CC BY
27
2016, том 18 [5]
—-ЕЧс^З-—
УДК 597.841.-144.4/.146./:597.841.-13
ХАРАКТЕРИСТИКА НЕКОТОРЫХ ФОРМИРУЮЩИХСЯ ОРГАНОВ ЛИЧИНОК ЖАБЫ ОБЫКНОВЕННОЙ (BUFO VIRIDIS LAURENTI, 1768) КАК ОРГАНОВ КРОВЕТВОРЕНИЯ
Д.Р. Светашева, М.П. Грушко
ФГБОУ ВПО «Астраханский государственный технический университет» Федеральное агентство по рыболовству г. Астрахань, Российская Федерация, 414056
Аннотация. Целью данной работы явилось изучение морфо-физиологических особенностей формирующихся печени и селезенки, как органов кроветворения личинок Жабы обыкновенной (Bufo Viridis Lau-renti, 1768). Для получения полной характеристики органа кроветворения необходимо решить ряд задач, в число которых входит детальное изучение качественного и количественного состава кроветворных элементов печени и селезенки на всех этапах личиночного развития, кроме того необходимо изучить сроки и темпы развития органов, его морфологических особенностей, а так же рассмотреть возможные патологические процессы кроветворения. Большой интерес в наши дни представляет изучение постэмбрионального развития организмов в связи с изменившейся экологической обстановкой, а в первую очередь изучение крови и кроветворных органов, которые наиболее чувствительны к изменениям в окружающей природной среде.
Ключевые слова: селезенка, печень, гепатоциты, кроветворение, эритроциты, гранулоциты, агранулоци-ты, пойкилоцитоз, гемоседерин, пигмент, митоз.
Введение. Развитие организма представляет собой процесс систематического, последовательного, упорядоченного накопления структурных и функциональных качеств прогрессивного характера. Процесс развития всегда сопровождается возникновением новых, постоянных и необратимых структурных изменений, которые занимают определенный период индивидуального развития, характер-
ный только для представителя данного вида [1]. Представление о гистоструктурев динамике дает ключ к пониманию не только особенностей физиологии органов организма в разные возрастные периоды, но и многих процессов патологии [4; 5]. Гибель организма, аномалии связаны с отклонениями от нормального хода развития [3]. В последние годы, в связи с изменившейся экологической
—--—
~ 12 ~
Издание зарегистрировано в Федеральной службе по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор). Свидетельство о регистрации СМИ ПИ ЭЛ № ФС77-50518 Журнал представлен в НАУЧНОЙ ЭЛЕКТРОННОЙ БИБЛИОТЕКЕ (НЭБ) — головном исполнителе проекта по созданию Российского индекса научного цитирования (РИНЦ)
—--—
обстановкой, большой интерес представляет изучение постэмбрионального развития организмов. В частности наиболее уязвимых органов, таких как печень и селезенка.
Методика исследования. Материалами исследований послужили 120 серий срезов личинок зеленой жабы (Bufo viridis Laurenti, 1768) на разных стадиях развития, приготовленных и окрашенных по общепринятым методикам. Применялась фиксация — в растворе Буэна, затем велась проводка через спирты возрастающей крепости, заливка в парафинные блоки, окраска гематоксилин-эозином. Изучение развития основных систем на ранних стадиях онтогенеза проводили на микроскопе «МИКРОМЕД-2» с применением иммерсии. Идентификация форменных клеток крови осуществлялась по атласам В.Н. Никитина (1949), Н.Т. Ивановой (1984), изменения форменных элементов — согласно рекомендациям Л.Д. Житеневой (1989).
Экспериментальная часть. В первые дни развития печень представляет собой обширное образование, клетки которого напоминают форму многоугольника, как у зрелых гепатоцитов. Была слабо выражена балочная структура, но в основном клетки лежали рыхло. В межклеточном пространстве и в синусоидах были отмечены элементы крови эритро-поэтического ряда (31,7%), гранулоцитопо-этического (65,3%) и агранулоцитопоэтиче-ского (3%) рядов. Отмечены клетки крови на разных стадиях развития: миелобласты — 1,8%, промиелоциты — 3%, метамиелоци-ты — 1,3%, палочкоядерные нейтрофилы — 2,5%, сегментоядерные нейтрофилы — 22%, эритробласты — 3%, полихроматофильные нормобласты — 5%, оксифильные нормобла-сты — 6,3%, эритроциты — 20%, моноблас-ты — 0,6%, лимфобласты — 1%, промоно-циты — 1,8%, пролимфоциты — 0,6%, лейкоциты — 1,3%.
