CC BY
47
^55^»—Аграрный вестник Урала № 10 (89), 2011 г.—*. -
%9ф
_____________________Ветеринария -И*
УДК 636.22/.28:611.69
ИССЛЕДОВАНИЕ МОРФОЛОГИИ НЕКОТОРЫХ ОРГАНОВ МЫШЕЙ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ПРЕПАРАТА ВАС!ЬЬи8 8иВТ!Ы8 В ПЕРИОД БЕРЕМЕННОСТИ
Н. В. АРХИПЕНКО, аспирант, Уральская ГСХА, Л. И. ДРОЗДОВА, доктор ветеринарных наук, профессор, заведующая кафедрой анатомии и гистологии, Л. И. ТИМИНА, соискатель, научный сотрудник филиала ФБУ «33 ЦНИИИМинобороны РФ»
620049, г. Екатеринбург, ул. Звездная, д. 1; тел. 8(343)256-00-88;
620075, г. Екатеринбург, ул. Карла Либкнехта, д. 42;
тел. 8(343)371-47-33
Аннотация. В статье рассмотрены морфологические особенности двух желез пищеварительной системы, печени и поджелудочной железы, при воздействии на организм экспериментальных животных препарата B. subtilis в период беременности.
Ключевые слова: морфология, печень, поджелудочная железа, микроорганизмы рода Bacillus.
Abstract. Morphological features of two glands of digestive system, liver and pancreas under the influence of the preparation B. subtilis over the organism of experimental animals in pregnancy period.
Keywords: morphology, liver, pancreas, microorganisms oft Bacillus kind.
Различные физиологические и патологические состояния беременных животных характеризуются определенными изменениями со стороны иммунного статуса, который необходимо целенаправленно корректировать, особенно в период беременности, путем применения иммуномодуляторов для получения более жизнеспособного молодняка [1].
В качестве иммуномодулирующих препаратов в настоящее время используется достаточно большое количество микроорганизмов, но наибольший интерес для исследователей вызывают штаммы Bacillus subtilis. По изученности генетических и физиологических свойств они занимают второе место после Е. coli.
Микроорганизмы рода Bacillus безвредны для организма человека и животных (за исключением Bacillus antracis и B. cereus), крайне неприхотливы к условиям роста, способны синтезировать множество биологически активных веществ, что делает перспективным их использование для конструирования новых пробиотических препаратов [2, 3].
По сравнению с другими бактериями, которые используются для пробиотических целей, клетки B. subtilis как в вегетативной, так и споровой форме устойчивы к нагреванию и воздействию желчных солей [4], обладают высокой гидролитической активностью, синтезируют протеазы, амилазы, липазы, нуклеазы и другие ферменты [5]. Кроме того, B. subtilis проявляет высокую антагонистическую активность в отношении S.aureus, C.albicans, S.sonnei, S.thyphimurium.
В настоящей работе приведены результаты экспериментального изучения гистоморфологических изменений структуры печени и поджелудочной железы у лабораторных животных в период беременности на фоне применения B. subtilis.
Цель и методика исследований.
Цель работы — изучить гистологические изменения в печени и поджелудочной железе у экспериментальных животных в период беременности при использовании препарата B.subtilis.
Исследования проводили в филиале ФБУ «33 ЦНИИИ Минобороны России», (г. Екатеринбург) и на кафедре анатомии, гистологии и ветсанэкспертизы Уральской государственной сельскохозяйственной академии.
8
Для проведения экспериментальных исследований были сформированы две группы животных по 5 особей в каждой. Первую (опытную) группу и вторую (контрольную) составляли беспородные белые мыши самки (беременные), массой 23-25 г. Животные содержались в стандартных условиях вивария, при двенадцатичасовом световом режиме, температуре воздуха 22 ± 2,0 °С и свободном доступе к воде и корму. Работа с животными проводилась в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» [6].
Самкам первой группы вводили суспензию клеток B. subtilis в концентрации 2,4 * 106 см3, самкам второй — 0,9 % раствор хлорида натрия.
Введение препарата производили перорально (вну-трижелудочно) при помощи шприца для инъекций вместимостью 1 см3 и металлической иглы с напайкой в виде маленькой оливы.
Объем вводимых суспензий был равен 0,5 см3 на животное в сутки. Период наблюдения составил 14 дней.
По истечении срока наблюдения животных умерщвляли методом декапитации.
Для гистоморфологических исследований брали кусочки паренхиматозных органов: печень, поджелудочную железу. Материал фиксировали в 10 %-ом растворе нейтрального формалина. Заливку в парафин осуществляли по общепринятой методике. После этого готовили парафиновые срезы толщиной 5-6 мкм, окрашивали их гематоксилином и эозином. Просматривали под микроскопом «MICROS» с последующим фотографированием.
Результаты исследований.
При гистологических исследованиях печени беременных мышей контрольной группы были обнаружены процессы, связанные с нарушением обмена белка и обмена жира, а также нарушением микроциркуляции тканей органа.
