CC BY
41
Г.н. окунева, Е.Э. Кливер, А.М. Караськов, Ю.н. Горбатых,
А.М. Волков, Ю.А. Власов, В.А. Трунова*, В.В. Зверева*
Химические элементы и структурно-молекулярные особенности кардиомиоцитов у пациентов раннего возраста с транспозицией магистральных артерий
ФГБУ «ННИИПК
им. акад. Е.Н. Мешалкина»
Минздравсоцразвития
России, 630055, Новосибирск,
ул. Речкуновская, 15,
cpsc@nricp.ru
* Институт неорганической химии им. А.В. Николаева СО РАН, 630090, Новосибирск, просп. Лаврентьева, 3
УДК 616.13.12-007-053.1:612 ВАК 14.01.26
Поступила в редакцию 17 мая 2011 г.
© Г.Н. Окунева,
Е.Э. Кливер,
А.М. Караськов,
Ю.Н. Горбатых,
A.М. Волков,
Ю.А. Власов,
B.А. Трунова,
В.В. Зверева, 2012
Изучено содержание химических элементов (ХЭ) в миокарде пациентов с транспозицией магистральных артерий (ТМА), полученные результаты сопоставлены с морфологическими и анатомическими нарушениями. Исследованы образцы миокарда детей с ТМА в возрасте от новорожденности до 6 мес. Методом рентгенофлуоресцентного анализа с использованием син-хронного излучения определена концентрация 14 ХЭ: Б, С1, К, Са, Сг, Мп, Fe, N Си, Zn, Бе, Вг, Rb и Бг - и проведены морфологические измерения миокарда. Установлено, что гипертрофия миокарда у детей раннего возраста с ТМА нарушает интенсивность метаболизма, что проявляется сниженным содержанием Zn, Сг, N С1, Бе, особенно в левом желудочке. Выявлены уменьшение диаметра мышечных волокон, средней площади ядер, переход синтеза сердечного миозина на скелетный, снижение ядерно-цитоплазматических соотношений. Ключевые слова: химические элементы; молекулярная структура кардиомиоцитов; транспозиция магистральных артерий.
Роль ХЭ в поддержании жизнедеятельности клеток очень важна. Известно, что в составе живого вещества найдено более 70 ХЭ. Каждый из них выполняет одну или несколько физиологических функций. Поэтому при нарушении обмена ХЭ на молекулярном уровне могут происходить важные аномальные эффекты: ингибирование ферментов, необратимые конформационные изменения макромолекул и, как следствие, изменение скорости метаболизма и синтеза белковых структур, включая возникновение аномалий и мутаций [1, 2, 10]. Поэтому нормальное функционирование миокарда осуществляется при постоянстве микро-элементного состава, т. е. должен поддерживаться микроэлементарный гомеостаз.
Можно предположить, что многофакторная этиология возникновения многих врожденных пороков сердца, в том числе и ТМА, может включать дисбаланс ХЭ в миокарде у беременных женщин. ТМА относится к сложным врожденным порокам сердца с такими анатомическими и гемодинамичес-кими нарушениями, которые не совместимы с жизнью, и поэтому смертность неопери-рованных новорожденных составляет от 30 до 50% на первом году жизни [5, 9]. Для про-
гнозирования причин возникновения этого порока сердца и соответствующей коррекции необходимо изучение молекулярных основ метаболических процессов в миокарде пациентов с ТМА с помощью исследования содержания ХЭ и соотношение их с нарушениями структуры миокарда. Цель исследования - определение содержания ХЭ в разных отделах миокарда у пациентов с ТМА и сопоставление полученных результатов с возрастом и степенью морфологических и анатомо-гемодинамических нарушений. В соответствии с целью поставлены две задачи: изучение содержания ХЭ и морфологической структуры миокарда у детей раннего возраста; выявление закономерности распределения ХЭ в миокарде детей с ТМА в соответствии с таблицей Д.И. Менделеева.
материал и методы
Изучено 42 образца миокарда у детей с ТМА в возрасте от 1,0 до 4,5 мес. (средний возраст 3,0±0,7 мес., массы сердца 54,0±5,0 г, тела 4,2±0,3 кг), умерших в ближайшие послеоперационные сроки после радикал ь-ной коррекции порока. Для оценки содержания ХЭ и морфологической структуры миокарда производили забор образцов
сердечной мышцы из желудочков и предсердий не позднее 24 ч с момента смерти. Все образцы распределили по возрасту пациентов на три группы: I - новорожденные (средний возраст 22,0±6,7 дня; n = 19); II - 1-6 мес. (2,1±0,9 мес.; n = 18); III - старше 6 мес. (8,1±1,8 мес.; n = 5).
