CC BY
73
МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
УДК 612.111:616-006
DOI 10.23648/UMBJ.2017.27.7082
К ВОПРОСУ О МЕХАНИЗМАХ ВОЗНИКНОВЕНИЯ ОКСИДАТИВНОГО СТРЕССА В ЭРИТРОЦИТАХ ОРГАНИЗМА-ОПУХОЛЕНОСИТЕЛЯ
Т.П. Генинг1, А.Ю. Федотова1, Д.Р. Долгова1, Т.В. Абакумова1, И.И. Антонеева1, О.С. Воронова2
гФГБОУ ВО «Ульяновский государственный университет», г. Ульяновск, Россия; 2ФГБОУ ВО «Ульяновский институт гражданской авиации им. главного маршала авиации Б.П. Бугаева», г. Ульяновск, Россия
e-mail: tonechkatuzeeva@mail.ru
Считается установленным факт, что развитие неоплазмы в организме сопровождается активацией перекисного окисления липидов и изменением активности ферментативного звена в эритроцитах циркулирующей крови. Развитие окислительного стресса рассматривается как накопление в эритроцитах промежуточных продуктов в результате действия опухоли на организм. Таким образом, активация свободнорадикального окисления является типовым эфферентным звеном в реализации системного действия опухоли на организм. Единого мнения относительно активности ферментов антиоксидантной системы и их роли в развитии окислительного стресса в динамике развития неоплазмы не наблюдается.
Цель - оценить роль ферментативного звена антиоксидантной системы и системы глутатиона в возникновении окислительного стресса в эритроцитах крыс с перевиваемой асцитной опухолью яичников.
Материалы и методы. Работа выполнена на эритроцитах беспородных белых крыс с перевиваемой асцитной опухолью яичников в стационарную и терминальную фазы роста опухоли. В гемо-лизате эритроцитов определяли биохимически уровень малонового диальдегида, диеновых конъю-гатов, кетодиенов, шиффовых оснований, активность глутатионредуктазы, глутатион-S-трансферазы, глутатионпероксидазы, уровень восстановленного и окисленного глутатиона. Результаты. Установлено значимое по сравнению с контролем повышение уровней малонового диальдегида и диеновых конъюгатов, а также активности супероксиддисмутазы, каталазы и глутатион^трансферазы. Активность глутатионпероксидазы, уровень восстановленного глутатиона и отношение восстановленного и окисленного глутатиона были снижены. Заключение. Полученные данные позволяют предполагать истощение пула восстановленного глу-татиона в эритроцитах крыс-опухоленосителей в результате снижения его образования и повышения активности глутатион^трансферазы на фоне усиления перекисного окисления липидов.
Ключевые слова: эритроциты, перекисное окисление, антиоксидантная система.
Введение. Считается установленным, что развитие неоплазмы в организме сопровождается нарушением морфофункционального состояния эритроцитов циркулирующей крови [1]. В частности, имеет место активация перекисного окисления липидов (ПОЛ) и изменение активности ферментативного звена анти-оксидантной системы (АОС), что характери-
зует ситуацию оксидативного стресса (ОС) [2]. При этом в качестве основного фактора, определяющего развитие ОС, рассматривается накопление в эритроцитах промежуточных продуктов ПОЛ (диеновых конъюгатов (ДК) и малонового диальдегида (МДА)) в результате системного действия опухоли на организм [35]. Таким образом, активация свободноради-
кального окисления является типовым эфферентным звеном в реализации системного действия опухоли на организм. Единого мнения относительно активности ферментов АОС и их роли в развитии ОС в динамике развития неоплазмы на сегодня не существует [6-10].
Цель исследования. Оценка роли ферментативного звена АОС и системы глута-тиона в возникновении ОС в эритроцитах крыс с перевиваемой асцитной опухолью яичников (АОЯ).
