CC BY
59
170
НАУЧНЫЕ ВЕДОМОСТИ
Серия Медицина. Фармация. 2012. № 16 (135). Выпуск 19
УДК 615.322:547.814.5.06:543.544.5.068.7
ИССЛЕДОВАНИЕ ФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ БУДРЫ ПЛЮЩЕВИДНОЙ (GLECHOMA HEDERACEA L] , ВЫРАЩЕННОЙ В УСЛОВИЯХ СЕВЕРНОГО КАВКАЗА
Пятигорская государственная фармацевтическая академия
Е.А. ВАСИЛЕНКО О.И. ПОПОВА
В работе изложены результаты исследования фенольных соединений будры плющевидной. Впервые в надземной части будры плющевидной идентифицированны галловая кислота, катехин, эпигаллокатехингаллат , эпикатехин, кофейная кислота, дигидрокверцетин, лютеолин, кверцетин, рутин.
e-mail: evg-vasilenko@mail.ru
Ключевые слова: будра плющевидная, фенольные соединения, ВЭЖХ.
Введение. Трава будры плющевидной [Glechoma hederacea L.] - многолетнее травянистое растение с ползучим голым или с короткими волосками стеблем длиной 20—50 см, с многочисленными укореняющимися побегами. Листья почковидные или округло-почковидные, крупного-родчатые, на длинных черешках (у нижних листьев черешки длиннее, чем у верхних). Цветоносные побеги приподнимающиеся. Цветки маленькие, трубчатые, двугубые, фиолетовые или синевато-лиловые, собраны пучками по 3—4 штуки в пазухах средних и верхних листьев. Нижняя губа длиннее верхней. Цветет в первой половине лета. Плод — бурый яйцевидный орешек длиной до 2 мм. Плоды созревают в августе. Растение очень пахучее [1,2,3]. Будра плющевидная включена в Европейскую и Британскую фармакопеи [5,6,7].
Объектом исследования явилась надземная часть G. hederacea, собранная в период цветения (апрель - май) 2009-2010 гг. в окрестностях г. Пятигорска (Ставропольский край).
Цель - изучение фенольных соединений надземной части будры плющевидной.
Методика исследования. Изучение качественного состава фенольных соединений проводили на высокоэффективном жидкостном хроматографе фирмы '^!Х8ТО№',модель 305,ФРАНЦИЯ; инжектор ручной,модель RHEODYNE, 7125 USA, с последующей компьютерной обработкой результатов исследования с помощью программы Мультихром для" Windows" .
В качестве неподвижной фазы была использована металлическая колонка размером 4,6х250 мм KromasilC 18, размер частиц 5 микрон.
В качестве подвижной фазы метанол-вода-кислота фосфорная концентрированная, в соотношении 400:600:5. Анализ проводили при комнатной температуре. Скорость подачи элюента 0,8 мл\мин. Продолжительность анализа 70 мин. Детектирование проводилось с помощью УФ-детектора "GILSTON" UV/VIS модель 151,при длине волны 254 нм.
Для исследования сырьё измельчали до размера частиц ,проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 2 мм по (ГОСТ 214-83 ).
Около 2.0 г сырья помещали в колбу вместимостью 200 мл, прибавляли по 40 мл спирта этилового 70 %, присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 1 часа с момента закипания спиртоводной смеси в колбе. После охлаждения смесь фильтровали через бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводили спиртом этиловым 70 % до метки (исследуемый раствор).
Параллельно готовили серию 0,05 % растворов сравнения в 70% спирте этиловом: рутина, кверцетина, лютеолина, лютеолин-7-гликозида, геспередина, апигенина,гиперозида, дигидрок-верцетина, кемпферола, витексина, изовитексина, нарингенина, байкалина, изорамнетина, галловой кислоты, кофейной кислоты, хлорогеновой кислоты, цикориевой кислоты, коричной кислоты, феруловой кислоты, эллаговой , о-кумаровой, умбеллиферона, эскулетина, кумарина, метоксику-марина, эпигалокатехингаллата (ЭГКГ), эпикатехина.
По 20 мкл исследуемого раствора и растворов сравнения вводили в хроматограф и хрома-тографировали по вышеприведенной методике.
Результаты представлены в табл. 1.
НАУЧНЫЕ ВЕДОМОСТИ |: ] Серия Медицина. Фармация. 2012. № 16 (135). Выпуск 19 -|7-|
Таблица 1
Результаты идентификации фенольных соединений надземной части будры плющевидной
(извлечение 70% спиртом этиловым)
№ Время, мин Высота, шУ Площадь, шУ-сек ФО Содержание, % Название
1. 3,468 86,80 2141,32 1,000 22,16 галловая кислота
2. 3,650 89,83 2092,26 1,000 21,65 катехин
3. 4,359 46,94 1746,80 1,000 18,07 ЭГКГ
4. 5,453 31,97 1375,71 1,000 14,23 эпикатехин
5. 6,263 10,09 166,25 1,000 1,72 неидент.
6. 6,488 9,72 99,74 1,000 1,03 неидент.
7. 6,836 21,71 545,61 1,000 5,65 неидент.