Методом РФА СИ исследовали концентрацию 14 ХЭ: S, Cl, K, Ca, Cr, Mn, Fe, Ni, Cu, Zn, Se, Br, Rb и Sr - в ИЯФ СО РАН и проводили морфометрическое измерение кардиомиоцитов в лаборатории патоморфологии и электронной микроскопии ННИИПК им. акад. Е.Н. Мешалкина. Также выполняли флуорометрическое исследование миокарда с использованием флуоресцентных зондов - эти-диум бромида и хлортетрациклина и окраску образцов миокарда антителами к скелетному миозину Monoclonal Anti-Skeletal Myosin (FAST) Clone MY-32, secondary antibody FITS-conjugated. В качестве второй метки применяли вторичные антитела, конъюгированные c FITS. Статистическую обработку результатов проводили с помощью программы Microsoft Excel 2000. Достоверность различий средних величин и корреляционных взаимоотношений проводили с помощью t-критерия Стью-дента. Достоверными считали различия при р<0,005.
результаты
Проведенный анализ содержания ХЭ в миокарде умерших детей раннего возраста с ТМА позволил выявить следующие закономерности (табл. 1). В 65% содержание ХЭ по сравнению с интактным миокардом снижено: умеренно до 78% концентрация К, до 60% - Cl, Cr, Sr и Zn, до 50% - Br, Ni и Rb. Выявлена также самая низкая концентрация Se - 25% от должного содержания. Три ХЭ (S, Ca и Fe) находили в концентрации, соответствующей должной. Повышена концентрация только для Cu (160%) и Mn (170200%). По данным распределения ХЭ по отделам сердца, наиболее низкие концентрации ХЭ установлены в миокарде левого желудочка (ЛЖ) и правого предсердия (ПП).
Таким образом, необратимые гемодинамические нарушения функции миокарда и развитие сердечной недостаточности сопряжены, очевидно, с низким содержанием ХЭ:
Cl, Cr, Sr, Zn, Br, Rb, Ni и особенно Se до 25% и ниже предела обнаружения. Повышенная концентрация Mn и ^ преимущественно в правых отделах сердца, видимо, обусловлена увеличенной функциональной нагрузкой и играет компенсаторную роль. Содержание S, Fe и Ca соответствует должным величинам и не принимает участия в альтерации миокарда. На основании полученных результатов можно заключить, что для поддержания нормальной функциональной активности миокарда у детей раннего возраста с ТМА ХЭ должны содержаться в оптимальных концентрациях - Cl, Zn, Sr, Cr, Ni, Rb, Br и особенно Se, защищающий кардиомиоциты от перекисного окисления липидов. Установлено, что гипертрофические изменения миокарда больных ТМА прогрессируют с возрастом, превышая должную массу сердца в 2,5-3,0 раза. Большую
роль в ремоделировании сердца играют гиперпластичес-кие процессы, связанные с интенсивной полиплоидиза-цией генетического материала и увеличением дезоксирибонуклеиновой кислоты. Понижение уровня суммарных ионов кальция в кардиомиоцитах, по данным флуоромет-рического исследования, взаимообусловлено появлением зон кардиосклероза при нарастании гипертрофии миокарда. Адаптивно к этим процессам и к имеющей место хронической гипоксии происходит переход синтеза с сердечного миозина на скелетный, что, в свою очередь, усиливает клинические проявления сердечной недостаточности вследствие снижения скорости сокращения гипертрофированных кардиомиоцитов. Морфометрически отмечено уменьшение диаметра мышечного волокна, средней площади ядра и снижение ядерно-цитоплазматических соотношений. При этом увеличивались объемная и относительная площади поверхности мышечной ткани (табл. 2).