Среди зрелых эритроцитов у 20% личинок были выявлены патологические клетки (пойкилоциты 17%). Подобное соотношение форменных элементов крови, говорит о том, что с первых дней, после вылупления личинки, печень активно функционирует как кроветворный орган.
Наличие формирующихся элементов крови на столь раннем сроке развития личинок объясняется активным интраваскуляр-ным и экстраваскулярным кроветворением в печени.
На 3-и и 4-е сутки развития личинки соотношение кровяных элементов в печени не изменилось по сравнению с первыми двумя днями после ее вылупления.
На 5—7-е сутки тенденция развития элементов крови в печени личинки Жабы обыкновенной остается неизменной. Преобладающее большинство клеток относится к эритропоэтическому ряду — 28% и к гра-нулоцитопоэтическому ряду — 24%. При этом большинство эритропотических клеток было представлено оксифильными нормобла-стами — 15%, зрелые эритроциты составляли 13%. Основную долю гранулоцитопоэ-тических клеток составляли сегментоядерные нейтрофилы — 13%. Обнаружено большое количество мегакариоцитов — 12%, а так же клеток с патологиями — пойкилоцитоз — 17%. Несколько изменилось соотношение элементов белой крови в печени: обнаружено незначительное количество лимфобластов — 0,5%, численность пролимфоцитов достигла 1%. Содержание лейкоцитов не увеличивалось — 1,3%. Гепатоциты печени личинки к этому периоду располагались более плотно, чем в первые дни. Наряду с этим было отмечено накопление жировых капель в цитоплазме отдельных гепатоцитов (жировая дистрофия).
На 8—12-й день балочная структура органа четко выражена. Печень занимает боль-
—--—
~ 13 ~
Издание зарегистрировано в Федеральной службе по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор). Свидетельство о регистрации СМИ ПИ ЭЛ № ФС77-50518 Журнал представлен в НАУЧНОЙ ЭЛЕКТРОННОЙ БИБЛИОТЕКЕ (НЭБ) — головном исполнителе проекта по созданию Российского индекса научного цитирования (РИНЦ)
—--—
ше половины всей брюшной полости. Соотношение формирующихся элементов крови немного меняется, увеличивается процентное соотношение клеток белой крови (лимфоци-топоэтический ряд 8,5%). Клетки эритропоэти-ческого ряда группировались в эритробласти-ческие островки. Которые состояли из клеток на разных стадиях развития. Среднее количество клеток в островках составляло 6 ± 2 кле-
ток. На срезах были обнаружены гранулы ге-мосидерина, который образуется при распаде крови [3].
К 20 суткам личиночного развития печень головастика жабы приобретает хорошо выраженную сосудистую структуру (рис. 1). В этот период сосуды печени были сильно расширенны и переполнены форменными элементами крови.
Рис. 1. Печень Жабы обыкновенной (Bufo Viridis Laurenti, 1768) на 20-е сутки личиночного развития (ОБ 10 ОК4): 1 — сосуды переполненные элементами крови
Элементный состав кроветворных элементов двадцатидневной личинки жабы обыкновенной отражается в неравном процентном соотношении: гранулоциты — 19%, агранулоциты — 5% и 3,5% клеток эритро-поэтического ряда. В печени были отмечены участки, инфильтрированные лимфоцитами, что вероятно является следствием воспалительного процесса.
Исследования показали, что у личинок жабы селезенка обнаруживается на ранних стадиях развития. В первые сутки после вы-лупления, селезенка личинок расположена
в каудальном направлении в петлях кишечника под зачатком мезонефроса. Формирующийся орган в первые сутки личиночного развития представлял собой небольшое овальное образование, состоящее из плотно расположенных мезенхимных клеток. На этой стадии среди мезенхимных клеток были отмечены единичные формирующиеся клетки красной крови — эритробласты. На вторые сутки развития личинки появляются единичные клетки лимфоцитопоэтического ряда: лимфобласты и пролимфоциты. В селезенке были обнаружены так же единичные клетки —
~ 14 ~
Издание зарегистрировано в Федеральной службе по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор). Свидетельство о регистрации СМИ ПИ ЭЛ № ФС77-50518 Журнал представлен в НАУЧНОЙ ЭЛЕКТРОННОЙ БИБЛИОТЕКЕ (НЭБ) — головном исполнителе проекта по созданию Российского индекса научного цитирования (РИНЦ)
—---
гемоцитобласты, самые ранние предшественники клеток крови, которые дают начало всем остальным клеткам крови На 5—6-е сутки в петлях молодой ретикулярной ткани выявляются очаги размножающихся клеток эритропоэтического — 51%, лимфоцитопо-этического — 17%, моноцито поэтического и тромбоцитопоэтического — 2% рядов. Все клетки располагались хаотично. Происходит закладка просвета первичных сосудов.
