CC BY
45
УДК 616.23/.24-036.12-053.2-078-097:616.98:579.882.11 Кубанский научный медицинский вестник № 2 (125) 2011
Н. В. КОЛЕСНИКОВА, Л. Н. КОКОВА, Е. А. КОКОВ, И. В. НЕХОТИНА, Г. А. ЧУДИЛОВА, Л. В. ЛОМТАТИДЗЕ, С. В. СТОРОЖУК, Н. А. ОБУХОВА
ИММУННЫЙ СТАТУС ДЕТЕЙ С БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ И ОБСТРУКТИВНЫМ БРОНХИТОМ, СОЧЕТАННЫМИ С ХЛАМИДИЙНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ
ЦНИЛ Кубанского государственного медицинского университета,
Россия, 350640, г. Краснодар, ул. Седина, 4, тел. 8-861-262-90-19. E-mail: troickaya@rambler.ru
Сравнительное исследование иммунного статуса детей с бронхиальной астмой легкого течения и рецидивирующим обструктивным бронхитом в стадии ремиссии, ассоциированными с гиперпродукцией IgE и инфицированием хламидиями, выявило достоверные изменения показателей различных звеньев иммунитета обследуемых как относительно возрастной нормы, так и относительно таковых патологий, не сопровождающихся хламидийной инфекцией. Полученные данные имеют дифференциально-диагностическое значение и обуславливают целесообразность комплексной терапии с включением элементов иммунокоррекции.
Ключевые слова: бронхиальная астма, обструктивный бронхит, иммунный статус, хламидийная инфекция.
N. V. KOLESNIKOVA, L. N. KOKOVA, E. A. KOKOV, I. V. NEHOTINA, G. A. CHUDILOVA, L. V. LOMTATIDZE, S. V. STOROZHUK, N. A. OBUKHOVA
IMMUNE STATUS OF CHILDREN WITH IGE-MEDIATED CHRONIC RESPIRATORY DISEASES,
COMBINE WITH CHLAMYDIAL INFECTION
The central scientific research laboratory of Kuban state medical university,
Russia, 350640, Krasnodar, Sedina st., 4, tel. 8-861-262-90-19. E-mail: troickaya@rambler.ru
Comparative study of immune status of children with bronchial asthma at easy current and recurrent obstructive bronchitis in the remission stage, associated with hyperproduction of IgE and chlamydial infection revealed a significant changes in performance of various components of immunity surveyed, both with respect to age norms, and with respect to such pathologies wich are not accompanied by chlamydial infection.The obtained data has differential-diagnostic importance and causes expediency of complex therapy with inclusion of elements of immunocorrection.
Key word: bronchial asthma, obstructive bronchitis, immune status, chlamydial infection.
Изучение иммунологических механизмов в развитии аллергического воспаления у детей представляет собой актуальную и практически значимую проблему в связи с возможностью перехода острого воспаления в хроническое, что свойственно патогенезу бронхиальной астмы (БА) [6]. Актуальность проблемы острого обструктивного бронхита (ОБ) определена высокой заболеваемостью, тяжелым течением, частым развитием осложнений и переходом в рецидивирующий ОБ и БА [7, 9, 13, 14]. В последние годы охарактеризованы два патогенетических варианта ОБ у детей, в основе развития которых лежат особенности иммунного ответа и выраженность изменений соструктурно-функцио-нального состояния клеточных мембран [8]: инфекционно-воспалительный и атопический варианты. В ряде случаев у детей с БА и ОБ выявляется хламидийная инфекция [10], выполняющая роль триггеров обострений аллергических заболеваний [4, 11] и способная индуцировать дисбаланс в системе местного иммунитета слизистых, определяющий длительную персистенцию патогенов в организме ребенка [3].
Цель исследования - провести сравнительную оценку состояния различных звеньев иммунной системы у детей с бронхиальной астмой легкого течения и рецидивирующим обструктивным бронхитом в стадии ремиссии, ассоциированными с хламидийной инфекцией и гиперпродукцией 1дЕ.
Методика исследования
Проведено обследование 76 детей в возрасте от 4 до 9 лет с БА легкого течения (32 ребенка, 42%) и рецидивирующим обструктивным бронхитом (ОБ) в стадии ремиссии (44 ребенка, 58%). У 27% пациентов с БА и у 32% с рецидивирующим ОБ методом ИФА были обнаружены IgG-антитела к Clamidia pneumoniae, Chl. psitacci в положительных титрах (1:20-1:40). Комплексная оценка клинико-лабораторных данных детей с ОБ позволила выделить инфекционно-воспалительный вариант ОБ с нормальным содержанием IgE и отсутствием хламидийной микрофлоры у 24 (43%), а у 32 (57%) - атопический вариант ОБ, сопровождающийся повышенным содержанием IgE в сочетании с хламидийной инфекцией.