Белковая дистрофия гепатоцитов проявлялась зернистой дистрофией клеток. Чаще всего повреждались гепатоциты периферических отделов дольки, при этом клетки были увеличены в объеме, имели округлую, овальную или неправильную формы, цитоплазма просветлена и заполнена мелкими зернами белка; ядра
www. m-avu. narod. ru
Аграрный вестник Урала № 10 (89), 2011 г.- <-------
Ветеринария
? V*
* - ./ ? -
йж:
* йл1 • 1«/
л' -/ • ’'''-гу *
/ I»
Шн
Ч" V # > с* *
Рисунок 1 Печень (контроль). Зетнистая дистрофия гепатоцитов (11). Окраска гематоксилином и эозином (увеличение х40)
Рисунок 3 Печень (опыт). Система триады. Расширение вены (11). Окраска гематоксилином и эозином (увеличение х40)
Рисунок 4 Печень (опыт). Пролиферация звездчатых ретикулоэндотелиоцитов (11) и деление гепатоцитов (12). Окраска гематоксилином и эозином (увеличение х40)
Рисунок 5 Поджелудочная железа (опыт). Активизация островка Лангерганса (11) и умеренное кровенаполнение сосудов (12). Окраска гематоксилином и эозином (увеличение х40)
Рисунок 2 Печень (контроль).
Жировой гепатоз, крупно- и мелкокапельная жировая дистрофия. Окраска гематоксилином и эозином (увеличение х40) гепатоцитов были неодинаковой величины. Некоторые из них уменьшались в объеме до пиктоморфных или постепенно лизировались и были заметны в виде тени (рис. 1).
В других рядом лежащих гепатоцитах можно было видеть деление ядра (двуядерные гепатоциты), чаще всего этот процесс сопровождался застойной гиперемией микроциркуляторного русла печени.
Данные процессы свидетельствуют о нарушении белкового обмена, интенсивности
окислительно-восстановительных процессов и окислительного фосфорилирования. Зернистая дистрофия носит, как правило, компенсаторно-приспособительный характер и является обратимым процессом.
Наряду с зернистой дистрофией в гепатоцитах чаще всего встречалась жировая дистрофия, которая была представлена мелко- и крупнокапельным вариантом. При этом многие из клеток печени полностью теряли ядро и превращались в жировые вакуоли, в других — ядро было смещено на периферию и уплотнено, такие клетки можно считать перстневидными (рис. 2).
Накопление жира в печени свидетельствует о нарушении липидного обмена, но и в этом случае, процесс можно считать обратимым, так как дистрофия протекает в виде инфильтративного ожирения и связана, скорее всего, с неполноценным кормлением животных.
Гистологическое исследование поджелудочной железы мышей контрольной группы выявило уменьшение количества островков Лангерганса на единице площади, дольчатое строение органа было слабо выражено, что может предполагать нарушение углеводного обмена.
У животных опытной группы, получавших В. subtilis в течение 14 дней, при гистологическом исследовании печени процесс жировой дистрофии не обнаружен, и только в некоторых клетках можно было видеть мелкие зерна белка, при этом гепатоциты были четко очерчены, равномерно окрашены, в них были выявлены процессы деления (регенерации).
Что касается сосудов микроциркуляторного русла, то они были равномерно кровенаполнены и только
Литература
1. Гугушвили Н. Н. Иммунобиологическая реактивность коров и методы ее коррекции // Ветеринария. 2003. № 12.
С. 34-36.
2. Антипов В. А., Субботин В. М. Эффективность и перспективы применения пробиотиков // Ветеринария. 1980.
№ 12. С. 55-57.
3. Сорокулова И. Б., Осипова И. Г., Пинчук И. В. [и др.]. Изучение безопасности пробиотических штаммов бацилл //
Матер. междунар. конф. «Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания». М., 2004.
С. 55.
4. Малик Е. В. Оценка влияния препарата «Биокорм пионер» на фагоцитарную активность перитонеальных макро
фагов мышей // Ветеринарный врач. 2009. № 2. С. 22-27.
5. Смирнов В. В., Резник С. Р, Василевская Н. А. Спорообразующие аэробные бактерии-продуценты биологиче
ски активных веществ. Киев, 1983. 263 с.
6. Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных. М. : МЗ РСФСР, 1977. 12 с.
www.m-avu.narod.ru 9
венозные сосуды системы триады были расширены и содержали эритроциты.
Стенки артерии и желчного протока в системе триады с хорошо выраженным эндотелием и эпителием (рис. 3).
Обращает на себя внимание усиленная реакция звездчатых ретикуло-эндотелиоцитов, выполняющих функцию фагоцитоза. Наиболее активно их реакция выявлена в области центральной вены, здесь же выявлено значительное количество делящихся гепатоцитов (рис. 4).
Сравнительное морфологическое изучение поджелудочной железы контрольных и опытных мышей показало активизацию островков Лангерганса у животных опытной группы под воздействием В. subtilis, причем эти островки были четко контурированы, увеличены в объеме. Клетки поджелудочной железы были четко очерчены, ядра клеток интенсивно окрашены гематоксилином в синий цвет.
Система микроциркуляторного русла у поджелудочной железы опытных мышей умеренно кровенаполнена. Все это свидетельствует о функциональной полноценности данного органа (рис. 5).
Вывод.
Таким образом, сравнительная оценка морфологических изменений происходящих в печени и поджелудочной железе контрольной и опытной групп позволяет положительно оценить действие В. subtilis на организм экспериментальных животных (мышей) в период беременности, так как под его влиянием усилились процессы метаболизма и произошла нормализация структуры исследуемых органов у животных опытной группы.