На 9-е сутки в селезенке личинок была заметна разветвленная сеть щелей, что можно считать «прообразом» формирующейся сосудистой системы органа [3]. Снаружи орган был покрыт тонкой соединительнотканной капсулой. В поверхностном слое органа редко определялись идущие от капсулы вглубь закладки тяжи вытянутых клеток — развивающиеся трабекулы. Мезенхимный ретикулум, расположенный между сосудами, уже в большей степени к этому возрасту был замещен дифференцирующимися гемопоэти-ческими клетками, ретикулярными клетками, макрофагами. На 9-е сутки развития соотношение кровяных элементов указывает на численное преобладание полихроматофильных
нормобластов — 18,5%, базофильных и окси-фильных нормобластов по 18%, эритробла-сты — 6%,. Пронормобласты составляли 14% всех элементов крови; миелобласты — 8,5%, лимфобласты — 8%, пролимфоциты — 7%, лимфоциты — 8%.
На 12-е сутки личиночного развития селезенка приобретает слабовыраженную диф-ференцировку на белую и красную пульпу, при этом участки белой и красной пульпы не имели четкого места локализации. Соотношение элементов крови постепенно изменяется: лимфобласты — 15%, пролимфоциты — 11%, лимфоциты — 7%, оксифильные нормо-бласты составляют — 9.5%, базофильные нормобласты — 8%, эритробласты — 12%, гемоцитобласты — 18% (рис. 3) и тромбоциты — 1%. Процентное соотношение кроветворения распределяется следующим образом: гранулоцитопоэз — 15%, лимфоцитопоэз — 33%, эритроцитопоэз — 33,5%, тромбоцито-поэз — 1%.
К 20 дню развития личинки жабы обыкновенной селезенка полностью сформирована, строма органа подразделяется на красную и белую пульпу (рис. 2).
1 V. ЯН I»
2 J
Fife i
iiH *
Рис. 2. Продольный срез личинки Жабы обыкновенной (Bufo Viridis Laurenti, 1768) на 20 сутки личиночного развития (ОБ10 ОК4):
1 — селезенка, 2 — мезонефрос
—--—
~ 15 ~
Издание зарегистрировано в Федеральной службе по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор). Свидетельство о регистрации СМИ ПИ ЭЛ № ФС77-50518 Журнал представлен в НАУЧНОЙ ЭЛЕКТРОННОЙ БИБЛИОТЕКЕ (НЭБ) — головном исполнителе проекта по созданию Российского индекса научного цитирования (РИНЦ)
—--—
Л £* W Г 1
О* W
fe
г % é
Л
1 —^
•
9 V 1 / 2 % %
<Ф /
/
г
Рис. 3. Селезенка жабы обыкновенной (Bufo Viridis Laurenti, 1768) на 20 сутки личиночного развития (ОБ 10 ОК40): 1 — гемоцитобласты, 2 — лимфоциты
В этот период в селезенке доминирует лимфоцитопоэз — 51,5%, при этом основная масса элементов крови приходится на про-лимфоциты — 18%, лимфобласты — 17,5%, лимфоциты — 16%. На клетки эритропоэти-ческого ряда приходилось 23,5% клеток, которые распределяются следующим образом: эритробласты — 1%, оксифильные нормобла-сты — 6%, полихроматофильные и базофиль-ные нормобласты — по 4%, эритроциты — 8%, тромбоцитопоэз — 2%, гемоцитоблас-ты — 2% клеток.
Выводы. Определено, что печень выполняет функцию кроветворения на протяжении всего личиночного периода развития. В печени образуются элементы крови всех линий. Отмечены некоторые патологические изменения печени и формирующихся элементов крови. Подробное изучение селезенки, как органа кроветворения, указывает на довольно раннее возникновение первых гемопоэтиче-
ских очагов в эмбриональной селезенке, однако максимум ее активности, а следовательно, и наиболее важное значение как органа кроветворения у личинки жабы происходит к концу личиночного периода развития жабы. Селезенка представляет собой универсальный орган кроветворения, где появляется тром-боцитопоэз.
ЛИТЕРАТУРА
1. Валькович Э.И. Общая и медицинская эмбриология. Ростов н/Д: Феникс, 2008.
2. Волкова О.В., Елецкий Ю.К. Основы гистологии с гистологической техникой. 20-е изд. М.: Медицина, 1982.
3. Волкова О.В., Пекарский М.И. Эмбриогенез и возрастная гистология внутренних органов человека. М.: Медицина, 1976.
