CC BY
81
7) Ganoderma L. из КНР, порошок, заводское производство Фуфан Линчжигань Танцян (Fufang ingzhi Gantangjang);
8) отвар из грибов Ganoderma L. (КНР и КНДР), выращенных методом гидропоники (Mahhyon Pharmaceutical Factory, Pyongyang D.P.R. of Korea).
Лакированный трутовик (Ganoderma L.) . Этот гриб имеет очень своеобразный вид, и его обычно нельзя спутать ни с каким другим трутовиком. Для гриба характерна короткая боковая ножка, окрашенная так же, как и сама шляпка, в буровато-пурпурный или каштаново-бурый цвет. Шляпка с блестящей лакированной коркой, округлая, веерообразная, деревянистая. Снизу шляпки — плотный слой беловатых трубочек. Гриб обычен в Горном Алтае на корневых лапах старых лиственниц. Плодовые тела лакированного трутовика формируются на обнаженных корнях лиственниц, обычно по вьючным тропкам и местам прогона скота. Гриб может развиваться также на старых пнях и упавших стволах лиственниц.
Полисахариды, выделенные из грибов, представляют собой водорастворимые аминопроизводные 1-З-уЗ- D -глюкана. Ganoderma mushrooms обладают стимулирующим воздействием на иммунную систему, универсальным радиопротекторным действием.
Главные элементы Ganoderma L. (Буллочо): глюкоза, белок, аминокислота, алкалоид, полисахариды, фенол, кумарин, масло. Микроэлементы: Ag, Са, Fe, К, Na, Mn, Sn, Zn, Ва.
Фармакологическое применение: оказывает успокаивающее действие на ЦНС, снимает боль, способствует расширению гладкой мускулатуры в бронхах и кишечнике, усиливает работу сердца, снижает уровень холестерина в крови и артериальное давление, повышает неспецифический иммунитет.
Форма приготовления лекарства до недавнего времени была только одна. В последнее время описано комплексное применение: ганодерма + китайский лимонник + женьшень + элеутерококк или Ganoderma + женьшень + горянка корейская + ремания клейкая. Применяют по 2-3 г 3 раза в день.
Клиническое применение: Ganoderma оказывает успокаивающее действие. После применения этого лекарства у 70% больных с заболеваниями нервной системы наблюдался глубокий сон и нормализовались показатели вегетативной нервной системы. Хороший эффект показан при заболеваниях сердца, отмечено антиастматическое действие, он обладает тонизирующими свойствами, значительно повышает неспецифическую противоопухолевую резистентность, активизирует функцию Т-лимфоцитов, способствует увеличению количества лимфоцитов, обладает интерфероноподобным действием.
Изучение иммуномодулирующего действия Ganoderma L. показало (табл.1), что у 3 больных с меланомой показатели клеточного иммунитета, характеризующие Т-киллерную активность (Gml), во всех случаях возрастали. Активность Т-супрессорных
other tree-fungus. It has a short side stem of brownish purple or chestnut brown color, the same as the cap. The ligneous round fan-like cap has a lac-keoured crust. There is a dense layer of whitish tubes from below the cap. The fungus is usually found on old larch roots in the Altai Mountains. The fruit bodies of the Ganoderma L. grow on naked larch roots along pack animal and cattle paths. The fungus can also grow on old stumps and fallen larch trunks.
Polysacharides isolated from the mushrooms are water-soluble aminoderivatives of l-3-/S-D-glucane. Ganoderma mushrooms stimulate the immune system and take a universal radioprotective effect.
The basic elements of Ganoderma L. (Bullocho) are, as follows: glucose, protein, amino acid, alkaloid, polysacharides, phenol, cumarin, oil. Microelements: Ag, Ca, Fe, K, Na, Mn, Sn, Zn, Ba.
Pharmacologic usage: exerts a sedative effect on the CNS, relieves pain, expands smooth muscles of the bronchi and intestines, stimulates cardiac activity, decreases blood cholesterin and blood pressure, increases non-specific immunity.
