CC BY
16
Качество и безопасность пищи. Методы контроля
цов [Certified Reference Material (CRM)] ERM-BF435a (0% ГМО, немодифицированный картофель) и ERM-BF435b (100% ГМ картофель линии PH05-026-0048), AV43-6-G7 (CRM, ERM-BF431e). Метод идентификации ГМ картофеля линии PH05-026-0048, основан на полимеразной цепной реакции (ПЦР-РВ) по технологии TaqMan® PCR. Протокол ПЦР разработан и валидирован European Commission Joint Research Centre. Идентификация трансформационного события выполнена с использованием пары праймеров, один из которых расположен внутри перенесенной генетической конструкции, другой - в области геномной ДНК картофеля, прилегающей к трансгенной вставке, олигонуклеотидного зонда с репортерным флуоресцентным красителем FAM (6-карбоксифлуоресцеин) на 5'-конце и гасителем BHQ1, относящимся к семейству красителей Black Hole Quenchers, - на З'-конце.
Относительное количество ГМ картофеля PH05-026-0048 определяли на основании калибровочной кривой (график зависимости логарифма процента концентрации от величины ACt для каждой калибровочной точки).
Результаты и обсуждение. Специфичность праймерной системы для идентификации трансформационного события PH05-026-0048 методом ПЦР-РВ подтверждена в исследованиях с другими ГМ линиями картофеля, а также результатами BLAST-анализа.
Диапазон применения метода, определяемый как интервал между наибольшей и наименьшей концентрациями определяемого вещества в образце, при котором аналитическая методика имеет приемлемый уровень прецизионности, правильности и линейности, вычисляли по калибровочной кривой с содержанием ГМ картофеля РН05-026-0048 от 0,1 до 50%. Угол наклона стандартной кривой в диапазоне рабочих концентраций от 0,1 до 50% составлял 3,392°, коэффициент корреляции линейной регрессии равен 0,99, эффективность амплификации составляла 90,7%. Данные результаты подтверждают наличие прямо пропорциональной зависимости аналитического сигнала от количества определяемого вещества в образце и соответственно линейность метода. Предел обнаружения геномной ДНК составляет 0,019% или 11 копий ДНК картофеля линии PH05-026-0048 из расчета на 100 нг суммарной ДНК при RSDr <25%. Предел количественного обнаружения составляет 0,06% или 36 копий ДНК картофеля линии PH05-026-0048 из расчета на 100 нг суммарной ДНК при RSDr < 25%.
Таким образом, результаты проведенных исследований подтвердили характеристики, определенные для количественного метода идентификации ГМ картофеля линии PH05-026-0048. Высокая специфичность праймеров, линейность и точность метода соответствуют как требованиям международной лаборатории Евросоюза (European Union Reference Laboratory for GM Food and Feed), так и свидетельствует о его надежности и пригодности для обеспечения эффективного надзора за обращением ГМ картофеля в Российской Федерации.
Работа поддержана грантом Российского научного фонда №16-16-04123.
Фомина С.Ф., Степанова Н.В.
ИЗУЧЕНИЕ ПИТАНИЯ ДЕТЕЙ г. КАЗАНИ И РИСК ЗАБОЛЕВАЕМОСТИ, СВЯЗАННЫЙ С ХИМИЧЕСКОЙ КОНТАМИНАЦИЕЙ ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ
Институт фундаментальной медицины и биологии, ФГАОУ ВО «Казанский федеральный университет»
Актуальность. В последние десятилетия внимание всего мирового сообщества привлечено к проблеме оценки влияния факторов окружающей среды на здоровье детей. Этиопатогенетическая роль питания как фактора риска в современных условиях определяет характер развития алиментарно-зависимых патологий у детей и подростков. В научных публикациях, где представлены расчеты уровней риска для детского населения, не учтена возрастная структура детей, отсутствует информация о значениях факторов экспозиции и лишь в единичных работах используется региональные значения. Вместе с тем известно, что поведенческие факторы экспозиции с возрастом изменяются.
Цель - провести оценку баланса потребления продуктов питания детей 3-6 лет и анализ неканцерогенного риска для здоровья, обусловленного контаминацией продуктов питания свинцом, кадмием, мышьяком и ртутью.
Материал и методы. Оценка баланса потребления продуктов питания детей проводилась в двух основных направлениях: индивидуальное и семейное питание (анкетно-опросный метод) и оценка питания в коллективах, где ребенок получает полный или частичный рацион (хронометражно-весовой метод). Сравнительный анализ фактического потребления основных пищевых веществ, макро- и микроэлементов, витаминов был произведен на основе СанПин 2.4.1.3049-13 (с изм. от 04.04.2014) «Санитарно-эпидемиологические требования к устройству, содержанию и организации режима работы дошкольных образовательных организаций» и МР 2.3.1.2432-08 «Нормы физиологических потребностей в энергии и пищевых веществах для различных групп населения Российской Федерации». Оценка экспозиции свинца (Pb), кадмия (Cd), мышьяка (As) и ртути (Hg), поступающих с продуктами питания, была проведена за 2011-2014 гг. на основании медианы и 95th percentile в соответствии с МУ 2.3.7.2519-09. Оценку неканцерогенного риска осуществляли по результатам исследований в пищевых группах продуктов свинца, кадмия, мышьяка и ртути, выполненных на базе аккредитованной лаборатории ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Республике Татарстан» в соответствии с Р 2.1.10.1920-04 и Агентства по охране окружающей среды USEPA.
