, которые осуществляют рецепторные функции и участвуют в физиоло-гаческом процессе регуляции экспрессии генов. На основе данных о противоопухолевом и анти-метастатическом действии различных нитроазо-лов (в том числе саназола) может быть построена математическая модель количественной взаимосвязи структура—активность [1, 30]. Подобные работы позволяют выявить роль различных факторов молекулярного распознавания (электронная плотность, гидрофобные характеристики и объем заместителей), а также участие отдельных фрагментов молекул нитроазолов в проявлении указанных видов биологической активности. Найденные значения импакт-факторов для нитроазолов могут быть использованы в дальнейшем при de novo дизайне соединений с противоопухолевым действием.
Модуляция терапевтического действия саназола
Значительную роль в механизме защиты клеток от биоредуктивных агентов и АФК, генерируемых при аутооксилении их нитрорадикалов, играют эндогенные антиоксиданты глутатион и токоферол, а также антиоксидантные ферменты, такие как супер оксиддисмутаза, каталаза, глутати-онпероксидаза, глутатионредуктаза и др. Мы предполагаем, что, модулируя активность антира-дикальной ферментативной системы, можно, с одной стороны, повышать эффективность прямого противоопухолевого воздействия саназола, а с другой — снижать его побочное действие. В частности, показано, что витамин Bi и аскорбиновая кислота повышают радиосенсибилизирующую активность саназола в отношении бактерий Е. coli (AB 1157) [22, 23]. Дальнейшее направление исследований в этом плане может быть наме-
чено путем анализа механизма действия других нитрогетероциклических соединений. Было показано, что саназол значительно снижает концентрацию восстановленного глутатиона в опухолевых клетках HeLa [62]. Увеличение расхода глУга-тиона клетками может происходить как в результате его взаимодействия с радикалами нитрогетероциклических соединений, так и с Н2О2 в реакции, катализируемой глутатионпероксидазой. Анион-радикалы нитрогетероциклических соединений слабо взаимодействуют с глутатионом [48]. Более активно с глутатионом связываются нитрозопроизводные [18]. Показано, что ферментативное связывание нитрозофуранов с глутатионом катализируется глутатионтрансферазой. В ходе этой реакции освобождается нитрит-ион [11]. Возможно, что по сходному механизму происходит генерация нитрит-ионов саназолом.
Одноэлектронное восстановление нитросоединений в аэробных условиях может приводить к быстрому истощению в клетках NADPH вследствие его потребления МАО(Р)Н~редуктазами и глутатионпероксидазой. Снижение в клетках динамической концентрации NADPH вызывает увеличение уровня окисленного глутатиона [10] и снижение скорости глутатионзависимого процесса детоксикации этих агентов.
Заключение
Проведенный в настоящей работе обзор литературных данных и собственных результатов показал, что саназол (препарат АК-2123) обладает как радиосенсибилизирующим, так и противоопухолевым, антиметастатическим и иммуномодулирующим действием. В высоких дозах саназол проявляет радиосенсибилизирующую активность. Он усиливает повреждающее действие целого ряда цитостатических препаратов (адриами-цин, винкристин, митомицин С и циклофосфан) на опухолевые клетки in vitro. Способность саназола в низких дозах повышать эффективность цитостатической терапии in vivo, кроме этого, может быть связана с его влиянием на процессы мембранного ионного транспорта (активный транспорт Са2), проявлением самостоятельного противоопухолевого и антиметастатического эффекта, регуляцией активности эффекторных клеток иммунной системы, модуляцией опухолевых антигенов с повышением их иммуногенно-
сти. Терапевтическая эффективность саназола может быть положительно модулирована другими соединениями, в частности агентами с антиок-сидантными свойствами.
