CC BY
45
Изучение степени влияния эдемагеноза на иммунологический статус северных оленей в хозяйствах Ямало-Ненецкого автономного округа
Ю.А. Мамонтова, аспирантка, ВНИИВЭиА
Иммунная система является одной из важнейших гомеостатических систем организма, которая во многом определяет степень здоровья животных и их адаптивные возможности. Нарушение функции иммунной системы рассматривается как один из патогенетических механизмов любого патологического процесса [1]. Исследование иммунологического статуса проводится для оценки функционального состояния иммунной системы, идентификации нарушенного звена в ней при первичных и вторичных иммунодефицитных состояниях, изучения влияния на животного различных неблагоприятных факторов [2, 3]. Интерес к проблеме иммунологического мониторинга обусловлен, прежде всего, тем, что иммунная система представляет индикаторную систему экологического неблагополучия, т.к. чутко реагирует на изменения окружающей
среды. При этом важное значение имеет оценка иммунного статуса северных оленей, находящихся в суровых климатических условиях.
Выбор иммунологических показателей при изучении иммунного статуса у северных оленей основан на том, что в основе иммунодефицит-ных состояний лежит нарушение выполнения иммунной системой защитной функции в связи со структурными или функциональными дефектами отдельных её звеньев. Одним из важных проявлений иммунодефицита у северных оленей является повышенная заболеваемость животных эдемагенозом, в защите от которого принимают участие три основные системы: фагоцитоз, В-система и Т-система иммунитета [2, 4].
С целью изучения основных показателей иммунного статуса северных оленей провели отбор крови у оленей (п = 100), содержащихся в оленеводческих хозяйствах МОП «Ярсалинский», МОП «Панаевский», ГП «Антипаютинский»,
1. Основные показатели состава крови северных оленей в хозяйствах Ямало-Ненецкого автономного округа
Показатели Хозяйство
МОП «Ярсалинский» МОП «Панаевский» ГП «Антипаютинский» Ямальский отдел ГНУ ВНИИВЭА В среднем по округу
Гемоглобин, г% 12,3±1,2 12,8±1,1 13,1±0,9 11,6±1,1 12,5±0,4
Тромбоциты, тыс. 354,0±22,8 279,4±19,2 283±9,7 308,2±7,6 306,3±19,8
Лейкоциты, тыс. 4,9±0,3 5,2±0,1 5,8 ±0,2 4,7±0,2 5,2±0,3
Лейкоцитарная формула, %
Базофилы 0,0 0,9±0,1 0,8±0,1 0,0 0,4±0,3
Эозинофилы 4,0±0,1 3,8±0,1 4,4±0,1 3,2±0,1 3,9±0,3
Юные 0,0 0,0 0,1±0,1 0,0 0,03±0,03
Палочкоядерные 2,2±0,1 3,1±0,1 2,9±0,1 2,0±0,1 2,6±0,3
С егментоядерные 58,3±2,2 61,0±3,8 56,7±1,8 59,2±4,3 58,8±1,0
Лимфоциты 26,4±1,8 34,1±5,1 29,3±2,2 27,9±3,6 29,4±1,9
Моноциты 2,0±0,1 1,7±0,1 2,2±0,1 2,7± 0,1 2,2±0,2
Ямальский отдел ГНУ ВНИИВЭА. Применив гемолитический анализатор Medonic СА 620 и счётчик форменных элементов крови СФК — Минилаб, определи основные показатели крови (табл. 1).
Диагностика иммунодефицита направлена на качественную и количественную оценки звеньев иммунной системы, а также иммуно-регуляторных механизмов, с помощью которых осуществляется созревание, дифференцировка и взаимодействие Т-, В-лимфоцитов, NK-клеток, Ig и компонента. Для идентификации нарушенного звена иммунитета применяется сложный комплекс лабораторных исследований, включающий иммунологические, биохимические методы [2, 5].
Определение количества и функциональной активности Т-клеток и их основных субпопуляций — один из главных методов оценки Т-системы иммунитета и диагностики всех форм иммунодефицита, связанных с нарушением клеточного иммунитета. Для этого нами были определены общее число лимфоцитов, процент и абсолютное количество зрелых Т-лимфоцитов (табл. 2). Для оценки В-системы иммунитета определили важнейшие показатели: процентное и абсолютное число В-лимфоцитов (табл. 3) и уровень продуцируемых ими иммуноглобулинов G,-M классов (табл. 4).
