CC BY
47
УДК 575.174.015.3:616.248
ИЗУЧЕНИЕ АССОЦИАЦИИ ОДНОНУКЛЕОТИДНЫХ ПОЛИМОРФИЗМОВ RS1800470 ГЕНА ТРАНСФОРМИРУЮЩЕГО ФАКТОРА РОСТА В1 (TGFB1) И RS231775 ГЕНА ЦИТОТОКСИЧЕСКОГО Т-ЛИМФОЦИТ-СВЯЗАННОГО ИММУНОГЛОБУЛИНА 4 (СПА4) С РИСКОМ РАЗВИТИЯ
БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЫ
А.В.Разводовская1, И.И.Черкашина1, С.Ю.Никулина1, В.А.Шестовицкий1, М.И.Воевода2, В.Н.Максимов2, А.Б.Аверьянов*
1Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф.Войно-Ясенецкого Министерства здравоохранения РФ, 660022, г. Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1 2Научно-исследовательский институт терапии Сибирского отделения РАМН, 630089, г. Новосибирск, ул. Бориса Богаткова, 175/1
РЕЗЮМЕ
Целью исследования явилась оценка вклада од-нонуклеотидных полиморфизмов rs1800470 гена TGFB1 и rs231775 гена CTLA4 в формирование предрасположенности к развитию бронхиальной астмы (БА) среди жителей г. Красноярска. Группа больных БА - 100 человек, две контрольные группы, для каждого полиморфизма, соответственно, 282 и 338 человек. Геномную ДНК выделяли из 10 мл венозной крови методом фенол-хлороформной экстракции. Каждый одно-нуклеотидный полиморфизм гена тестировали с помощью полимеразной цепной реакции в реальном времени в соответствии с протоколом фирмы производителя (зонды TaqMan, Applied Biosystems, США) на приборе ABI 7900HT. При изучении распределения генотипов ОНП rs1800470 гена TGFB1 и rs231775 гена CTLA4 среди мужчин и женщин, больных аллергической и неаллергической БА, и лицами контрольной группы выявлены статистически значимые различия. При изучении полиморфизма rs1800470 гена TGFB1 для группы больных неаллергической БА показано отсутствие редких гомозигот GG. Развитие неаллергической астмы статистически значимо ассоциировано с генотипом АА и AG, по сравнению как с группой контроля (р=0,025), так и с группой больных, страдающих аллергической формой БА (р=0,006). При наличии данных генотипов риск неаллергической БА возрастает по сравнению с группой контроля (ОШ = 1,631; 95%-й ДИ = 1,37-1,94) и с группой больных с аллергической БА (ОШ = 1,128; 95%-й ДИ = 1,083,17). При изучении полиморфизма rs231775 гена CTLA4 выявлено повышение частоты генотипа GG в группе больных аллергической БА, в том числе у женщин. Учитывая полученные результаты, можно сделать вывод, что наличие генотипа GG (ОШ = 2,036; 95%-й ДИ = 1,16-3,58) обусловливает повышенный риск развития аллергической БА по сравнению с группой контроля.
Ключевые слова: однонуклеотидный полиморфизм, ген rs1800470 TGFB1, ген rs231775 CTLA4, бронхиальная астма.
