Маркеры иммунного статуса при трихинеллезе и их сдвиги под воздействием экзогенных витаминов а и с Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

Биохимия, биотехнология и диагностика

УДК 619:616.995.132.6:636:612.017

МАРКЕРЫ ИММУННОГО СТАТУСА ПРИ ТРИХИНЕЛЛЕЗЕ И ИХ СДВИГИ ПОД ВОЗДЕЙСТВИЕМ ЭКЗОГЕННЫХ ВИТАМИНОВ А И С

А.В. ЗАНГИНЯН соискатель

Институт молекулярной биологии НАНРА, тел. 37410-24-36-09, e-mail: hzang@mail.ru

При трихинеллезе происходят существенные изменения в иммунитете и устойчивости организма на уровне параметров, определяющих и клеточный и гуморальный иммунный ответ. Экзогенное введение витаминов А и C до и после заражения трихинеллами нормализует иммунный статус животных, повышает их резистентность к заражению.

Ключевые слова: трихинеллез, витамины, резистентность, иммунитет.

Изучению патогенеза гельминтозов человека и животных посвящено большое число работ, тем не менее многие молекулярно-клеточные аспекты этой сложной проблемы остаются еще неясными, что в значительной степени затрудняет изыскание действенных профилактических и терапевтических мер по борьбе с отмеченными заболеваниями. Присутствие в организме патогена индуцирует нарушение регуляции клеточной активности и экспрессии генов, а также нейро-иммунно-гуморальные сдвиги [1, 2, 7, 9, 10, 12, 13].Одним из наименее изученных вопросов в этом аспекте является выяснение того, какие патологические процессы являются результатом непосредственного, первичного воздействия гельминтов, а какие обусловлены развитием вторичных осложнений на фоне общей интоксикации организма хозяина. Наблюдают также существенные сдвиги в характерном для нормы равновесии окислительно-восстановительных реакций, что в частности приводит к снижению активности ферментов, участвующих в синтезе витаминов. Происходит торможение образования витамина А в стенках тонких кишок. Дефицит витамина А влечет за собой и дефицит витамина С, других витаминов и микроэлементов - меди, молибдена, марганца, кобальта и йода. Снижается их всасываемость через стенки желудка и тонких кишок [5]. Все это приводит к снижению общих адаптивных возможностей организма, функциональной активности иммунной системы и соответственно сопротивляемости организма инфекциям.

Учитывая вышеизложенное, задачей настоящего исследования было изучение иммунологической реактивности и резистентности организма животных при трихинеллезе на уровне клеточных и гуморальных компонентов иммунитета и воздействия на эти параметры экзогенно вводимых витаминов А и С.

Материалы и методы

Эксперименты проводили на 20 белых беспородных крысах-самцах массой тела 130-150 г, зараженных Trichinella spiralis. Животных разделили на 4 группы по 5 крыс в каждой. В первую группу входили интактные, незараженные трихинеллами животные, вторую группу составляли животные, экспериментально зараженные трихинеллами, третью группу -

животные, экспериментально зараженные трихинеллами, которым до и после заражения вводили витамин А; в четвертую группу входили животные, экспериментально зараженные трихинеллами, которым до и после заражения вводили витамин С.

Крыс заражали трихинеллезом путем однократного введения per os личинок T. spiralis (30 личинок трихинелл на 1 г массы тела животного). Личинок трихинелл получали из обработанной искусственным желудочным соком мышечной ткани зараженных трихинеллами крыс.

Витамин А вводили подкожно (по 1000 МЕ в день в форме раствора ретинола ацетата в масле) в два этапа: 1) в течение 5 дней за 7-8 дней до заражения животных трихинеллами; 2) в течение 5 дней через 2-3 дня после заражения. Аналогичным способом и по той же схеме вводили витамин С (по 25 мг в день в форме 5%-ного раствора).

Пробы крови брали натощак из хвостовой артерии на 14 и 35-е сутки после заражения. Часть пробы (цельная кровь) использовали для определения фагоцитарной активности лейкоцитов, Т-лимфоцитов и эозинофилов. Из другой части получали сыворотку, которую использовали для определения общей гемолитической активности комплемента, лизоцимной и бактерицидной активности. На 35-е сутки после заражения крыс вскрывали под эфирным наркозом и выделяли у них фрагменты мышц бедра. В мышечной ткани под микроскопом определяли содержание личинок трихинелл. Этот параметр использовали для оценки интенсивности заражения животных трихинеллами и степени их приживаемости в организме хозяина.

Фагоцитарную активность лейкоцитов крови [4], выражали в процентном соотношении активных, участвовавших в фагоцитозе сегменто-ядерных нейтрофилов крови, к их общему числу. Количество эозинофилов определяли по содержанию этой субпопуляции лейкоцитов в общей популяции лейкоцитов [6], тимусзависимые лимфоциты - по методике Mendes [12] с использованием феномена розеткообразования с бараньими эритроцитами, бактерицидную и лизоцимную активность сыворотки крови -фотоколориметрическим методом [3], титр комплемента - по Андрееву (1975).

Результаты и обсуждение

Уже через 14 сут после заражения в крови животных отмечали статистически достоверные сдвиги параметров, характеризующих иммунологическую реактивность и резистентность организма по сравнению с незараженными животными (табл. 1, 2). На 35-е сутки после заражения отмеченные нарушения были более выраженными. У зараженных животных, которым до и после заражения вводили витамины А и С, отмеченные сдвиги были менее выражены, чем у зараженных животных, не получавших эти витамины.

