CC BY
20
УДК 619:616.36-084:619:615.2]:636.4
ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ПРЕПАРАТА «ГЕПРИМ ДЛЯ СВИНЕЙ» НА ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ И ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ПРИ ПРОФИЛАКТИКЕ ГЕПАТОЗОВ
П.В. БУРКОВ, кандидат ветеринарных наук, докторант
А.В. МИФТАХУТДИНОВ, доктор биологических наук, доцент
Уральская государственная академия ветеринарной медицины, Россия, Челябинская область, г. Троицк, ул. Гагарина, 13
E-mail: nirugavm@mail.ru
Резюме. Для профилактики дистрофии печени разработан гепатопротектор «Геприм для свиней». Комплексный состав препарата позволяет не только профилактировать гепатозы, но и воздействовать на органы кроветворения и естественную резистентность. Исследования проводили с целью определения морфо-функционального состояния организма свиней при гепатозах и изучения влияния препарата на некоторые гематологические и иммунологические показатели при профилактике гепатозов. «Геприм для свиней» в опытной группе вводили подкожно однократно в дозе 0,2 мл/кг. У животных ежемесячно отбирали пробы крови для гематологических и иммунологических анализов, осуществляли патоморфологические исследования биоматериала и послеубойную диагностику состояния печени. За период наблюдений в контрольной группе пало 3 гол. с диагнозом гепатоз, в опытной - 1 гол. с диагнозом гастроэнтерит. Дистрофические поражения печени животных характеризуются нарушением клинического статуса и обширными поражениями не только этого органа, но и желудка, а также кишечника. При гистологическом исследовании гепатодистрофия представляет собой смесь белковых и жировых дистрофий, осложненных расстройствами кровообращения и некрозом поврежденных тканей. Применение «Геприм для свиней» обеспечивает поддержание стабильного уровня гематологических показателей в пределах нормы на протяжении всего периода наблюдения. В контрольной группе их изменения, особенно повышенное содержание гемоглобина (от 9,5 до 13,4%) на фоне низкого числа эритроцитов (от 3,6 до 36,7%) свидетельствуют об интоксикации и субклиническом гепатозе. Изучаемый препарат позволяет повысить напряженность гуморального звена показателей естественной резистентности: бактерицидную активность сыворотки крови за период наблюдения - на 3,5.9,7%, лизоцимную - на 2,1.13,3%. При послеубойной диагностике в печени животных опытной группы, в отличие от контрольной, признаков дистрофии не обнаружено. Масса свиней опытной группы за период эксперимента выросла в 9 раз, контрольной - в 8 раз.
Ключевые слова: «Геприм для свиней», дистрофия печени свиней, гематологические показатели, лизоцимная активность сыворотки крови, бактерицидная активность сыворотки крови.
Высокий уровень обменных процессов, инфекционные заболевания, несбалансированные рационы, наличие в кормах для свиней токсинов неизбежно приводит к поражению внутренних органов животных, среди которых центральное место занимает печень, поэтому на ее заболевания приходится 10...20% всех незаразных патологий [1, 2].
Рынок гепатопротекторов на сегодняшний день весьма обширен и представлен препаратами, которые при всех своих достоинствах воздействуют на отдельные звенья патогенеза [3.5], не затрагивая возможностей восстановления функций печени, как в
Достижения науки и техники АПК, №9-2014 _
направлении регенерации органа, так и путем стимулирования защитных сил организма.
Разработанный в Уральской государственной академии ветеринарной медицины препарат «Геприм для свиней», благодаря своему уникальному механизму действия, обладает гепатопротекторными и стимулирующими неспецифические звенья иммунной системы организма свойствами. Препарат содержит модифицированные цитотоксические сыворотки к клеткам и тканям селезенки и печени свиней. Вследствие чего он оказывает комплексное воздействие на все участки патогенеза гепатодистрофий с одновременным усилением регенеративных процессов и размножением специфических клеточных элементов. Помимо стимуляции регенерации гепатоцитов, геприм способен оказывать влияние на кроветворные органы, стимулируя гемопоэз и неспецифические факторы защиты [6].
Цель наших исследований - определить морфо-функциональное состояние организма свиней при гепатозах и изучить влияние «Геприм для свиней» на некоторые гематологические и иммунологические показатели при профилактике гепатозов.
Условия, материалы и методы. Исследования проводили в ООО «Луговской свинокомплекс» Увель-ского района Челябинской области на поросятах крупной белой породы в возрасте 2 мес. Из животных сформировали две группы (опытная и контрольная) по 25 гол. в каждой. Особям опытной группы для профилактики гепатоза однократно подкожно вводили препарат «Геприм для свиней» в дозе 0,2 мл на 1 кг живой массы.
