CC BY
55
УДК 616.441-008.64
E.C. Манюк, В.Г. Изатулин, Ё.С. Васильева
КОРРЕКЦИЯ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ГИПОТИРЕОЗА РАСТИТЕЛЬНЫМ ПРЕПАРАТОМ «БАЯКОН»
Иркутский государственный медицинский университет (Иркутск)
Изучено влияние растительного препарата аконита байкальского на морфологическое состояние щитовидной железы, в условиях экспериментального гипотиреоза. Установлено корригирующее действие препарата «Баякон», которое начинает, проявляться через 2 недели после начала его применения и. достигает, максимума через 8 недель.
Ключевые слова: гипотиреоз, морфометрия, «Баякон»
THE CORRECTION OF THE EXPERIMENTAL HYPOTHIREOSIS WITH PLANT PREPARATION OF ACONITUM BAIKALENSE «BAYACON»
E.S. Manuk, V.G. Izatulin, L.S. Vasilieva Irkutsk State Medical University, Irkutsk
Influence of a vegetative preparation Aconitum Baikal on a morphological condition of a thyroid, gland under the condition of experimental hypothyrosis is studied. It is established, that corrective influence of a preparation «Bayacon» starts in 2 weeks after the beginning of application and reaches the maximum, in 8 weeks.
Key words: hypothyrosis, morphometry, «Bayacon»
По данным эпидемиологических исследований, в последние два десятилетия отмечается рост заболеваемости щитовидной железы, что вызывает интерес исследователей к данной проблеме. Дисфункция щитовидной железы полиэтиологич-на, может быть связана с аномалией развития, генетической аутоиммунной патологией, дефицитом Т-супрессоров, воспалительным процессом в ткани щитовидной железы, врожденным дефектом ферментных систем, медикаментозной терапией, струмогенным эффектом дефицита микроэлементов (йод, селен, кобальт, хром, медь и магний) и другими причинами [5, 8, 11].
Лечебная тактика заболеваний щитовидной железы за последние 10—15 лет заметно не изменилась, а арсенал эффективных лекарственных средств, предназначенных для лечения и профилактики указанной патологии, явно недостаточен. В связи с вышеизложенным, актуальность исследований по изучению эффективных лекарственных средств, предназначенных для лечения и профилактики заболеваний щитовидной железы, не вызывает сомнений [6, 16].
Наиболее перспективным в данном отношении представляется препарат аконита байкальского «Баякон», разработанный в НИИ фармакологии Томского научного центра РАМН совместно с Иркутским ИОХ СО РАМН.
Различные виды аконитов широко применяются в народной медицине для лечения различных заболеваний. В работах отечественных авторов аконит (борец) наиболее подробно описан в трудах
В.В. Телятьева. По мнению В.В. Телятьева, физиологические и токсические свойства аконитов обус-
ловлены наличием алкалоидов, содержание которых (от 0,1 до 4 %) сильно варьирует от вида к виду и от условий произрастания, а также в зависимости от фазы вегетации растений [17]. Аконит байкальский (Aconitum baicalense Turcz.ex Rapaics (А. С7екапоУ8куш 81етЬ.)) на протяжении многих лет применяется в народной медицине Восточной Сибири, Тибета и Китая при лечении эндемического и узлового зоба, аутоиммунного тиреоидита, доброкачественных и злокачественных новообразований щитовидной железы. Настойка аконита байкальского представляет собой комплекс веществ, экстрагируемых из надземной части растения аконита байкальского 30% раствором этилового спирта с последующим отстаиванием и фильтрацией. По данным научных исследований НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН и Сибирского медицинского университета (г. Томск), биологическая активность аконита байкальского обусловлена содержанием дитерпеновых алкалоидов (зон-горин, напеллин, мезаконитин, гипаконитин и Ы-оксинапеллин) и флавоноидов (гликозиды бикем-пферола и бикверцетина, а также кверцетина и кемпферола) [13]. Установлено, что данный препарат обладает противоопухолевыми и антимета-статическими свойствами, оказывает выраженное стресспротективное и гастрозащитное действие [9, 15].
Цель нашего исследования заключалась в выявлении возможности коррекции нарушения структуры щитовидной железы растительным препаратом «Баякон» при различной обеспеченности организма тиреоидными гормонами в условиях экспериментального гипотиреоза.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Экспериментальный гипотиреоз моделировали введением мерказолила у 96 белых беспородных крыс-самцов. Основным механизмом действия мерказолила является торможение активности тиропероксидазы. Данный препарат вызывает уменьшение синтеза тироксина в щитовидной железе, ускоряет выведение йодидов, угнетает активность ферментных систем, участвующих в окислении йодидов в йод, что приводит к торможению йодирования тиреоглобулина и задержке превращения дийодтирозина в тироксин.
