CC BY
350
Химия растительного сырья. 2013. №1. С. 151-156.
УДК 541.127
ИЗУЧЕНИЕ АНТИОКСИДАНТНЫХ СВОЙСТВ ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ ГОРИССКОГО РЕГИОНА АРМЕНИИ
© Р.Л. Варданян , Л.Р. Варданян, Л.В. Атабекян, Т.С. Григорян
Горисский государственный университет, ул. Авангарда, 4, Горис, 3205 (Армения), e-mail: vrazmik@rambler.ru
Исследовано антиоксидантное действие экстрактов из различных органов 11 лекарственных растений, произрастающих в Горисском регионе Армении. Установлено, что из исследованных экстрактов наибольшее количество антиоксидантов содержатся в плодах жостера и в траве фенхеля конского, а по антиоксидантной активности выделяется экстракт из цветков и корней шафрана.
Ключевые слова: лекарственные растения, антиоксиданты, экстракты, окисление, кумол.
Введение
Причинами проявления сердечно-сосудистых, желудочно-кишечных, злокачественных опухолей и других заболеваний является накопление в организме излишних концентраций свободных радикалов. Для урегулирования концентрации радикалов в живых организмах вырабатываются специальные вещества
- различные ферменты, витамины, обладающие антиоксидантными свойствами. Эти соединения являются ловушкой для свободных радикалов. Естественно, что для профилактики вышеуказанных заболеваний рекомендуются лекарства с содержанием антиоксидантов растительного происхождения [1-3].
Набор антиоксидантов в растениях гораздо богаче, чем в тканях животных и человека. Эго объясняется тем, что растения практически не имеют никаких других средств защиты от агрессивного воздействия окружающей среды. На сегодняшний день известно около 6000 антиоксидантов растительного происхождения [4, 5], объединенных под общим термином - флавоноиды. Все биофлавоноиды в своей основе имеют общую структуру С6-С3-С6, и благодаря наличию гидроксильных групп они являются ловушкой для свободных радикалов. Причем антиоксидантные свойства биофлавоноидов зависят от количества гидроксильных групп [6, 7].
Антиоксидантный состав каждого конкретного растения неповторим как в качественном, так и в количественном отношении. Каждое растение, обладая своей уникальной композицией биоантиоксидантов, одновременно зависит от времени вегетации, от географической местности и климатических условий произрастания [8-10]. Следовательно, прежде чем рекомендовать данное лекарственное растение как продукт, содержащий антиоксиданты, обязательным является изучение его антиоксидантных свойств с указанием географической местности и времени сбора растения.
Цель настоящей работы - изучение антиоксидантной активности и определение содержания антиоксидантных веществ в экстрактах листьев и плодах некоторых лекарственных растений, произрастающих
Варданян Размик Левонович - проректор, доктор в Горисском регионе Армении. В Горисском регионе,
химических наук, профессор, с его уникальным географическим рельефом (от пус-
тынных до альпийских), произрастают самые разные
e-mail: vrazmik@rambler.ru
Варданян Луиза Размиковна - заведующая кафедрой общей химии, кандидатхимических наук, доцент, (более 1000 видов) лекарственные растения, и для
e-mail: vrazmik@rambler.ru практической цели важным является изучение этих
Атабекян Лилит Валериковна - преподаватель Григорян Татевик Суреновна - преподаватель
растений как источников биоантиоксидантов.
* Автор, с которым следует вести переписку.