SUMMARY
THE STUDY OF ASSOCIATION OF SINGLE NUCLEOTIDE POLYMORPHISMS OF RS1800470
GENE OF TRANSFORMING GROWTH FACTOR B1 (TGFB1) AND RS231775 GENE OF CYTOTOXIC T-LYMPHOCYTE-CONNECTED IMMUNOGLOBULIN 4 (CTLA4) WITH THE RISK OF BRONCHIAL ASTHMA DEVELOPMENT
A.V.Razvodovskaya1, I.I.Cherkashina1, S.Yu.Nikulina1, V.A.Shestovitsky1, M.I.Voevoda2, V.N.Maksimov2, A.B.Averyanov1
'Krasnoyarsk State Medical University, 1 Partizana Zheleznyaka Str., Krasnoyarsk, 660022, Russian Federation 2Scientific Research Institute of Internal Medicine of Siberian Branch RAMS, 175/1 Borisa Bogatkova Str., Novosibirsk, 630089, Russian Federation
The purpose of the research was to study the influence of single-nucleotide polymorphisms rs1800470 of TGFB1 gene and rs231775 of CTLA4 gene on the susceptibility to the development of bronchial asthma among the population of Krasnoyarsk. The group of patients with bronchial asthma were 100 people; two control groups, respectively, for each polymorphism -282 and 338 people. Genome DNA was extracted from 10 ml of venous blood with phenol-chloroform extraction technique. Single nucleotide gene polymorphism was tested with the help of polymerase chain reaction in real time in accordance with the firm producer protocol (probes TaqMan, Applied Biosystems, USA) on the apparatus ABI 7900HT. While studying the polymorphism rs1800470 of gene TGFB1 for a group of patients with non-allergic asthma the absence of rare homozygous GG was demonstrated. Development of non-allergic asthma significantly associated with genotype AA and AG, in comparison with both the control group (p=0.025) and a group of patients suffering from allergic forms of asthma (p=0.006). If there is evidence of genotypes, non-allergic asthma risk increases compared with the control group (OR = 1.631; 95% CI = 1.37-1.94) and with a group of patients with allergic asthma (OR = 1.128; 95% CI = 1.08-3.17). When studying polymorphism rs231775 CTLA4 gene, increased frequency of genotype GG in the group of patients with allergic asthma, including women, was revealed. Taking into consideration the results obtained, it can be concluded that the presence of the genotype GG (OR = 2.036; 95% CI = 1.16-3.58) causes an increased risk of allergic asthma in comparison with the control group.
Key words: single-nucleotide polymorphism, rs1800470 TGFB1 gene, rs231775 CTLA4gene, bronchial asthma.
Рост заболеваемости, хроническое, часто неконтролируемое течение, недостаточная эффективность существующих методов лечения и профилактики ставят бронхиальную астму (БА) в ряд наиболее актуальных проблем современной медицины. Среди взрослого населения заболеваемость во всем мире составляет более 300 млн человек [3].
В развитии астмы наряду с внешне-средовыми факторами важную роль играет и генетическая предрасположенность. На сегодняшний день можно выделить группы генов, нарушения структуры и функционирования которых могут вносить вклад в формирование БА. К генам-кандидатам астмы относят: гены врожденного иммунного ответа и иммунорегуляции; гены, связанные с дифференцировкой и функционированием Th2; гены иммунитета слизистых оболочек; гены легочной функции и др. [2]. К настоящему времени получены данные о связи БА и полиморфизма примерно 80 генов [2]. Проверялось на ассоциацию с БА 1148 генов (HuGENavigator,version 2.0). В том числе, показана связь одного из генов и морфологической конституции у больных астмой в популяции г. Красноярска [6].
При изучении патогенеза БА представляет интерес исследование возможного участия полиморфизма тех генов-кандидатов, продукты которых принимают участие в формировании как бронхиальной гиперреактивности, так и аллергического воспаления [12]. Среди большого числа генов, которые могут принимать участие в формировании предрасположенности к развитию БА, малоизученным остается ген трансформирующего ростового фактора бета-1 (TGFB1). Данный ген отвечает за синтез белка трансформирующего фактора роста-р1 (TGFP1). TGF-P1 представляет собой многофункциональный пептид, который контролирует пролиферацию, дифференцировку и другие функции во многих типах клеток. TGF-P1 был впервые идентифицирован в тромбоцитах человека как белок с молекулярной массой 25 килодальтон. Зрелые белки TGF-P состоят из 112 аминокислотных остатков и содержат от шести до девяти остатков цистеина, которые образуют как внутри-, так и межмолекулярные дисульфидные связи. Кроме того, TGF-P1 может инги-бировать секрецию и активность многих цитокинов, включая IFNy, TNFa и различные интерлейкины. TGF-Р1 может также увеличить экспрессию определенных цитокинов в Т-клетках и способствовать их распространению, особенно если клетки являются незрелыми. TGF-P1 усиливает пролиферацию, синтез коллагена и фибробластов [11].