Сопоставление распределения ХЭ по степени снижения концентраций в миокарде детей с ТМА с группой сравнения выявило следующие закономерности (табл. 3). Установлено сниженное содержание в гипертрофированном миокарде ЛЖ, левого предсердия (ЛП), правого желудочка (ПЖ), ПП макроэлементов: К, С1 и 7п. Содержание Б, Ре и Са сохранялось на должном уровне. Достоверно снижена концентрация ультрамикроэлементов: Сг, №,
N1 и Бе. Содержание остальных ХЭ существенно не отличалось от должных величин. На основании полученных результатов можно заключить, что функция гипертрофированного миокарда у детей с ТМА нарушена из-за сниженной концентрации большинства макроэлементов и достоверного снижения ультрамикроэлементов. Эти изменения больше выражены в левых отделах сердца.
Результаты анализа подтверждаются данными морфологического исследования. Гипертрофические изменения сердца быстро прогрессируют с возрастом, превышая должные возрастные показатели в 2 раза у больных до 1 мес. и в 3,5-4,5 раза у больных 6-12 мес. При этом линейные размеры ЛЖ и ПЖ у пациентов с интактной межжелудочковой перегородкой (ИМЖП) в I группе фактически идентичны, а во II группе с дефектом межжелудочковой перегородки (ДМЖП) толщина ПЖ больше, чем ЛЖ, на 133%. Для I группы с ИМЖП выявлена достоверная связь между толщиной миокарда и содержанием в нем Б, К, Ре и Бг и отрицательная корреляционная связь с Си (табл. 4). Среднее количество ядер в ЛЖ в обеих группах было ниже, чем в контроле, а поверхностная плотность кардиомиоцитов плавно возрастала во всех группах. В результате ядерно-цитоплазматический индекс в левом желудочке с возрастом постепенно снижался во всех группах. Иммуногистохимические исследования образцов миокарда пациентов с транспозицией магистральных артерий обнаружили появление в кардиомиоцитах скелетного миозина. Это свидетельствует о том, что при развитии гипертрофии кардиомиоцитов происходит переключение синтеза сердечного миозина на ске-
Таблица 1
Распределение ХЭ в миокарде детей раннего возраста с интактным миокардом и детей с ТМА * p<0,05 достоверные различия с интактным миокардом
Содержание ХЭ, мкг/г
Отделы сердца
Сг Мп Fe № Си Zn Se
Интактный миокард
ЛЖ (п = 5) 1,0±0,22 2,4±0,2 344±30 0,4±0,05 8,9±0,68 360±39 0,7±0,1
ПЖ (п = 5) 0,9±0,12 2,4±0,2 422±83 0,6±0,09 10,1 ±0,87 392±43 0,8±0,1
Миокард больных ТМА
ЛЖ (п = 15) 0,4±0,15* 2,6±0,8 321±42 0,2±0,03* 14,6±2,99 240±22* 0,2±0,05*
ПЖ (п = 20) 0,6±0,23 5,1 ±2,0 342±33 0,2±0,05* 16,1 ±2,58 307±42 0,1±0,04*
Таблица 2
Морфометрические параметры миокарда детей раннего возраста при транспозиции магистральных артерий
Таблица 3
Распределение химических элементов в порядке снижения концентраций по отделам сердца у детей с транспозицией магистральных артерий
Отдел Дети ранне- Больные ТМА
Морфометрический параметр сердца го возраста раннего возраста
Диаметр мышечного волокна, мкм ЛЖ ПЖ 14,6±0,79 13,1±1,13 12,0± 1,47 11,4±1,35
Относительная площадь поверности ЛЖ 265±22,8 287±27,3
мышечной ткани, мкм2 ПЖ 274±27,3 286±37,6
Объемная плотность мышечной ткани ЛЖ ПЖ 0,78±0,067 0,81±0,081 0,85±0,08 0,84±0,11
Кол-во ядер в поле зрения ЛЖ ПЖ 41±2,5 53±1,5 45±7,1 34±7,7
Средняя площадь ядра, мкм2 ЛЖ ПЖ 2358±211,8 2534±289,1 2073±107 2063±355,8
Ядерно-цитоплазматическое соотношение ЛЖ ПЖ 0,37 0,49 0,33 0,26
