Лечение и профилактика сальмонеллеза голубей и животных зоопарков с использованием фаготерапии и пробиотика Treatment and Prevention of Salmonellosis in Pigeons and Zoo Animals Using Phagotherapy and Probioti Текст научной статьи по специальности «Сельское и лесное хозяйство»

Научная статья на тему 'Лечение и профилактика сальмонеллеза голубей и животных зоопарков с использованием фаготерапии и пробиотика' по специальности 'Сельское и лесное хозяйство' Читать статью
Pdf скачать pdf Quote цитировать Review рецензии
Авторы
Коды
  • ГРНТИ: 68 — Сельское и лесное хозяйство
  • ВАК РФ: 06.00.00
  • УДK: 63
  • Указанные автором: УДК: 619: 616.98: 579.842.14

Статистика по статье
  • 1615
    читатели
  • 101
    скачивания
  • 0
    в избранном
  • 0
    соц.сети

Аннотация
научной статьи
по сельскому и лесному хозяйству, автор научной работы — Пименов Николай Васильевич, Субботин Владимир Викторович, Данилевская Наталия Владимировна

Эффективное избирательное подавление сальмонелл в организме и лечение сальмонеллеза достигается совместным применением активных бактериофагов и пробиотика. Метод селективной деконтаминации показал эффективность в условиях лабораторий, голубятен, зоопарков. Для лечения и борьбы с сальмонеллезом птиц, птиц и животных в зоопарках перспективно широкое внедрение метода, основанного на совместном применении фагов и пробиотика.

Abstract 2013 year, VAK speciality — 06.00.00, author — Pimenov Nikolay Vasilievich, Subbotin Vladimir Viktorovich, Danilevskaya Nataliya Vladimirovna

The effective selective inhibition of salmonellosis in the organism and salmonellosis treatment are accomplished by combinedactive bacteriophages and probiotic usage. The method showed efficiency in laboratories, as well as in dovecotes and zoos. A broad introduction of selective decontamination based on the combined usage of bacteriophages and probiotics is perspective for treatment and control of bird's and animal salmonellosis.

Научная статья по специальности "Сельское и лесное хозяйство" из научного журнала "Российский ветеринарный журнал. Мелкие домашние и дикие животные", Пименов Николай Васильевич, Субботин Владимир Викторович, Данилевская Наталия Владимировна

 
Читайте также
Читайте также
Рецензии [0]

Похожие темы
научных работ
по сельскому и лесному хозяйству , автор научной работы — Пименов Николай Васильевич, Субботин Владимир Викторович, Данилевская Наталия Владимировна

Текст
научной работы
на тему "Лечение и профилактика сальмонеллеза голубей и животных зоопарков с использованием фаготерапии и пробиотика". Научная статья по специальности "Сельское и лесное хозяйство"