Ген TGFB1 расположен на 19 хромосоме, содержит 7 экзонов и очень большое количество интронов [8]. Всего в гене TGF-@1 идентифицировано 5 значимых однонуклеотидных полиморфизмов (ОНП). Зарубежными авторами найдена ассоциация rs1800470 гена TGFB1 с атопической БА. Лица-носители Т аллеля (С-
509Т) имели повышенный риск развития астмы [13]. Ряд исследователей считает, что ген TGFB1 относится к генам, регулирующим врожденный иммунный ответ и иммуннорегуляцию при БА. TGFB1 имеет значение при росте и дифференцировке клеток дыхательных путей во время воспалительного процесса при БА, то есть участвует в патогенезе астмы [16]. По некоторым данным, rs1800470 гена TGFB1 способствует развитию БА, влияет на реактивность и ремоделирование дыхательных путей. Показана взаимосвязь данного гена с тяжестью астмы [10]. Существует мнение, что TGFB1 выступает в качестве противовоспалительного цито-кина, т.е. подавляет аллергическое воспаление. TGFB1 косвенно ингибирует активацию Т-клеток, предотвращает развитие аллергического воспаления через способность ингибировать синтез IgE и за счет ингибирования пролиферации клеток. Наряду с этим, в исследовании среди польского населения не доказана роль гена TGFB1 в развитии БА.
Полиморфизм rs231775 гена CTLA4 (cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4 - поверхностный антиген цитотоксических Т-лимфоцитов) у больных БА изучен недостаточно, его роль в патогенезе заболевания еще окончательно не определена. Проведено 25 исследований, 2 мета-анализа (HuGENavigator,version 2.0).
Ген CTLA4 расположен на хромосоме 2q33 [9] и содержит 4 экзона и 3 интрона. Синоним названия гена - CD152. Изучена роль полиморфизма 49A/G гена CTLA4 в развитии аллергического ринита. У больных с круглогодичной формой аллергического ринита частота функционально «неблагоприятного аллеля» 49A/G гена CTLA4 почти в 1,3 раза превышала аналогичный показатель в группе с сезонной формой, и незначительно - в контрольной группе [1]. В исследовании среди корейского населения было показано влияние полиморфизма +49 A/G гена CTLA4 на выработку IgE и на предрасположенность к развитию БА [15]. Мета-анализ среди китайского населения также подтвердил значение полиморфизма +49A/G гена CTLA4 для риска развития астмы [14]. В литературе имеются сообщения о связи полиморфизмов в промоторе (-318 C/T) T аллеля с развитием тяжелой астмы, и в первом экзоне (+49 A/G) - с гиперреактивностью бронхов дыхательных путей, а также ОНП CT60 гена CTLA4 с ответом на лечение ингаляционными глюкокортикостероидами у детей с атопической БА [7].
Цель исследования - оценить вклад однонуклеотидных полиморфизмов rs1800470 гена TGFB1 и rs 231775 гена CTLA4 в формирование предрасположенности к развитию БА среди жителей г. Красноярска.
Материалы и методы исследования
В исследование включены больные БА в возрасте от 16 до 70 лет. Всеми пациентами подписано информированное согласие на участие в исследовании. Протокол исследования №36/2011 от 22.12.2011 г. был одобрен Этическим комитетом КрасГМУ Больные обследованы в период 2011-2012 гг. на базе Городской поликлиники №6.
В исследовании принимали участие больные с подтвержденным диагнозом БА, способные выполнять спирометрическое обследование и согласные на проведение данного исследования. Из исследования были исключены: больные с неуточнённым диагнозом астмы; больные БА с другими хроническими и острыми заболеваниями легких (ХОБЛ, рак легких, туберкулёз, пневмония и др.); больные БА с тяжёлой сопутствующей и сочетанной патологией (инфаркт миокарда, нестабильная стенокардия, застойная сердечная недостаточность и др.).
Всем пациентам было проведено клинико-инстру-ментальное исследование: клинический осмотр, спирометрия с бронходилатационной пробой, аллергологическое обследование. Обследовано 100 больных БА, жителей г. Красноярска, в том числе 75 женщин и 25 мужчин (основная группа). Средний возраст пациентов составил 50 (37; 57) лет. Диагноз астмы у всех больных был установлен ранее. Степень тяжести, уровень контроля, форма заболевания определены в соответствии с рекомендациями, изложенными в GINA [3]. Среди наблюдавшихся больных диагностированы следующие формы БА: аллергическая - у 68 человек, неаллергическая - у 32 человек. Длительность заболевания в среднем составила при аллергической БА - 7 (4; 14,5) лет, неаллергической - 8 (4; 12,5) лет. Среди сопутствующих заболеваний у больных БА выделены: внелегочные аллергические заболевания - у 25 человек (23,1±4,1%), ишемическая болезнь сердца
- у 6 (5,6±2,2%), гипертоническая болезнь - у 21 (19,4±3,8%), заболевания желудочно-кишечного тракта
- у 3 (2,8±1,6%), заболевания суставов - у 2 (1,9±1,3%), заболевания эндокринной системы - у 3 (2,8±1,6%) человек.