Материалы и методы. Работа выполнена на белых беспородных крысах массой 180-200 г с перевиваемой АОЯ (штамм РЯ, РОНЦ им. Н.Н. Блохина, г. Москва) в стационарную (п=22) и терминальную (п=22) фазы роста опухоли. Контрольную группу составили здоровые половозрелые крысы (п=24). Все животные содержались в стандартных условиях вивария при естественном освещении и свободном доступе к воде и корму. Работа проводилась в соответствии с Правилами проведения работ и использования экспериментальных животных, утвержденными Приказом МЗ СССР № 755 от 12 августа 1977 г., положениями Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации от 1964 г., дополненной в 1975, 1983 и 1989 гг., а также требованиями этического комитета Института медицины, экологии и физической культуры Ульяновского государственного университета. Животных умерщвляли путем декапитации под эфирным наркозом.
Для оценки продуктов ПОЛ в гемолизате
эритроцитов (1:10) оценивали уровень ДК -при Е232/220 нм, кетодиенов (КД) - при Е278/220 нм, шиффовых оснований (ШО) - при Е400/220 нм по методу И.А. Волчегорского [11]. Содержание МДА определяли в тесте с тиобарби-туровой кислотой по методу Л.И. Андреевой [12]. Для оценки ферментативного звена АОС изучали активность супероксиддисму-тазы (СОД) по методу M. Nishikimi [13], ка-талазы, глутатион^-трансферазы (ГТ) и глутатионпероксидазы (ГПО) по методу
A.И. Карпищенко [14]. Активность глутати-онредуктазы (ГР) устанавливали по методу
B.С. Асатиани [15]. Уровень восстановленного (GSH) и окисленного глутатиона (GSSG) определяли по методу G.L. Ellman [16]. Активность ферментов и количество продуктов ПОЛ пересчитывали на 1 г гемоглобина.
Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием непараметрического критерия Манна-Уитни (Stata 6.0) и стандартных пакетов Microsoft Excel 2007. Различия считали статистически значимыми при p<0,05.
Результаты и обсуждение. В результате проведенных исследований нами установлено значимое по сравнению с контролем повышение МДА и ДК. Изменение уровней КД и ШО в эритроцитах крыс в динамике развития АОЯ не было статистически значимым (рис. 1).
Рис. 1. Содержание продуктов ПОЛ в эритроцитах крыс с АОЯ.
* - данные, достоверно отличающиеся от аналогичных данных в контроле (р<0,05)
Таким образом, полученные нами данные по параметрам ПОЛ в эритроцитах крыс с АОЯ укладываются в концепцию Н.П. Чесноковой с соавт. [9] и позволяют предполагать, что накопление в эритроцитах промежуточных продуктов ПОЛ (ДК и МДА) является следствием системного действия опухоли на организм.
Несколько иная ситуация имеет место при оценке активности в эритроцитах ферментативного звена АОС.
Рассмотрим схему образования и обезвреживания активных форм кислорода (АФК) в эритроцитах (рис. 2):
Глюкоза
^^лгакозо-б^оофат
Гликолиз Глюкозо-6-фосфат!
глюкозо-6-фосфат
| ■*- б-фосфоглюконат
Глицеральдегид-З-фосфат
-лиетгемоглобин ■^редуктазная система
1,3-Фосфоглицерат
2,3 -бифосфоглицерат
3-фосфоглицерат
Г^АТР
Лакгат
КАОР
Глюкозо-6-фосфа-дегидрогеназа
АБРН+Н*
ОБЗО лутатион-редуктаза
гвБН
НЬРе оксиНЬ
НЬРе метНЬ
Рис. 2. Образование и обезвреживание АФК в эритроцитах [17]
1. Источником супероксидного аниона (О2-) в эритроцитах является спонтанное окисление Бе2+ в геме НЬ. И поскольку кислорода в эритроцитах много, то скорость образования О2-, Н2О2 и ОН- высокая;
НЬ (Бе2+) !-► ё + О2 О2- Н2О2 -►НО + ОН-
I —ё, 2Н+
МйНЬ (Бе3+)
2. СОД превращает О2- в Н2О2 и О2.
3. Н2О2 расщепляется каталазой или ГПО.
4. ГР восстанавливает 0880.
5. На окислительном этапе пентозофос-фатного пути превращения глюкозы образуется КАБРН, необходимый для восстановления глутатиона.
6. В глицеральдегидфосфатдегидроге-назной реакции гликолиза образуется КАБН, участвующий в восстановлении железа мет-гемоглобинредуктазной системой.
