CC BY
39
БИОХИМИЯ
DOI: https://doi.org/10.22263/2312-4156.2018.6A6
ИЗМЕНЕНИЕ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ПЕЧЕНИ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ РАСПРОСТРАНЕННОМ ГНОЙНОМ ПЕРИТОНИТЕ НА ФОНЕ ПРИМЕНЕНИЯ ЭНЕРГОТРОПНОЙ КОРРЕКЦИИ
ЯРОЦКАЯ Н.Н., КОСИНЕЦ В.А., КОРОЛЬКОВА Н.К.
Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет, г. Витебск, Республика Беларусь
Вестник ВГМУ. - 2018. - Том 17, №6. - С. 46-54.
CHANGES IN THE FUNCTIONAL ACTIVITY OF THE LIVER IN EXPERIMENTAL GENERALIZED PURULENT PERITONITIS WITH THE APPLICATION OF ENERGOTROPIC CORRECTION
YAROTSKAYA N.N., KOSINETS V.A., KARALKOVA N.K.
Vitebsk State Order of Peoples' Friendship Medical University, Vitebsk, Republic of Belarus Vestnik VGMU. 2018;17(6):46-54.
Резюме.
Цель исследования - изучить влияние энерготропных препаратов на функциональную активность печени при экспериментальном распространенном гнойном перитоните.
Материалы и методы. Эксперимент выполнен на 59 кроликах. Гнойный перитонит моделировали путем интрааб-доминального введения аэробно-анаэробной смеси E.coli и B.fragilis. Через 6 часов после инициации перитонита выполняли хирургическое лечение с использованием в течение 5-ти суток в послеоперационном периоде метаболических препаратов - цитофлавина, содержащего янтарную кислоту, никотинамида, рибоксина и рибофлавина или неотона, содержащего креатинфосфат. Животных выводили из эксперимента через 6-часов после инициации перитонита, а также на 1-е, 3-е, 5-е сутки после операции. Функциональную активность оценивали по показателям интенсивности свободно-радикального окисления, активности ферментов, продуктов углеводного обмена в гомогенатах печени.
Результаты. Полученные данные свидетельствовали о развитии в печени при экспериментальном распространенном гнойном перитоните метаболических нарушений, о чем свидетельствовало изменение про-/антиоксидант-ного равновесия, уровня индикаторных, экскреторных, лизосомальных ферментов и их субстратов. Применение препаратов энерготропного действия позволило снизить негативный эффект действия бактериальных токсинов в послеоперационном периоде, оказываемый на функциональное состояние печени, в сравнении с контрольной группой животных, не получавших энерготропной поддержки.
Заключение. Инициация экспериментального гнойного перитонита уже через 6 часов приводит к развитию метаболических нарушений в печени с нарастанием процессов свободнорадикального окисления и угнетением факторов антиоксидантной системы, что указывает на повреждение мембранных структур гепатоцитов. Применение в послеоперационном периоде препаратов энерготропного действия способствует повышению мощности антиокислительной системы, что сопровождается снижением выраженности цитолитических и деструктивных процессов в паренхиме печени.
Ключевые слова: экспериментальный распространенный гнойный перитонит, кролики, печень, энерготропные препараты.
Abstract.
Objectives. To estimate the effect of energotropic drugs on the functional activity of the liver in experimental generalized purulent peritonitis.
Material and methods. The experiment was performed on 59 rabbits. Purulent peritonitis was modelled by means of
intra-abdominal administration of an aerobic-anaerobic mixture of E. coli and B. fragilis. In 6 hours after the initiation of peritonitis, surgical treatment was performed with the use of metabolic drugs Cytoflavin containing succinic acid, nicotinamide, Riboxin and Riboflavin or Neotone containing creatine phosphate during 5 days in the postoperative period. The animals were taken out of the experiment in 6 hours after the initiation of peritonitis, as well as on the 1st, 3rd, 5 th day after the operation. Functional activity was assessed by the indices of the intensity of free-radical oxidation, enzyme activity, and carbohydrate metabolism products in liver homogenates.
Results. The obtained data testified to the development of the liver metabolic disorders in experimental generalized purulent peritonitis, as evidenced by the change in pro/antioxidant balance, the level of indicator, excretory, lysosomal enzymes and their substrates. The use of drugs possessing energotropic action allowed to reduce the negative effect of bacterial toxins in the postoperative period, exerted on the functional state of the liver in comparison with the control group of animals that did not receive any energotropic support.
Conclusions. The initiation of experimental purulent peritonitis already in 6 hours leads to the development of metabolic disorders in the liver with an increase in free radical oxidation processes and inhibition of antioxidant system factors, which indicates the damage to the hepatocytes membrane structures. The use of the energotropic action preparations in the postoperative period contributes to an increase of the antioxidant system power, which is accompanied by a decrease in the severity of cytolytic and destructive processes in the liver parenchyma. Key words: experimental generalized purulent peritonitis, rabbits, liver, energotropic drugs.