В качестве контроля использовали популяционную выборку жителей г. Новосибирска в количестве 282 и 338 человек для каждого гена, соответственно. Средний возраст их составил 49 (15; 61) лет. Группы были сопоставимы по полу и возрасту (р>0,05).
Молекулярно-генетическое обследование пациентов проводилось в лаборатории молекулярно-генети-ческих исследований терапевтических заболеваний ФГБУ «НИИ терапии и профилактической медицины» СО РАМН (г. Новосибирск). Геномную ДНК выделяли из 10 мл венозной крови методом фенол-хлороформной экстракции. Генотипирование осуществляли методом полимеразной цепной реакции (ПЦР), используя структуру праймеров и параметры температурных циклов, описанных в литературе [5]. Каждый однонуклео-тидный полиморфизм гена тестировали с помощью ПЦР в реальном времени. Для ее проведения использовался прибор ABI 7900HT (Applied Biosystems) и технология TaqMan. Прибор для проведения ПЦР в реальном времени состоит из амплификатора, блока анализа флуоресценции и компьютерного блока со специальным программным обеспечением, с помощью которого можно проанализировать полученный результат. TaqMan ПЦР основана на 5"-экзонуклеазной активности полимеразы. ДНК-зонд, имеющий флуоресцентный краситель на 5" -конце и гаситель флуорес-
ценции на 3"-конце, комплементарен участку ампли-фицируемой области. Гаситель поглощает испускаемое флуоресцентной меткой излучение, а фосфатная группа в 3" -положении блокирует полимеразу. При отжиге зонд количественно связывается с комплементарным участком ДНК. Во время стадии элонгации полимераза синтезирует комплементарную цепь ДНК и, дойдя до участка, гибридизованного с зондом, начинает расщеплять его за счет 5'-экзонуклеазной активности. В результате флуоресцентная метка отделяется от гасителя, и ее свечение может быть детектировано. Увеличение флуоресценции будет прямо пропорционально количеству наработанного ПЦР-продукта. Количество последнего увеличивается с каждым циклом реакции вдвое. Поэтому зависимость количества продукта ПЦР от количества циклов выражается экспо-нентой.
Статистическая обработка полученных данных выполнялась при помощи программы SPSS, версии 19.0. Описательная статистика результатов исследования представлена для качественных признаков в виде процентных долей и их стандартных ошибок. Расчет ошибок для 0% производился по методике А.М.Меркова [4]. Значимость различий качественных признаков в группах наблюдения оценивали при помощи непараметрического критерия х2 Пирсона с поправкой на непрерывность. При частоте встречаемости признака 5 и менее использовался точный критерий Фишера. Различия во всех случаях оценивали, как статистически значимые при р<0,05.
Для анализа количественных признаков, распределение которых было отличным от нормального, использовались непараметрические критерии. Данные представлены в виде: Ме - медиана, [Qp Q3] - интер-квартильный размах (значения 25-го и 75-го перценти-лей, соответственно).
Для оценки риска развития БА по конкретному генотипу производили оценку отношения шансов (ОШ) в таблицах сопряженности 2*2 с расчетом доверительных интервалов. ОШ считали статистически значимым, если в его доверительный интервал не попадала единица.
Результаты исследования и их обсуждение
По полиморфизму rs1800470 гена TGFB1 были про-генотипированы 93 больных с диагнозом БА и 282 человека из контрольной группы (табл. 1).
При сравнении основной и контрольной групп (табл. 1) по частоте встречаемости генотипов rs1800470 гена TGFB1 статистически значимых различий не получено (р=0,967). Изучение распределения генотипов полиморфизма rs1800470 гена TGFB1 среди мужчин и женщин больных аллергической и неаллергической БА и лицами контрольной группы статистически значимых различий также не выявило.