Механизм действия, изучаемого препарата, основан на стимуляции регенерации клеток печени. В основе этого процесса лежит активация деления гепатоцитов цитотоксинами, обусловленная образованием комплекса «цитотоксин-клетка». Относительно продолжительное действие препарата обусловлено раздражением соответствующих органов и тканей практически неизученными продуктами жизнедеятельности самих клеток, которые последние начинают синтезировать уже после создания обозначенного комплекса «цитотоксин-клетка» посредством изменения проницаемости мембран, воздействия на нуклеиновые кислоты и некоторые другие механизмы.
Подобное действие описано в работах Н.В. Иванова [7] и подтверждено экспериментальным путем при изучении динамики содержания сывороточного альбумина, концентрация которого была выше при использовании цитотоксинов, выступающих фармакологической основой препарата «Геприм» [8].
Поросятам контрольной группы инъецировали аналогичное количество физиологического раствора. За всеми животными вели наблюдения в течение 4 мес. Ежемесячно определяли количество эритроцитов, гемоглобина и лейкоцитов в цельной крови, бактерицидную и лизоцимную активность сыворотки крови. Трупы павших животных подвергали патологоанатомическому исследованию с обязательным гистологическим ис-
- 55
Рис. 1. Белковая и жировая дистрофия печени. Некроз в центре печеночной дольки. Окраска гематоксилином и эозином х 200.
следованием печени. Для этого кусочки размером 1 см3 фиксировали 10%-ным раствором формалина на протяжении 72 ч, затем заливали в парафин, изготавливали гистологические срезы и окрашивали их гематоксилином и эозином. Срезы микроскопировали при 400-кратном увеличении, фотографировали с помощью микроскопа Leica DMRXA и камеры Leica DFC 290. В конце опытного периода контрольный убой животных обеих групп сопровождали патологоанатомическим исследованием печени. Математическую обработку результатов проводили с помощью программы Biostat.
Результаты и обсуждение. За период наблюдений в контрольной группе пало 3 гол. с диагнозом гепатоз, в опытной - 1 гол. с диагнозом гастроэнтерит.
Клинически гепатоз у поросят характеризовался общим угнетением или депрессивным состоянием, замедленной реакцией на раздражители, расстройством аппетита или полным отказом от корма, ослаблением сердечной деятельности и затруднением дыхания, общей слабостью и диспепсией.
Трупы павших животных были истощены, глаза запавшие. Кожные покровы серо-розового цвета, в области ануса запачканы каловыми массами. Основные патологоанатомические изменения у павших особей сосредоточены в органах желудочно-кишечного тракта и помимо изменений в печени сопровождаются поражениями желудка и кишечника. Желудок павших поросят вздут и растянут газами, содержимое имеет кашицеобразную консистенцию и кисловатый запах. Слизистая оболочка желудка покрасневшая, набухшая, покрыта большим количеством густой вязкой слизи и собрана в грубые, не расправляющиеся складки. Петли тонкого и толстого кишечника расширены, содержимое мягкой консистенции. Слизистая оболочка тонкого отдела кишечника набухшая, покрасневшая, собрана в складки. Сосуды брыжейки гиперемированы, брыжеечные лимфатические узлы увеличены в объеме, паренхима сочная, на разрезе выбухает. Печень в объеме увеличена, бледная,
Рис. 2. Эритростаз и сладжирование эритроцитов в центре печеночной дольки. Окраска гематоксилином и эозином х400.
на ощупь мягкой, дряблой консистенции. Дольчатость сглажена. При надавливании пальцами углубления не выравниваются. Поверхность имеет мозаичную окраску: участки серого цвета чередуются с участками коричнево-желтого, серо-желтого и глинистого цветов. Паренхима органа ломкая и сравнительно легко разрывается руками. Поверхность разреза печени мутная, тусклая, напоминает обваренное кипятком мясо; малокровная, окрашена от серо-коричневого до глинисто-желтого цветов.
При гистологическом исследовании печени (рис. 1 и 2) установлено наличие в органе паретического венозного и капиллярного полнокровия с картиной эритростазов и сладжирования эритроцитов в центрах долек. Наблюдается дискомплексация балок из-за расширения перикапиллярных пространств. Во всех полях зрения - центролобулярные некрозы гепатоци-тов, по периферии долек - тяжелая белковая и мелкокапельная жировая дистрофия гепатоцитов. Стенки портальных трактов утолщены, несколько разрыхлены из-за умеренного отека. По ходу портальных трактов определяется густая нейтрофильно-лимфоцитарная инфильтрация с распространением нейтрофилов по перикапиллярным пространствам.