Печень - самая крупная железа в человеческом организме, которая играет важную роль в метаболических и иммунологических реакциях. Расстройство системы детоксикации является ранним механизмом развития печеночной дисфункции и фактором риска для неблагоприятного исхода, приводящего к развитию полиорганной недостаточности [1]. Массивная гибель гепато-цитов является основным процессом, предшествующим развитию печеночной недостаточности, который характеризуется преобладанием скорости и степени гепатоцеллюлярной смерти над регенеративными способностями печени [2]. Основной патологический процесс при поражении печени эндотоксинами развертывается на клеточном и молекулярном уровнях и связан с изменениями свойств мембранных и цитоплазма-тических структур гепатоцитов [3, 4].
Выраженность нарушения функционального состояния гепатоцитов характеризуется изменениями про-/антиоксидантного равновесия, уровня индикаторных, экскреторных, лизосо-мальных ферментов и их субстратов. Активация процесса свободнорадикального окисления в печени приводит к разрушению мембран, высвобождению ферментов, распаду белков с последующей гибелью клетки [5, 6]. Возрастание мощности антиокислительной системы способно снизить токсический эффект действия бактериальных токсинов при перитоните и повысить де-токсикационную функцию печени [7, 8].
В этой связи большой интерес представляет возможность использования известных препа-
ратов с энерготропными свойствами на функциональное состояние печени в послеоперационном периоде гнойного перитонита.
Цель исследования - изучить влияние энерготропных препаратов на функциональную активность печени при экспериментальном распространенном гнойном перитоните.
Материал и методы
Эксперимент проведен на 59 кроликах-самцах породы шиншилла массой 2,6-3,0 кг. Животные были распределены по следующим группам: I - интактные (n=7); II - 6-часовой распространенный гнойный перитонит без хирургического лечения (n=7); III - контрольная, хирургическое лечение перитонита (n=15); IV - хирургическое лечение перитонита с применением в послеоперационном периоде препарата «Неотон» в течение 5-ти суток (n=15); V - хирургическое лечение перитонита с применением в послеоперационном периоде препарата «Цитофлавин» в течение 5-ти суток (n=15).
Моделирование гнойного перитонита осуществляли путем введения животным через переднюю брюшную стенку в брюшинную полость 6 млн/кг микробных тел аэробно-анаэробной взвеси, состоящей из равного количества микроорганизмов E. Coli и B. Fragilis. Через 6 часов после введения микроорганизмов в III-ей, IV-ой и V-ой группах животных с целью лечения перитонита и устранения энтеральной недостаточности выполняли лапаротомию, санацию брюшной
полости, декомпрессию тонкой кишки. Животные 1У-ой и У-ой групп получали внутривенно капельно препараты «Неотон» (0,05 г фосфокре-атина в 100 мл 0,9%-го раствора натрия хлорида из расчета 10 мл/кг в/в) и «Цитофлавин» (2,0 г янтарной кислоты, 0,10 г никотинамида, 0,20 г рибоксина, 0,02 г рибофлавина в 100 мл 0,9%-го раствора натрия хлорида из расчета 10 мл/кг в/в) соответственно, животные 111-ей группы - эквивалентный объем 0,9%-го раствора натрия хлорида.
Оба использованных лекарственных средства являются препаратами метаболического действия с энерготропными свойствами. Неотон - метаболическое средство, содержащее креатин-фосфат. Оно выполняет роль резерва химической энергии и используется для быстрого ресинтеза АТФ. Цитофлавин - препарат комплексного метаболического действия, содержащий янтарную кислоту, никотинамид, рибоксин и рибофлавин. Данный препарат стимулирует процессы клеточного дыхания, а также обладает детоксицирую-щим, антигипоксическим и антиоксидантным свойствами.
Работу с экспериментальными животными проводили согласно международным нормам биоэтики в лабораторном животноводстве.
Животных с распространенным гнойным перитонитом выводили из эксперимента (летальная доза пентобарбитала) через 6 часов после заражения, животных 111-ей, 1У-ой и У-ой групп -на 1-е, 3-и и 5-е сутки после операции.
Материалом для биохимического исследования служили фрагменты печени, из которых готовили гомогенаты. Для получения гомогената навеску сырой ткани печени измельчали и промывали в 0,9% физиологическом растворе для удаления остатков крови. Затем кусочки печени помещали в гомогенезатор Поттера-Эвельгейма (стекло-тефлон), добавляли буферный раствор (0,05 М фосфатный буфер, рН 7,4) и гомогенизировали до получения однородного гомогената. Полученный гомогенат центрифугировали при 3000 обр/мин, полученный супернатант фильтровали через несколько слоев марли, переносили в отдельную пробирку и использовали для определения. При изучении активности супероксиддис-мутазы и кислой фосфатазы гомогенаты готовили, используя 0,9% физиологический раствор.