С целью углубленного иммунологического обследования в венозной крови методом проточной цитометрии (проточный цитофлюориметр «Cytomics FC-500», СШ^) и соответствующей панели моноклональных антител («Beckman coulter») определяли параметры клеточного (CD3+, CD4+,CD8+, CD16+CD56+лимфоциты) иммунитета; методом радиальной иммунодиффузии в сыворотке крови (G. Manchini et al.,1965) - иммуноглобулины основных классов (IgA, M, G); концентрацию сывороточного общего IgE - методом ИФА (тест-система ЗАО «Вектор Бест»), а функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов (НГ) оценивали в соответствии с рекомендациями И. В. Нестеровой и соавт.
[5] по показателям их фагоцитарной (%ФАН, ФЧ, ФИ, %П, ИП) и микробицидной функции (показатели спонтанного и стимулированного ЫВТ-теста - %ФПК, СЦИ и коэффициента мобилизации - КМ). Концентрацию в сыворотке крови интерферона-у (ИФНу) и интерлейкина-4 (ИЛ-4), а также компонентов комплемента (С3, С4, С5, С3а, С5а, С1-ингибитор)определяли методом ИФА с использованием специфических моноклональных антител (ООО «Цитокин», Санкт-Петербург).
Для сравнительной оценки иммунного статуса обследуемых были сформированы следующие клинические группы: 1-я группа - дети с 1дЕ-опосредованной БА легкого течения, ассоциированной с хламидийной инфекцией; 2-я группа - дети с атопическим вариантом рецидивирующего ОБ, ассоциированным с хламидийной инфекцией и повышенным уровнем общего 1дЕ. Группы сравнения включали детей с БА без хла-мидийной инфекции (группа 3) и рецидивирующим ОБ инфекционно-воспалительного варианта смешанной вирусно-бактериальной природы, не ассоциированным с хламидийной инфекцией (группа 4). Контролем служили показатели иммунного статуса практически здоровых детей того же возраста (группа 5).
Статистическую обработку полученных данных осуществляли общепринятыми методами с вычислением среднеарифметических (М) и относительных (Р) величин, средней ошибки средней арифметической (м). Статобра-ботку данных проводили на персональном компьютере «РепНит-4» с использованием программы «^аНвйса-б.О».
Результаты исследования и их обсуждение
Исследование относительных параметров клеточного иммунитета детей клинических групп позволило установить общий характер изменений содержания 003(+)-лим-фоцитов в виде достоверного их увеличения относительно контроля за счет популяции CD8(+)Т-киллеров (табл. 1). При этом содержание Т-хелперов было ниже, чем у здоровых детей, особенно при атопическом варианте ОБ. Содержание CD19(+)-В-лимфоцитов превышало контрольный уровень во всех группах детей, причем наиболее выраженно - при БА. Хламидийная инфекция у детей с БА и ОБ определяла характер изменения концентрации натуральных киллеров (CD16+CD56+) и приводила к отсутствию изменений их количества в 1-й и 2-й клинических группах, тогда как в отсутствие хламидийной инфекции у детей с БА и ОБ уровень содержания натуральных киллеров был достоверно выше контрольного
(табл. 1). Сходный характер изменений был обнаружен при анализе большинства абсолютных показателей клеточного иммунитета детей с ОБ и БА (рисунок).
Оценка гуморального звена иммунной системы обследуемых пациентов показала достоверное снижение концентрации сывороточного 1дА у детей с ОБ, наиболее выраженное в отсутствие хламидийной инфекции, и повышение содержания 1дС во всех клинических группах, наиболее выраженное в 3-й группе. Содержание патогенетически значимого 1дЕ было выше нормы в обеих группах детей с БА, а также при атопическом варианте ОБ, сочетанного с хламидийной инфекцией, однако максимальное возрастание отмечено в 1-й клинической группе (табл. 1).