There has been just one drug formulation up to recently. At present, a complex usage is described, including Ganoderma + Schisandra chinensis + Panax ginseng + Eleutherococcus or Ganoderma + Panax ginseng + Herba epimedii + Risoma remaniae. To be administered at 2-3 g 3 times a day.
Clinical usage: Ganoderma exerts sedative effect. After administration of the drug 70% of patients with abnormalities of the central nervous system had sound sleep and presented normalization of the autonomous nervous system. A markable positive effect is observed in patients with cardiac diseases. The drug exerts antiasthmatic, tonic action, increases considerably non-specific antitumor resistance, enhances T-lymphocyte function, contributes to increase of lymphocyte count, takes interferon-like effect.
The study of the immunomodulating action of Ganoderma L. showed (table 1) that 3 patients with melanoma presented increasing cell immunity parameters characterizing the T-killer activity. (Gmi) in all the cases. The activity of T-suppressor killers (LT8) as a rule decreased or remained unchanged.
T-cell parameters determined with the MAbs (OCT8, OCT11), showed a rise in all the patients. The patient M., receiving the drug at two concentrations presented stimulation of mature T-lymphocytes (OCT3).
The T-helpers identified with the OCT4 were enhanced in all the 3 patients, except the patient M., with a high T-helper concentration, under the effect of the tested drug. Activity of T-suppressor killers (OCT8) decreased in the patients M. and I., but increased in the patient N. The level of the humoral immunity (ICOl — B-lymphocytes) also increased in
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
© В.И.Купин, 1992 УДК 616-006.446-097
В.И.Купин
Ganoderma mushrooms — перспективные иммуномодуляторы в онкологии
НИИ экспериментальной диагностики и терапии опухолей
Грибы — это удивительные растения. Возможно, им принадлежит будущее. Они еще не раз удивят ученых своими свойствами и тем потенциалом, который в них заложен. Гриб, не так давно, в 1976 г., найденный в пустынной области Хардантервида в Западной Норвегии, произвел сенсацию в медицине. Оказалось, что он может быть использован для производства мощного средства, подавляющего иммунную систему, названного впоследствии циклоспорином А; это вещество произвело революцию в трансплантологии. Грибы семейства Ganoderma Lucidum (Буллочо, Корея) и Ganoderma applanatum (Линджи, Китай) представляют огромный интерес для исследователей в настоящее время.
Материалы и методы. Исследования выполняли на сканирующем лазерном проточном цитофлюорографе фирмы “ORTO-Spectrum III” совместно с коллегами из Рижского института экспериментальной и клинической медицины (д-р А.Шварц-берги сотр.).
В работе использовали набор моноклональных антител (МКАТ): ОКТЗ, ОКТ4, ОКТ8, ОКТ11, Gml, Leu7, ИК01, ИК020 к различным субпопуляциям клеток, а также проводили сравнительное изучение продукции у-интерферона у мышей линии BALB/c в ответ на введение растительных препаратов и изучение продукции у-интерферона у больных с меланомой кожи.
Использовали полисахариды, полученные из грибов Ganoderma Lucidum:
1) Ganoderma L. из Пхеньяна (КНДР, 1988 г.);
2) Ganoderma L., приобретенная в аптеке Пекина (КНР, 1989 г.);
3) Ganoderma L., собранная в пригороде Пекина (КНР, 1989 г.);
4) Ganoderma L., приобретенная в аптеке Шанхая (КНР, 1989 г.);
5) Ganoderma L., собранная в Тульской области в долине реки Вы-прейка, на корнях ивы (июль 1989 г., СССР);
6) Ganoderma L. (Буллочо) из КНДР, таблетированная, заводское производство Рензиаляк, 1988 г.;
ORIGINAL
PAPERS
THEORETICAL INVESTIGATIONS
V.I.Kupin
Ganoderma Mushrooms — Prospective Immuno-modulators in Oncology
Research Institute of Experimental Diagnostics and Therapy of Tumors
Mushrooms are a wonderful plant. I believe they have a happy future before them. They shall surprise us by their properties and potential. A mushroom found in 1976 in Hardantevida, Western Norway, was a sensation in medicine. It appeared that the mushroom could be used for production of a powerful agent suppressing the immune system, that was later called cyclosporine A; this drug made a revolution in transplantology. Mushrooms of Ganoderma Lucidum family (Bullocho, Korea) and Ganoderma applanatum (Linji, China) are of great interest for researchers.