Функциональную активность печени оценивали по биохимическим показателям в гомо-генатах печени: содержания глюкозы, лактата,
активности ферментов (щелочной фосфотазы -ЩФ, кислой фосфотазы - КФ, лактатдегидроге-назы - ЛДГ, супероксиддисмутазы - СОД, ката-лазы - КАТ) с использованием диагностических наборов. Оценку интенсивности свободноради-кального окисления проводили с использованием метода индуцированной хемилюминесценции на биохемилюменометре БХЛ-06 по показателям S, Imax, S/(Imax*t).
Статистическая обработка результатов проводилась с помощью стандартного пакета статистических программ «STATISTICA 10.0» и «MS Excel». Величины анализируемых показателей в группах представляли в виде медианы (Ме) и интерквартильного интервала [25%; 75%]. Для оценки достоверности различий использовали непараметрический U-тест Манна-Уитни с учетом поправки Бонферрони либо дисперсионный анализ Крускела-Уоллиса (Kmskal-Wallis ANOVA) в независимых выборках, в зависимых - W-критерий Уилкоксона. Различия принимались за достоверные при р<0,05.
Результаты
Согласно полученным данным, в гомоге-натах печени животных уже через 6 часов после инициации перитонита в сравнении с интактной группой увеличивались показатели интенсивности хемилюминесценции, характеризующие процессы свободнорадикального окисления: S -в 1,2 раза (р<0,015), Imax - в 1,7 раза (р<0,002), показатель антиоксидантной защиты, напротив, снижался в 1,4 раза (р<0,004) (табл. 1). Нарастала активность ферментов: КАТ - в 3,9 раза (р<0,002), ЛДГ - в 1,5 раза (р<0,002), КФ - в 1,7 раза (р<0,002), содержание уровня лактата - в 1,5 раза (р<0,002). При этом снижалась ферменатив-ная активность ЩФ в 1,1 раза (р<0,002) и СОД в 1,1 раза (р<0,034). Содержание глюкозы снижалось в 1,4 раза (р<0,004) (табл. 2).
На 1-сутки после операции в контрольной группе показатели интенсивности свободнора-дикального окисления S и Imax в сравнении с группой 6-часового перитонита незначительно нарастали (р=0,626; р=0,074 соответственно), показатель, характеризующий АОА (антиоксидант-ная активность), снижался (р=0,193). Определение активности ферментов показало нарастание ЛДГ в 7,8 раза (р<0,005). При этом активность СОД, КАТ, ЩФ, КФ статистически значимо снижалась в 2,0, 7,6, 1,1 и 1,2 раза соответственно
Таблица 1 - Динамика показателей индуцированной хемилюминесценции в гомогенатах печени при экспериментальном распространенном гнойном перитоните на фоне применения энерготропной коррекции
Группа Показатель 1тах, мВ 8, мВ*сек 8/(1тахП), относит. ед.
Норма (п=7) Медиана 0,68 6,15 0,289
Мш-Мах 0,64-0,76 5,24-6,57 0,239-0,313
6-часовой перитонит (п=7) Медиана 1,15 р1<0,002 7,16 р1<0,015 0,212 р1<0,004
Мш-Мах 0,951,25 6,08-8,05 0,167-0,275
Контрольная (п=15) 1 сутки Медиана 1,24 р1<0,005 р2=0,074 7,31 р1<0,009 р2=0,626 0,178 р1<0,005 р2=0,193
Мш-Мах 1,11-1,50 6,37-8,33 0,165-0,223
3 сутки Медиана 1,12 р3=0,224 5,79 р3<0,043 0,173 р3=0,345
Мш-Мах 1,07-1,28 4,94-6,23 0,129-0,188
5 сутки Медиана 1,07 р1<0,005 8,51 р1<0,005 0,239 р1=0,329
Мш-Мах 0,95-1,21 7,65-9,48 0,238-0,300
С применением неотона (п=15) 1 сутки Медиана 0,88 р1<0,005 р4<0,012 5,81 р1=1,0 р4=0,036 0,224 р1<0,002 р4=0,094
Мш-Мах 0,78-1,09 5,36-6,52 0,169-0,277
3 сутки Медиана 0,96 р3<0,043 р4=0,036 6,41 р3=0,224 р4=0,060 0,227 р3=0,892 р4<0,012
Мш-Мах 0,94-1,10 5,65-7,34 0,188-0,225
5 сутки Медиана 0,85 р1<0,007 р4=0,021 7,05 р1<0,005 р4<0,012 0,262 р1=0,626 р4=0,403
Мш-Мах 0,76-0,97 6,66-7,51 0,241-0,329
С применением цитофлавина (п=15) 1 сутки Медиана 1,16 р1<0,005 р4=0,143 р5=0,036 6,08 р1=0,745 р4<0,012 р5=0,036 0,170 р1<0,005 р4=0,403 р5=0,060
Мш-Мах 1,04-1,30 5,66-6,34 0,163-0,190
3 сутки Медиана 0,98 р3<0,043 р4=0,055 6,34 р3=0,500 р4=0,170 0,205 р3<0,043 р4<0,001
Мш-Мах 0,86-1,12 5,16-6,67 0,186-0,251
5 сутки Медиана 0,85 р1<0,003 р4<0,007 р5=0,021 6,34 р1=0,390 р4<0,008 р5<0,008 0,251 р1<0,018 р4=0,648 р5=0,082
Мш-Мах 0,78-0,90 5,74-6,44 0,223-0,261
Примечание: р1 - по сравнению с нормой; р2 - по сравнению с группой 6-часового перитонита; р3 - по сравнению с предыдущими сроками аналогичной группы; р4 - по сравнению с контрольной группой аналогичных суток; р5 - по сравнению с препаратом «Неотон» аналогичных суток. Значения р при поиске парных различий приведены с учетом поправки Бонферрони.