Показатели дыхательной и защитной функции крови животных опытной группы оставались стабильными в пределах физиологической нормы [9] и не претерпевали больших изменений на протяжении всего периода исследований (см. табл.). В то же время у свиней контрольной группы они сильно варьировали. Так,
Таблица. Показатели дыхательной и защитной функции крови свиней
Показатель Количество эритроцитов, 1012/л Содержание гемоглобина, г/л Количество лейкоцитов, 109 Бактерицидная активность сыворотки крови, % Лизоцимная активность сыворотки крови, %
1 месяц эксперимента
Опыт 6,42±0,48* 114,3±2,0** 14,45±1,05** 46,93±0,15 35,37±0,49
Контроль 5,78±0,08 134,40±18,05 20,1±3,5 45,33±0,29 34,63±0,23
2 месяц эксперимента
Опыт 6,4±0,1** 104,3±12,3** 14,0±2,4* 48,22±0,77* 39,63±0,37*
Контроль 3,8±0,1 135,0±8,1 12,3±1,9 45,20±0,21 35,47±0,35
3 месяц эксперимента
Опыт 6,6±0,3 106,3±2,3* 13,4±0,7 48,50±0,35** 40,03±0,09**
Контроль 6,4±0,3 132,3±2,9 12,8±2,2 44,20±0,15 35,73±0,28
4 месяц эксперимента
Опыт 6,3±0,1** 116,3±4,9* 13,1±0,5 48,63±0,41* 40,82±0,32**
Контроль 4,7±0,1 130,3±5,3 14,7±1,6 45,50±0,32 36,03±0,07
Примечание: опыт-контроль * - р<0,05; ** - р<0,01
__Достижения науки и техники АПК, №9-2014
количество эритроцитов в крови животных в контроле находилось ниже нижней границы нормы на первый, второй и четвертый месяцы, а содержание гемоглобина превышало ее верхнюю границу на протяжении всего эксперимента по месяцам соответственно на 12,9, 13,4, 11,2 и 9,5%. Количество лейкоцитов в контрольной группе было больше, чем в опытной, а также по сравнению с физиологической нормой, только в первый месяц эксперимента - соответственно на 39,1 и 25,6%.
В период наблюдения отмечен рост величин показателей гуморального звена естественной резистентности. Бактерицидная активность сыворотки крови в опытной группе в первый, второй, третий и четвертые месяцы наблюдения была выше, чем в контрольной, на 3,5, 6,7, 9,7 и 6,9% соответственно, лизоцимная - на 2,1, 11,7, 12,0 и 13,3%.
Предубойная масса тела свиней опытной группы составила в среднем 122,0 кг, контрольной - 105,6 кг, то есть выросла за период исследований соответственно в 9 и 8 раз.
По результатам контрольного убоя в печени животных, которые не получали изучаемый препарат, были обнаружены участки зернистой и жировой дистрофии. У особей опытной группы патологоанатомических изменений печени, характеризующих дистрофическое поражение, не отмечали.
Гепатодистрофия у свиней, по нашим наблюдениям, сопровождается тяжелыми расстройствами клиниче-
ского статуса и обширными поражениями как печени, так и желудка и кишечника, что согласуется с данными В.М. Данилевского (1989) [1]. При микроскопии пораженных участков печени гепатозы свиней представляют собой смесь белковых и жировых дистрофий, осложненных расстройствами кровообращения и некрозом поврежденных тканей. Применение препарата «Геприм для свиней» обеспечивает поддержание стабильного уровня гематологических показателей крови на протяжении всего периода наблюдения, в то время как в контрольной группе их изменения, и особенно повышенное содержание гемоглобина на фоне низкого числа эритроцитов свидетельствуют об интоксикации и наличии субклинического гепатоза [10, 11].
Выводы. Клинико-патологические гепатозы у молодняка свиней характеризуются нарушениями общего состояния и тяжелыми дистрофическим и воспалительными поражениями органов пищеварения: печени, желудка и кишечника.
Использование модифицированных цитотоксинов препарата «Геприм для свиней» стабилизирует гематологические показатели у животных на протяжении всего опыта, по сравнению с контрольной группой, в которой наблюдаются признаки субклинического гепатоза.
«Геприм для свиней» обладает стимулирующим влиянием на факторы естественной резистентности, увеличивая показатели бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови свиней.
Литература.
1. Данилевский В.М. Профилактика болезней печени при откорме животных//Ветеринария. 1989. №11. С. 21-24.