Результаты. Сравнительный анализ фактического потребления основных пищевых веществ макро- и микроэлементов с физиологическими нормами для детей дошкольного возраста показал, что соотношение белков, жиров
Материалы XVII Всероссийского конгресса с международным участием «Фундаментальные и прикладные аспекты нутрициологии и диетологии. Лечебное, профилактическое и спортивное питание» (Москва, 29-31 октября 2018 г.)
и углеводов составило 1:1:4,5. Калорийность фактически съеденных рационов в возрастной группе детей 3-6 лет составила 1400±31 ккал, или 78% нормы. Содержание витамина В2 по результатам исследования в два раза превысило установленные физиологические нормы (2,23 мг), содержание железа в норме (10,3 мг). Доля остальных компонентов пищи составила около 65-90% нормы.
Результаты оценки поступления химических веществ с продуктами питания показали, что наибольший вклад в общую суммарную экспозицию изученных контаминант вносят свинец (85,91% на уровне медианы и 87,77% на уровне 95th percentile и мышьяк (14,13% на уровне медианы и 34,28% на уровне 95th percentile. Характеристика риска показала, что коэффициент опасности по метилртути (МеНд) (пересчет поступления ртути с рыбой и морепродуктами) на уровне 95th percentile превысил значение 3,0 (настораживающий риск). Уровни неканцерогенного риска от воздействия свинца, кадмия, ртути являются допустимыми.
Обсуждение. Изучаемые химические контаминанты (Pb, Cd, As, Hg и МеНд), обнаруженные в анализируемых группах пищевых продуктов, обладают потенциальной способностью вызывать в организме различные вредные эффекты. Индексы опасности (HI), рассчитанные на основе медианных значений коэффициентов опасности, менее 3,0 (допустимый риск). Наиболее подвержены общетоксическому действию центральная нервная система и развитие (HI = 4,02 и 3,98 соответственно). Риск развития системных неканцерогенных эффектов, обусловленный преимущественно контаминацией пищевых продуктов свинцом, составил: 46% для гормональной системы и 57% для центральной нервной системы.
Заключение. Результаты оценки поступления основных пищевых веществ с рационом питания детей показали, что доля основных компонентов пищи составила около 65-90% нормы для детей изученного возраста, и это служит основанием для проведения Роспотребнадзором целенаправленных мероприятий по надзору за организацией питания детей в детских образовательных учреждениях и разработки целевых комплексных программ для оптимизации питания.
Основной вклад в суммарную экспозицию с рационом питания детей вносят свинец и мышьяк. На долю поступления кадмия и ртути приходится от 4 до 10%. Настораживающий уровень риска (>3,0) выявлен по метилртути на уровне 95th percentile. Предварительная оценка риска поступления химических контаминант с основными продуктами питания свидетельствует о возможном риске для здоровья детского населения 3-6 лет г. Казани и требует дальнейшего исследования.
Работа выполнена за счет средств субсидии, выделенной ФГАОУ ВО «Казанский федеральный университет» для выполнения государственного задания в сфере научной деятельности 19.9777.2017/8.9.
Хотимченко С.А.1, 2, Багрянцева О.В.1, 2, Гмошинский И.В.1, Ригер Н.А.1, Евстратова А.Д.1, Трушина Э.Н.1, Мустафина О.К.1, Сото Х.С.1, Шипелин В.А.1, Шумакова А.А.1, Демина Т.Ю.1, Леонтьева Э.В.1
ИССЛЕДОВАНИЕ ТОКСИЧНОСТИ ЛИПОФИЛЬНЫХ ФИКОТОКСИНОВ (ОКАДАИКОВОЙ КИСЛОТЫ И ЙЕССОТОКСИНА) В ЭКСПЕРИМЕНТЕ IN VIVO
1 ФГБУН «ФИЦ питания и биотехнологии», Москва
2 ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский университет)
Актуальность. Фикотоксины - это вторичные метаболиты, продуцируемые примерно 100 видами водорослей и фикопланктоном. По химическим свойствам они делятся на гидрофильные, липофильные и амфифильные токсины. Окадаиковая кислота и ее производные - диарейные токсины (DSP-токсины), йессотоксины входят в группу липотропных токсинов (Technicalpaperon Toxicity Equivalency Factors for Marine Biotoxins Associated with Bivalve Molluscs, FAO/WHO, 2016). Недостаточность сведений о биологических свойствах и токсичности фикотоксинов, входящих в эту группу, неспецифичность клинической картины отравления при поступлении малых доз токсинов снижает эффективность мероприятий по управлению рисками, связанными с использованием в рационе морепродуктов.
Цель - определение биомаркеров токсичности окадаиковой кислоты и йессотоксина в экспериментах in vivo и ex vivo.
Материал и методы. Окадаиковая кислота - проведен эксперимент на 74 крысах самцах линии Wistar с исходной массой тела 100±10 г. В работе использовали препарат окадаиковой кислоты производства фирмы Fermentec Ltd. (Израиль). Токсин вводился крысам однократно внутрибрюшинно (контроль - физиологический раствор NaCl) в виде физиологического раствора в концентрациях 50, 100 и 150 мкг/мл. Выведение животных из эксперимента осуществляли через 6, 24 и 168 ч после введения препаратов окадаиковой кислоты путем декапитации под эфирной анестезией. Определяли массу внутренних органов, биохимические и гематологические показатели крови, активность глутатионпероксидазы, небелковых тиолов в печени, уровни цитокинов IFN-y, IL-10, IL-17A в плазме крови и в лизатах клеток печени, апоптоз клеток печени, уровень малонового диальдегида в печени.
Йессотоксин - проведен эксперимент на 72 крысах-самцах линии Wistar с исходной массой тела (м.т.) 100±10 г В работе использовали препарат йессотоксина производства National Research Council Canada (Канада). Растворы,