(р<0,005; р<0,005; р<0,009; р=0,034). Содержа- Применение препарата «Неотон» на 1-сут-
ние глюкозы и лактата снижалось в 1,1 и 1,6 раза ки после операции продемонстрировало нараста-соответственно (р=0,034, р<0,005). ние процессов свободнорадикального окисления
Таблица 2 - Динамика изменения содержания биохимических показателей в гомогенатах печени при экспериментальном распространенном гнойном перитоните на фоне применения энерготропной коррекции
Группа Показатель СОД, Ед/г ткани КАТ, нкат/г ткани Глюкоза, моль/г ткани ЩФ, нкат/г ткани КФ, нкат/г ткани ЛДГ, нкат/г ткани Лакгат, ммоль/г ткани
Интакгная (п=7) Медиана 131,69 12,88 0,137 58,81 23,77 10,66 1,61
25% -75% 129,79-143,80 11,99-13,99 0,125-0,149 56,51-62,60 23,17-25,06 10,47-11,66 1,48-1,69
6-часовой гнойный перитонит (п-7) Медиана 117,16 р1<0,034 50,63 pl<0,002 0,096 pl<0,004 51,64 pl<0,002 40,51 pl<0,002 16,20 р1<0,002 2,36 pl<0,002
25% -75% 101,78-124,43 43,96-54,40 0,093-0,106 49,33-52,94 37,62-41,94 15,98-16,56 2,14-2,51
Контрольная (п=15) 1 сутки Медиана 55,09 р1<0,005 р2<0,005 6,66 р1<0,005 р2<0,005 0,086 pl<0,005 45,24 pl<0,005 р2<0,009 33,84 pl<0,005 126,08 р1<0,005 р2<0,005 1,43 pl=0,031 р2<0,005
25% -75% 55,09-58,04 6,22-7,55 0,079-0,090 43,03-45,61 32,97-35,21 124,22-130-28 1,43-1,46
3 сутки Медиана 21,68 р3<0,043 7,99 рЗ=0,224 0,120 рЗ=0,079 56,03 р3<0,043 24,14 р3<0,043 96,37 рЗ=0,067 1,39 рЗ=0,465
25% -75% 18,96-24,64 7,22-9,77 0,101-0,129 54,67-57,53 24,10-27,84 93,94-102,74 1,39-1,44
5 сутки Медиана 64,92 р1<0,057 10,66 pl<0,014 0,122 р 1=0,073 64,88 pl<0,029 28,74 pl<0,034 6,43 р1<0,002 1,39 pl<0,014
25% -75% 61,31-64,92 9,77-11,32 0,119-0,124 62,96-66,63 28,04-28,77 6,13-7,26 1,31-1,44
С применением неотона (п=15) 1 сутки Медиана 116,10 р1<0,034 р4<0,011 13,77 pl=0,681 р4<0,011 0,090 pl<0,005 р4=0,530 56,88 pl=0,329 р4<0,012 34,87 pl<0,005 р4=0,676 99,65 р1<0,005 р4=0,021 1,39 pl=0,118 р4=0,519
25% -75% 110,24-121,27 13,32-13,77 0,084-0,093 52,08-59,15 33,74-36,77 91,67-104,49 1,31-1,43
3 сутки Медиана 98,35 р3<0,043 р4<0,012 8,44 р3<0,043 0,120 р3<0,043 52,98 рЗ=0,224 32,11 рЗ=0,079 р4<0,012 58,33 р3<0,043 1,39 рЗ=0,685
25% -75% 94,88-101,68 7,55-9,33 0,115-0,125 52,66-55,43 30,47-33,84 54,48-81,23 1,20-1,50
5 сутки Медиана 108,94 р1<0,005 р4<0,012 13,77 р 1=0,744 р4=0,027 0,163 pl<0,05 р4<0,005 63,21 pl=0,416 р4=0,255 33,21 pl<0,005 р4=0,021 12,35 р1=0,329 р4<0,005 1,43 pl=0,058 р4=0,246
25% -75% 92,26-108,94 13,22-14,21 0,155-0,167 59,11-63,78 31,74-35,04 11,52-12,55 1,39-1,46
С применении цитофлавина (п=15) 1 сутки Медиана 75,42 р1<0,005 р4=0,015 р5<0,012 18,21 р1<0,011 р4<0,012 р5=0,021 0,130 pl=0,807 р4<0,012 р5<0,012 26,49 pl<0,005 р4<0,012 р5<0,012 26,27 pl=0,254 р4<0,012 р5<0,012 114,94 р1<0,005 р4=0,094 р5=0,094 1,46 pl=0,139 р4=0,594 р5=0,595