Materials and Methods. The investigation was performed together with our colleagues from the Institute of Experimental and Clinical Medicine, Riga (Dr Schwartsberg and others) using a scanning laser flow cytofluorograph from ORTO-SPECTRUM III. We used a set of monoclonal antibodies (MAb) OCT3, OCT4, OCT11, Gml, Leu7, ICOl, IC020 to various cell subpopulations and performed a comparative study of production of y-interferon in BALB/c mice in response to administration of vegetable drugs and production of y-interferon in skin melanoma patients.
Polysacharides derived from Ganoderma Lucidum were used, as follows:
1) Ganoderma L. from Pyongyang (KPDR, 1988),
2) GanodermaL. from a drugstore in Beijing (CPR, 1989),
3) Ganoderma L. gathered in Beijing suburb (CPR, 1989),
4) Ganoderma L., from a drug store in Shanghai (CPR, 1989),
5) Ganoderma L. gathered in Tula region at the river Vypreika on willow roots (July 1989, USSR),
6) Ganoderma L. (Bullocho)-tablets of industrial production, Renzialyak, 1988,
7) Ganoderma L. — powder of industrial production (from Fu-fang ingzhi Gantangjang) and
8) Ganoderma L. broth (CPR and KPDR) grown by hydroponics (Mahhyon Pharmaceutical Factory, Pyongyang, KDPR). Ganoderma Lucidum. This tree-fungus
looks peculiar and can hardly be confused with any
Таблица1 /Table 1
Изучение иммуномодулирующего действия Ganoderma L. с помощью метода проточной цитофотометрии Study of immunomodulating action of Ganoderma L. by flow cytophotometry
MKAT Концентрация, Leu7 Gm1 OKT11 OKT3 OKT4 OKT8 OKT4 ИК01 ИК020
мг/мл /ОКТ8
Больной М., 14.06.88. Д-з: меланома T2N0M0 / Ds: Melanoma T2N0M0, patient М., 14.06.88.
Контроль/Control 41,0 14,2 88,0 79,9 36,0 40,6 0,8 5,7 40,8
Опыт/Experiment 1,0 21,6 » 37,1 ♦ 90,1 t 83,4 * 33,9 * 38,5 * -0,8= 15,3 t 23,7 Ф
Ganoderma L. 0,01 25,0 ♦ 26,4 ♦ 97,5 ♦ -79,4- 38,9 t 36,5 * 1,0 ♦ 9,7 ♦ 25,2 1
Больной И., 1947, T1N0M0, 15.06.88. Д-з; меланома кожи левой стопы. 10.02.88; операция Дюкена слева + иммунотерапия, март 1988 г. - метастазы в легкие /Ds: Skin melanoma of left foot, patient I., 1947. T1N0M0, 15.06.88. 10.2.88. Duculng operation+immunotherapy. March 1988 - lung metastases.
Контроль/Control x 14,4 66,9 X 43,9 26,3 1,6 X X
Опыт/Experiment 1,0 X 40,8 t 87,9 t X 52,9 t 23,8 t 2,2 ♦ X X
Ganoderma L. 0,01 X 45,8 t 86,3 ♦ X 57,0 + -28,7- 1,9 ♦ X X
Больная H., 16.06.88. Д-з; диссеминированная меланома. 1974 г.: операция Дюкена, 1988 г.: диссеминация, интоксикация, анемия / Ds: Disseminated melanoma, patient N., 16.06.88. 1974 : Duculng operation. 1988 : Dissemination, Intoxication, anemia
Контроль/Сопшої X 12,1 75,4 X 37,6 13,4 2,8 X X
Опыт/Experiment 1,0 X X X X X X X X X
Ganoderma L. 0,01 X =12,6- 84,9 ♦ X 40,0 t 18,7 t -2,1 ♦ X X
Донор С., 17.06.88 / Donor S. 17.06.88
Контроль/Control x 27,6 57,0 X 28,5 38,9 0,7 X X
Опыт/Experiment 1,0 x X X X X X X X X
Ganoderma L. 0,01 X 58,5 t 93,5 t X 39,1 ♦ -38,0- 1,0 I X X
MAb Concentration, mg/ml Leu 7 Gm1 OCT11 OCT3 OCT4 OCT8 OCT4 /ОСТ8 IC01 IC020
Примечание. В табл.1, 2 и 5 показатели отражают число клеток в процентах. Стрелка и знак (-) указывают на модулирующий эффект препарата.