Таблица 1. Целебные свойства исследованных растений
№ Растение Целебные свойства Орган исследованного растения Используется при болезнях Химический состав
Алколоиды, дубиль-
Барбарис Berberis L. Печени, желчного ные вещества, фито-
1 Желчегонное Листья пузыря, органов хинон, органичес-
пищеварения кие кислоты, токоферолы
Боярышник Антоцианы,
черный Кардиотоническое, Атеросклероз, флавоноиды,
2 (восточный) регулирование Плоды тахикардия и кумарины,
Crataegus кровообращения ишемия органические
orientalis Pall L. кислоты, витамин С
3 Держи-дерево, Христовы тернии Paliurus Мочегонное, противовоспалительное, Плоды Спазмолитическое Галлокатехин, катехин, рутин, кварцетин, жирные ТСИРПОТМ
spina Christi Mill L. отхаркивающее 1 } алкалоиды,
флавоноиды Витамины,
4 5 Ежевика, Rubus caesius L. Успокоительное, отхаркивающее средство, ранозаживляющее Листья, Цветы Гастрит, желудочное кровотечение, легочное кровотечение дубильные вещества, каротин, флавоноиды, органические кислоты, микроэлементы
6 Жостер, Rhamnus L. Слабительное, антибактериальное Плоды Кожные заболевания, язва желудка, Антрахинон, каскарозоиды, эфирные масла
хронические запоры
Сахарный диабет, Витамины А, Е, С,
7 8 Каперсы Capparis L. Болеутоляющее Плоды“ Плоды6 раковые заболевания, незаживающие раны, зубные боли К, рутин, кварцетин, флавонол, микроэлементы Поливитамины,
9 Крапива колючая, Urtica L. Ранозаживляющее Листья Малокровие, при заболеваниях печени микроэлементы, флавоноиды. танины, органические кислоты
10 Лох, Elaeagnus L. Вяжущее средство, противовоспалительное, отхаркивающее Жаждоутоляющее, Плоды Кишечное, воспаление ротовой полости, сердечное Авитаминоз, Фруктоза, глюкоза, танин, белки, органические кислоты, алкалоиды Углеводы, протеины, витамины С,
11 Портулак Portulaca L. стимулятор деательности сердечной мышцы, снижение холестерина Трава бессоницы, дезинтерии, почек и печени, укусы змей и насекомых Е, К, РР, гликозиды, алкалоиды, органические кислоты, норадреналин, дофамин
12 13 Фенхель конский Foeniculum Mill. Отхаркивающее, мочегонное Трава Цветы Кашля Эфирное масло, воск, смолы, дубильные вещества
14 15 Шафран Crocus L. Антисептическое, потогонное Цветы Корень Проблемы с пищеварением, астма, бессонница, Каротиноиды, кроцин, терпинин, пинен
воспаления, рак.
Примечания: а экстракт получен прессованием плодов, этанольный экстракт.
Экспериментальная часть
В качестве объекта исследования использованы приведенные в таблице 1 растения, где вкратце описано их применение в медицине для лечения той или иной заболеваемости [11]. Из химического состава (см. табл. 1) видно, что все исследованные растения содержат продукты, обладающие антиоксидантными свойствами (флавоноиды, токоферолы, катехины, каротиноиды и т.д.). Следовательно, экстракты из разных органов этих растений (листья, плоды, цветы) должны обладать существенными антиоксидантными свойствами. Экстракты получали следующим образом: после сбора объекты высушивали в сушильном шкафу при 40 °С до постоянной массы, далее растирали в керамической ступке до порошкообразного состояния, в полученный порошок при комнатной температуре добавляли дважды перегнанный бензол соотношением 1 : 20 (за исключением плодов каперсов), дали отстояться одни сутки, далее отфильтровывали бумажным фильтром. Фильтрат при комнатной температуре испаряли в вакуумном шкафу до постоянного веса.
Антиоксидантные свойства и их количественное содержание в полученных экстрактах определили на модельной реакции окисления кумола, инициированного азо-ди-изобутиронитрилом (АИБН). Опыты по окислению проводили на газометрической установке с автоматическим регулированием давления [12]. Использованные реактивы (кумол, хлорбензол, АИБН) очищали по методике, описанной в работе [13].