1. Показатели иммунологической реактивности организма крыс (%) при _ экспериментальном трихинеллезе _

Группа животных Число эозинофилов Титр комплемента Лизоцимная активность

Через 14 сут после заражения

Первая Вторая Третья Четвертая 2,70±0,42 39,60±3,81* 8,94±1,1* 6,56±0,53* 0,072±0,004 0,072±0,004 0,088±0,006** 0,070±0,003 20,80±0,82 18,88±0,55 20,34±1,14 20,66±0,62

Через 25 сут после заражения

Первая Вторая Третья Четвертая 2,66±0,629 6,28±0,78* 13,64±1,65* 8,10±0,85* 0,066±0,004 0,076±0,044** 0,130±0,021** 0,110±0,01* 21,60±0,57 12,62±1,16* 17,78±0,70* 16,98±1,14*

*P < 0,001, **P < 0,05 по сравнению с контролем.

2. Показатели иммунологической реактивности организма крыс (%) при _ экспериментальном трихинеллезе _

Группа животных Бактерицидная активность Фагоцитарная активность Т-лимфоциты

Через 14 сут после заражения

Первая Вторая Третья Четвертая 67,40±2,79 56,20±4,03** 69,60±1,98 70,04±3,66 64,40±2,70 78,00±2,85* 67,76±6,94 65,80±1,78 49,54±0,83 50,58±1,92 52,16±2,02 51,18±1,32*

Через 25 сут после заражения

Первая Вторая Третья Четвертая 61,60±1,6 31,00±3,70 67,40±1,98 55,92±4,0 64,40±1,89 49,88±1,85* 67,70±1,86 53,34±3,75 51,00±1,40 26,88±3,05* 47,32±0,94* 44,38±2,34*

*Р < 0,001, **Р < 0,05 по сравнению с контролем.

Нормализующее влияние витаминов на показатели иммунологической реактивности организма крыс проявлялось также и на уровне параметра, характеризующего интенсивность развития трихинелл и соответственно сопротивляемость организма развитию заболевания. Число личинок, обнаруженных в 1 г мышц зараженных животных, получавших витамин А или С, оказалось в среднем в 1,5 раза ниже, чем у зараженных животных, не получавших эти витамины (табл. 3).

3. Приживаемость трихинелл в организме крыс

Группа животных Количество личинок трихинелл в

в 1 г мышц

Первая -

Вторая 36,4±4,93*

Третья 24,2±2,55*

Четвертая 25,0±2,06*

*Р < 0,05 по сравнению с контролем.

Выводы

Патогенез трихинеллеза характеризуется значительным изменением иммунологической реактивности и резистентности организма на уровне параметров, характеризующих как клеточные так и гуморальные компоненты иммунного ответа.

Экзогенное введение витамина А или С до и после заражения трихинеллами в значительной степени нормализует иммунный статус животных, способствует повышению сопротивляемости их организма и снижению интенсивности инвазии

Литература

1. Астафьев Б.А. Гельминтозы человека (эпидемиология и борьба). - М.: Медицина, 1975. - 287 с.

2. Астафьев Б.А. Иммунологические проявления и осложнения гельминтозов. - М.: Медицина, 1987. - 124 с.

3. Бухарин О.В., Созыкин В.Л. Факторы естественного иммунитета. -Оренбург, 1979. - С. 43-45.

4. Гостев В.С., Петрушина С.А., Сааков А.К. Вопросы питания // Тр. АМН СССР. - 1950. - Т. 13, Вып. 2. - С. 110-116.

5. Давтян Э.А. О неспецифических факторах патогенеза гельминтозов и нормализующей роли микроэлементов // Биол. журнал Армении. - 1968. Т. XXI, № 21.

6. Кассирский И.А., Алексеев Г.А. Клиническая гематология. - М.: Издательская группа URSS, 1955. - С. 720.

7. Озерецковская Н.Н., Зальнова Н.С., Тумольская Н.И. Клиника и лечение гельминтозов. - Л.: Медицина, 1985. - 183 с.

8. Плященко С.И., Сидоров В.Т. Естественная резистентность организма животных. - Л.,1979. - 184 с.

9. Gottstein B., Pozio E., Nockler K. // Clin. Microbiol. Rev. - 2009. - V. 22, N 1. - P. 127-145.

10. Helluy S, Holmes J.C. // Can. J. Zool. - 1990. - V. 68. - P. 1214-1220.

11. Kavaliers M., Podesta R. // Can. J. Zool. - 1988. - V. 66. - P. 2653-2657.

12. Mendes N.F., Tolnai M.E.A., Silveira N.R.A. et al. Technical aspects of the rosette test used to detect human complement receptor (B) and sheep erythrocyte-binding (T) limphocytes // J. Immunol. - 1973. - V. 111. - P. 260-367.

13. MettrickD.F., Cho C.H. // Rev. Canad. de Zoologie. - 1982. - V. 60, N 5. - P. 790-797.

14. Stibbs H.H. // J. Parasitol. - 1984. - V. 70, N 3. - P. 428-432.

Blood markers of immunity in trichinellosis and their changes under the influence of exogenic vitamins A and C

H.V. Zanginyan

There are significant changes in immunity and resistance of the organism to infection at trichinellosis. Exogenous injection of vitamins A and C before and after infection by Trichinella spiralis normalizes the immune status of animals, raises them resistance to infection.

Keywords: trichinellosis, vitamins, resistance, immunity.