2. Миронова О.А., Бутенков А.И., Коваленко А.В. Вегетативная активность у поросят, больных гепатитом микотоксикозной этиологии // Ветеринарная патология. 2009. №3. С. 92.
3. Effect of ornitineaspartate infusion on elevated serum ammonia randomized, placebo-controlled double-blind multicentre trial/ Feher J., Lang I., GodlA. et al. //Medical Science Monitor. 1997. №3. P. 5-9.
4. Luper S. A review of plants used in the treatment of liver diseases: part 1. // Alternative Medicine Review. 1998. Vol. 3. P. 410-421.
5. Protective effects of rutin on liver injury induced by biliary obstruction in rats / P.H. Pan, S.Y. Lin, Y.Y. Wang, W.Y. Chen, Y.H. Chuang, C.C. Wu, C.J. Chen // Free Radical Biology and Medicine. 2014. №73. Р. 106-116.
6. Средство для профилактики гепатоза у свиней Бурков П.В., Щербаков П.Н., Щербакова Т.Б. Федеральная служба по интеллектуальной собственности, патентам и товарным знакам, Москва, 2011 Патент № 2416430 от 20 апреля 2011.
7. Иванов Н.В. К вопросу о влиянии овариальных цитотоксинов на яйценоскость у кур // Ученые записки Казанского ветеринарного института. 1934. С. 235-237.
8. Бурков П.В., Щербаков П.Н., Сунагатуллин Ф.А. Влияние препарата «Геприм для свиней» на некоторые биохимические показатели сыворотки крови при профилактике гепатоза // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. 2011. Т. 205. С. 26-31.
9. Кондрахин И.П., Левченко В.И. Диагностика и терапия внутренних болезней животных. М.: Аквариум-Принт. 2005. 830 с.
10. Бабанин И.В., Мерзленко Р.А. Новое в лечении свиноматок, больных гепатозом // Свиноводство. 2013. №1. С. 54-55.
11. Гепатодистрофия поросят и ее профилактика / С.М. Сулейманов, В.С. Слободяник, П.А. Паршин, А.В. Гребенщиков, О.В. Чудненко, В.И. Паршина, В.Б. Чудненко, С.А. Шумейко//Ветеринарная патология. 2005. №3. С. 118-124.
STUDY OF THE INFLUENCE OF PREPARATION «HEPRIM FOR PIGS» ON HEMATOLOGICAL AND IMMUNOLOGICAL PARAMETERS IN THE PREVENTION OF HEPATOSIS
P.V. Burkov, A.V. Miftakhutdinov
Ural state academy of veterinary medicine, Russia, Chelyabinsk region, Troitsk, Gagarin Street, 13
Summary. For the prevention of liver dystrophy hepatoprotektor «Heprim for pigs» was developed. The complex composition of the drug can not only take prophylactic measures for hepatosis but also affect the blood forming organs and natural resistance. The aim of the study was to determine the morphological and functional state of pigs with hepatosis and examine the influence of the preparation on some hematological and immunological parameters in the prevention of hepatosis. «Heprim for pigs» was administered percutaneously once in a dose of 0.2 ml/kg. Blood samples of animals were taken monthly for hematological and immunological analyses, pathomorphological tests of biomaterial and postmortem diagnosis of liver state were carried out. During the observation period 3 heads died with the diagnosis of hepatosis in the control group; in the experimental group one pig died with a diagnosis of gastroenteritis. Degenerative liver damage in animals is characterized by impaired clinical status and extensive lesions not only of the organ, but also of the stomach and intestine. Histological examination of hepatosis is a mixture of protein and fat dystrophies complicated with disorders of blood circulation and necrosis of damaged tissues. Application of «Heprim for pigs» provides a stable level in the normal range of hematological parameters throughout the entire period of observation, in the control group their changes, and especially the high level of hemoglobin (from 9.5 to 13.4 %) against the background of low number of red blood cells (from 3.6 to 36.7 %) is the evidence of intoxication and subclinical hepatosis. The studied preparation makes it possible to increase the tension of humoral indicators of natural resistance: bactericidal activity of blood serum over the period of observation on 3.5...9.7 %, lyzozyme activity - by 2.1...13.3 %. With post-mortem diagnostics of liver of animals from the experimental group, compared with the control one, the signs of dystrophy were not found. During the experiment, the weight of pigs of the experimental group increased 9 times, of the control group - 8 times. Keywords: "Heprim for pigs", liver distrophy of pigs, hematological indices, serum lysozyme activity, serum bactericidal activity.
Достижения науки и техники АПК, №9-2014 _ 57
