CC BY
15
Сравнительная характеристика терапевтической эффективности применяемых схем лечения при демодекозе собак
Схема лечения Кол-во заражённых животных Выздоровело животных через
28 дн. % 56 дн. % 84 дн. % 112 дн. %
1-я (АверсектК&С®-2 + Полиоксидоний-вет®) 12 0 0 3 25,0 8 66,6 11 91,7
2-я (Ивермек спрей® + Полиоксидоний-вет®) 11 0 0 3 27,3 6 54,5 8 72,7
3-я (Аверсектиновая мазь® + Полиоксидоний-вет®) 10 0 0 1 10,0 4 40,0 7 70,0
8 собак (ЭЭ — 66,6%), на 16-ю неделю — 11 собак (ЭЭ — 91,7%) (табл.). У животных отмечали достаточно быстрый регресс очагов поражения и эпителизацию кожного покрова. У одной собаки выздоровление не наступило, в соскобах были найдены клещи, начиная от яйца, личиночной стадии, нимфы и дейтонимфы, а также взрослые особи.
Использование 2-й схемы лечения (Ивермек спрей® + Полиоксидоний-вет®) позволило привести к выздоровлению на 8-й неделе терапии 3 собаки (ЭЭ - 27,3%), на 12-й неделе - 6 собак (ЭЭ -54,5%) и на 16-й неделе - 8 собак (ЭЭ - 72,7%). При проведении мониторинга гематологических показателей у собак отклонений не было выявлено, побочных действий со стороны пищеварительной, дыхательной и нервной систем на препарат не наблюдали. Зуд к 4-й неделе не беспокоил животных.
Лечение собак по 3-й схеме с использованием Аверсектиновой мази и иммуномодулятора Полиоксидоний-вет®, в дозе 0,15 мл подкожно через день курсом лечения три недели, позволило установить освобождение от клещей на 8-й неделе терапии у 1 собаки (ЭЭ - 10,0%), на 12-й неделе - у 4 собак (ЭЭ - 40,0%) и на 16-й неделе -у 7 собак (ЭЭ - 70,0%). Собаки хорошо переносили применяемую терапию против клещей демодексов. Никаких проявлений интоксикаций ни у одной собаки мы не отмечали.
При использовании вышеуказанных схем терапии на протяжении всего периода терапевтических мероприятий животных подстригали, мыли у них кожные покровы (иногда даже каждый день), обрабатывали кожу обеззараживающими препаратами, чаще всего хлоргексидином, затем просушивали,
для того чтобы кожа животного была сухой и чистой. Защищали животных от возможности слизывания лекарственных средств, с помощью нашейных воротников и наблюдения за ними.
Вывод. Применение инсектоакарицидного средства Аверсект К&С®—2® в дозе 0,4 мл на 10 кг массы тела животного подкожно один раз в семь дней совместно с препаратом, обладающим имму-номодулирующим эффектом — Полиоксидоний-вет®, с подкожным введением из расчёта 0,15 мг/кг дважды в неделю на протяжении трёх недель терапии, показало терапевтическую эффективность 91,7%.
Литература
1. Белова С. Демодекоз у собак Demodicosis canum // VetPharma.
2011. № 5. С. 28-33.
2. Домацкий В.Н. Средства терапии и профилактики парази-тозов собак и кошек // Успехи современной науки. 2016. Т. 9. № 11. С. 93-96.
3. Домацкий В.Н., Аубакиров М.Ж. Паразитические насекомые и клещи (учебное пособие). Костанай, 2015. 227 с.
4. Столбова О.А. Возрастная и породная специфичность де-модекоза собак в условиях города Тюмени // Современные проблемы науки и образования. 2014. № 6. С. 1372.
5. Столбова О.А., Скосырских Л.Н., Круглов Д.С. Сезонная динамика эктопаразитозов у мелких домашних животных в условиях города Тюмени // Современные проблемы науки и образования. 2017. № 2. С. 237.
6. Ястреб В.Б. Лечение демодекоза собак с применением клозантина и иммуномодуляторов // Российский парази-тологический журнал. 2016. Т. 36. Вып. 2. С. 234-239.
7. Коротаева О.А. Диагностика, терапия и профилактика демодекоза собак. Тюмень, 2005. 30 с.
8. Инструкция применения ивермек-спрея [Электронный ресурс]. URL: http://www.nita-farm.ru/produktsiya/ivermek-sprey (дата обращения 26.06.2017).
9. Инструкция применения полиоксидония-вет [Электронный ресурс]. URL: https://www.vetlek.ru/shop/?gid=1451&id=7239 (дата обращения 26.06.2017).
10. Mueller, R.S., Bensignor, E., Ferrer, L., Holm, B., Lemarie, S., Paradis, M. and Shipstone, M.A. Treatment of demodicosis in dogsA2011 clinical practice guidelines. Veterinary Dermatology
2012. 23(2): 86-98.