При введении саназола в организм происходит его биологическая активация путем восстановления электронно-акцепторной группы (нитрогруппы) до радикала нитроаниона, с участием ферментов ксантиноксидазы и цитохром-Р-450-редуктазы. В гипоксических условиях нитрорадикалы быстро окисляются с образованием Ог~, который затем подвергается спонтанной или ферментативной дисмутации с продукцией АФК. Кроме того, нитрозопроизводные саназола могут быть источником оксида азота, цитотоксические и регуляторные свойства которого хорошо известны. В нормооксических условиях саназол не способен эффективно конкурировать с кислородом в качестве акцептора электронов. Проявление того или иного биологического эффекта саназола во многом зависит от дозы, схемы и способа введения препарата, а также от степени ок~ сигенации в различных тканях организма.
ЛИТЕРАТУРА
1. Хлебников А.И., Щепеткин И.А., Ахмеджанов P.P. Построение модели количественной взаимосвязи структу ра-активность для нитроазолов с противоопухолевой ак тивностью // Хим.-фарм. журн. 2001. Т. 35, № 6. С. 25-29.
2. Чердынцева Н.В., Кокорев О.В., Коновалова КВ., Кагия В.Т. Усиление цитотоксической и цитостатической активности спленоцитов и макрофагов радиосенсибилиза тором АК-2123 у мышей с карциномой легких Льюис при терапии циклофосфаном // Эксперим. онкол. 1997. Т. 19. С. 333-337.
3. Чердынцева Н.В. Иммунологические механизмы противоопухолевого действия модификаторов биологиче ских реакций различной природы: Автореф. дис. ... д-ра биол. наук. Иркутск, 1999. 48 с.
4. Чердынцева Н.В., Кокорев О.В., Малиновская Е.А. и др. Модуляция противоопухолевой активности перитонеальных макрофагов и спленоцитов радиосенсибилизато ром АК-2123 // Онкология. 2000. Т. 2-4. С. 272-274.
5. Щепеткин И.А. Влияние ионизирующего излуче ния и радиосенсибилизатора АК-2123 на люминолзависи-мую хемилюминесценцию нейтрофилов человека // Рад. биол. радиоэкол. 1998. № 4. С. 601-608.
6. Щепеткин И.А. Генерация нитрорадикалов сана зола ксантиноксидазой // Биохимия. 1998. Т. 63. С. 16211629.
7. Щепеткин И.А. Гипоксические биоредуктивные агенты. Возможные иммунные и рецепторопосредованные механизмы противоопухолевого действия // Эксперим. клин. фарм. 1999. Т. 62, № 3. С. 67-74.
8. Щепеткин И.А. Свободнорадикальные механизмы биологического действия нитрофуранов // Антибиотики и химиотер. 2000. № 3. С. 31-35.
9. Airley R.A., Monaghan J.E., Stratford J. Hypoxia and disease: opportunities for novel diagnostic and therapeutic prodrag strategies // Pharm. J. 2000. Vol. 264. P. 666-673.
10. Akerboom T.P.M., BikerM., Sies H. The relationship of biliary glutathione disulfide efflux and intracellular glutathione disulfide content in perfused rat liver // J. Biol. Chem. 1982. Vol. 257. P. 4248-4256.
11. Asaoka K, Takahashi K. Glutathione conjugation of nitro compounds by monkey glutathione s-transferases // Bio-chem. Pharm. 1989. Vol. 38. P. 2977-2983.
12. Brown J. M. Targeting bioreductive agents to tumors: is it necessary to manipulate blood flow? // Int. J. Rad. Biol.
1991. Vol. 60. P. 231-236.
13. Cherdyntseva N.r Kokorev O., Konovalova N.. Kagiya V. Effect of radioserisitizer AK-2123 on the activity of natural killer cells and macrophages in B-16 melanoma bearing mice // Sensitization Newsletter. 1998. Vol. 5, № 1. P. 2-6.
14. Cherdyntseva N. V., Schepetkin LA., Afanas'ev S.G. et al. The immune system parameters in gastric cancer patients treated with intraoperatrive radiotherapy and AK-2123 admini stration (in vivo and in vitro) // Sensitization Newsletter. 1996. Vol. 3, № 1.P. 4-7.