Животные были разделены на 3 группы: 1-я группа получала мерказолил («Акрихин», Россия) в дозе 10 мг на кг массы. Препарат вводили ежедневно, перорально, в составе обычного рациона пищи, в течение 8-х недель; 2-я группа получала мерказолил в такой же дозировке, в аналогичные сроки, с последующей коррекцией препаратом «Баякон». Препарат вводили крысам эндогаст-рально, ежедневно, в дозировке 0,5 мл на кг массы, с 8-й недели по 16-ю неделю эксперимента. Третья группа — интактные животные. На 2, 4, 8,
10, 12 и 16-й неделе эксперимента после декапита-ции проводили забор морфологического материала [12]. Для морфометрического исследования ЩЖ использовали обе доли, которые фиксировали в 10% растворе формалина и заливали в гистопласт. Серийные срезы толщиной 7 мкм окрашивали гематоксилином и эозином. Часть срезов толщиной 5 мкм окрашивали азуром и эозином [7, 10].
Для патоморфологического анализа щитовидной железы нами были использованы алгоритмы гистологического описания, разработанные О.К.-Хмельницким [18], для унифицированного патогистологического исследования и объективизации оценки отмеченных изменений [2, 3, 14].
Так как изменение функциональной активности щитовидной железы сопровождается перестройкой ее гистоструктуры, которая выражается в изменении ее тканевых компонентов, в работе была использована методика определения соотношения тканевых компонентов. Методом точечного счета [1] проводили морфометрию структурных компонентов ЩЖ: фолликулярного эпителия, стромы, интерфолликулярного эпителия, сосудов [4, 10, 18].
Полученные цифровые данные обработаны статистически стандартными параметрическими методами с использованием парного и группового критерия Стьюдента. Данные считались статистически значимыми при p < 0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
При кормлении крыс мерказолилом клиническая симптоматика развивающегося гипотиреоза наблюдалась через 10 — 12 дней. У экспериментальных животных отмечалась гиподинамия и увеличение массы. После 2-х недель моделирования увеличение массы тела составило 11,2 ± 4/100 г массы тела, после 8 недель моделирования 15,8 ± 7/100 г массы тела.
При вскрытии у всех без исключения животных нами был отмечен доминирующий показатель струмогенного эффекта избытка тироидных гормонов в организме на макро- и микроскопическом уровне. Отмечалось достоверное увеличение массы щитовидных желез. При моделировании экспериментального гипотиреоза через 2 недели масса щитовидных желез составляла 23,7 ± 0,52 мг, на 4-й неделе моделирования — 41,5 ± 1,4 мг, на 8-й неделе моделирования 46,1 ±1,5 мг. Именно этот признак имеет решающее значение для постановки диагноза — зоб, как самостоятельной нозооло-гической формы патологии щитовидной железы при дифференциальной диагностике.
Ингибирование мерказолилом функциональной активности щитовидной железы при моделировании гипотиреоза привело через 8 недель к выраженным изменениям, что на 56 сутки наблюдаются как выраженные изменения основных морфометрических параметров, соответствующих снижению функциональной активности органа. Изменились соотношения площадей, занимаемых основными структурами в паренхиме железы. Возрастала интенсивность пролиферативных процессов, отдельные фолликулы достигали гигантских размеров за счет перерастяжения коллоидом, приобретали неровные очертания, звездчатый рисунок. Все тироциты принимали уплощенную форму за счет увеличения размеров фолликула и растяжения его стенки накопившимся коллоидом. Процесс гиперплазии тиреоидного эпителия носил диффузный характер и развивался у всех без исключения животных. Средний диаметр фолликулов превышал значения в контроле в 2 раза и был равен 119,8 ±1,2 мкм.
Угнетение гормоногенеза приводило к уменьшению морфометрических показателей эпителиальных компонентов: высота тироцитов снижалась до 5,4 ± 0,15 мкм (в контроле 7,1 ± 0,56 мкм; p < 0,05) (рис. 1), вследствие этого относительный объем фолликулярного эпителия уменьшался до
23.6 ± 0,16 % (в контроле 41,4 ± 1,3 %; p < 0,05), объем интерфолликулярного эпителия снижался до 6,34 ± 0,41 %, средняя площадь тироцитов равнялась 29,1 ± 0,42 мкм3 (у интактных
37.13 ± 0,77 мкм3; p < 0,05).