Рис. 1. Кинетические кривые поглощения кислородакумолом в отсутствие (1) ив присутствии 1мг (2) и 2 мг (3) экстракта из плодов жостера: V = 1,63-10-7 моль/лс; [КН]=2,87 моль/л; Т=351К
1, мин
Рис. 2. Кинетические кривые поглощения кислорода кумолом в присутствие 120 мг ЭК (1) и 20 мг ЭДД (2) и зависимость параметра Ф от массы ЭК (1') и ЭДД (2'): У1 = 1,63-10-7моль/лс; [КН]=2,87 моль/л; Т=351К
Обсуждениерезулътатов
Установлено, что при введении в систему АИБН - кумол - хлорбензол исследованных экстрактов (за исключением плодов из каперсов - ЭК и держи-дерево - ЭДД) на кинетических кривых поглощения кислорода появляются четко выраженные периоды индукции, что свидетельствует о наличии в них антиоксидантных веществ. Для иллюстрации на рисунке 1 представлены кинетические кривые поглощения кислорода кумолом в присутствии различных добавок экстрактов из плодов жостера. Обнаруженные периоды индукции описываются уравнением (1), что позволило определить эффективные содержания антиоксидантов (фпН]) в исследованных экстрактах
т = f • [1пН] V , (1)
где [1пН] - концентрация антиоксидантов в использованном экстракте; f - число радикалов, обрывающихся на одной молекуле антиоксиданта; V1 - скорость инициирования.
Помимо содержания антиоксидантов, за время периода индукции из кинетических кривых вычислен также параметр к7, характеризующий активность антиоксидантов. При этом пользовались уравнением (2) [14].
= - 7^1п(1 —), (2)
Ъ7 г
где Ай2 - концентрация поглощенного кислорода за время t < т; [КН] - концентрация кумола (2,87 моль/л); х - период индукции; Ъ2 и к7 - константы скоростей реакций продолжения:
Д°2/ /[ЯН ]
ЯО2 + яи ^ яоои + я*
и линейного обрыва цепей:
ЯО2 + 1пИ ^ ЯООИ + 1п При расчете к7 учитывали, что для кумола к2=4,677 107ехр(-6800/ЯТ) [15].
Из кинетических кривых поглощения кислорода (см. рис. 1) следует, что скорость окисления кумола после выхода из периодов индукции для всех исследованных экстрактов остается существенно заниженной по сравнению со скоростью окисления чистого кумола (на рисунке 1 сравните тангенсы углов прямых 1, 2 и 3). Причем в случае экстрактов из плодов каперсов (экстракт получен методом прессования) и держидерева кинетика поглощения кислорода кумолом осуществляется без периодов индукции (рис. 2, прямые 1 и 2), оставаясь заниженной по сравнению со скоростью его безингибированного окисления. Во всех случаях обнаруженные предельные скорости окисления кумола (V) в присутствии исследованных экстрактов и скорость окисления чистого кумола (^і) находятся в соотношении (3) [14].
ф = = Д2іШ (3)
V V ■Щ’
где [0] - концентрация продуктов окисления антиоксидантов в экстрактах. Предлагается, что 2 образуется по реакции:
ЯО2* + 1п' ^ 2 + молекулярные продукты', где к7\ и к6 - константы скоростей реакции линейного
яо2 + 2 ^ 2* + яоои *
и квадратичного обрыва цепей
ЯО2 + ЯО2 ^ молекулярные продукты*.
Спрямляя экспериментальные данные в координатах уровнения (3), для всех исследованных экстрактов вычислили параметры антиоксидантной активности (к7і). При расчетах учитывали, что для кумола к6=4,74-105-ехр(-1800/ЯТ) [15].
Результаты по измерению содержания антиоксидантов (/-[іпИ]), и их антиоксидантой активности (параметры к7 и к7і) приведены в таблице 2. Из таблицы 2 следует, что из исследованных экстрактов наибольшее количество антиоксидантов содержится в плодах жостера (2,9-10-4 моль/л мг), и в траве фенхеля конского (2,65-10-4 моль/л мг), а наиболее активным антиоксидантом является экстракт из цветов и корней шафрана.