15.Davi P.U., Rao B.S.S. Effect of AK-2123, radiation and hyperthermia on transplantable mouse tumor // Radiosensitization Newsletter. 1990. Vol. 9, №> 4. P. 12-14.
16. Doherty N., Hancock S.L., Kaye S. et al. Muscle cramping in phase I clinical trials of tirapazamine (SR4233) with and without radiation // Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 1994. Vol. 29. P. 379-382.
n.Dorie M.J., Brown J.M. Tumor-specific, schedule-dependent interaction between tirapazamine (SR4233) and cis-platin // Cancer Res. 1993. Vol. 53. P. 4633-4636.
18. Eyer P. Reactions of nitrozobenzene with reduced glu tathione // Chem. Biol. Interact. 1979. Vol. 24. P. 227-239.
19. Garcia-Angulo A., Kagiya T. Intratumoral and pa-rametrial infusion of a 3-nitrotriazole (AK-2123) in the radio therapy of the uterine cervix cancer: Stage H-III - Preliminary positive results // Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 1992. Vol. 22. P. 589-591.
20. Garner A.P., Paine M.J.I., Rodriguez-Crespo I. et al. Nitric oxide synthases catalyze the activation of redox cycling and bioreductive anticancer agents // Cancer Res. 1999. Vol. 59. P. 1929-1934.
21. Goncharova S.A., Rajewskaya T.A., Konovalova N.P., Kagiya TV. Nitrotriazole AK-2123 enhances mitomycin С ac tivity in mice bearing multidrag-resistant tumors // J. Chemo-ther. 2001. Vol. 13. P. 635-640.
22. Heinrich E., Getoff N. Influence of vitamin Bl on sanazole activity under irradiation. A study in vitro // Antican cer Res. 2002. Vol. 22. P. 927-929.
23. Heinrich E., Getoff N. Radiation induced effect of the vitamins С, Е and beta-carotene on sanazole efficiency. A study in vitro // Anticancer Res. 2000. Vol. 20. P. 3615— 3618.
24. Hori Y., Zhou B. Modification effects of AK-2123 on adriamycin to mouse leukemic cells // Gan-To-Kagaku-Ryoho.
1994. Vol. 21. P. 1697-1700.
25.Huan L.C., Hua B.Y. Clinical pharmacokinetic study and sensitive effect of AK-2123 // Int. J. Radiat. Oncol. Biol, Phys. 1994. Vol. 29. P. 607-610.
26. Imamura M., Edgren M.R., Murata T. et al. Radiosen-' sitization with a 3-nitrotriazole (AK-2123) // Int. J. Oncol.
1995. Vol. 6. P. 841-845.
27. Ju 0.7, Zang J., Lin S. Effect of AK-2123 on the immune system in mice // Radiosensitization Newsletter. 1986. Vol. 5, №1. P. 1-2.
28. Kagiya V.T. Radiomodification in cancer therapy. The first Kazakhstan-Japan Symposium. 1996. Sept., 17-20. Almaty, 1996. P. 51.
29. Kapoor S., Mathew R., Huilgol N.G. et al. Redox reactions of sanazole (AK-2123) in aqueous solutions: a pulse radiolysis study // J. Radiat. Res. (Tokyo). 2000. Vol. 41.
P. 355-366.
30. Khlebnikov A.I., Schepetkin I.A., Kwon B.S. Modeling of the anticancer action for radical derivatives of nitroazoles: quantitative structure-activity relationship (QSAR) study // Cancer Biother. Radiopharm. 2002. Vol. 17. P. 193-203.
31. Konovalova N.P., Diatchkovskaya R.F., Volkova L.M. et al. Novel action of radiosensitizer AK-2123 as a chemosen-sitizer of anticancer drugs in anti-leukemia activity in vivo // Radiosensitization Newsletter. 1991. Vol. 10. № 3. P. 1-3.