АКТУАЛЬНАЯ ТЕМА
Лечение и профилактика сальмонеллеза голубей и животных зоопарков с использованием фаготерапии и пробиотика
Н.В. Пименов1, В.В. Субботин2, Н.В. Данилевская1
1 Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина.
2 Евразийская экономическая комиссия (Москва).
Ключевые слова: бактериофаги, лечение, пробиотик на основе лакто- и бифидофлоры, сальмонеллез, селективная деконтаминация
Сокращения: ВОЗ — Всемирная организация здравоохранения, ЛД — летальная доза, мкр. кл. — микробные клетки, РФ — Российская Федерация, СНГ — Содружество Независимых Государств
Сальмонеллез — опасный для человека зооноз, вызываемый энтеробактериями рода Ба1топв11а, продолжает оставаться серьезной социально-экономической проблемой большинства стран мира. В РФ и странах СНГ за последние 15 лет заболеваемость сальмонеллезом людей и птицы возросла в 7 раз. По заключению экспертов ВОЗ, альмонеллезная инфекция не имеет себе равных по сложности эпизоотологии, эпидемиологии и трудностям борьбы с ней.
Нозологически различают первичные сальмонеллезы, если болезнь с выраженным клиническим проявлением вызвана серовариантами сальмонелл, адаптированными для данного вида восприимчивого организма. S. typhimurium и S. enteritidis выделяли в клинических случаях сальмонеллеза у бобров, косуль, ланей, других представителей дикой фауны и зоопар-ковой культуры. Эти же сероварианты являются самыми распространенными в случаях возникновения сальмонеллеза у собак, кошек, морских свинок, хомяков, черепах. Адаптированными для молодняка крупного рогатого скота являются Salmonella enteritidis, S. typhimurium, S. dublin; для поросят — S. choler-aesuis, S. typhimurium, S. enteritidis, S. typhisuis; для овец — S. abortusovis, S. enteritidis; для лошадей — S. abortusequi, S. typhimurium; для цыплят — S. enteri-tidis, S. gallinarum-pullorum, S. typhimurium; для водоплавающей птицы — S. typhimurium; для голубей, декоративных и экзотических птиц — S. typhimurium, S. enteritidis.
Вторичные сальмонеллезы могут быть следствием инфицирования на фоне снижения общей резистентности организма и иммунодепрессивных реакций. При бактериологическом анализе здесь выделяют разные сероварианты, менее адаптированные или вообще нехарактерные как возбудители болезни. Как правило, вторичные сальмонеллезы спорадичны, а вот первичные могут приобретать характер энзоотии.
Обращает на себя внимание изменение в картине нозологического профиля первичных сальмонеллезов,
а, именно, в последние 10 лет сероварианты 5. enteritidis и 5. typhimurium стали доминировать как поливидо-вые возбудители сальмонеллеза. Необходимо отметить, что и медицинские исследователи называют эти сероварианты основными возбудителями пищевых ток-сикоинфекций и сальмонеллеза у человека.
Следует обратить внимание на широкую циркуляцию сальмонелл во внешней среде, объектах дикой и синантропной фауны. Установлено, что растет вирулентность циркулирующих штаммов сальмонелл, инфицирующая доза может составлять от десятков до нескольких тысяч клеток. Так, Н.В. Пименовым от голубей выделены изоляты 5. typhimurium с высокой вирулентностью, характеризуемой величиной ЛД5о менее 5 тыс. мкр. кл., даже, 1349 и 647 мкр. кл., 5. enteritidis — 5 и 9 тыс. мкр. кл. [2]. Учитывая, что голубь — синантропная птица, обитает рядом с человеком, потенциальная социальная угроза инфицирования вирулентными штаммами становится очевидна. При этом циркулирующие патогенные штаммы сальмонелл обладают множественной антибиотикорезистентностью. Широкие исследования антибиотикорезистентности, проведенные нами у 28 выделенных изолятов 5. typhimuri-um, показали, что произошел серьезный дрейф в сторону развития у циркулирующих сальмонелл множественной резистентности к антибиотикам [3].
Множественную лекарственную устойчивость регистрировали у всех изучаемых образцов. При анализе антибиотикорезистентности выделенных изолятов в одном из исследований отмечены показатели средней или высокой чувствительности большинства культур сальмонелл только к имипенему, у половины культур — к левомицетину (хлорамфениколу) (51,8 %), байтрилу (53,6 %), фурагину (57,7 %), клафорану (58,3 %). К мономицину, ципрофлоксацину, азитроми-цину, клотримазолу, доксициклину, метронидазолу, карбенициллину, колистину, стрептомицину, белкос-пире, рифампицину, канамицину, тетрациклину, лин-комицину, неомицину, эритромицину большинство выделенных изолятов сальмонелл обладали резистентностью или низкой чувствительностью. Низкой была активность пенициллинов, карбенициллина, азитро-мицина [1].
Реальная ситуация с циркуляцией патогенных сальмонелл с множественной антибиотикорезистент-ностью угрожает инфицированием и заболеваемостью людей, животных и птиц. При этом спектр терапевти-
Лечение и профилактика сальмонеллеза голубей и животных зоопарков с использованием фаготерапии и пробиотика
ческих средств и традиционных методов лечения не принесет оздоровительного эффекта. В этой связи назрела необходимость развития комплексных методов освобождения от сальмонеллы с использованием препаратов, альтернативных антибиотикам.