За счет накопления коллоида внутри фолликулов его относительный объем увеличивался до
70.14 ± 0,43 % (в контроле 46,2 ± 0,8 %; p < 0,05), а плотность коллоида до 52,1 ±0,18 (у интактных
34.6 ± 0,2), за счет чего величина фолликулярноколлоидного индекса (ФКИ) уменьшилась до 0,33 ± 0,02 (у интактных крыс 0,77 ± 0,01). Концентрация интрафолликулярного йода уменьшилась до 0,22 ± 0,12 (в контроле 0,35 ± 0,01, p < 0,05).
Изменения в структуре фолликулов отразились на стромально-паренхиматозных отношениях, которые изменялись в сторону уменьшения относительного объема стромы 6,6 ± 0,13 % (у интактных крыс 11,7 ± 1,0 %; p < 0,05), индекс склерозирования возрос до 14,18 ± 0,01 (у интактных крыс 7,54 ± 0,12).
Численность С-клеток не изменялась и равна 0,92 ± 0,04 % (у интактных животных 0,9 ± 0,20 %)
Относительный объем перифолликулярного сосудистого русла к 16 неделе уменьшился незначительно — до 4,61 ± 0,47 % (у интактных животных 4,82 ± 0,13 %) за счет сужения междольковых венул и капилляров, окружающих фолликулы.
Отмечена миграция лаброцитов, большая часть лаброцитов дегранулирована, что указывает на истощение тучноклеточного компонента. Все тканевые базофилы находились в состоянии активной дегрануляции. Число тканевых базофилов в 1 мм2 равно 31,02 ± 0,52 (у интактных крыс 21,42 ± 0,71 в 1 мм2, p < 0,05). Индекс дегрануляции возрастал и составлял в этот период
82,14 ± 0,15 (в контроле 70,43 ± 0,61, p < 0,05).
При коррекции экспериментального гипотиреоза препаратом «Баякон» на 16 неделе эксперимента отмечались признаки усиления активности внутриклеточных биосинтетических процессов: увеличение высоты тироцитов, эпителий приобретал кубическую, на отдельных участках призматическую форму, наблюдалось разжижение и эвакуация коллоида.
Средняя высота фолликулярного эпителия увеличивалась до 6,7 ±0,19 мкм (без коррекции 6,25 ± 0,21 мкм), относительный объем фолликулярного эпителия составлял 24,5 ± 0,37 % (без коррекции 24,2 ± 0,37 %), интерфолликулярного эпителия 8,15 ± 0,22 %, средняя площадь тироцитов составляла 29,7 ± 0,4 мкм2 (без коррекции 29,2 ± 0,51 мкм2). Относительный объем коллоида уменьшался до 67,8 ± 0,36 % (без коррекции 69,5 ± 0,35 %; р < 0,05), а коэффициент его резорбции увеличивался (рис. 1). В результате уменьшения относительного объема коллоида фолликулярно-коллоидный индекс (ФКИ) — отношение объемных фракций эпителия и коллоида — увеличился и составил 0,38 ± 0,003 (без коррекции 0,35 ± 0,007; p < 0,05). Плотность коллоида уменьшилась до 38,5 ± 0,18 (без коррекции 41,2 ± 0,34;
p < 0,05). Концентрация интерфолликулярного йода составила 0,27 ± 0,09 (без коррекции 0,26 ± 0,08).
Относительный объем перифолликулярного сосудистого русла не изменился и составил 4,71 ± 0,38 % (без коррекции 4,68 ± 0,29 %).
Исследование стромы щитовидной железы показало, что ее относительный объем не изменялся и составлял до 6,93 ± 0,19 % (без коррекции 6,78 ± 0,3 %), но индекс склерозирования уменьшился до 13,0 ± 0,01 (без коррекции 13,7 ± 0,04).
Относительный объем С-клеток практически не изменяется 0,91 ± 0,02 % (без коррекции
0,9 ± 0,01 %).
В соединительнотканной строме ЩЖ увеличилось количество тучных клеток в состоянии дегрануляции. Из данных литературы известно, что тканевые базофилы наряду с парафоллику-лярными клетками обеспечивают гомеостаз биогенных аминов в ЩЖ. Тучные клетки периферических зон могут выступать в качестве переносчиков серотонина и катехоламинов в функционально более активные центральные зоны органа. Серотонин и катехоламины, в свою очередь, стимулируют эндоцитоз коллоида фолликулярными клетками и выведение тиреоидных гормонов в кровь, а также регулируют функциональное состояние микроциркуляторного русла железы. Число тканевых базофилов, выявленных в 1 мм2, возрастало до 27,41 ±0,16 (без коррекции 26,30 ± 0,12 в 1 мм2, p < 0,05). Индекс дегрануляции лаброцитов возрастал до значения
77,15 ± 0,48 (без коррекции 76,12 ± 0,15; p < 0,05).