Нами установлено повышение активности СОД и каталазы по сравнению с контролем в стационарную и терминальную фазы
роста опухоли (рис. 3). На сегодня не существует единого мнения относительно активности СОД и каталазы в динамике развития опухоли. По данным одних авторов [6-8, 18], активность СОД и каталазы в эритроцитах организма-опухоленосителя снижается, при этом авторы полагают, что прогрессирующая недостаточность активности СОД определяет системную активацию процессов ПОЛ при злокачественных опухолях определенной локализации [9]. Данные других авторов [10, 19-20] свидетельствуют о повышении активности этих ферментов. При этом существует мнение, что увеличение в эритроцитах активности антиоксидантных ферментов может быть компенсаторной реакцией в ответ на усиление ОС [10].
В доступной литературе мы обнаружили данные, свидетельствующие о разнонаправленной динамике СОД и каталазы в эритроцитах опухоленосителей по сравнению с контролем [9, 21].
Рис. 3. Активность СОД и каталазы в эритроцитах крыс с экспериментальным АОЯ. * - данные, достоверно отличающиеся от аналогичных данных в контроле (р<0,05)
В литературе также представлены данные о фазности изменений антиоксидантной активности крови организма-опухоленосите-ля [22]. Для объяснения Е.А. Нейфахом в 1960-е гг. было высказано предположение, что опухоль «выкачивает» антиоксиданты из других органов и тканей. При этом удаление опухоли приводит к нормализации активности ПОЛ в крови, что позволяет предполагать определяющую роль опухоли в формировании антиоксидантного статуса организма-опухоленосителя.
Образовавшийся при окислении Fe2+ О2-СОД далее превращает в Н2О2+О2, а уже ка-талаза расщепляет Н2О2. Расщеплять Н2О2 может также ГПО, активность которой, по нашим данным, в стационарную фазу АОЯ не отличалась от контроля, а в терминальную
фазу была значимо снижена по сравнению с контролем (рис. 4). Снижение активности ГПО в эритроцитах зарегистрировано также у больных раком шейки матки [23]. GSSG восстанавливает ГР, активность которой, по нашим данным, также была снижена в эритроцитах в динамике АОЯ (рис. 4).
Анализ вышеизложенного позволяет предполагать, что активность ферментов АОС в эритроцитах организма-опухоленоси-теля, определяемая условиями гипоксии, развивающейся в организме при развитии солидной опухоли, гетерогенностью опухоли, усилением активности моноцитов, осуществляющих противоопухолевый иммунный ответ, является важной составляющей биологического портрета опухоли в динамике ее развития.
Рис. 4. Активность глутатионзависимых ферментов в эритроцитах крыс с АОЯ. * - данные, достоверно отличающиеся от аналогичных данных в контроле (р<0,05) Субстратом для ГПО, расщепляющей Н2О2 и пероксиды липидов, является глута-
тион. Глутатион - тиолсодержащий трипеп-тид - осуществляет защиту клетки от ксенобиотиков, свободных радикалов и гидропе-роксидов. Он функционирует в качестве ан-тиоксиданта, участвуя в разрушении перекиси водорода и пероксидов липидов, обеспечивая субстрат для ГПО. В эритроцитах периферической крови, наиболее страдающих от активности свободных радикалов при развитии в организме неоплазмы, его содержит-
Нами установлено прогрессирующие снижение уровня GSH и отношения GSH/GSSG в эритроцитах в динамике АОЯ (рис. 5). Снижение окислительно-восстановительного статуса глутатиона (GSH/GSSG) имело место в крови мышей с опухолью Эрлиха [24], в эритроцитах у пациентов со злокачественными опухолями различной локализации [25-26]. В то же время в литературе доступны данные о повышении GSH и GSSG в эритроцитах крыс на ранних стадиях развития гепатомы Морриса 5123 [27]. При этом авторы отмечали на поздних стадиях понижение уровня GSH и соотношения GSH/GSSG при сохраняемом повышенном уровне GSSG. Существует мнение, что расходование GSH в окислительных реакциях сопровождается генерацией GSSG, взаимодействующего с SH-группами белков. При этом величина отношения GSH/GSSG значительно снижалась, что свидетельствует о сокращении редокс-потенциала системы глу-татиона. При снижении величины отношения
GSH/GSSG в условиях окислительного стрес-
ся значительное количество. При снижении потенциала глутатионовой защиты в эритроцитах повышается содержание АФК, что вызывает окисление SH-групп молекул №.