ХЭ ТМАЛЖ ХЭ ТМА ПЖ ХЭ ТМА ЛП ХЭ ТМАПП
S 3268±424 S 3547±331 S 2398±330 S 2505±260
Са 1256±89 Са 1224±99 Са 1148±105 Са 1109±86
К 508± 60 К 560± 55 К 444± 58 К 421± 38
СІ 405± 45 СІ 435± 56 СІ 348± 43 Fe 375± 38
Fe 321 ± 42 Fe 342± 33 Fe 338± 53 СІ 290± 42
Zn 240± 22 Zn 307± 42 Zn 183± 21 Zn 192± 27
Си 14,6± 2,99 Си 16± 2,58 Си 13± 2,18 Си 14,3± 2,7
Вг 6± 0,7 Вг 8± 0,8 Вг 6± 0,7 Вг 6± 0,6
Sr 3,7± 0,7 Мп 5,1± 5 Sr 3,2± 0,3 Мп 4,2± 1,4
Мп 2,6± 0,8 Sr 3,8± 0,5 Мп 3,1± 1,1 Sr 3,5± 0,4
Rb 0,8± 0,2 Rb 0,6± 0,08 Сг 0,6± 0,25 Сг 0,7± 0,18
Сг 0,4± 0,15 Сг 0,6± 0,23 Rb 0,5± 0,1 Rb 0,5± 0,07
N 0,2± 0,03 N 0,2± 0,05 Se 0,2± 0,06 Se 0,2± 0,05
Se 0,2± 0,05 Se 0,1± 0,04 Ni 0,2± 0,04 Ni 0,2± 0,04
летный. При одновременных дефекте межжелудочковой перегородки и дефекте межпредсердной перегородки (ДМПП) гипертрофические процессы более выражены по сравнению с транспозицией магистральных артерий при ИМЖП, что соответствовало и повышенному содержанию химических элементов. Большую роль в ремоделировании сердца у пациентов старше 6 мес. играют гиперпластические процессы, связанные с интенсив-
ной полиплоидизацией генетического материала и увеличением количества дезоксирибонуклеиновой кислоты. Из вышеизложенного следует, что оптимальными возрастными границами для кардиохирургической коррекции больных с транспозицией магистральных артерий являются для пациентов с ИМЖП неонатальный период, а для пациентов с ДМЖП и дефектом межпредсердной перегородки - период новорожденности.
Таблица 4
Корреляция между толщиной миокарда и содержанием в нем некоторых химических элементов *p<0,05; **p<0,01
Желудочек Анатомические группы Б К Fe Си Бг Zn
Правый I 0,15 0,09 0,58* -0,26 -0,19 0,12
II 0,31 0,15 -0,29 -0,60* 0,13 0,08
Левый I 0,92** 0,75** 0,82** -0,92** 0,67** -0,18
II 0,46 0,47 0,50 -0,33 0,30 -0,25
ОБСУЖДЕНИЕ
По нашим данным, нарушение функции миокарда у детей раннего возраста с ТМА, приведшей к смерти, может быть связано со значительным снижением метаболизма, маркеры которого - уменьшение содержания до 50% Вг, N и Rb, до 60% Сг, Sr, Zn и С1 и особенно Se - до 25%. Какую роль играют эти ХЭ в метаболизме миокарда у детей с ТМА? Среди них некоторые преимущественно внутриядерные - Сг, Мг и N а часть находится преимущественно внеядерно и депонируется в микросомах, митохондриях, лизосомах, комплексе Гольджи: Си, Zn, Se, Вг,
Rb, Sr [2]. Важную роль играет Zn, который обеспечивает активность более 300 ферментов и является компонентом более 200 металлопротеинов [4, 7, 11]. Дефицит цинка провоцирует развитие врожденных пороков сердца [3]. Вг играет важную роль в развитии плода, и при его дефиците увеличивается число выкидышей. N может быть кофактором многих ферментов: уреазы, гид-рогеназы, ряда дегидрогеназ и метил-коэнзим М-редук-тазы, и при его дефиците нарушаются метаболические процессы в клетках. Сг - жизненно необходимый ХЭ.
Обнаружено, что активность Ь-ДНК-полимеразы напрямую зависит от содержания хрома [12]. Дефицит хрома отмечается у недоношенных детей при недостаточном его поступлении с пищей у беременных женщин. С1 и Rb являются электролитами. Хлорные каналы содержатся в митохондриальных мембранах, мышечной ткани. Ионы хлора регулируют объем жидкости, стабилизируют рН клеток.
Rb является аналогом К и активно участвует в стабилизации окислительно-восстановительного потенциала.