Таблица 2. Содержание антиоксидантов в 1 мг экстракта и их активность, 7=351 К
Объект исследования Время сбора сырья Место произрастания растения / высота от уровня моря, м /[іпИ]-104, моль/л а к710-4, л/моль-с а к71-10-2, л/моль - с а
1 25.04 с. Галидзор / 1100 0,83 2,93 8,26
2 30.09 г. Горис / 1500 0,67 2,41 6,46
3 20.10 Воротанское ущелье / 1200 б б 0,014е
4 29.06 г. Горис /1470 0,65 1,33 2,81
5 29.06 г. Горис / 1470 0,53 5,28 3,61
6 15.10 с. Татев / 1900 2,94 1,62 2,95
7 15.08 г. Ереван / 900 б б 0,0012е
8 15.08 г. Ереван / 900 0,11 2,08 7,40
9 15.03 г. Горис / 1470 0,35 2,50 1,28
10 02.10 г. Арташат / 700 0,27 1,85 7,68
11 25.07 г. Горис / 1400 1,45 0.55 10,23
12 03.07 г. Джермук / 2200 2,65 1,49 1,53
13 03.07 г. Джермук / 2200 1,00 1,55 1,49
14 20.10 с. Хндзореск / 1450 0,12 7,04 27, 78
15 20.10 с. Хндзореск / 1450 0,17 7,02 20, 48
Примечания: а погрешность измеренных величин не превышала 10%; в присутствии этих экстрактов кинетика поглощения кислорода осуществляется без периодов индукции; в размерность к71 (мг-с)-1.
Заключение
Исследовано антиоксидантное действие экстрактов различных органов лекарственных растений, произрастающих в Горисском регионе Армении. Экспериментально установлено, что все исследованные экстракты довольно долго проявляют антиоксидантные свойства и являются примерами отрицательного катализа в реакциях окисления. Измерено содержание антиоксидантных веществ в иследованных экстрактах и их антиоксидантные активности.
Список литературы
1. Kim H.P., Mani I., Ziboh V.A. Effects of naturally-occurring flavonoids and biflavonoids on epidermal cyclooxygenase from guinea pigs // Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids. 1998. Vol. 58. Pp. 17-24.
2. Marfak A., Trouillas P., Allais Redox reactions obtained by irradiation of quercetin methanol solution ar similar in vivo metabolism // Radiat Res. 2003. Vol. 159. Pp. 218-227.
3. Della Loggia R.,Tubaro A., Sosa S. The role of triterpenoids in the topical anti - inflammantory activity of Calendula officinalis flowers // Plante Medica. 1994. Vol. 60. Pp. 516-520.
4. Пепанян A.A. Использование антиоксидантов в косметологии // Вестник медицинского института им. Меграбяна. Ереван, 2007. С. 34-39.
5. Hanaski Y., Ogawa S., Fukui S. The correlation between oxygen scavenging and antioxidative effects of flavonoids // Free radic. Biol Med. 1994. Vol. 8. Pp. 77-97.
6. Денисов E.T., Денисова Т.Г. Реакционная способность природных фенолов // Успехи химии. 2009. Т. 78, №11. С. 1129-1155.
7. Tikhonov I., Roginsky V., Pliss E. The Chain - breaking antioxidant activity of phenolic compounds with different of OH groups as determinend during the oxidation of styrene // Int. J. Chem. Kinet. 2009. Vol. 41. Pp. 92-100.
8. Варданян Р.Л., Варданян Л.Р., Атабекян Л.В. Динамика накопления антиоксидантных веществ в листьях смородины черной // Сб. трудов Международной научной конференции Горисского государственного университета. Горис, 2010. С. 60-68.
9. Дмитриевна Г.Ю. Влияние экологических факторов на содержание в растениях некоторых антиоксидантов : авто-реф. дисс. ... канд. биол. наук. Калининград, 2009. 25 с.
10. Атабекян Л.В. Определение количественного содержания флавоноидов в листьях глухой крапивы (Яснотка Белая)
- Laminum Album L. и барбариса - Berberus // Химический журнал Армении. 2012. Т. 65, N1. С. 34-38.
11. Оганесян Дж.О. Зеленая аптека. Ереван, 2005. 328 с.
12. Эмануэль Н.М., Денисов Е.Т., Майзус З.К. Цепные реакции окисления углеводородов в жидкой фазе. М., 1965. 375 с.
13. Варданян Л.Р. Кинетика инициированного персульфатом калия окисления эмульгаторов в водных растворах и их стабилизация : дис. ... канд. хим. наук. Ереван, 2004. 124 с.
14. Денисов Е.Т., Азатян В.В. Ингибирование цепных реакций. Черноголовка, 1997. 268 с.