Note. In tables 1,2,5 the numbers represent cell count in percent. Arrow and - Indicate modifyling effect of the drug.
киллерных клеток (Lt8), как правило, в большинстве случаев снижалась или оставалась неизменной.
Показатели Т-клеток, определяемые с помощью МКАТ (ОКТ8, ОКТ 11), были увеличены у всех больных.
У больного М. при использовании препарата в двух концентрациях выявлена стимуляция зрелых Т-лимфоцитов (ОКТЗ).
Т-хелперы, определяемые с помощью ОКТ4, стимулировались у всех трех больных, за исключением больного М. с высокой концентрацией Т-хелперов, под влиянием исследуемого препарата.
Активность Т-супрессоров-киллеров (ОКТ8) снижалась у больных М. и И., но повышалась у больного Н. Показатели гуморального иммунитета (ИК01 — В-лимфоциты) также повышались у больного М.
При изучении показателей иммунитета in vitro у донора С. отмечена аналогичная тенденция стимуляции иммунитета под влиянием препарата. Значительно повышалось число NK-клеток ( ~ в 2 раза), определяемых с помощью Gml, Т-клеток (ОКТ11) и Т-хелперов (ОКТ4). Число Т-супрессоров-киллеров (ОКТ8) практически не менялось. Коэффициент соотношения ОКТ4/ОКТ8 у донора С. возрастал по сравнению с
the patient M.
The in vitro immunity study showed a similar tendency of immunity stimulation under the effect of the drug in the donor C. A considerable (about twofold) rise was observed in the NK-cells determined with the Gml, T-cells (OCT11) and T-helpers (OCT4), while the count of T-suppressor killers (OCT8) remained practically the same. The coefficient of the OCT4/OCT8 ratio in the donor C. increased as compared with the control. So, the flow cytometry study showed a positive immunomodulating effect of the drug. The data from table 1 are schematically presented in figures I-IV.
The in vitro and in vivo study of the immunomodulating action of various Ganoderma L. preparations by flow cytometry in the donors (table 2) demonstrated immunoregulatory capacity of the drugs in respect to the cellular and humoral immunity determined using a set of MAbs (OCT4, Gml, IC020, ICOl).
The in vitro study of the Ganoderma drugs in donors showed about a 1.5-2-fold normalization of the T-helper count rather than their suppression, as compared with the baseline. The first investigation
100
во
во
40
20
100
too
во
во
40
30
LL
100
Изучение иммуномодулирующего действия препарата Ganoder-ша L. у больных с онкологическими заболеваниями (I-III) и донора (IV) с помощью метода проточной цитофотометрии.
по оси ординат: число клеток (в%); по оси абсцисс: 1 — показатели до введения, 2 — после введения препарата в дозе 1,0 мг/мл, 3 — после введения препарата в дозе 0,1 мг/мл.
контролем. Таким образом, показано положительное иммуномодулирующее действие препарата, изучаемого с помощью метода проточной цитометрии. Данные табл.1 графически представлены на рисунке, I-IV.
Изучение иммуномодулирующего действия различных образцов Ganoderma L. с помощью метода проточной цитометрии у доноров in vitro и in vivo (табл.2) выявило иммунорегуляторную способность данных препаратов в отношении клеточного и гуморального иммунитета, определяемого с помощью набора МКАТ (ОКТ4, Gml, ИК020, ИК01).
Исследование образцов препаратов Ganoderma L. у доноров in vitro показало, что имеется не подавление, а скорее нормализация количества Т-хелперов по сравнению с исходной нормой ~ в 1,5-2 раза. При первом исследовании наблюдалось незначительное снижение количества Т-супрессоров-киллеров, во втором случае их количество незначительно возрастало (на 2-3%), т.е. практически оставалось без изменения.