При изучении полиморфизма rs1800470 гена TGFB1 для группы больных неаллергической БА показано отсутствие редких гомозигот GG (табл. 2). Развитие неаллергической астмы статистически значимо ассоциировано с генотипом АА и AG, по сравнению
как с группой контроля (р=0,025), так и с группой боль- астмы возрастает по сравнению с группой контроля ных, страдающих аллергической формой БА (р=0,006). (ОШ=1,631; 95%-й ДИ=1,37-1,94) и с группой больных При наличии данных генотипов риск неаллергической аллергической БА (ОШ=1,128; 95%-й ДИ=1,08-3,17).
Таблица 1
Распределение частот встречаемости генотипов по ОНП ге1800470 гена TGFВ1 среди больных БА и лиц
контрольной группы
Генотипы Основная группа(п=93) Контрольная группа (п=282)
абс. %±т абс. %±т
АА 38 40,9±5,1 111 39,4±2,9
AG 42 45,2±5,2 131 46,5±3,0
GG 13 14,0±3,6 40 14,2±2,1
р 0,967
Примечание: р - критерий значимости при сравнении частоты встречаемости генотипов среди больных БА и лиц контрольной группы.
Таблица 2
Распределение частот встречаемости генотипов по ОНП ге1800470 гена TGFВ1 среди больных БА и лиц
контрольной группы
Генотипы Аллергическая БА (п=62) Неаллергическая БА (п=31) Контрольная группа (п=282)
1 2 3
абс. %±т абс. %±т абс. %±т
АА 21 33,9±6,0 17 54,8±8,9 111 39,4±2,9
AG 28 45,2±6,3 14 45,2±8,9 131 46,5±3,0
GG 13 21,0±5,2 0 0+11,1 40 14,2±2,1
р р1-2=0,013; р1-3=0,380; р2-3=0,049
Генотип AA+AG 49 79,0±5,2 31 100+11,1 242 85,8±2,1
Генотипы GG 13 21,0±5,2 0 0+11,1 40 14,2±2,1
р р1-2=0,006; р1-3=0,180; р2-3= 0,025
ОШ; 95%-й ДИ ОШ(1-2): 1,631 [1,37; 1,94]; ОШ(1-3): 1,605 [0,79; 3,22]; ОШ(2-3): 1,128 [1,08; 1,17]
Примечание: р - критерий значимости при сравнении частоты встречаемости генотипов среди больных аллергической, неаллергической БА и лиц контрольной группы; * - статистически значимые различия с контролем.
Таблица 3
Распределение частот встречаемости генотипов по ОНП ^231775 гена СТЬЛ4 среди больных БА и лиц
контрольной группы
Генотипы Основная группа(п=97) Контрольная группа (п=338)
абс. %±т абс. %±т
АА 23 23,0±4,3 93 27,5±2,4
AG 43 44,3±5,0 171 50,6±2,7
GG 31 32,0±4,7 74 21,9±2,2
р 0,124
Примечание: р - критерий значимости при сравнении частоты встречаемости генотипов среди больных БА и лиц контрольной группы.
По полиморфизму ге231775 гена СТ1А4 были про-генотипированы 97 больных БА и 338 лиц контрольной группы (табл. 3). При исследовании частот полиморфизма ге231775 гена СТЬА4 не выявлено статистически
значимых различий между общей совокупностью больных БА и группой контроля (р=0,124).
Нами изучен полиморфизм ге231775 гена СТ1А4 отдельно среди больных БА и лиц контрольной группы
(табл. 4).
При сравнительном анализе установлено, что в группе больных аллергической БА частота встречаемости генотипа GG была почти в 1,7 раз выше по сравнению с контрольной группой и составила у больных аллергической астмой 36,4%, в контроле - 21,9% (р=0,032). Частота встречаемости генотипов GG и AA+AG полиморфизма ге231775 гена СТ1Л4 в группе больных БА составила 36,4 и 63,6%, соответственно, а в группе контроля - 21,9 и 78,1%, соответственно. Таким образом, риск развития аллергической БА среди жителей г. Красноярска оказался связан с носитель-ством генотипа GG (ОШ=2,036; 95%-й ДИ=1,16-3,58; р1-3=0,012) полиморфизма ге231775 гена СТЬЛ4. Статистически значимые различия в распределении частот генотипов между группами больных неаллергической
БА и лицами контрольной группы по полиморфному локусу ге231775 гена СТ1Л4 не выявлены (табл. 4).