32. Konovalova N.P., Diatchkovskaya R.F., Volkova L.M., Kagiya T. Anti-tumor effect of AK-2123 by ultra low dose daily-administration in B16 melanoma bearing mice // Sensitization Newsletter. 1996. Vol. 3, № 2. P. 3-8.
33. Konovalova N.P., Volkova L.M., Kagiya V.T. Side chain structure of nitroazoles and anti-tumour activities in B16 ! melanoma bearing mouse by ultra low dose administration // Sensitization Newsletter. 1996. Vol. 3, № 4. P. 3-5. .
34. Konovalova N.P., Volkova LM., Tatyanenko L.V. et al Comparative inhibitory effect of radiosensitizer AK-2123 and 5-FU on experimental hepatic metastases // Sensitization Newsletter. 1997. Vol. 4, №> 2. P. 3-6.
35. Konovalova N.P., Volkova L.M., Tatyanenko L.V. et al. Inhibitory effect of radiosensitizer AK-2123 on experimental hepatic metastases and Ca2+ active transport // Neoplasma. 1997. Vol. 44. P. 361-365.
36. Kozin S. V., Hasegava Т., Kozina L. V. et al. The use of a hypoxic cell sensitizer AK-2123 gave no improvement in thermoradiotheraspy combined with hydralazine // Int. J. Hy-perthemria. 1996. Vol. 12. P. 771-777.
37. Kramers P.G. Studies on the induction of sex-linked recessive lethal mutations in Drosophila melanogaster by ni-troheterocyclic compounds // Mutat. Res. 1982. Vol. 101. P. 209-236.
38. Kvnugita N., Mei N., Norimura Т., Kagia V.T. Modifi cation of radiothermo-chemotherapy by AK-2123 and hydra lazine in tumor bearing mice // Indian J. Exp. Biol. 1996. Vol. 34. P. 838-841.
39.Kutcher W.W., McCalla D.R. Aerobic reduction of 5-nitro-2-furaldehyde semicarbazone by rat liver xanthine dehydrogenase // Biochem. Pharmacol. 1984. Vol. 33. P. 799-805.
40. Lax D. Generation of furazolidone radical anion and its inhibition by glutathione // Biochem. Med. Metab. Biol.
1992. Vol. 48. P. 56-63.
41. Marcinkeviciehe J., Cenas N.. Kulys J. et al. Nitroreductase reactions of the NADPH:adrenodoxin reductase and
the adrenodoxin complex // Biomed. Biochim. Acta i99G. Vol. 49. P. Іб7-І72.
42. Mitsuhashi N., Sakurai H., Takahashi T. et al. Does AK-2i23 (Senazole) have sensitizing effects on radiation, cis-platin and hyperthermia under aerobic conditions in vitro? // Anticancer Res. І998. Vol. i8. P. 34б3-34б8.
Ai.Monaghan J.E., Stratford l.J. Overcoming cisplatin resistance with the bioreductive drug tirapazamine // Br. J. Cancer. І998. Vol. 78. (Suppl. i). P. 4І.
44. Moreno S.N.J., Mason R.P., Docampo R. Reduction of nifurtimox and nitrofurantoin to free radical metabolites by rat liver mitochondria. Evidence of an outer membrane-located nitroreductase // J. Biol. Chem. І984. Vol. 259. P. 6298-63G5.
45. Murugesan S., Shetty S.J., Noronha O.P. et al. Tech-netium-99m-cyclam AK 2І23: a novel marker for tumor hy-poxia//Appl. Radiat. Isot. 2GGi. Vol. 54. P. 8І-88.
46. Osinsky L, Bubnovskaja /., Ganusevich I. Influence of radiosensitizer AK-2i23 on pH and thermosensitivity of tumor tissue // Radiosensitzation Newsletter. І99G. Vol. 9, № 4. P. І2-І4.
47. Pasupathy K., Nair C.K., Kagiya T.V. Effect of a hypoxic radiosensitizer, AK 2І23 (Sanazole), on yeast Sac-charomyces cerevisiae II J. Radiat. Res. (Tokyo). 2GGi. Vol.42. P. 2І7-227.