Наибольшее отрицательное влияние на метаболизм кар-диомиоцитов оказывает значительный дефицит Se, который защищает кардиомиоциты от повреждающего действия свободных радикалов. У новорожденных, матери которых испытывали недостаток Se во время беременности, отмечалось снижение мышечной массы и отставание в развитии [6]. При дефиците Se наблюдается гибель клеток по механизму как апоптоза, так и некроза, что может привести к внезапной смерти новорожденных [3, 4]. На основании этих данных можно предположить, что очень низкое содержание Se в миокарде может быть причиной структурных нарушений закладки и развития отделов сердца, а впоследствии и гибели детей с ТМА в раннем возрасте. Поэтому новорожденные дети
с ТМА должны получать с молоком матери достаточное количество ХЭ, особенно Se. Два ХЭ, Мп и Си, содержатся в миокарде детей с ТМА в повышенном количестве. Содержание Мп повышено в правых отделах сердца в ПП и ПЖ в 2 раза. Марганец присутствует главным образом в митохондриях и обеспечивает энергетику. Он является компонентом множества ферментов: фосфоэнол пируваткарбокси ки наза, гликозилтрасфе-раза, ксилоксиерасфераза и др. Митохондриальная Мп-зависимая супероксиддисмутаза повышает свою активность в кардиомиоцитах и таким образом препятствует свободно-радикальному окислению, обеспечивает стабильность структуры клеточных мембран и компенсирует таким образом дефицит селена [2, 3].
В миокарде детей с ТМА в 1,5 раза повышено содержание Си. Медь входит в состав многих важнейших ферментов, таких как цитохромоксидаза, тирозиназа, аскорбиназа и др. Медь присутствует в системе антиок-сидантной защиты, являясь кофактором супероксид-дисмутазы, Си^п-зависимой СОД, участвующей в нейтрализации свободных радикалов кислорода и таким образом частично компенсирующей дефицит Se [2-4].
В соответствии со второй задачей все ХЭ в зависимости от степени снижения концентраций в миокарде у детей с ТМА были распределены по трем группам. Первая (макроэлементы в концентрации от 10 000 до 100 мкг/г) - S, Са, К, С1, Fe, Zn. Вторая (микроэлементы в концентрации от 100 до 1 мкг/г) - Си, Вг, Sr, Мп для ЛЖ и ЛП и Си, Вг, Мп, Sr для ПЖ ПП. Третья (ультрамикроэлементы в концентрации от 1,0 до 0,1 мкг/г) - Rb, Сг, N Se для ЛЖ и ПЖ и Сг, Rb, Se, N для ЛП и ПП. Распределение ХЭ проведено в строгом порядке от большей концентрации к меньшей, что соответствовало, как правило, снижению концентрации ХЭ в 2,0-2,5 раза. Было выявлено нарушение этой закономерности при переходе от макроэлементов к микроэлементам, а именно от Zn к Си концентрация снизилась в 30-40 раз.
Чем можно объяснить это нарушение? Zn и Си входят в состав Zn/Cu-CОД. Концентрация Zn в миокарде 250300 мкг/г, а Си только 8-10 мкг/г, т. е. в 25-30 раз меньшая. Очевидно, что использование Zn в миокарде детей с ТМА значительно большее, чем Си, хотя роль Си также необходима для функции миокарда. Сопоставление распределения ХЭ в порядке снижения концен-
траций с порядковым номером в таблице Д.И. Менделеева выявило следующую закономерность. Основные макроэлементы, которые мы исследовали, содержались в больших концентрациях, Р, Б, С1, К, Са находились в таблице Д.И. Менделеева под номерами от 15 до 20.
Все микро- и ультрамикроэлементы, содержащиеся в малых концентрациях, находились в таблице под номерами от 24 до 38, т. е. имели большую атомную массу.
Таким образом, можно предположить, что система распределения ХЭ по степени снижения концентраций ХЭ в миокарде в известной мере соответствует степени повышения порядкового номера в таблице Д.И. Менделеева. На основании вышеизложенного можно заключить, что чем больше порядковый номер ХЭ и чем больше его атомный вес, тем меньшее количества этого ХЭ содержится в миокарде. У детей с ТМА наиболее низкие концентрации микроэлементов наблюдались у Бе № 34,
Rb № 37, Бг № 39, а наиболее высокие концентрации макроэлементов у Б № 16, С1 № 17, К № 19, Са № 20.