25% -75% 68,95-81,31 16,43-18,65 0,125-0,137 26,06-26,56 25,74-28,01 108,81-120,54 1,39-1,58
3 сутки Медиана 92,26 рЗ <0,043 р4<0,012 р5=0,296 30,42 рЗ <0,043 р4<0,004 р5<0,007 0,134 рЗ=0,892 р4=0,173 р5=0,120 43,24 рЗ<0,012 р4=0,045 р5=0,055 29,01 рЗ<0,012 р4=0,094 р5=0,021 74,75 рЗ=0,094 р4=0,229 р5=0,055 1,56 рЗ=0,595 р4=0,124 р5=0,099
25% -75% 86,38-95,73 26,42-33,75 0,127-0,141 40,83-47,09 28,17-29,51 70,86-82,17 1,45-1,60
5 сутки Медиана 102,55 р1<0,026 р4<0,008 р5=1,0 18,65 pl<0,014 р4<0,002 р5=0,060 0,152 р1=0,179 р4<0,021 р5=0,329 35,72 pl<0,002 р4<0,002 р5<0,005 23,89 pl=0,667 р4=0,082 р5<0,008 11,28 р1=0,798 р4<0,007 р5=0,329 1,28 pl<0,006 р4=0,604 р5=0,118
25% -75% 99,04-104,90 14,21-18,65 0,148-0,164 29,91-36,29 23,37-26,96 11,02-12,17 1,26-1,41
Примечание: р1- по сравнению с нормой; р2 - по сравнению с группой 6-часового перитонита; рЗ - по сравнению с предыдущими сроками аналогичной группы; р4 - по сравнению с контрольной группой аналогичных суток; р5 - по сравнению с препаратом «Неотон» аналогичных суток. Значения р при поиске парных различий приведены с учетом поправки Бонферрони.
и снижение антиоксдантной активности, на что указывали показатели системы ПОЛ (8, 1тах) и АОА (р=1,0, р<0,005, р<0,002) в сравнении с ин-тактной группой. При этом активность антиок-сидантных ферментов СОД снижалась в 1,1 раза (р<0,034), а КАТ повышалась 1,1 раза (р<0,005). Активность ЛДГ и КФ увеличивалась в 9,3 и 1,5 раза соответственно (р<0,005; р=0,034), а ЩФ незначительно снижалась (р=0,104). Содержание глюкозы и лактата снижалось в 1,5 и 1,2 раза соответственно (р=0,051; р<0,005).
Динамика состояния оксидантно-антиокси-дантной системы на 1-сутки после операции при применении цитофлавина была аналогичной при применении неотона. Показатель 1тах увеличивался в 1,7 раза (р<0,005), а показатель, характеризующий АОА, снижался в 1,7 раза (р<0,005) в сравнении с интактной группой. Оценка ферментативной активности продемонстрировала снижение активности СОД и ЩФ в 1,7 и 2,2 раза соответственно (р<0,005; р<0,005), увеличение активности КАТ в 1,4 раза (р<0,011), ЛДГ в 10 раз (р<0,005), КФ в 1,1 раза (р=0,254). Содержание глюкозы и лактата статистически не отличалось (р=0,807, р=0,139).
На 3-сутки после операции в контрольной группе в сравнении с 1-сутками отмечалась незначительное снижение интенсификации свободно-радикального окисления с падением активности антиоксидантной защиты (р=0,224, р<0,043, р=0,345). Данные результаты сопровождались дальнейшим снижением активности СОД в 2,5 раза (р<0,043), нарастанием активности КАТ в 1,2 раза (р=0,224), ЩФ в 1,2 раза (р<0,043), снижением активности ЛДГ в 1,3 раза (р=0,067), КФ в 1,4 раза (р=0,465). Увеличивалось содержание глюкозы в 1,4 раза (р=0,079).