Иммунологические исследования проводили по методикам, предложенным В.Г. Дорофейчук (1968), О.В. Смирновой, Кузьминой (1966), Jondalj (1984), Е. Merdes (1973).
На базе оленьего стада Ямальского отдела ГНУ ВНИИВЭА заложена серия опытов по
изучению степени влияния эдемагеноза на иммунологический статус северных оленей.
С этой целью сформировали подопытную и контрольную группы оленей, от которых в течение исследуемого периода (90 суток) получали сыворотку крови (до заражения, 7-, 15-, 30-, 60- и 90-й дни исследований).
Оленей первой группы экспериментально заразили эдемагенозом путём искусственной подсадки самок. Вторая группа была свободной от оводов. В течение экспериментального периода особи обеих групп содержались в одинаковых условиях и подвергались регулярной обработке инсекто-репелентными препаратами.
После заражения оленей личинками подкожного овода установлено постепенное снижение как относительного, так и абсолютного количества Т-лимфоцитов. До заражения и первые дни после заражения уровень Т-клеток оленей составлял 26,0±1,9%, или 1578,0+82,9 клетки в 1 мкл крови. Кинетика Т-лимфоцитов в группе оленей, свободных от личинок овода, относительная концентрация розеткообразующих Т-лимфоцитов колебалась в пределах от 25,8+1,9 до 35,2+2,1% (табл. 3).
При экспериментальном заражении оленей личинками подкожного овода отмечено постоянное снижение относительного и абсолютного количества В-клеток до 60-го дня исследований. За этот период их число снизилось с 19,4+1,8% (1183,6+75,9 клетки в 1 мкл крови)до 8,6+1,3% (467,6+37,3 клетки в 1 мкм крови), затем к 90-му дню исследований уровень В-клеток увеличился, достигнув уровня 10,6+1,4% (585,0+ 13,2 клетки в 1 мкл крови) (табл. 3).
2. Фоновые показатели иммунологического статуса северных оленей
Т-лимс юциты В-лимфоциты, Среднее кол-во igM, мг/мл Гетерофильные агглютинины log Лизоцимная активность, %
абс. число % абс. число %
1578±82,9 26,0±1,9 1183±75,9 19,4±1,8 0,81±0,1 3,6±0,2 14,7±0,4
3. Динамика показателей среднего количества Т- и В-лимфоцитов оленей,
заражённых эдемагенозом
Показатели Срок эксперимента, дн.
до заражения 7-й 15-й 30-й 60-й 90-й
Среднее количество Т-лимфоцитов
Экспериментальная группа
% абс. число 26,0±1,9 1578,0±82,9 27,2±2,0 1551,4±72,9 22,2±1,8 1449,4±74,5 19,0±1,7 1096,8±5,7 18,8±1,7 1027,0±1,7 18,6±1,7 1032±56,1
Контрольная группа
% абс. число 25,8±1,9 1577,2±44,1 35,2±2,1 2095,4±57,2 35,0±2,1 2178±11,7 33,0±2,1 1996,6±64,8 33,4±2,1 2038,4+12,6 35,2±2,1 2114,2±10,7
Среднее количество В-лимфоцитов
Экспериментальная группа
% абс. число 19,4±1,8 1183±75,9 12,4±1,5 711,2±10,6 12,6±1,6 749,6±13,3 10,4±1,4 600,2±4,66 8,6±1,3 567,6±37,7 10,6±1,4 585,0±13,2
Контрольная группа
% абс. число 16,4±1,6 944,8±32,8 17,2±1,7 1024,2±6,7 11,0±1,4 814,2±11,1 13,0±1,5 787,2±21,6 12,4±1,5 793,4±35,8 16,6±1,6 995,4±34,9
4. Кинетика иммуноглобулинов класса М и G в сыворотке северных оленей
Группа оленей Срок эксперимента, дн.
до заражения 7-й 15-й 30-й 60-й 90-й
Иммуноглобулинов класса М
Экспериментальная, мг/мл контрольная 0,81±0,10 0,80±0,10 1,70±0,33 1,13±0,26 1,24±0,15 1,08±0,15 1,39±0,26 1,24±0,15 I,24±0,15 II,23±0,30 1,40±0,26 1,24±0,15
Иммуноглобулинов класса G
Экспериментальная, мг/мл 25,8±0,3 28,8±0,3 30,2±7,3 30,2±3,7 33,2±0,4 27,8±3,1
контрольная 28,9±0,3 28,9±3,0 25,6±0,3 29,9±0,2 28,9±2,0 28,9±0,3
5. Лизоцимная активность в сыворотке северных оленей, заражённых личинками подкожного овода
Группа оленей Срок эксперимента, дн.