Полученные результаты позволили сделать заключение о возможности коррекции экспериментального гипотиреоза с помощью растительного препарата «Баякон».
Корригирующее действие этого препарата начинает проявляться после 2 недель его применения, а через 8 недель наблюдается стойкий корригирующий эффект.
инт.
10
12 16нед.
2
4
8
Рис. 1. Увеличение коэффициента резорбции коллоида в щитовидной железе под действием препарата «Баякон» у животных с экспериментальным гипотиреозом. Обозначения: светлые столбики - гипотиреоз без коррекции, черные столбики - коррекция гипотиреоза «Баяконом».
Положительный эффект применения препарата «Баякон» в качестве корректора дисфункционального состояния щитовидной железы подтверждает необходимость дальнейших исследований препарата.
ЛИТЕРАТУРА
1. Автандилов В.Г. Проблемы патогенеза и патологоанатомической диагностики болезней в аспектах морфометрии / В.Г. Автандилов. — М.: Медицина, 1984. — 324 с.
2. Автандилов Г.Г. Медицинская морфомет-рия: Руководство / Г.Г. Автандилов. — М.: Медицина, 1990. — 382 с.
3. Агроскин Л.С. Цитофотометрия. Аппаратура и методы анализа клеток по светопоглощению / Л.С. Агроскин. — М.: Наука, 1977. — 295 с.
4. Алешин Б.В. О состоянии функциональной активности и пролиферации паренхимы в щитовидной железе. Формы пролиферации тиреоид-ной паренхимы / Б.В. Алешин, О.И. Бриндак,
B.В. Мамина // Проблемы эндокринологии. — 1987. - Т. 33, № 6. - С. 67-72.
5. Балаболкин М.И. Эндокринология / М.И. Ба-лаболкин. — М.: Медицина, 1998. — 580 с.
6. Бомаш Н.Ю. Морфологическая диагностика заболеваний щитовидной железы / Н.Ю. Бомаш. — М.: Медицина, 1981. — 175 с.
7. Быков В.Л. Стереологический анализ щитовидной железы (обзор методов) / В.Л. Быков // Арх. ан., гист. и эмбр. — 1979. — №7. —
C. 98 — 106.
8. Зимина С.А. Морфофункциональные особенности щитовидной железы при экспериментальном гипоселенозе: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. — 2000. — 22 с.
9. Исследование противоопухолевых и анти-метастатических свойств растительных средств из аконита байкальского / Т.Н. Поветьева [и др.] // Сибирский онкологический журнал: Научно-
практическое издание / НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН и др. - 2002. - №3/4. -
С. 138-141.
10. Кириллов Ю.Б. Ускоренный морфометрический метод определения функциональной активности щитовидной железы / Ю.Б. Кириллов,
A.П. Чумаченко, В.Г. Аристархов // Пробл. эндок-ринол. - 1994. - №4. - С. 19-21.
11. Клинико-морфологическая характеристика фолликулярных опухолей щитовидной железы у лиц молодого возраста, проживающих на загрязненной радионуклидами территории / А.Ю. Абросимов [и др.] // Пробл. эндокринол. - 2000. - № 2. - С. 7-12.
12. Кондаленко В.Ф. Ультраструктура щитовидной железы человека в норме и при патологии / В.Ф. Кондаленко, А.П. Калинин, В.А. Одинокова // Арх. пат. - 1970. - №4. - С. 25-33.
13. Минаева В.Г. Лекарственные растения Сибири / В.Г. Минаева. - Новосибирск: Наука, 1991. - 428 с.
14. Мусина Н.Ю. Морфологическая характеристика щитовидной железы у молодняка крупного рогатого скота / Н.Ю. Мусина, И.А. Мусин // Морфология. - 2002. - №2-3. - С. 111.
15. НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН /
B.Г. Пашинский [и др.] // Сибирский журнал гастроэнтерологии и гепатологии. - 2004. - № 18. -
C. 112-113.
16. Структурные изменения при адаптивнокомпенсаторных реакциях щитовидной железы / В.А. Глумова [и др.] // Морфология. - 2002. -№2-3. - С. 41.
17. ТелятьевВ.В. Полезные растения Центральной Сибири / В.В. Телятьев. - Иркутск: Вост.-Сиб. кн. изд., 1987. - 399 с.
18. Хмельницкий О.К. Щитовидная железа как объект морфометрического исследования / О.К. Хмельницкий, М.С. Третьякова // Арх. патологии. - 1998. - №4. - С. 47-49.