При оценке распределения частот генотипов выявлено, что генотипы AA+AG и GG полиморфизма ге231775 гена СТЬЛ4 составили в группе женщин с аллергической БА, соответственно, 61,2 и 38,8%, а у женщин контрольной группы - 75,1 и 24,9%, соответственно (табл. 5). Согласно полученным данным, наличием генотипа GG обусловлен повышенный риск развития аллергической БА у женщин (ОШ=0,523; 95%-й ДИ =1,0-3,6; р1-3=0,047). Статистически значимые различия в распределении частот генотипов среди мужчин, больных аллергической и неаллергической БА, и мужчин контрольной группы по полиморфному локусу ге231775 гена СТ1Л4 не установлены.
Таблица 4
Распределение частот встречаемости генотипов по ОНП ^231775 гена СТЬЛ4 среди больных БА и лиц
контрольной группы
Генотипы Аллергическая БА (п=66) Неаллергическая БА (п=31) Контрольная группа (п=338)
1 2 3
абс. %±т абс. %±т абс. %±т
АА 12 18,2±4,7 11 35,5±8,6 93 27,5±2,4
AG 30 45,5±6,1 13 41,9±8,9 171 50,6±2,7
GG 24 36,4±5,9* 7 22,6+7,5 74 21,9±2,2
р р1-2=0,137; р1-3=0,032*; р2-3=0,585
Генотип AA+AG 42 63,6±5,9 24 77,4+7,5 264 78,1±2,2
Генотипы GG 24 36,4±5,9* 7 22,6+7,5 74 21,9±2,2
р р1-2=0,175; р1-3=0,012*; р2-3=0,930
ОШ; 95%-й ДИ ОШ(1-2): 1,960 [0,73; 5,20]; ОШ(1-3): 2,036 [1,16; 3,58]; ОШ(2-3): 1,040 [0,43; 2,51]
Примечание: р - критерий значимости при сравнении частоты встречаемости генотипов среди больных аллергической, неаллергической БА и лиц контрольной группы; * - статистически значимые различия с контролем.
Таблица 5
Распределение частот встречаемости генотипов по ОНП ге231775 гена СПЛ4 среди женщин, больных аллергической и неаллергической БА и женщин контрольной группы
Генотипы Женщины с аллергической БА (п=49) Женщины с неаллергической БА (п=23) Женщины контрольной группы (п=233)
1 2 3
абс. %±т абс. %±т абс. %±т
АА 10 20,4±5,8 9 39,1±10,2 61 26,2±2,9
AG 20 40,8±7,0 10 43,5±10,3 114 48,9±3,3
GG 19 38,8±7,0* 4 17,4±7,4 58 24,9±2,8
р р1-2=0,114; р1-3=0,032*; р2-3=0,387
Генотип AA+AG 30 61,2±7,0 19 82,6±7,9 175 75,1±2,8
Генотипы GG 19 38,8±7,0 4 17,4±7,9 58 24,9±2,8
р р1-2=0,070; р1-3=0,047; р2-3=0,423
ОШ; 95%-й ДИ ОШ(1-2): 3,0 [0,88; 10,2]; ОШ(1-3): 0,523 [1,0; 3,6]; ОШ(2-3): 1,574 [0,20; 1,94]
Примечание: р - критерий значимости при сравнении частоты встречаемости генотипов среди женщин с аллергической, неаллергической БА и женщин контрольной группы; * - статистически значимые различия с контролем.
По литературным данным имеется ассоциация rs1800470 гена TGFВ1 и rs231775 гена CTLA4 с повышенным риском развития БА, с тяжестью астмы, с развитием аллергического ринита. Результаты нашего исследования не полностью совпадают с приведенными выше данными. При изучении полиморфизма rs1800470 гена TGFВ1 для группы больных неаллергической БА показано отсутствие редких гомозигот GG. Развитие неаллергической астмы статистически значимо ассоциировано с генотипом АА и AG, по сравнению, как с группой контроля (р=0,025), так и с группой больных, страдающих аллергической формой БА (р=0,006). При наличии данных генотипов риск неаллергической БА возрастает по сравнению с группой контроля (ОШ=1,631; 95%-й ДИ=1,37-1,94) и с группой больных с аллергической БА (ОШ=1,128; 95%-й ДИ =1,08-3,17). При изучении полиморфизма rs231775 гена CTLA4 выявлено повышение частоты генотипа GG в группе больных аллергической БА, в том числе у женщин. Учитывая полученные результаты, можно сделать вывод о том, что наличие генотипа GG (ОШ=2,036; 95%-й ДИ=1,16-3,58; р1-3=0,012) обусловливает повышенный риск развития аллергической БА. Среди мужчин по данному гену статистически значимых различий не выявлено.