Иммуноморфологическая диагностика экспериментального хламидиоза крыс в органах иммунитета
О.В. Кочетова, к.в.н, А.С. Кумакшев, аспирант, ФКОУ ВО Пермский институт ФСИН; Н.А. Татарникова, д.в.н., профессор, ФГБОУ ВО Пермская ГСХА
Исследование внутренних органов животных, заражённых хламидийной инфекцией, даёт возмож-
ность изучения достоверных изменений в органах и системах в процессе прогрессирующего течения заболевания. У взрослых особей заболевания, вызванные хламидиями, протекают, как правило, бессимптомно [1]. При определённых условиях, а именно при декомпенсации иммунологических
функций, заболевание может переходить в глубокие системные поражения многих органов и тканей [2], а также провоцирует аутоиммунные реакции, когда антигеном становятся клеточные системы организма [3]. Наиболее точным в диагностике хламидий-ной инфекции явился иммуноморфологический метод, который позволил с большой точностью установить тропизм возбудителя в органах и тканях животных при экспериментальном заражении. Исследованы те органы и ткани, к которым возбудитель проявляет тропизм в первую очередь. Это эпителиальные ткани, сосудистая система и система иммуногенеза. С помощью этого метода мы проследили точную локализацию хламидий в клетке хозяина и установили основные этапы патологического процесса при развитии инфекции. Иммунологические реакции, обеспечиваемые клеточными и гуморальными факторами, в своём течении имеют целый ряд стадий. В них принимают участие клеточные элементы (макрофаги, лимфоциты Т-клеточного и В-клеточного ряда) и плазменные факторы, в частности иммуноглобулины, участвующие в реакциях гиперчувствительности немедленного типа. К органам иммуно-компетентной системы относятся тимус у плодов и молодых особей, селезёнка, лимфатические образования различной локализации, прослеживаемые наиболее хорошо в органах дыхательных путей и желудочно-кишечного тракта, т.е. там, где вероятность контакта клеточных систем организма с возбудителем наиболее высока. В связи с этим нами была прослежена локализация возбудителя в органах иммунокомпетентной системы (тимусе, селезёнке, лимфатических узлах).
Цель исследования — изучить морфо-пато-логические процессы, протекающие в органах иммунокомпетентной системы крыс при экспериментальном хламидиозе.
Материал и методы исследования. Материалом для исследования служили патогенные микроорганизмы (хламидии). Опыты были проведены на крысах. Для заражения крыс использовали возбудитель Ск!. РзШаа, штамм «Лори» выделенный в 1957 г. от попугая.
Инфекционный материал животным вводили внутрибрюшинно в виде 10-процентной взвеси, очищенной дифференциальным центрифугированием овокультуры Ск!. ръШаа штамм «Лори». Инфекционный титр инокулянта составил 10-7 LD50/ 0,5 мл для куриных эмбрионов.
Животных умерщвляли через 30 дн. путём передозировки эфиром, после этого материал для исследования подвергали фиксации в 10-процентном формалине. На следующий день производили вырезку кусочков тканей, далее проводку по спиртам возрастающей крепости, заливку материала в парафин.
Иммуногистохимическое окрашивание серийных срезов тканей производили пероксидазным методом, используя моно- и поликлональные
антитела к хламидийному антигену и систему визуализации Еп^юп™ фАКО). Для разведения первичных антител использовали растворитель антител, редуцирующий фоновое окрашивание ^АКО). Все этапы окрашивания проходили на нагревательном столике при температуре 37°С. Суммарное время реакции (без микроскопии и оценки полученных результатов) составляет 12 мин. 05 с. Учитывая время, необходимое для приготовления криостатных срезов, для микроскопии и оценки полученных результатов суммарное время колебалось в пределах 20—22 мин.
Результаты исследования. Особенно остро на внедрение хламидий в организм реагирует лимфоидная система — барьер на пути любого патологического агента при распространении его в макроорганизме. В лимфатических узлах экспрессию хламидийного антигена наблюдали в первую очередь в макрофагальных элементах пе-рифолликулярных зон — именно в том месте, где происходит контакт иммунокомпетентных клеток с антигеном и старт иммунного ответа (рис. 1). Иммунокомпетентные клетки выявляли также на уровне синусов (субкапсулярных и мозговых) с характерной цитоплазматической экспрессией хламидийного антигена (рис. 2—5).
В тимусе плода и новорождённых экспрессия хламидийного антигена прослеживается на уровне мозгового слоя, где наиболее интенсивен уровень иммунных реакций и наблюдаются изменения, связанные со становлением иммунного ответа на внедрение возбудителя. При этом следует учесть незрелость тимуса у особей раннего возраста (слабую выраженность ретикулоэпителиальной системы — телец Гассаля, принимающих участие в выработке иммунокомпетентных поэтинов, стимулирующих созревание и бласттрансформацию лимфоцитов).