3. Грушко М.П. Особенности гистологической организации некоторых органов кроветворения озерной лягушки (Rana Ridibunda) // Вестник
—--—
~ 16 ~
Издание зарегистрировано в Федеральной службе по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор). Свидетельство о регистрации СМИ ПИ ЭЛ № ФС77-50518 Журнал представлен в НАУЧНОЙ ЭЛЕКТРОННОЙ БИБЛИОТЕКЕ (НЭБ) — головном исполнителе проекта по созданию Российского индекса научного цитирования (РИНЦ)
Астраханского государственного технического университета. 2010. № 1(49). С. 78—81.
4. Грушко М.П. Морфофизиологические особенности кроветворения у костистых рыб (на примере воблы (ЯиШшгиШш са8рюи8)) // Вопросы рыболовства. 2010. № 2 (42). С. 327—340.
5. Житнева Л. Д., Полтавцева Т.Г., Рудницкая О. А. Атлас нормальных и патологически из-
мененных клеток крови рыб. Ростов-н/Д, Ростовское книжное издательство, 1989.
6. Светашева Д.Р., Грушко М.П. Формирование почки у амфибий в личиночный период развития на примере Жабы зеленой (Bufo viridis, 1768) // Современные проблемы науки и образования. 2014. № 2; URL: http://www.science-education.ru/116-12288.
CHARACTERISTICS OF SOME
OF THE EMERGING ORGANS OF LARVAE
OF THE LARVAS TOAD (BUFO VIRIDIS LAURENTI, 1768)
AS ORGANS OF HEMATOPOIESIS
D.R. Svitasheva, M.P. Grushko
State budgetary educational institution of higher professional education Astrakhan state technical University Federal Agency for fisheries Astrakhan, Russian Federation, 414056
Annotation. The aim of this work was to study the morpho-physiological characteristics of the emerging liver and spleen, as the blood of larvae of common Toads (Bufo Viridis Laurenti, 1768). For complete specifications on hematopoiesis it is necessary to solve a number of problems, including a detailed study of the qualitative and quantitative composition of hematopoietic elements of the liver and spleen at all stages of larval development, in addition it is necessary to study the timing and rate of development of organs, its morphological features, as well as to consider the possible pathological processes of hematopoiesis. Great interest in our days is the study of the postembryonic development of organisms in relation to changing environmental conditions, but primarily to the study of blood and blood-forming organs that are most sensitive to changes in the environment.
Key words: spleen, liver, hepatocytes, hematopoiesis, erythrocytes, granulocytes, agranulocytes, poikilocytosis, hemosiderin, pigment, mitosis._
REFERENCES
1. Val'kovich E.I. Obshchaia i meditsinskaia embriologiia. Rostov n/D, Feniks, 2008.
2. Volkova O.V., Eletskii Iu.K. Osnovy gistolo-gii s gistologicheskoi tekhnikoi. Moscow, Meditsina, 1982.
3. Volkova O.V., Pekarskii M.I. Embriogenez i vozrastnaia gistologiia vnutrennikh organov chelo-veka. Moscow, Meditsina, 1976.
4. Grushko M.P. Osobennosti gistologicheskoi organizatsii nekotorykh organov krovetvoreniia ozer-noi liagushki (Rana Ridibunda). Vestnik Astrakhan-skogo gosudarstvennogo tekhnicheskogo universiteta, 2010, no. 1(49), pp. 78—81.
5. Grushko M.P. Morfofiziologicheskie osobennosti krovetvoreniia u kostistykh ryb (na primere vob-ly (Rutilusrutilus caspicus)). Voprosy rybolovstva, 2010, no. 2 (42), pp. 327—340.
6. Zhitneva L.D., Poltavtseva T.G., Rudnits-kaia O.A. Atlas normal'nykh i patologicheski izme-nennykh kletok krovi ryb. Rostov-n/D, Rostovskoe knizhnoe izdatel'stvo, 1989.
7. Svetasheva D.R., Grushko M.P. Formirova-nie pochki u amfibii v lichinochnyi period razvitiia na primere Zhaby zelenoi (Bufo viridis, 1768). Sovre-mennye problemy nauki i obrazovaniia, 2014, no. 2; URL: http://www.science-education.ru/116-12288.
—--—
~ 17 ~
Издание зарегистрировано в Федеральной службе по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор). Свидетельство о регистрации СМИ ПИ ЭЛ № ФС77-50518 Журнал представлен в НАУЧНОЙ ЭЛЕКТРОННОЙ БИБЛИОТЕКЕ (НЭБ) — головном исполнителе проекта по созданию Российского индекса научного цитирования (РИНЦ)