На фоне применения лекарственного средства «Неотон» на 3 сутки после операции в сравнении с 1 сутками нарастало образование свободных радикалов в гомогенатах печени, о чем свидетельствовало увеличение показателей 8 в
1.1 раза (р=0,224), 1тах в 1,1 раза (р<0,043). При этом показатель, характеризующий состояние антиоксидантной системы, статистических отличий от такового в 1 сутки не имел (р=0,892). Активность основных антиоксидантных ферментов в сравнении с 1 сутками (СОД, КАТ) снижалась в
1.2 и 1,6 раза соответственно (р<0,043; р<0,043). Также снижалась активность ЛДГ в 1,7 раза (р<0,043), ЩФ в 1,1 раза (р=0,224), КФ в 1,1 раза (р=0,079). Нарастало содержание глюкозы в 1,3
раза (р<0,043). Уровень лактата статистических отличий не имел (р=0,685).
Применение «Цитофлавина» на 3-сутки после операции у животных продемонстрировало снижение интенсификации процессов свобод-норадикального окисления и нарастание активности антиокислительной защиты в сравнении с 1-сутками. Показатель 1тах снижался в 1,2 раза (р<0,043), а показатель АОА увеличивался в 1,2 раза (р<0,043). Активность антиоксидантных ферментов СОД и КАТ продемонстрировала нарастание активности первой в 1,2 раза (р<0,043) и увеличение второй в 1,6 раза (р<0,043). Нарастала активность ЩФ в 1,6 раза (р<0,012), КФ в 1,1 раза (р<0,012), снижалась активность ЛДГ в 1,5 раза (р=0,074). Статистически значимых отличий изменения содержания уровня глюкозы и лактата обнаружено не было (р=0,689; р=0,595).
На 5-сутки после операции в контрольной группе состояние оксидантно-антиоксидантной системы статистически значимо отличалось от таковых значений в интактной группе. Показатели 8 и 1тах, характеризующие свободнорадикаль-ное окисление, превышали значения интактной группы в 1,4 и 1,6 раза соответственно (р<0,005; р<0,005). Показатель, характеризующий состояние антиоксидантной системы, приближался к значению интактной группы, однако оставался ниже ее значений (р=0,329). Активность СОД и КАТ в сравнении с 3 сутками нарастала в 3,0 и 1,3 соответственно (р<0,043; р=0,074), однако по-прежнему оставалась ниже значений интактной группы (р<0,005; р<0,014). Резко снижалась активность ЛДГ в сравнении с 3 сутками в 15 раз (р<0,001), но при этом оставалась ниже значений интактной группы (р<0,002). Активность ЩФ и КФ нарастала в сравнении с интактной группой в 1,1 и 1,2 раза соответственно (р<0,029; р<0,034), содержание глюкозы статистически не отличалось (р=0,073). Уровень лактата оставался ниже значений интактной группы (р<0,014).
Показатели, характеризующие состояние ПОЛ (8, 1тах), на фоне применения неотона на 5-сутки после операции в сравнении с интактной группой были повышены (р<0,005; р<0,003), но оставались ниже значений, полученных в контрольной группе аналогичного срока наблюдения (р<0,012; р=0,021). Показатель, характеризующий состояние антиоксидантной системы, приближался к значениям интактной группы (р<0,018). Активность СОД оставалась в 1,2 раза ниже значений интактной группы (р<0,005), а активность
КАТ выше в 1,1 раза (р=0,744). Показатели активности ЛДГ снижались в сравнении с 3 сутками в 4,7 раза (р<0,005) и незначительно были выше значений интактной группы (р=0,329). Активность ЩФ и КФ оставалась выше значений интактной группы в 1,1 и 1,4 раза соответственно (р=0,416; р<0,005). Уровень глюкозы и лактата к 5 суткам после операции статистически не отличался от значений интактной группы (р=0,051; р=0,058).
На фоне применения лекарственного средства «Цитофлавин» на 5 сутки после операции интенсивность свободнорадикального окисления, характеризующаяся показателями S, 1тах, АОА, приближалась к значениям интактной группы (р=0,390; р<0,003; р<0,018). Активность фермента антиоксидантной системы СОД продемонстрировала ее нарастание в сравнении с 3 сутками в 1,1 раза (р=0,224), однако данный показатель не достигал значения, полученного в интактной группе (р<0,026). Активность КАТ, напротив, снижалась в сравнении с 3 сутками в 1,6 раза (р<0,043), но оставалась выше в 1,4 раза значений интактной группы (р<0,014). В сравнении с интактной группой снижалась активность ЩФ в 1,6 раза (р<0,002), при этом активность ЛДГ, КФ, уровень глюкозы статистически не отличались (р=0,798; р=0,667; р=0,179). Уровень лактата был ниже значений интактной группы в 1,2 раза (р<0,002).