Образование дисульфидных связей между протомерами № и мет№ приводит к их агрегации - образованию телец Хайнца, которые способствуют разрушению эритроцитов при попадании их в мелкие капилляры.
са тиоловые группы белков могут обратимо модифицироваться с образованием смешанных дисульфидов между белковыми SH-груп-пами и SH-группами молекул с низкой молекулярной массой [28]. При этом GSH выступает в качестве «ловушки» для свободных радикалов [29], а патологические состояния, включая развитие неоплазмы, вызывают истощение GSH [26]. Полученные нами данные о динамике ГПО и ГР (снижение активности которых, возможно, является результатом влияния неоплазмы) позволяют предполагать не только и не столько истощение GSH, сколько снижение его образования в эритроцитах при развитии АОЯ.
GSH также используется ГТ для детокси-кации ксенобиотиков и пероксидов. При этом осуществляется 4 основных типа реакций:
1) R+GSH=HRSG;
2) RX+GSH=HX+SG - нуклеофильное замещение;
3) восстановление органических перокси-дов до спиртов:
Рис. 5. Уровни в8И и отношение 08Ш088в в эритроцитах в динамике АОЯ. * - данные, достоверно отличающиеся от аналогичных данных в контроле (р<0,05)
208Н+ЯООН=ЯОН+08-08+Н2О;
4) Изомеризация (стероидов, простаглан-динов).
В реакциях 1-го и 2-го типов глутатион теряется. В реакциях 3-го типа образуется 08-80 (окисленный глутатион), который восстанавливается ГР.
Нами установлено увеличение активности ГТ в эритроцитах в динамике развития АОЯ (рис. 4). Повышение активности ГТ в
эритроцитах больных РЯ показано в работе [30]. Повышение активности ГТ представляется оправданным на фоне повышения концентрации АФК и усиления ПОЛ, однако это также ведет к истощению пула 08Н.
Заключение. Полученные данные позволяют предполагать истощение пула 08Н в эритроцитах крыс-опухоленосителей в результате снижения его образования и повышения активности ГТ на фоне усиления ПОЛ.
Литература
1. Крыжановский Г.Н. Дизрегуляционная патология. М.; 2002. 632.
2. Liu F., Mizukami H, Sarnaik S, Ostafin A. Calcium-dependent human erythrocyte cytoskeleton stability analysis through atomic force microscopy. J. Struct. Biol. 2005; 150 (2): 200-210.
3. Чеснокова Н.П., Моррисон В.В., Понукалина Е.В. О роли активации свободнорадикального окисления в структурной и функциональной дезорганизации биосистем в условиях патологии. Успехи современного естествознания. 2008; 3: 25-34.
4. Чеснокова Н.П., Барсуков В.Ю., Зяблов Е.В. Закономерности активации свободнорадикального окисления и изменений показателей клеточного состава периферической крови при фолликулярной форме рака щитовидной железы. Научные труды SWorld. 2010; 1: 86-87.
5. Чеснокова Н.П., Барсуков В.Ю., Злобнова О.А. Закономерности изменений гормонального баланса в динамике опухолевой прогрессии у больных раком молочной железы. Успехи современного естествознания. 2011; 4: 47-54.
6. Шарипов Ф.К., Беленков Ю.О., Киреев Г.В. Динамика свободнорадикального окисления в ткани штамма саркома-45 как показатель взаимодействия опухоли и организма. Вопросы онкологии. 2005; 2: 227-229.
7. Агабеков А.И., Барсуков В.Ю., Чеснокова Н.П. О роли активации процессов липопероксидации и недостаточности антирадикальной защиты крови в патогенезе рака ободочной кишки. Современный взгляд на будущее науки. Международная научно-практическая конференция. Уфа:
Научный центр «АЭТЕРНА»; 2014: 44-47.
8. Manoharan S., Klanjiappan K., Kayalvizi M. Enhanced. Lipid peroxidation and impaired enzymatic antioxidant activities in the erythrocytes of the patients with cervical carcinoma. Cell Mol. Bio Lett. 2004; 9 (4A): 699-707.