8. 7,233 12,29 465,66 1,000 4,82 кофейная кислота
9. 8,553 7,14 338,45 1,000 3,50 неидент.
10. 9,444 3,83 166,31 1,000 1,72 неидент.
11. 10,79 1,28 49,69 1,000 0,51 дигидрокверцетин
12. 15,8 0,65 53,99 1,000 0,56 лютеолин
13. 18,76 2,33 196,24 1,000 2,03 кверцетин
14. 22,94 0,93 56,16 1,000 0,58 рутин
15. 26,72 0,87 92,91 1,000 0,96 неидент.
16. 41,46 0,44 77,36 1,000 0,80 неидент.
Рис. 1. ВЭЖХ Хроматограмма спиртового извлечения из надземной части будры плющевидной
172 НАУЧНЫЕ ВЕДОМОСТИ Серия Медицина. Фармация. 2012. № 16 (135). Выпуск 19
Количественное определение галловой кислоты и эпигаллокатехингаллата (ЭГКГ)
в будре плющевидной методом ВЭЖХ
Около 2,0 г (точная навеска) сырья помещали в колбу вместимостью 200 мл, прибавляли 40 мл спирта этилового 70%, присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 1 часа с момента закипания спиртоводной смеси в колбе. После охлаждения смесь фильтровали через бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводили спиртом этиловым 70% до метки(испытуемый раствор). Параллельно готовили растворы в 70% спирте этиловом РСО. Для этого около 0,01г (точная навеска) галловой кислоты или 0,04(точная навеска) ЭГКГ помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл прибавляли 50 мл спирта этилового 70% перемешивали до растворения и доводили объём до метки тем же растворителем (РСО).
По 20 мкл исследуемого раствора и раствора РСО вводили в хроматограф и хроматографи-ровали по вышеприведенной методике [4].
Расчёт количественного содержания галловой кислоты и ЭГКГ производили методом абсолютной калибровки с помощью компьютерной программы " Мультихром " для " Windows " и с помощью формулы:
С % = Бис.х Сстандарта г\мл х100х50х100 ,
S стандарта х а ( 100- W)
Где
S ис.- площадь пика галловой кислоты или ЭГКГ в исследуемом растворе;
S стандарта -площадь пика стандартного раствора РСО галловой кислоты
или ЭГКГ;
С %-концентрация галловой кислот ы или ЭГКГ в % в испытуемом образце;
С стандарта г\мл - концентрация РСО галловой кислоты или ЭГКГ в г\мл;
а - навеска исследуемого образца в г.
W- влажность растительного сырья в %.
Результаты проведенных исследований приведены в табл. 2
Таблица 2
Результаты количественного определения галловой кислоты и ЭГКГ в представленном образце будры плющевидной
методом ВЭЖХ
Найдено в %
Галловой кислоты ЭГКГ
0,25 0,19
Вывод. Экспериментально в извлечении из надземной части будры плющевидной установлено наличие 16 соединений, из которых идентифицированы галловая кислота, катехин, ЭГКГ, эпикатехин, кофейная кислота, дигидрокверцетин, лютеолин, кверцетин, рутин. Доминирующими в количественном отношении являются: галловая кислота (22,16%), катехин (21,65%), ЭГКГ (18,07%).Количественное содержание галловой кислоты (0,25%), ЭГКГ (0,19 %)
Литература
1. Растительные ресурсы России: Дикорастущие цветковые растения, их компонентный состав и биологическая активность; Семейства Caprifoliaceae - Lobeliaceae . - Спб.; М.: Товарищество научных изданий КМК, 2011. - 630 с.
2. Изучение фенольного состава подземных органов сабельника болотного / О.Л. Жукова [и др.] // Вестник Московского Университета. Сер.2.Химия. - 2006. - Т.47, №5. -С.342-346.
3. Лекарственные растения: Терн [Электронный ресурс] / Справочно-информационный Интернет-портал «Медицина. Харьков», 2008.
4. Стыскин, Е.Л. Практическая высокоэффективная жидкостная хроматография /Е.Л.Стыскин, Л.Б.Ициксон, Е.В.Брауде. - Москва,1986. -204 с.
5. European Pharmacopoeia. - 6 th ed. - 2008 - CD - ROM version.
6. British Herbal Pharmacopoeia 1996. - Published by British Herbal Medicine Association, 1996- 212 p.
7. British Pharmacopeia 2008- CD - ROM version.
THE STUDY OF PHENOLIC COMPOUNDS OF WILD SNAKEROOT (GLECHOMA HEDERACEA L], CULTIVATED IN THE NORTH CAUCASUS
This paper presents the results of the study of phenolic compounds Glechoma hederacea. For the first time in the aerial part of Glechoma hederacea gallic acid, catechin, epigallokate-hingallat, epicatechin, caffeic acid, dihydroquercetin, luteolin, quercetin, rutin were identified.
E.A. VASILENKO O. I. POPOVA
Pyatigorsk State Pharmaceutical Academy
e-mail: evg-vasilenko@mail.ru
Key words: Glechoma hederacea, phenolic compounds.