Метод селективной деконтаминации предусматривает избирательное подавление патогенной микрофлоры. Как метод терапии селективная деконтаминация была разработана для лечения желудочно-кишечных заболеваний, длительное время предусматривала применение антибактериальных средств с подтвержденной чувствительностью и последующее восстановление нор-мофлоры кишечника пробиотическими препаратами. Патогенный микроорганизм, таким образом, вытеснялся из биоценоза, и при соблюдении режимов применения и правильном подборе препарата достигалось устранение микробоносительства.
Очевидно, что в современных условиях с распространенной множественной антибиотикорезистент-ностью и особенностями возбудителя добиться устранения сальмонеллоносительства при указанных подходах будет проблематично. Необходимо отметить, что сальмонеллы способны персистировать в организме и локализоваться не только в кишечнике, но и в легких, внутрисуставной жидкости, желчи, суставах, то есть там, где не всегда удается поддерживать концентрации активного антибактериального вещества. В этой связи более перспективными деконтаминантами, санирующими организм от сальмонелл, будут высокоактивные литические бактериофаги — специфичные агенты, обеспечивающие по сути селективную деконтаминацию как избирательное подавление.
Эффективность метода селективной деконтаминации при борьбе с сальмонеллезом изучали при использовании препаратов бактериофагов, основанных на фагах Ph. S. typhimurium №5 ТЗ -ДЕП, Ph. S. typhimuri-um №8 МЁ -ДЕП, Ph. S. typhimurium №9 ММ -ДЕП (авторы штаммов — Н.В. Пименов, И.В. Чиркова), Ph. S. enteritidis А-1 -ДЕП, Ph. S. enteritidis ЮН-1 -ДЕП, Ph. S. enteritidis ЮН-2 -ДЕП (авторы штаммов — С.В. Ленев, Ю.А. Малахов, Н.В. Пименов). Перечисленные штаммы отличались высокой литической активностью (10-8...10-10 по методу Аппельмана и более 107 по Гра-циа) и максимальным спектром литического действия к бактериям Salmonella при специфичности литической активности. При изучении эффективности лизинооб-разования, адсорбционных свойств, среднего числа негативных колоний при высевах по методу исследования одиночного цикла развития фагов, характеристики циклов одиночного развития бактериофагов были получены данные, удовлетворяющие критериям производственных штаммов для создания лечебно-профилактических препаратов. Штаммы бактериофагов обладали выраженной интенсивностью формирования литического фермента и выраженными свойствами адсорбции на клетках хозяев. Характеристики цикла одиночного развития в системе «фаг-бактериальная клетка» демонстрировали высокие показатели репродуктивной способности изучаемых штаммов бактериофагов: по окончании лизиса бактерий количество фа-
говых частиц составило 13200 в 0,1 мл материала, средний выход фагов — от 185 до 426, что является достаточным критерием для терапевтической эффективности фагового препарата.
Препарат на основе перечисленных штаммов бактериофагов был сконструирован и успешно апробирован в лабораторных условиях на белых мышах, а затем в условиях голубятен. Сохранность в опытных группах (10 мышей), которым вводили препарат спустя 20 мин после инфицирования специфичной сальмонеллой в дозе 5 ЛД50, составила 100 % при гибели
9.. .10 мышей из 10 мышей (90...100 %) контрольной группы.
При исследовании активности бивалентного бактериофага голубям внутримышечно вводили 8. 1урЫтип-ит М-2ф ^ДЕП, 8. enteritidis 25 Яве -ДЕП в дозе 5 ЛД50, а спустя 20 мин — препарат. Наблюдение и учет заболевших и павших голубей с бактериологическим исследованием проводили в течение 14 дней. Результаты исследования активности препарата против сальмонеллеза птиц в остром лабораторном опыте на голубях показали их сохранность 90.100 % при сохранности в контрольных группах без фагообработки 0.10 %. При этом единичные летальные случаи в опытных группах могли быть спровоцированы высокой дозой экзо- и эндотоксинов сальмонелл, так как гибель по 1 голубю отмечали в первые 1.2 суток после начала эксперимента при введении 5. enteritidis или смеси с ее присутствием. От погибших голубей в опытных группах при бактериологических исследованиях сальмонеллу не выделяли, при этом в контроле ее выделяли из материала, полученного как от трупов, так и от клинически здоровых голубей.
Внедрение методов фаготерапии с применением новых средств бактериолитического действия, альтернативных химиотерапевтическим средствам, является основой современного метода селективной деконтаминации. Принимая во внимание специфичность действия литически активных бактериофагов, нельзя исключить ситуации распространения других энтеробактерий в биоценозе кишечника животных и птиц, больных сальмонеллезом и пролеченных фагами. На фоне сложившихся условий микробиоценоза (рН среды, ферментативная активность, концентрация продуктов воспаления, угнетение лакто- и бифидомикрофлоры) возможно заселение кишечника кишечной палочкой, иерсинией, клебсиеллой, протеем, энтеробактером, шигеллой, сальмонеллами других серовариантов, энтерококками, коринебак-териями, синегнойной палочкой и другими бактериями — патогенными сапрофитами. Тем самым для полноценного и долгосрочного лечебно-профилактического эффекта в селективной деконтаминации обозначена необходимость конкурентного вытеснения условно-патогенной микрофлоры пробиотическим препаратом — донором нормальной микрофлоры кишечника.
Из пробиотиков для осуществления поставленной задачи был выбран отечественный препарат на основе характерных для микробиоценоза желудочно-ки-