9. Чеснокова Н.П., Барсуков В.Ю., Понукалина Е.В., Агабеков А.И. Закономерности изменений процессов свободнорадикальной дестабилизации биологических мембран при аденокарциноме восходящего отдела ободочной кишки, их роль в развитии опухолевой прогрессии. Фундаментальные исследования. 2015; 1: 164-168.
10. Polat M.F., Taysi S., Gul M., Cikman O., Yilmaz I., Bakan E., Erdogan F. Oxidant/antioxidant status in blood of patients with malignant breast tumor and benign breast disease. Cell Biochem. Funct. 2002; 20 (4): 327.
11. Волчегорский В.А., Налимов А.Г., Яровинский Б.Г. Сопоставление различных подходов к определению продуктов перекисного окисления липидов в гептан-изопропаноловых экстрактах крови. Вопросы медицинской химии. 1989; 1: 127-131.
12. Андреева Л.И., Кожемякин Л.А., Кишкун А.А. Модификация метода определения перекисей липидов в тесте с тиобарбитуровой кислотой. Лабораторное дело. 1988; 11: 41-43.
13. Nishikimi M., Appa N., Yagi K. The occurrence of superoxide anion in the reaction of reduced phenacinemethosulfate and molecular oxygen. Biochem. Biophys. Res. Commun. 1972; 46: 849-854.
14. Карпищенко А.И. Медицинские лабораторные технологии и диагностика: справочник: в 2 т. Т. 2. СПб.: Интермедика; 1999. 656.
15. Асатиани В.С. Ферментные методы анализа. М.; 1969: 607-610.
16. Ellman G.L. Tissue sulfhydryl groups. Arch. Biochem. Biophys. 1959; 82 (1): 70-77.
17. Северин С.Е. Биологическая химия. М.; 2011. 364.
18. Dulinska I., Targosz M., Strojny W., Lekka M., Czuba P., Balwierz W., Szymonski M. Stiffness of normal and pathological erythrocytes studied by means of atomic force microscopy. J. Biochem. Biophys. Methods. 2006; 66 (1-3): 1-11.
19. Арсланова Д.Р., Генинг Т.П. Динамическое равновесие в системе ПОЛ-Антиоксидант яичников крыс в процессе онтогенеза. Сибирский консилиум. 2007; 7: 157.
20. Воронова О.С., Генинг Т.П., Сысолятин А.А., Светухин В.В. Влияние фемтосекундного лазерного излучения на про-антиоксидантный статус мышей с экспериментальным раком шейки матки. Ульяновский медико-биологический журнал. 2012; 3: 123-128.
21. Dursun H., Bilici M., Uyanik A., Okcu N., Akyuz M. Antioxidant Enzyme Activitiesand Lipid Peroxidation Levels in Erythrocytes of Patients with Oesophageal and Gastric Cancer. J. Int. Med. Res. 2006; 34: 193-199.
22. Бурлакова Е.Б., Алесенко Ф.В., Молочкина Е.М. Биоантиоксиданты в лучевом поражении и злокачественном росте. М.; 1975. 214.
23. Mukundan H., Bahadur A.K., Kumar A. Glutathione level and its relation to radiation therapy in patients with cancer of uterine cervix. Indian J. Exp. Biol. 1999; 9: 859-864.
24. Navarro J., Obrador E., Carretero J. Changes in glutathione status and the antioxidant system in blood and in cancer cells associate with tumour growth in vivo. Free Radic. Biol Med. 1999; 3-4: 410-418.
25. Della Rovere F., Granata A., Saija A., Broccio M., Tomaino A., Zirilli A., De Caridi G., Broccio G. SH groups and glutathione in cancer patient's blood. Anticancer Res. 2000; 20 (3A): 1595-1598.
26. Pastore A., Federici G., Bertini E., Piemonte F. Analysis of glutathione: implication in redox and detoxification. Clin. Chim. Acta. 2003; 333 (1): 19-39.
27. Batko J. The effect of experimental neoplastic disease on malondialdehyde level and glutathione status in erythrocytes of rats. Acta Biochim. Pol. 1997; 44 (4): 767-769.