Гиперпластические и гипертрофические адаптационные процессы в миокарде детей раннего возраста с ТМА приводят к увеличению массы миокарда в 2,5-3,0 раза и сопровождаются нарушением метаболических процессов, что выявляется снижением содержания физиологически значимых ХЭ: Zn, Сг, N С1, Бе, особенно в левом желудочке. Повышенное содержание Си и Мп выполняет, очевидно, адаптационную роль, препятствуя закрытию дефектов в перегородке сердца, через которые смешивается артериальная и венозная кровь, и защищает кардиомиоциты от перекисного окисления липидов.
Клинико-морфологический анализ показал, что оптимальным возрастом для выполнения радикальной кардиохирургической коррекции для больных ТМА с интактной межжелудочковой перегородкой является неонатальный период, а для пациентов с ТМА и с дефектом межжелудочковой перегородки - период новорожденности. Адаптивным процессом в связи с меньшими энергозатратами сокращения является переход синтеза с сердечного миозина на скелетный. Так как в миокарде детей раннего возраста с ТМА обнаружено низкое содержание многих жизненно важных ХЭ, следует обратить особое внимание на полноценное содержание в рационе беременных и кормящих женщин ХЭ, таких как Zn, Cr, Cl, Ni, Se, K, Rb и особенно Se.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Адкин Д.В. и др. // Педиатрия. 2002. № 3. С. 88-91.
2. Кудрин А.В., Скальный А.А., Жаворонков А.А. и др. Иммунофармакология микроэлементов. М., 2000.
3. Панченко Л.Ф., Маев И.В., Гуревич К.Г. Клиническая биохимия микроэлементов. М., 2004.
4. Скальный А.В. Микроэлементозы человека (диагностика и лечение). М., 1999.
5. Хоффман Дж. Детская кардиология. М., 2006.
6. Azoicai D., Ivan A., Bredatean M. et al. // Rev. Med. Chir. Soc.
Med. Nat. Lasi. 1997. V. 101, № 2. P. 109-115.
7. Beerli R.R. et al. // J. Biol. Chem. 2000. V. 275, № 42. P. 32617-32627.
8. Fozzard H.A., Haber E., Jenings R.B. et al. The Heart and Cardiovascular System. New York, 1986.
9. Re R.M. // Am. J. Cardiol. 1987. № 60. P. 100-104.
10. Ruff H.A. // J. Dev Behev Pediatr. 1999. V. 20, № 1. P. 42-79.
11. Shankar A.H. // Am. J. Clin. Nutr. 1998. V. 68 (Suppl.). P. 447-463.
12. Singh J., Snow E.T. // Biochemistry. 1998. V. 37, № 26. P. 9371-9378.
Галина Николаевна Окунева - доктор медицинских наук, профессор, Заслуженный деятель науки РФ, главный научный сотрудник лаборатории клинической физиологии ФГБУ «ННИИПК им. акад. Е.Н. Мешалкина» Минздравсоцразвития России (Новосибирск).
Евгений Эдуардович Кливер - доктор медицинских наук, ведущий научный сотрудник лаборатории патоморфологии и электронной микроскопии ФГБУ «ННИИПК им. акад. Е.Н. Мешалкина» Минздравсоцразвития России (Новосибирск).
Александр Михайлович Караськов - доктор медицинских наук, профессор, академик РАМН, Заслуженный деятель науки РФ, директор ФГБУ «ННИИПК им. акад. Е.Н. Мешал-кина» Минздравсоцразвития России (Новосибирск).
Юрий Николаевич Горбатых - доктор медицинских наук, профессор, руководитель центра детской кардиохирургии и хирургии новорожденных ФГБУ «ННИИПК им. акад.
Е.Н. Мешалкина» Минздравсоцразвития России (Новосибирск).
Александр Михайлович Волков - доктор медицинских наук, заведующий лабораторией патоморфологии и электронной микроскопии ФГБУ «ННИИПК им. акад. Е.Н. Мешалкина» Минздравсоцразвития России (Новосибирск).
Юрий Александрович Власов - доктор медицинских наук, профессор, ведущий научный сотрудник лаборатории функциональной и ультразвуковой диагностики ФГБУ «ННИИПК им. акад. Е.Н. Мешалкина» Минздравсоцразвития России (Новосибирск).
Валентина Александровна Трунова - кандидат химических наук, старший научный сотрудник Научно-исследовательского института неорганической химии СО РАН им. А.В. Николаева (Новосибирск).
Валентина Викторовна Зверева- кандидат химических наук, научный сотрудник Научно-исследовательского института неорганической химии им. А.В. Николаева СО РАН (Новосибирск).