до заражения 7-й 15-й 30-й 60-й 90-й
Иммуноглобулинов класса М
Экспериментальная, % 12,1±0,3 1,6±0,6 14,0±1,7 14,2±1,7 15,8±2,7 15,8±2,7
Контрольная, % 14,7±0,4 16,0±1,0 17,5±3,1 25,0±0,1 25,0±1,6 26,0±0,5
6. Динамика титра гетерофильных агглютининов в сыворотке крови северных оленей
Группа оленей Срок эксперимента, дн.
до заражения 7-й 15-й 30-й 60-й 90-й
Иммуноглобулинов класса М
Экспериментальная, % 3,2±0,1 3,0±0,1 2,4±0,3 2,6±0,3 2,4±0,2 2,2±0,3
Контрольная % 3,6±0,2 3,2,±0,2 3,4±0,1 3,8±0,3 3,8±0,3 4,0±0,2
Следует отметить, что хотя к концу исследований количество В-лимфоцитов и увеличилось, но оно было в 1,8 раза меньше по сравнению с фоновым показателем. У оленей, свободных от личинок подкожного овода, уровень В-лимфоцитов колебался в пределах от 11,0±1,4% (814,2±11,1 клетки в 1 мкл крови) до 17,2±1,7% (1024,2±6,7 клетки в 1 мкл крови).
Угнетение В-системы вероятно связано с образованием большого количества В-супрессоров, что коррелирует с тяжестью течения патологического процесса.
Динамика иммуноглобулина М незначительно изменилась, главным образом в первые 7 дней, сопровождаясь увеличением с 0,81±0,10 мг/мл до 1,70±0,33 мг/мл (табл. 4).
Уровень иммуноглобулина класса G увеличивался, начиная с 25,8±0,3 мг/мл (фоновый показатель) до 33,2±0,4 (60-й день опыта).
Показатели лизоцима у незаражённых животных постепенно повышались с уровня 14,7±0,7% и достигли максимума 26,0±0,5% к 90-му дню исследований, что в 1,76 раза больше исходного уровня, тогда как у инвазированных особей показатель активности лизоцима к завершению эксперимента возрос в 1,30 раза и составил 15,8±2,7 (табл. 5).
При изучении динамики гетерофильных агглютининов у незаражённых оленей резких изменений в титре антител не установлено, предел колебаний log 3,6±0,2—4,0±0,2. У инва-зированных животных, на протяжении периода исследований титр гетерофильных агглютининов плавно снижался с уровня log 3,2±0,1 до log 2,2±0,3 (табл. 6).
Результаты исследований позволили нам сделать следующие выводы.
1. Поражённость оленей эдемагенозом в среднем по округу составила 10,1%.
2. После заражения оленей личинками подкожного овода установили постепенное снижение как относительного, так и абсолютного количества Т- и В-лимфоцитов.
3. Динамика иммуноглобулина М изменялась незначительно главным образом в первые 7 дней, сопровождаясь увеличением с 0,81±0,10 мг/мл до 1,70±0,33 мг/мл.
4. Уровень иммуноглобулина класса G плавно увеличивался с 25,8±0,3 мг/мл (фоновый показатель) до 33,2±0,4 мг/мл (60-й день опыта).
5. Показатель активности лизоцима у неза-ражённых животных постепенно повышался и достиг максимума к 90-му дню исследований, что в 1,76 раза больше исходного уровня, тогда как у инвазированных особей показатель активности лизоцима к завершению эксперимента увеличился лишь в 1,30 раза и составлял 15,8%.
6. Титр гетерофильных агглютининов у ин-вазированных животных на протяжении всего периода исследований плавно снижался с уровня log 3,2±0,1 до log 2,2±0,3.
Литература
1. Петров Р.В., Ковальчук Л.В., Чередеев А.Н. Оценка иммунного статуса человека. М., 1984.
2. Петров Р.В., Хаитов Р.М., Манько В.М. Оценка иммунного статуса, иммунологический мониторинг — современные проблемы клинической иммунологии и аллергологии // Иммунология. 1994. №6. С. 4-9.
3. Петров Р.В., Хаитов Р.М., Пинегин Б.В. Иммунодиагностика иммунодефицитов // Иммунология. 1997. №4. С. 4-7.
4. Ярилин АА Основы иммунологии. М.: Медицина, 1999. 608 с.
5. Tizard I.R. Veterinary Immunology. An Introduction, 2000. Six edition. 482 p.