28. Gilge J.L., Fisher M., Chai Y.C. The effect of oxidant and the non-oxidant alteration of cellular thiol concentration on the formation of protein mixed-disulfides in HEK 293 cells. PLoS One. 2008; 3 (12): 4015.
29. Калинина Е.В., Чернов Н.Н., Новичкова М.Д. Роль глутатиона, глутатионтрансферазы и глу-таредоксина в регуляции редокс-зависимых процессов. Успехи биологической химии. 2014; 54: 299-348.
30. Сурикова Е.И., Сергеева М.М., Горошинская И.А., Максимова Н.А., Шалашная Е.В. Состояние антиоксидантной системы эритроцитов и содержание гаптоглобина в крови больных раком яичников с различной васкуляризацией локальной рецидивной опухоли. Современные проблемы науки и образования. 2012; 2.
MECHANISMS OF OCCURENCE OF OXIDATIVE STRESS IN ERYTHROCYTES OF TUMOR-BEARING ORGANISM
T.P. Gening1, A.Yu. Fedotova1, D.R. Dolgova1, T.V. Abakumova1, I.I. Antoneeva1, O.S. Voronova2
Ulyanovsk State University, Ulyanovsk, Russia;
Ulyanovsk Civil Aviation Institute named after the Chief Marshal B.P. Bugaev, Ulyanovsk, Russia
e-mail: tonechkatuzeeva@mail.ru
The development of neoplasm in the body is accompanied by activation of lipid peroxidation and changes in enzyme activity level in peripheral blood erythrocytes. Oxidative stress is caused by the accumulation of intermediate metabolites in erythrocytes, as a result of tumor impact on the body. Thus, the activation of free radical oxidation is a standard efferent link of the systemic tumor effect. There is no consensus regarding the activity and role of antioxidant enzymes in the oxidative stress during the development of neoplasms.
The purpose of our study was to evaluate the impact of the enzymatic link of the antioxidant and glutathione systems on the oxidative stress in red blood cells of rats with transplanted ovarian ascitic tumor.
Materials and Methods. The work was performed on the erythrocytes of mongrel white rats with transplanted ascitic ovarian tumor, assessed in stationary and terminal phases of tumor growth. The levels of malondialdehyde, diene conjugates, ketodienes, Schiff bases, activity of glutathione reductase, Glu-tathione-S-transferase, glutathione peroxidase, and levels of reduced and oxidized glutathione were determined biochemically in the erythrocyte hemolysate.
Results. We observed a significant increase in the levels of malondialdehyde and diene conjugates, as well as superoxide dismutase, catalase and Glutathione-S-transferase activity in tumor-bearing rats compared to the controls. The activity of glutathione peroxidase, reduced glutathione levels and the ratio of reduced and oxidized glutathione decreased.
Conclusion. Our data suggests the depletion of reduced glutathione pool as a result of decrease in its formation and enhanced activity of Glutathione-S-transferase under increased lipid peroxidation in red blood cells of tumor-bearing rats.
Keywords: red blood cells, peroxidation, antioxidant system.
References
1. Kryzhanovskiy G.N. Dizregulyatsionnaya patologiya [Disregulation pathology]. Moscow; 2002. 632 (in Russian).
2. Liu F., Mizukami H., Sarnaik S., Ostafin A. Calcium-dependent human erythrocyte cytoskeleton stability analysis through atomic force microscopy. J. Struct. Biol. 2005; 150 (2): 200-210.
3. Chesnokova N.P., Morrison V.V., Ponukalina E.V. O roli aktivatsii svobodnoradikal'nogo okisleniya v strukturnoy i funktsional'noy dezorganizatsii biosistem v usloviyakh patologii [Free radical oxidation in structural and functional disorganization of biosystems under pathology]. Uspekhi sovremennogo estestvoznaniya. 2008; 3: 25-34 (in Russian).
4. Chesnokova N.P., Barsukov V.Yu., Zyablov E.V. Zakonomernosti aktivatsii svobodnoradikal'nogo ok-isleniya i izmeneniy pokazateley kletochnogo sostava perifericheskoy krovi pri follikulyarnoy forme raka shchitovidnoy zhelezy [Free radical oxidation and changes in the parameters of peripheral blood cellular composition in the follicular form of thyroid cancer]. Nauchnye trudy SWorld. 2010; 1: 86-87 (in Russian).