Содержание С3-КК было достоверно выше контрольного уровня при атопическом варианте ОБ с хла-мидийной инфекцией, а в 4-й группе - ниже возрастной нормы; содержание С4-КК во всех клинических группах было снижено, за исключением 4-й группы детей, характеризующихся его увеличением; уровень С5-КК соответствовал контрольному во всех группах и лишь при БА без хламидийной инфекции достоверно превышал норму; С1-ингибитор был сниженным во всех группах, за исключением 3-й группы обследуемых детей. Изменение содержания активных компонентов комплемента было разнонаправленным, что выражалось в возрастании С3а-КК (максимально - в 3-й группе) и в снижении С5а-КК (максимально - в 4-й группе) (табл. 1). Таким образом, несмотря на разнонаправленный характер изменений компонентов комплемента важным фактором, определяющим общий характер изменения ряда показателей (С4-КК, С1-ингибитор, С3а и С5а), явился атопический компонент заболевания.
Известно, что высокие уровни ИФН-у могут полностью задерживать рост хламидий и способствовать лизису инфицированных клеток с выходом нежизнеспособных форм возбудителя, что обуславливает освобождение от инфекции [1, 2]. Показано, что концентрация ИФН-у была достоверно снижена в сыворотке крови детей всех клинических групп, но наиболее выраженно - в 3-й группе обследуемых, а содержание сывороточного ИЛ-4 достоверно превышало уровень возрастной нормы во всех клинических группах (табл. 1).
При этом важно, что отсутствие повышения концентрации 1дЕ в 4-й клинической группе сочетается с увеличением содержания ИФН-у, что еще раз подчеркивает регуляторную роль данного цитокина в продукции 1дЕ
0016+0056+
0019+
250
003+
004+
008+
---- - БА+хл
ОБ+хл
-------БА
---- -ОБ
■ контроль
Изменение абсолютных показателей клеточного иммунитета детей с БА и ОБ (в % от контроля)
Кубанский научный медицинский вестник № 2 (125) 2011
Кубанский научный медицинский вестник № 2 (125) 2011
Таблица 1
Показатели клеточного и гуморального иммунитета у детей с бронхиальной астмой и обструктивным бронхитом (М±м, р)
Показатель/ 1-я группа 2-я группа 3-я группа 4-я группа 5-я группа
группа (БА+хламидии) (Ат-ОБ+хламидии) (БА) (ОБ) (контроль)
Лейкоциты, абс. 7,50±0,98# 8,99±0,56# 5,65±0,35 6,49±0,86 6,75±0,75
Лимфоциты, абс. З,17±0,29 3,72±0,42 2,66±0,12 3,36±0,25 3,50±0,53
003(+), % 67,47±5,48*# 68,38±4,56 * 59,30±4,21 69,88±3,02* 55,10±1,З9
004(+), % 40,10±З,27*# З8,01±2,45* З5,40±2,17* 40,38±2,35* 45,9±2,35
С08(+), % 26,23±1,97*# 26,88±2,10* 22,60±1,59 28,43±2,46* 22,9±1,З5
0019(+), % 1,57±0,09* 1,52±0,12* 1,57±0,1З* 1,47±0,12* 1,21±0,06
0016(+)0056(+), % 19,60±2,02 15,86±1,29 З1,80±2,98*# 22,8±1,86*# 17,11±1,54
1д А, г/л 1,21±0,11 0,81±0,07* 1,З9±0,11 0,91±0,06* 1,4З±0,1З
1д М, г/л 0,86±0,04 1,15±0,09 1,22±0,09 0,96±0,08 0,84±0,08
1д G, г/л 11,72±0,98* 11,17±0,96* 15,07±0,9З*# 11,78±1,З8* 8,83±1,12
1дЕ, МЕ/мл З95,70±21,45*# 228,01±11,68*# 208,12±15,78* 44,53±4,56 37,56±8,42
С3, мг/мл 0,72±0,05 1,29±0,10* 0,73±0,03 0,35±0,05*# 0,85±0,06
С4, мг/мл 0,21±0,01* 0,18±0,04* 0,22±0,01* 0,68±0,08*# 0,35±0,02
С5, мг/мл 0,09±0,01 0,11±0,02 0,19±0,02*# 0,12±0,0З 0,10±0,01
С1-ингиб., мкг/мл 201,20±12,46* 200,00±14,25* 279,11±15,22# 187,50±17,26* 250,00±19,28