РВЖ • МДЖ • № 6/2013
Н.В. Пименов, В.В. Субботин, Н.В. Данилевская
шечного тракта птиц Bifidobacterium adolescentis и Lactobacillus acidophilum. Привлекательность данного пробиотика определена его свойствами, обеспеченными максимальной сохранностью биологических свойств микроорганизмов-доноров при контактно-сорбционной сушке биомассы, а также включением в препарат элементов культуральной среды и продуктов, повышающих интенсивность обмена веществ, конверсию корма и пристеночную резистентность слизистой оболочки кишечника [4].
Апробация метода включала в себя пероральное применение инфицированным цыплятам голубей бактериофага с питьевой, кипяченой и остуженной до
25...30°С водой в разведении из расчета по объему 1:10.1:20 и, одновременно, пробиотика с кормом в лечебной дозе 0,4 г/кг ежедневно в течение 10 суток, а далее 0,2 г/кг в течение 20 суток. Цыплят голубей контрольной группы препаратами не обрабатывали, и летальность составила 90 %. Диагноз — сальмонеллез был установлен во всех случаях. Применение селективной деконтаминации обеспечило полную сохранность цыплят в опытной группе (30 гол.). Дальнейшие испытания в «полевых условиях» на голубятнях Подольского и Домодедовского районов Московской области, в зоопарке «Ташир», неблагополучных по сальмонеллезу, в зоопарке ООО «Парк живой природы «До-До» на птице и животных подтвердили 100%-ю эффективность метода селективной деконтаминации, основанного на применении препаратов высокоактивных фагов совместно с пробиотиком.
Так, в зоопарке «Ташир» (Московская область) заболеваемость отмечали у фазанов 4.5-месячного возраста и 25.40-дневных утят, сальмонеллоно-сительство — у остальных птиц зоопарка. Выпойку препарата бактериофагов осуществили групповым способом всей птице трижды с интервалом 48 ч, пробиотик давали ежедневно в формах, сорбированных на муке и на отрубях, в течение 10 дней. На 3-и сутки состояние больной птицы улучшилось, в течение 5 дней констатировали клиническое выздоровление, заболеваемость и гибель больше не от-
Библиография
1. Данилевская Н.В., Пименов Н.В. Проблема антибиотико-резистентности на примере лечения сальмонеллеза у домашних голубей // РВЖ.МДЖ, 2005; 4: 21-25.
2. Пименов Н.В. Совершенствование средств и методов борьбы с сальмонеллезом птиц // Ветеринария и кормление, 2012; 4: 32-33.
мечали в течение пятимесячного периода наблюдения. При контрольных бактериологических исследованиях, проводимых каждые 14 суток из смывов и помета птиц зоопарка, бактерий рода Salmonella не выделяли.
Использование фагов и пробиотиков обеспечивает эффективное воздействие на разные мишени патологического процесса за счет специфического действия на возбудителя и неспецифического антагонистического действия пробиотических бактерий на гнилостную, патогенную и условно-патогенную микрофлору, а также за счет иммуномодулирующих и пребио-тических эффектов.
Принимая во внимание, что S. enteritidis и S. typhimurium — основные возбудители сальмонеллеза не только птиц, но и домашних животных, селективная деконтаминация как метод терапии становится все более перспективной. Во-первых, потому что фаготерапия наиболее приемлема как последовательная избирательная деконтаминация организма. Препараты фагов не имеют побочных действий и не приводят к резкой гибели всех энтеробактерий с высвобождением высоких доз эндотоксина. Во-вторых, фаги активны до полной санации организма от сальмонеллы. Так, в голубеводстве применение антибиотиков при сальмонеллезе отмечалось переходом болезни в хронические суставные формы, чего не фиксировали при фаготерапии.
Таким образом, метод контаминации является перспективным направлением в борьбе с сальмонеллезом, особенно при лечении и срочной профилактике, так как бактериофаги сохраняются до 3.5 суток в кишечнике и при алиментарном инфицировании или сальмонел-лоносительстве лизируют возбудителя, препятствуя заражению и клинической болезни. В известной степени профилактическое действие оказывает конкурентная микрофлора пробиотика на основе лакто- и бифидоф-лоры, препятствуя размножению патогенных сапрофитных бактерий. Предложенный метод необходим для широкого внедрения в практику ветеринарной медицины, так как является универсальным для разных видов животных и птиц.
3. Пименов Н.В., Данилевская Н.В. Антибиотикорезистент-ность сальмонелл, выделенных у домашних голубей // Ветеринария, 2006; 9: 20-24.
4. Субботин В.В., Данилевская Н.В. Опыт применения пробиотического препарата лактобифадол в птицеводстве: Мат-лы II Меж-дунар. Конгресса по птицеводству. — М., 2006.
SUMMARY
N.V.Pimenov, V.V.Subbotin, N.V.Danilevskaya. Treatment and Prevention of Salmonellosis in Pigeons and Zoo Animals Using Phagotherapy and Probiotic. The effective selective inhibition of salmonellosis in the organism and salmonellosis treatment are accomplished by combinedactive bacteriophages and probiotic usage. The method showed efficiency in laboratories, as well as in dovecotes and zoos. A broad introduction of selective decontamination based on the combined usage of bacteriophages and probiotics is perspective for treatment and control of bird's and animal salmonellosis.

читать описание
Star side в избранное
скачать
цитировать
наверх