5. Chesnokova N.P., Barsukov V.Yu., Zlobnova O.A. Zakonomernosti izmeneniy gormonal'nogo balans v dinamike opukholevoy progressii u bol'nykh rakom molochnoy zhelezy [Changes in the hormonal balance under tumor progression in patients with breast cancer]. Uspekhi sovremennogo estestvoznaniya. 2011; 4: 47-54 (in Russian).
6. Sharipov F.K., Belenkov Yu.O., Kireev G.V. Dinamika svobodnoradikal'nogo okisleniya v tkani shtamma sarkoma-45 kak pokazatel' vzaimodeystviya opukholi i organizma [Dynamics of free-radical oxidation in sarcoma-45 strain tissue as an indicator of tumor-organism interaction]. Voprosy onkologii. 2005; 2: 227-229 (in Russian).
7. Agabekov A.I., Barsukov V.Yu., Chesnokova N.P. O roli aktivatsii protsessov lipoperoksidatsii i ne-dostatochnosti antiradikal'noy zashchity krovi v patogeneze raka obodochnoy kishki [Activation of lipid peroxidation processes and insufficiency of antiradical blood protection in the pathogenesis of colon cancer]. Sovremennyy vzglyad na budushchee nauki [Modern outlook on the future science]. Mezhdu-narodnaya nauchno-prakticheskaya konferentsiya [International research-to-practical conference]. Ufa: Nauchnyy tsentr «AETERNA»; 2014: 44-47 (in Russian).
8. Manoharan S., Klanjiappan K., Kayalvizi M. Enhanced. Lipid peroxidation and impaired enzymatic antioxidant activities in the erythrocytes of the patients with cervical carcinoma. Cell Mol. Bio Lett. 2004; 9 (4A): 699-707.
9. Chesnokova N.P., Barsukov V.Yu., Ponukalina E.V., Agabekov A.I. Zakonomernosti izmeneniy protsessov svobodnoradikal'noy destabilizatsii biologicheskikh membran pri adenokartsinome voskhodya-shchego otdela obodochnoy kishki, ikh rol' v razvitii opukholevoy progressii [Changes in free radical destabilization processes of biological membranes under colon cancer ascendant adenocarcinoma and their impact on neoplastic proliferation development]. Fundamental'nye issledovaniya. 2015; 1: 164168 (in Russian).
10. Polat M.F., Taysi S., Gul M., Cikman O., Yilmaz I., Bakan E., Erdogan F. Oxidant/antioxidant status in blood of patients with malignant breast tumor and benign breast disease. Cell Biochem Funct. 2002; 20 (4): 327.
11. Volchegorskiy V.A., Nalimov A.G., Yarovinskiy B.G. Sopostavlenie razlichnykh podkhodov k opre-deleniyu produktov perekisnogo okisleniya lipidov v geptan-izopropanolovykh ekstraktakh krovi [Different approaches to the determination of lipid peroxidation products in heptane-isopropanol blood extracts]. Voprosy meditsinskoy khimii. 1989; 1: 127-131 (in Russian).
12. Andreeva L.I., Kozhemyakin L.A., Kishkun A.A. Modifikatsiya metoda opredeleniya perekisey lipidov v teste s tiobarbiturovoy kislotoy [Updating the method for lipid peroxide determination in the test with thiobarbituric acid]. Laboratornoe delo. 1988; 11: 41-43 (in Russian).
13. Nishikimi M., Appa N., Yagi K. The occurrence of superoxide anion in the reaction of reduced phenacinemethosulfate and molecular oxygen. Biochem. Biophys. Res. Commun. 1972; 46: 849-854.
14. Karpishchenko A.I. Meditsinskie laboratornye tekhnologii i diagnostika: spravochnik [Medical and laboratory techniques and diagnostics: manual]. St.-Peterburg: Intermedica; 1999. 656 (in Russian).