ЛИТЕРАТУРА
1. Анализ ассоциации полиморфизма 49А^ гена CTLA4 с развитием аллергического ринита / В.Ш.Алиева и [др] // Цитология и генетика. 2010. Т.44, №3. С.16-20.
2. Генетика бронхиальной астмы / М.Б.Фрейдин [и др.] // Генетика бронхолегочных заболеваний / под ред.
B.П.Пузырева, Л.М.Огородовой. М.: Атмосфера, 2010.
C.78-104.
3. Глобальная стратегия лечения и профилактики бронхиальной астмы (пересмотр 2011 г.) / под ред. А.С.Белевского. М.: Рос. респир. общество, 2012. 108 с.
4. Мерков А.М., Поляков Л.Е. Санитарная статистика (пособие для врачей). Л.: Медицина, 1974. 384 с.
5. Смит К., Калко С., Кантор Ч. Пульс-электрофорез и методы работы с большими молекулами ДНК // Анализ генома. Методы / под ред. К.Дейвиса: пер. с англ. М.: Мир. 1990. С.58-94.
6. Особенности полиморфизма гена хемокинового рецептора CCR5 и морфологической конституции у больных бронхиальной астмой и их родственников / И.И.Черкашина и [др.] // Сиб. мед. обозрение. 2013. №2. С.19-23.
7. Berce V, Potocnik U. Functional polymorphism in CTLA4 gene influences the response to therapy with inhaled corticosteroids in Slovenian children with atopic asthma // Biomarkers. 2010. Vol.15, №2. P.158-166.
8. Intron-exon structure of the human transforming growth factor-p precursor gene / R.Derynck [et al.] // Nucleic Acids Res. 1987. Vol.15, №7. P.3188-3189.
9. The impact of rs231775 (+49AG) CTLA4 gene polymorphism on transplanted kidney function / L.Domanski [et al.] // Ann. Transplant. 2012. Vol.17, №3. P.29-35.
10. Epistatic interactions between Tgfbl and genetic loci, Tgfbm2 and Tgfbm3, determine susceptibility to an asthmatic stimulus / J.Freimuth [et al.] // PNAS. 2012. Vol.109, №44. P.18042-18047.
11. Ishmael F.T. The Inflammatory Response in the Pathogenesis of Asthma // J. Am. Osteopath. Assoc. 2011. Vol.111, №11 (Suppl.7). P.11-17.
12. Association of asthma severity and bronchial hy-perresponsiveness with a polymorphism in the cytotoxic T-lymphocyte antigen-4 gene / S.Y.Lee [et al.] // Chest. 2002. Vol.122, №1. P.171-176.
13. Genetic polymorphisms in transforming growth factor beta-1 (TGFB1) and childhood asthma and atopy / H.Li [et al.] // Hum. Genet. 2007. Vol.121, №5. P.529-538.
14. Nie W., Chen J., Xiu O. Cytotoxic T-Lymphocyte Associated Antigen 4 Polymorphisms and Asthma Risk: A Meta-Analysis // PLoS One. 2012. Vol.7, №7. P.e42062.
15. Association Between Serum IgE Levels and the CTLA4+49A/G and FCER1B-654C/T Polymorphisms in Korean Children With Asthma / K.Y.Oh [et al.] // Allergy Asthma Immunol. Res. 2010. Vol.2, №2. P.127-133.
16. Variants in TGFB1, dust mite exposure, and disease severity in children with asthma / S.Sharma [et al.] // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2009. Vol.179, №5. P.356-362.
REFERENCES
1. Alieva VSh., Karimov H.Ya., Nazarov A.A., Arifov S.S., Boboev K.T. Tsitologiya i genetika 2010; 44(3):16-20.
2. Freydin M.B., Ogorodova L.M., Tsoy A.N., Berd-nikova N.G. Genetika bronkhial'noy astmy. V knige: Puzyrev V.P., Ogorodova L.M. (red.). Genetika bronkhole-gochnykh zabolevaniy [Genetics of bronchial asthma. In: Puzyrev VP., Ogorodova L.M., editors. Genetics of bronchopulmonary diseases]. Moscow: Atmosfera; 2010:78104.