48. Polnaszek C.F., Peterson F.J., Holtzmann J.L., Mason R.P. No detectable reaction of the anion radical metabolite of nitrofurans with reduced glutathione or macro-molecules // Chem. Biol. Interact. І984. Vol. 5І. P. 2б3-27І.
49. Rao B.S., Devi P.U. Multimodality treatment using AK-2i23, hydralazine, radiation and hyperthermia on a transplantable mouse tumor // Indian J. Med. Res. І99б. Vol. iG4. P. І82-І89.
5G. Rao D.N.R., Harman L, Motten A. et al. Generation of radical anions of nitrofurantoin, misonidazole, and metronoda-zole by ascorbate // Arch. Biochem. Biophys. І987. Vol. 255. P. 4І9-427.
51. Rao D.N.R., Mason R.P. Generation of nitro radical anions of some 5-nitrofurans, 2- and 5-nitroimidazoIes by norepinephrine, dopamine, and serotonin // J. Biol. Chem. І987. Vol. 2б2. P. ІІ73І-ІІ73б.
52. Schepetkin LA. Suppression by radiosensitizer AK-2І23 of early phprbol myristate acetate-stimulated chemilumin
nescence response of human neutrophils induced by gamma-irradiation // Cancer Biother. Radiopharm. І998. Vol. І3. P. 453-45б.
53. Schepetkin LA. Immune response to haptenized tumor antigen as possible mechanism of anticancer action of hypoxic bioreductive agents at low doses // Cancer Biother. Radio pharm. І999. Vol. І4. P. 29І-29б.
54. Schepetkin LA. Lucigenin luminescence elicited by microsomes and its modulation by nitroazole compounds // IUBMB Life. І999. Vol. 48. P. 499-5G4.
55. Schepetkin LA., Cherdyntseva N., Afanasjev S. et al. The luminol-amplified chemiluminescence of neutrophils and monocytes in patients with gastric cancer after intraoperative radiotherapy using radiosensitizer sanazole // Cancer Biother. Radiopharm. І999. Vol. І4. P. 397-4G2.
56. Schepetkin LA., Cherdyntseva N.V., Kagiya V.T. Sana zole as substrate of xanthine oxidase and microsomal NADPH-cytochrome P45G reductase // Pathophysiology. 2GGi. Vol. 8. P. ІІ9-І27.
57. Shibamoto Y., Sakano K., Kimura R. et al. Radiosensitization in vitro and in vivo by 3-nitrotriazoles // Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. І98б. Vol. І2. P. Юб3-Юбб.
58. Smyth G.E., Orsi B. Nitroreductase activity of NADH dehydrogenase of the respiratory redox chain // Biochem. J. І989. Vol. 257. P. 859-8б3.
59. Tatsumi K., Kitamura S., Yoshimura H. Reduction of nitrofuran derivatives by xanthine oxidase and microsomes. Isolation and identification of reduction products // Arch. Bio chem. Biophys. І97б. Vol. І75. P. І3І-І37.
6G. Wang J., Biedermann C.R., Wolf C.R., Brown J.M. Metabolism of the bioreductive cytotoxin SR 4233 by tumor cells: enzymatic studies // Br. J. Cancer. І993. Vol. б7. P. 321— 325.
61. King C, Li В., Li M. et al. Chemosensitization of sanazole for ADM, VCR in vitro and for Cyclphosphamide in vivo // Abstracts of the iGth International conference on chemical modifiers of cancer treatment. Clearwater, Florida, USA, І998. P. І3І.
62. Zhou H.-Q., Wang L.-M., Dong M. et al. The role of glutathione in the radiosensitive effect induced by treating HeLa cells with sanazole // Bull. Acad. Mil. Med. Sci. 2GGi. Vol. 25. P. 246-25G.
Поступила i7.G4.G3