Обсуждение
Таким образом, развитие перитонита приводит к активации свободнорадикального окисления с угнетением факторов антиоксидантной системы уже через 6 часов после инициации заболевания, что сопровождается также увеличением активности каталазы и кислой фосфатазы и указывает на повреждение мембранных структур гепатоцитов. Увеличение активности антиокислительного фермента каталазы, вероятно, связано с образованием в системе избыточного количества пероксида водорода и свидетельствует о развитии компенсаторно-приспособительных механизмов, направленных на защиту клеточных структур от разрушения, которое осуществляет перекись водорода.
Применение в послеоперационном периоде лекарственного средства «Неотон» способствует улучшению функционального состояния гепатоцитов уже на 1 сутки после операции по
сравнению с контрольной группой. Выявленный позитивный эффект лекарственного средства «Неотон» на функциональное состояние печени, надо полагать, связан с его защитным действием, направленным на предотвращение повреждения мембранных структур гепатоцитов при перитоните с нормализацией показателей системы ПОЛ/ АОА, уровня экскреторного и индикаторного ферментов и их субстратов, что свидетельствует о восстановлении структурно-функционального состояния гепатоцитов.
Применение лекарственного средства «Ци-тофлавин» препятствует смещению показателей системы перекисного окисления липидов и анти-оксидантной защиты в сторону превалирования ПОЛ, способствует восстановлению активности ферментов-маркеров функционального состояния печени, показателей углеводного обмена, что снижает повреждающее действие эндотоксинов при моделировании гнойного перитонита к 5 суткам послеоперационного периода, улучшая де-токсикационную функцию печени.
Заключение
1. Инициация экспериментального гнойного перитонита уже через 6 часов свидетельствует об изменении функционального состояния печени со статистически значимым по сравнению с интактной группой нарастанием процессов свободнорадикального окисления (Ме=1,15, р<0,002; Ме=7,16, р<0,015), снижением активности антиокислительной системы (Ме=0,212, р<0,004), нарастанием активности КАТ в 4,0 раза (Ме=50,63, р<0,002), ЛДГ 1,5 раза (Ме=16,20, р<0,002).
2. Применение в послеоперационном периоде при экспериментальном гнойном перитоните лекарственного средства, содержащего креатинфосфат, сопровождалось нормализацией в гомогенатах печени к 5 суткам после операции уровня антиоксидантной активности (Ме=0,260, р=0,626), активности КАТ (Ме=13,77, р=0,744), ЩФ (Ме=63,21, р=0,416), ЛДГ (Ме=12,35, р=0,329), содержания лактата (Ме=1,43, р=0,058) в сравнении с интактной группой.
3. Использование в послеоперационном периоде при экспериментальном распространенном гнойном перитоните лекарственного средства «Цитофлавин» сопровождается восстановлением активности КФ (Ме=23,89, р=0,667), ЛДГ (Ме=11,28, р=0,798), уровня глюкозы (Ме=0,152,
р=0,179), интенсивности свободнорадикального окисления 8 (Ме=6,34, р=0,390) в сравнении с интактной группой.
4. Использование лекарственных препаратов с энерготропными свойствами Неотон и Цитофлавин оказывает положительное влияние на функциональную активность печеночной паренхимы, способствуя нивелированию метаболических нарушений с восстановлением про-/ антиоксидантного равновесия, ферментативной активности, что предотвращает развитие негативных изменений в структурной целостности паренхимы печени и ее цитоплазматических компонентов уже к 5 суткам послеоперационного периода.
Литература
1. Костюченко, М. В. Современная концепция профилактики прогрессирования эндотоксикоза и нарушений функции печени и почек в неотложной хирургии / М. В. Костюченко // Междунар. журн. приклад. и фундам. исслед. - 2013. - № 9. - С. 113-114.
2. Пути повышения возможностей естественных механизмов детоксикации при остром перитоните / А. П. Вла-
сов [и др.] // Кубан. науч. мед. вестн. - 2010. - № 2. - С. 17-22.
3. Перитонит : учеб.-практ. пособие / Э. Г. Абдуллаев [и др.] ; Иван. гос. мед. акад. ; Владим. гос. ун-т им. А. Г. и Н. Г. Столетовых. - Владимир : Изд-во ВлГУ, 2014. -144 с.
4. Biochemical mechanisms in drug-induced liver injury: certainties and doubts / I. Grattagliano [et al.] // World J. Gastroenterol. - 2009 Oct. - Vol. 15, N 39. - Р. 4865-4876.
5. Звенигородская, Л. А. Перекисное окисление липидов и активность липопротеин-ассоциированной фосфоли-пазы А2 в сыворотке крови у больных неалкогольной жировой болезнью печени / Л. А. Звенигородская, Т. В. Нилова, А. В. Петраков // Поликлиника. - 2015. - № 5-1. - С. 48-52.