С3а, нг/мл 127,70±10,04* 178,00±12,97* 2З7,9±18,11*# 87,20±7,23# 100,00±11,21
С5а, нг/мл 7,32±0,69* 9,52±1,12* 46,24±4,25*# 6,21±0,76*# 17,01±1,54
ИФН-у, пкг/мл 4,З0±0,21* 1,70±0,80* 0,79±0,08*# 6,10±0,60*# 9,53±1,60
ИЛ-4, пкг/мл 1,51±0,40* 1,95±0,З1* 2,92±0,39*# 0,65±0,11# 0,51±0,10
Примечание: * - достоверность отличий от контроля (р<0,01),
# - достоверность отличий между клиническими группами (р<0,01).
Таблица 2
Функционирование системы нейтрофильных гранулоцитов у детей с бронхиальной астмой и обструктивным бронхитом (М±м, р)
Показатель/группа 1-я группа 2-я группа 3-я группа 4-я группа 5-я группа
(БА+хламидии) (Ат-ОБ+хламидии) (БА) (ОБ) (контроль)
%ФАН 52,00±3,59 45,25±3,26* 5З,10±4,19 42,17±4,12* 60,10±1,94
ФЧ у. е. 6,52±0,54* 4,56±0,54* 4,90±0,34* 4,06±0,51* 2,40±0,03
ФИ у. е. 3,52±0,27* 2,18±0,18 2,60±0,19# 1,7±0,12# 1,84±0,01
%П 67,43±5,02* 60,51±3,86 55,10±З,72# 55,83±4,21 59,9±1,18
ИП у. е. 2,57±0,17* 1,62±0,11* 1,2З±0,11# 1,28±0,10# 1,02±0,02
СЦИсп, у. е. 0,05±0,01* 0,07±0,01* 0,07±0,04* 0,35±0,02*# 0,25+0,01
СЦИст, у. е. 0,10±0,02* 0,14±0,0З* 0,11±0,01* 0,68±0,05*# 0,32±0,09
%ФПК сп. 1,01±0,08* 2,ЗЗ±0,15* 2,00±0,21*# 9,50±0,86*# 11,60±0,25
%ФПК ст. 2,51±0,14* 3,83±0,27* 4,00±0,37*# 21,50±1,58*# 17,50±0,52
КМ (%ФПКст/%ФПКсп) у. е. 2,50±0,11* 1,32±0,07 2,00±0,19* 1,52±0,08 1,51±0,02
Примечание: * - достоверность отличий от контроля (р<0,01),
# - достоверность отличий между клиническими группами (р<0,01).
и противохламидийной защите в целом. Исследование функционирования системы НГ показало снижение процента активных фагоцитов лишь при ОБ у детей (2-й и 4-й групп) наряду с тем, что поглотительная способность фагоцитов (ФЧ) была достоверно повышена во всех клинических группах, а переваривающая (%П) -только при БА с хламидийной инфекцией (табл. 2). Между тем оценка завершенности фагоцитарного акта по индексу переваривания (ИП) свидетельствовала об ак-
тивации данной функции во всех группах обследуемых детей с максимумом выраженности при БА, сочетающейся с хламидийной инфекцией (табл. 2). Исследование оксидазной биоцидности НГ в NBT-тесте продемонстрировало преимущественное снижение СЦИ и %ФПК как в спонтанном, так и в стимулированном тесте в 1, 2 и 3-й группах, однако адекватность реагирования на дополнительную антигенную нагрузку in vitro (КМ) в группах детей с ОБ соответствовала возрастной норме. Между тем при
БА, особенно в сочетании ее с хламидийной инфекцией, КМ достоверно превышал таковой в контрольной группе детей (табл. 2).
Анализ полученных данных в целом показал, что характер изменения показателей иммунной системы определяется как атопическим, так и инфекционным компонентом. Влияние хламидийной инфекции выражается в наличии достоверных межгрупповых различий по ряду параметров (CD3+, CD4+, CD8+-лимфоциты, IgE, IgG, показатели системы комплемента и НГ). В то же время сходство направленности изменений некоторых показателей при БА и Ат-ОБ, сочетающихся с хламидиозом (CD3+, CD8+-лимфоциты, IgE, IgG, С4-КК, С1-ингибитор), свидетельствует о возможном потенцировании атопического компонента заболевания данными возбудителями. Увеличение концентрации IgE, возрастание ИЛ-4 и снижение ИФН-у при БА и атопическом варианте ОБ приводили к активации системы комплемента и усилению поглотительной, переваривающей и микробицидной функции НГ. Между тем известно, что при хламидийной инфекции происходят угнетение активности системы комплемента, снижение синтеза С3а и С5а фракций, что приводит к слабому хемотаксису НГ в очаг воспаления и предрасполагает к затяжному, латентному течению воспалительного процесса [12]. Таким образом, респираторные IgE-опосредованные заболевания, сочетающиеся с хламидийной инфекцией, сопровождаются достоверными изменениями в различных звеньях иммунной системы, приводящими к увеличению сывороточной концентрации общего IgE, ИЛ-4 и к уменьшению способности к продукции ИФН-у, что обуславливает целесообразность комплексной этиотропной терапии заболеваний с включением элементов адекватной иммунокоррекции.