15. Денисов Е.Т. Константы скорости жидкофазных гемолитических реакций. М., 1971. 712 с.
Поступило в редакцию 19 марта 2012 г.
После переработки 1 декабря 2012 г.
156
P..H. Bap^ah^h, n.P. Bap^ah^h, H.B. Ataeekah, T.C. TPHrop^H
Vardanian R.L. , Vardanian L.R., Atabekian L. V., Grigorian T.S. STUDY OF THE ANTIOXIDANT CHARACTERISTICS OF SOME MEDICINAL PLANTS OF GORIS REGION OF ARMENIA
The antioxidant influence of the extract from different organs of 11 medicinal plants growing in Goris region of Armenia has been studied.
It has been stated that from all the studied extracts that of the berries of Rhamnus L. and the grass of Foeniculum mill.
have the highest content of antioxidants and the extract from the flowers and roots of Crocus L. has the highest antioxidant
activity.
Keywords: medicinal plants, antioxidants, extracts, oxidation, cumene.
References
1. Kim H.P., Mani I., Ziboh V.A. Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids, 1998, vol. 58, pp. 17-24.
2. Marfak A., Trouillas P. RadiatRes., 2003, vol. 159, pp. 218-227.
3. Della Loggia R.,Tubaro A., Sosa S. Plante Medica., 1994, vol. 60, pp. 516-520.
4. Pepanian A.A. Vestnik meditsinskogo instituta im. Megrabiana. Erevan, 2007, pp. 34-39. (in Russ.).
5. Hanaski Y., Ogawa S., Fukui S. The correlation between oxygen scavenging and antioxidative effects of flavonoids // Free radic. Biol Med. 1994. Vol. 8. Pp. 77-97.
6. Denisov E.T., Denisova T.G. Uspekhi khimii, 2009, vol. 78, no. 11, pp. 1129-1155. (in Russ.).
7. Tikhonov I., Roginsky V., Pliss E. Int. J. Chem. Kinet., 2009, vol. 41, pp. 92-100.
8. Vardanian R.L., Vardanian L.R., Atabekian L. V. Sbornik trudov Mezhdunarodnoi nauchnoi konferentsii Gorisskogo gosu-darstvennogo universiteta. [Proceedings of the International Conference of Goris State University]. Goris, 2010, pp. 60-68. (in Russ.).
9. Dmitrievna G.Iu. Vliianie ekologicheskikh faktorov na soderzhanie v rasteniiakh nekotorykh antioksidantov : avtoref. diss. ... kand. biol. nauk. [The influence of environmental factors on the content of some antioxidants in plants: the Dissertation of PhD]. Kaliningrad, 2009. 25 p. (in Russ.).
10. Atabekian L.V. Khimicheskii zhurnal Armenii, 2012, vol. 65, no. 1, pp. 34-38. (in Russ.).
11. Oganesian Dzh.O. Zelenaia apteka. [Green Pharmacy]. Yerevan, 2005, 328 p. (in Russ.).
12. Emanuel' N.M., Denisov E.T., Maizus Z.K. Tsepnye reaktsii okisleniia uglevodorodov v zhidkoi faze. [Continued oxidation of hydrocarbons in the liquid phase]. Moscow, 1965, 375 p. (in Russ.).
13. Vardanian L.R. Kinetika initsiirovannogopersulfatom kaliia okisleniia emul'gatorov v vodnykh rastvorakh i ikh stabilizat-siia : dis. ... kand. khim. nauk. [Kinetics initiated by potassium persulfate oxidation of emulsifiers in aqueous solutions and their stabilization: The dissertation of the candidate Chem. Science]. Yerevan, 2004, 124 p. (in Russ.).
14. Denisov E.T., Azatian V.V. Ingibirovanie tsepnykh reaktsii. [Inhibition of chain reactions]. Chernogolovka, 1997, 268 p. (in Russ.).
15. Denisov E.T. Konstanty skorosti zhidkofaznykh gomoliticheskikh reaktsii. [The rate constants of liquid-phase reactions of homolytic]. Moscow, 1971, 712 p. (in Russ.).
Received March 19, 2012 Revised December 1, 2012
* Corresponding author.