Селезёнка также является значимым органом. В светлых центрах фолликулов органа происходит активизация элементов клеточного и гуморального звена иммунопатологических реакций. Клеточные элементы макрофагального звена иммунных реакций способны осуществлять фагоцитоз чужеродных, биологически активных, антигенов, в частности бактериальных. Хламидии, также являющиеся высокоспецифическим антигеном, подвергаются фагоцитозу клетками макрофагальной системы. Эту реакцию можно наглядно проследить, применив иммуногистохимическую реакцию.
При использовании иммуногистохимического метода удаётся проследить основные патогенетические звенья в развитии хламидийной инфекции. У взрослых особей страдают в первую очередь репродуктивные органы (матка), где инфекция чаще имеет хронический характер течения, возбудитель может находиться в латентном состоянии, что особенно опасно для заражения потомства гематогенным путём. Органы лимфоидно-макрофагальной системы (печень, лимфатические узлы) являются
Рис. 1 - Экспрессия хламидий в клетке лимфатического узла крысы. Иммуногистохимическая реакция с хламидийным антигеном. х4
Рис. 3 - Иммуногистохимическая реакция с хлами-дийным антигеном. Экспрессия антигена в макрофагах перифолликулярной зоны крыс на уровне корковой зоны лимфатического узла плода крысы. х4
Рис. 2 - Иммуногистохимическая реакция с хлами-дийным антигеном. Экспрессия антигена в макрофагах перифолликулярной зоны на уровне мозгового синуса в лимфатическом узле плода крысы. х4
Рис. 4 - Иммуногистохимическая реакция с хлами-дийным антигеном. Экспрессия антигена в макрофагах перифолликулярной зоны на уровне мозгового синуса лимфатического узла плода крысы. х10
- О
• - л "г ' V -
С*
--% ай 1 ■ ■ ■/ * ' ,г
«■ 41 ' ■ л
<$"Г ш
/V' Щ
шш еН ) -5 *
л
е
Рис. 5 - Иммуногистохимическая реакция с хлами-дийным антигеном. Экспрессия антигена в макрофагах перифолликулярной зоны лимфатического узла плода крысы. х10
первым барьером защитного характера на пути хламидий в организме. Наличие хламидийных антигенов в иммуннокомпетентных клетках, способных выполнять макрофагальную функцию, доказывает
формирование иммунного ответа в барьерных органах, что может сдерживать гематогенное распространение возбудителя по организму. Если деятельность этой системы несовершенна по каким-либо причинам (сопутствующая патология, имму-нодефицитные состояния, ослабление организма и другие), страдают органы, в частности головной мозг, который является наиболее защищённым в связи с существованием гематоэнцефалического барьера.
Хламидийная инфекция принимает генерализованный характер течения с возможностью повреждения самых защищённых органов при недостатке местных барьерных структур, что и было доказано при использовании иммуногистохимического метода исследования с хламидийным антигеном. Следовательно, на нашем материале с помощью иммуногистохимического метода исследования удалось проследить точки фиксации возбудителя в плодовых тканях крыс. Точками воздействия при патогенетическом развитии инфекционного хламидийного процесса являются иммунокомпе-тентные органы, в частности тимус, селезёнка,
лимфатические узлы. В случае внутриутробной контаминации плода и рождения заражённого организма возбудитель находит благоприятные условия для развития на уровне головного мозга и паренхиматозных органов.
Выводы. В основе интранатального и постна-тального патогенеза инфекции можно отметить следующие звенья. Прохождение через родовые пути способствует попаданию возбудителя в организм новорождённого при прямом контакте с инфицированными эпителиальными клетками репродуктивных органов (следует учесть также возможность аспирации и заглатывания плодом инфицированных околоплодных вод с высоким содержанием возбудителя), далее происходит гема-
тогенное распространение, включая иммунокомпе-тентные органы, которые утрачивают способность адекватно реагировать на инфекционное начало, с дальнейшей фиксацией в органах-мишенях с развитием той или иной клинико-морфологической формы заболевания.
Литература
1. Татарникова Н.А. Морфология гисто-гематических барьеров при спонтанном и экспериментальном хламидиозе животных с разным типом плаценты // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2010. № 2 (26). С. 174-175.
2. Штерн Л.С. Развитие и регуляция гисто-гематических барьеров. М.: Наука, 1967. С. 192.
3. Дроздова Л.И., Татарникова Н.А. Морфология гисто-гематических барьеров при хламидиозе свиней: учеб. пособие для студентов по специальности «Ветеринария». Пермь, ПГСХА, 2003. С. 205.