ЛИТЕРАТУРА
1. Зайцева О. В., Щербакова М. Ю. Хламидийная инфекция: новый взгляд // Тер. архив. - 2001. - № 11. - С. 35-40.
2. Зайцева О. В., Скирда Т. А, Самсыгина Г. А. Бронхиальная астма у детей, ассоциированная с Chl. pneumoniae // В сб. «Проблемы инфекционных болезней (клиника, диагностика, лечение)». -М., 2000. - Т. 2. - С. 130-134.
3. Закиров И. И., Пикуза О. И., Королева А. И., Адо Е. И. Количественная характеристика нейтрофильных гранулоцитов у детей
с хламидийной инфекцией // Сб. трудов Х Межд. конгресса «Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии». - Казань, 2009. - С. 178-179.
4. Захарчева Л. П. Зависимость бронхиальной астмы от очагов хронической инфекции носоглотки // Сб. трудов Х Межд. конгресса «Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии». - Казань, 2009. - С. 80.
5. Нестерова И. В., Колесникова Н. В., Чудилова Г. А. Комплексное трехуровневое исследование системы нейтрофильных гранулоцитов с возможной диагностикой иммунодефицитных состояний при различной патологии: Методич. рекомендации, МЗРФ, № 96/11. - М., 1996. - 25 с.
6. Кирдей Е. Г., Кирдей Л. Е, Скворцова Р. Г. и др. Особенности иммунного статуса и иммунокоррекции у детей, больных бронхиальной астмой // Астма. - 2003. - Т. 4. № 1. - С. 19-25.
7. Мизерницкий Ю. Л. Бронхообструктивный синдром при ОРВИ у детей раннего возраста: дифференциальный диагноз в педиатрической практике // Пульмонология детского возраста: проблемы и решения / Под ред. Ю. Л. Мизерницкого, А. Д. Царего-родцева. - М., 2002. - Вып. 2. - С. 102-109.
8. Симованьян Э. Н, Харабаджахян Э. А, Денисенко В. Б. Эффективность использования рекомбинантного интерферона а2р (виферона) при остром обструктивном бронхите у детей // Педиатрия. - 2008. - Т. 87. № 1. - С. 106-114.
9. Таточенко В. К. Терапия ОРЗ у детей // Рус. мед. журнал. -2004. - № 21. - С. 1200-1207.
10. Тюрин Н. А, Кузьменко Л. Г., Петрук Н. И. и др. Роль внутриклеточных микроорганизмов в этиопатогенезе бронхиальной астмы у детей раннего возраста // Мат. научн.-практ. конф. педиатров России «Болезни органов дыхания у детей». - М., 1999. - С. 57.
11. Файзуллина Р. М., Гусева Е. Д., Макаева Р. З., Ханова А. К. Инфекционные триггеры обострения болезни у детей с аллергическими заболеваниями // Сб. трудов Х Межд. конгресса «Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии». - Казань, 2009. - С. 66.
12. Blasi F. Chlamydia pneumoniae in respiratory infections. Pros. 4th meet. eur. soc. chlam. res. 20-23 Aug 2000. - Helsinki, Finland. - P. 32-36.
13. Martinez F. D. Development of wheezing disorders and asthma in preschool children // Pediatrics. - 2002. - V. 109. - P. 362-367.
14. Valacer D. J. Childhood asthma: causes, epidemiological factors and complications // Drugs-2000. - V. 59. - P. 43-45.
Поступила 10.12.2010
В. П. КОНЕВ1, С. Н. МОСКОВСКИЙ1, В. В. ГОЛОШУБИНА2
КАЧЕСТВЕННЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ КОСТНОЙ ТКАНИ ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ
Кафедра судебной медицины с курсом правоведения ГОУ ВПО «Омская государственная медицинская академия Росздрава»,
Россия, 644043, г. Омск, ул. Партизанская, 20, тел. (38I2) 236207;
2кафедра внутренних болезней и поликлинической терапии ГОУ ВПО «Омская государственная медицинская академия»
Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации,
Россия, 644043, г. Омск, ул. Ленина, I2. E-mail: vpkonev@mail.ru
На основании проведенных исследований установлены качественные характеристики костной ткани у лиц с хронической алкогольной интоксикацией, которые дадут возможность динамической оценки костной ткани, а также позволят использовать медицинские документы для идентификационных исследований.
Ключевые слова: денситометрия, хроническая алкогольная интоксикация.
Кубанский научный медицинский вестник № 2 (125) 2011 УДК 611.°18.4+616:613.81