15. Asatiani V.S. Fermentnye metody analiza [Enzymatic methods of analysis]. Moscow; 1969: 607-610 (in Russian).
16. Ellman G.L. Tissue sulfhydryl groups. Arch. Biochem. Biophys. 1959; 82 (1): 70-77.
17. Severin S.E. Biologicheskaya khimiya [Biological chemistry]. Moscow; 2011. 364 (in Russian).
18. Dulinska I., Targosz M., Strojny W., Lekka M., Czuba P., Balwierz W., Szymonski M. Stiffness of normal and pathological erythrocytes studied by means of atomic force microscopy. J. Biochem. Biophys. Methods. 2006; 66 (1-3): 1-11.
19. Arslanova D.R., Gening T.P. Dinamicheskoe ravnovesie v sisteme POL-Antioksidant yaichnikov krys v protsesse ontogeneza [Dynamic balance in the POL-antioxidant system of ovarian rats during ontogenesis]. Sibirskiy konsilium. 2007; 7: 157 (in Russian).
20. Voronova O.S., Gening T.P., Sysolyatin A.A., Svetukhin V.V. Vliyanie femtosekundnogo lazernogo izlucheniya na pro-antioksidantnyy status myshey s eksperimental'nym rakom sheyki matki [Effect of femtosecond laser radiation on the pro-antioxidant status of mice with experimental cervical cancer]. Ul'yanovskiy mediko-biologicheskiy zhurnal. 2012; 3: 123-128 (in Russian).
21. Dursun H., Bilici M., Uyanik A., Okcu N., Akyuz M. Antioxidant Enzyme Activities and Lipid Peroxidation Levels in Erythrocytes of Patients with Oesophageal and Gastric Cancer. J. Int.Med. Res. 2006; 34: 193-199.
22. Burlakova E.B., Alesenko F.V., Molochkina E.M. Bioantioksidanty v luchevom porazhenii i zloka-chestvennom roste [Bio-antioxidants in radiation damage and malignant growth]. Moscow; 1975. 214 (in Russian).
23. Mukundan H., Bahadur A.K., Kumar A. Glutathione level and its relation to radiation therapy in patients with cancer of uterine cervix. Indian J. Exp. Biol. 1999; 9: 859-864.
24. Navarro J., Obrador E., Carretero J. Changes in glutathione status and the antioxidant system in blood and in cancer cells associate with tumour growth in vivo. Free Radic. Biol. Med. 1999; 3-4: 410-418.
25. Della Rovere F., Granata A., Saija A., Broccio M., Tomaino A., Zirilli A., De Caridi G., Broccio G. SH groups and glutathione in cancer patient's blood. Anticancer Res. 2000; 20 (3A): 1595-1598.
26. Pastore A., Federici G., Bertini E., Piemonte F. Analysis of glutathione: implication in redox and detoxification. Clin. Chim. Acta. 2003; 333 (1): 19-39.
27. Batko J. The effect of experimental neoplastic disease on malondialdehyde level and glutathione status in erythrocytes of rats. Acta Biochim Pol. 1997; 44 (4): 767-769.
28. Gilge J.L., Fisher M., Chai Y.C. The effect of oxidant and the non-oxidant alteration of cellular thiol concentration on the formation of protein mixed-disulfides in HEK 293 cells. PLoS One. 2008; 3 (12): 4015.
29. Kalinina E.V., Chernov N.N., Novichkova M.D. Rol' glutationa, glutationtransferazy i glutaredoksina v regulyatsii redoks-zavisimykh protsessov [Glutathione, glutathione transferase and glutaredoxin in the regulation of redox-dependent processes]. Uspekhi biologicheskoy khimii. 2014; 54: 299-348 (in Russian).
30. Surikova E.I., Sergeeva M.M., Goroshinskaya I.A., Maksimova N.A., Shalashnaya E.V. Sostoyanie an-tioksidantnoy sistemy eritrotsitov i soderzhanie gaptoglobina v krovi bol'nykh rakom yaichnikov s razlichnoy vaskulyarizatsiey lokal'noy retsidivnoy opukholi [Erythrocyte antioxidant system and hap-toglobin level in the blood of patients with ovarian cancer with different vascularization of local recurrent tumor]. Sovremennyeproblemy nauki i obrazovaniya. 2012; 2 (in Russian).