3. Global Initiative for Asthma (GINA). Global strategy for asthma management and prevention (Updated 2011). Available at: www.ginasthma.com.
4. Merkov A.M., Polyakov L.E. Sanitarnaya statistika [Medical statistics]. Leningrad: Meditsina; 1974.
5. Smith K., Kalko C., Cantor Ch. Pul's-elektroforez i metody raboty s bol'shimi molekulami DNK. V knige: Davis K. (red.). Analiz genoma. Metody [Pulse-elec-trophoresis and methods of work with large DNA molecules. In: Davis K., editor. Genome analysis. Methods]. Moscow: Mir; 1990:58-94 (in rus.).
6. Cherkashina I.I., Nikulina S.J., Maksimov V.N., Voivoda M.I., Shestovitsky V.A., Chupakhina V.A., Razvodovskaya A.V. Sibirskoe meditsinskoe obozrenie 2013; 2:19-23.
7. Berce V., Potocnik U. Functional polymorphism in CTLA4 gene influences the response to therapy with inhaled corticosteroids in Slovenian children with atopic asthma. Biomarkers 2010; 15(2):158-166.
8. Derynck R., Rhee L., Chen E.Y., Van Tilburg A. In-tron-exon structure of the human transforming growth fac-tor-ß precursor gene. Nucleic Acids Res. 1987; 15(7):3188-3189.
9. Domanski L., Bobrek-Lesiakowska K., Kloda K.,
Pawlik A., Safranow K., Wisniewska M., Romanowski M., Ciechanowski K. The impact of rs231775 (+49AG) CTLA4 gene polymorphism on transplanted kidney function. Ann. Transplant. 2012; 17(3):29-35.
10. Freimuth J., Clermonta F. F., Huangc X., DeSapio A., Tokuyasu T. A., Sheppard D., Akhurst R.J. Epistatic interactions between Tgfb 1 and genetic loci, Tgfbm2 and Tgfbm3, determine susceptibility to an asthmatic stimulus. PNAS 2012; 109(44):18042-18047.
11. Ishmael F.T. The Inflammatory Response in the Pathogenesis of Asthma. J. Am. Osteopath. Assoc. 2011; 111(11 Suppl.7):s11-s17.
12. Lee S.Y., Lee Y.H., Shin C., Shim J.J., Kang K.H., Yoo S.H., In K.H. Association of asthma severity and bronchial hyperresponsiveness with a polymorphism in the cytotoxic T-lymphocyte antigen-4 gene. Chest 2002; 122(1):171-176.
13. Li H., Romieu I., Wu H., Sienra-Monge J.J, Ramirez-Aguilar M., del Rio-Navarro B.E., del Lara-
Sanchez I.C., Kistner E.O., Gjessing H.K., London S.J. Genetic polymorphisms in transforming growth factor beta-1 (TGFB1) and childhood asthma and atopy. Hum. Genet. 2007; 121(5):529-538.
14. Nie W., Chen J., Xiu O. Cytotoxic T-Lymphocyte Associated Antigen 4 Polymorphisms and Asthma Risk: A Meta-Analysis. PLoS One 2012; 7(7):e42062.
15. Oh K.Y., Kang M.J., Choi W.A., Kwon J.W., Kim B.J., Yu J., Hong S.J. Association Between Serum IgE Levels and the CTLA4+49A/G and FCER1B-654C/T Polymorphisms in Korean Children With Asthma. Allergy Asthma Immunol. Res. 2010; 2(2):127-133.
16. Sharma S., Raby B.A., Hunninghake G.M., Soto-Quirós M., Avila L., Murphy A.J., Lasky-Su J., Klander-man B.J., Sylvia J.S., Weiss S.T., Celedón J.C. Variants in TGFB1, dust mite exposure, and disease severity in children with asthma. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2009; 179(5):356-362.
Поступила 29.10.2014
Контактная информация Анастасия Владимировна Разводовская, аспирант кафедры внутренних болезней №1, Красноярский государственный медицинский университет, 660022, г. Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1.
Е-mail: asenochek@bk.ru Сorrespondence should be addressed to Anastasiya V. Razvodovskaya, MD, Postgraduate student of Department of Internal Medicine №1,
Krasnoyarsk State Medical University, 1 Partizana Zheleznyaka Str., Krasnoyarsk, 660022, Russian Federation.
Е-mail: asenochek@bk.ru