6. Kannan, N. Protective Effect of Acacia nilotica (L.) against Acetaminophen-Induced Hepatocellular Damage in Wistar Rats / N. Kannan, K. M. Sakthivel, C. Guruvayoorappan // Adv. Pharmacol. Sci. - 2013. - N 2. - P. 987692.
7. Летуновский, А. В. Метаболические изменения в печени при экспериментальном алкогольном панкреатите и их коррекция / А. В. Летуновский // Кубан. науч. мед. вестн. - 2011. - № 6. - С. 90-94.
8. Сирота, Т. В. Активность цитоплазматической суперок-сиддисмутазы -чувствительный показатель состояния антиоксидантной системы печени и мозга крыс / Т. В. Сирота, М. В. Захарченко, М. Н. Кондрашова // Биомед. химия. - 2014. - Т. 60, № 1. - С. 63-71.
Поступила 12.11.2018 г.
Принята в печать 29.11.2018 г.
References
1. Kostyuchenko MV. The modern concept of prevention of progression of endotoxicosis and disorders of the liver and kidneys in emergency surgery. Mezhdunar Zhurn Prikladi Fundam Issled. 2013;(9):113-4. (In Russ.)
2. Vlasov AP, Tarasova TV, Kozlov IG, Loginova OV, Leshchankina NYu, Visaitov DA. Ways to improve the capabilities of natural detoxification mechanisms in acute peritonitis. Kuban Nauch Med Vestn. 2010;(2):17-22. (In Russ.)
3. Abdullaev EG, Babyshin VV, Novikov YuA, Gusev AV, Malakhov NB; Ivan gos med akad; Vladim gos un-t im AG i NG Stoletovykh. Peritonitis: ucheb-prakt posobie. Vladimir, RF: Izd-vo VlGU; 2014. 144 p. (In Russ.)
4. Grattagliano I, Bonfrate L, Diogo CV, Wang HH, Wang DQ, Portincasa P. Biochemical mechanisms in drug-induced
liver injury: certainties and doubts. World J Gastroenterol. 2009 Oct;15(39):4865-76.
5. Zvenigorodskaya LA, Nilova TV, Petrakov AV. Lipid peroxidation and activity of lipoprotein-associated phospholipase A2 in serum of patients with nonalcoholic fatty liver disease. Poliklinika. 2015(5-1):48-52. (In Russ.)
6. Kannan N, Sakthivel KM, Guruvayoorappan C. Protective Effect of Acacia nilotica (L.) against Acetaminophen-Induced Hepatocellular Damage in Wistar Rats. Adv Pharmacol Sci. 2013;(2):987692. doi: 10.1155/2013/987692
7. Letunovskiy AV. Metabolic changes in the liver in experimental alcoholic pancreatitis and their correction. Kuban Nauch Med Vestn. 2011;(6):90-4. (In Russ.)
8. Sirota TV, Zakharchenko MV, Kondrashova MN. The activity of cytoplasmic superoxide dismutase - a sensitive indicator of the antioxidant system of the rat liver and brain. Biomed Khimiia. 2014;60(1):63-71. (In Russ.)
Submitted 12.11.2018 Accepted 29.11.2018
Сведения об авторах:
Яроцкая Н.Н. - научный сотрудник научно-исследовательской лаборатории, Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет, ORCID: https://orcid.org/0000-0002-2493-7653;
Косинец В.А. - д.м.н., профессор кафедры госпитальной хирургии с курсами урологии и детской хирургии, Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет, ORCID: https://orcid.org/0000-0001-7127-1877;
Королькова Н.К. - к.м.н., доцент, и.о. заведующего кафедрой офтальмологии, Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет, ORCID: https://orcid.org/0000-0002-6172-6767.
Information about authors:
Yarotskaya N.N. - research officer of the Scientific-Research Laboratory, Vitebsk State Order of Peoples ' Friendship Medical University,
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-2493-7653;
Kosinets V.A. - Doctor of Medical Sciences, professor of the Chair of Hospital Surgery with the courses of Urology & Pediatric surgery, Vitebsk State Order of Peoples' Friendship Medical University, ORCID: https://orcid.org/0000-0001-7127-1877;
Karalkova N.K. - Candidate of Medical Sciences, associate professor, acting head of the Chair of Ophthalmology, Vitebsk State Order of Peoples' Friendship Medical University, ORCID: https://orcid.org/0000-0002-6172-6767.
Адрес для корреспонденции: Республика Беларусь, 210009, г. Витебск, пр. Фрунзе, 27, Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет, Научно-исследовательская лаборатория. E-mail: yardip@ yandex.ru - Яроцкая Наталья Николаевна.
Correspondence address: Republic ofBelarus, 210009, Vitebsk, 27 Frunze ave., Vitebsk State Order ofPeoples'Friendship Medical University, Scientific-Research Laboratory. E-mail: yardip@yandex.ru - Natalia N. Yarotskaya.