Study of immunomodulating action of Ganoderma L. drug in cancer patients (l-lll) and a donor (IV) by flow cytopho-tometry.
Along the y axis: cell count (%); along the x axis:
1 — before drug administration, 2 — after drug administration at 1.0 mg/ml, 3 — after drug administration at 0.1 mg/ml.
demonstrated a slight decrease in the T-suppressor killers, while their inconsiderable (2-3%) increase was detected in the second case, i.e. the count was practically unchanged.
A notable (about twofold) suppression of the NK-cell activity was observed in all the drugs tested in the first investigation and a slight suppression in the second one. The humoral immunity (ICOl) in the donor U. was suppressed inconsiderably, however the second investigation showed a tendency to its stimulation on administration of Ganoderma drug n 4 at two concentrations and Ganoderma n 6 at low concentration.
The in vivo study of the donor Z., who received 30 ml of the broth daily for 1 week, failed to show any difference with the values. The data obtained allow the conclusion that the drug does not take any markable effect on the normal immunity status.
Similar to the classical immunomodulators (thy-
Таблица2 / Table 2
Изучение иммуномодулирующего действия различных препаратов методом проточной цитофотометрии Study of immunomodulating effect of various Ganoderma L. drugs by flow cytophotometry
Донор У. Контроль 21.11.90 Концентрация, мг/мл 30,7 % 19,4 % 2,0 20,9 % 10,8 %
Препарат МКАТ OKT4 OKT8 ОКТ4/ОКТ8 ИК020 ИК01
Ganoderma, п-3 1,0 21,6 і -18,3- 1,1 10,4 * 6,1 *
KHP/CPR 0,01 27,6 і 17,9 ^ 1,5 9,3 і- 7,5 і
Ganoderma, п-4 1,0 20,0 і 16,9 + 1,1 9,8 і 8,0 *
KHP/CPR 0,01 25,5 + 17,4 і 1,4 10,1 і 8,0 t
Ganoderma, п-7 1,0 26,7 + -18,9- 1,4 12,7 і 9,1 *
KHP/CPR 0,01 27,4 * 14,0 і 1,9 11,1 і 8,9 1
Ganoderma, n-6 1,0 31,2 + 16,1 + 1,9 10,7 1 9,5 і
KHflP/KPDR 0,01 31,7 + 17,6 1 1,8 9,4 —10,0-
Drug MAb Concentration, mg/mi 30,7 % ОСТ8 ОСТ4/ОСТ8 1С020 ІС01
Donor U. Control 21.11.90 OCT4 19,4 % 2,0 20,9 % 10,8 %
Донор У. Контроль 28.11.90 Концентрация, мг/мл 36,4% 19,2% 1,8 19,2% 17,2%
Препарат МКАТ OKT4 OKT8 OKT4/OKT8 ИК020 ИК01
Ganoderma, n-3 1,0 30,2 * 21,4 ♦ 1,4 17,1 * 16,2- +
KHP/CPR 0,01 32,7 1 21,4 t 1,5 17,2 і 15,3 +
Ganoderma, n-4 1,0 28,9 * 21,9 * 1,3 -19,5- 18,9 1
KHP/CPR 0,01 31,3 1 -19,0- 1,6 17,8 + 18,5 *
Ganoderma, n-7 1,0 24,6 + 20,3 ♦ 1,2 16,0 + =17,8=
KHP/CPR 0,01 29,4 1 20,3 * 1,4 17,9 V 15,0 1
Ganoderma, n-6 1,0 29,7 I 17,2- 1,7 17,0 * -17,0-
KHflP/KPDR 0,01 32,9 * 22,8 t 1,4 16,3 + 18,2 *
Drug MAb Concentration, mg/ml OCT4 OCT8 OCT4/OCT8 IC020 IC01
Donor U. Control 21.11.90 36,4 % 19,2 % 1,8 19,2 % 17,2 %
Донор 3., принимала отвар Ganoderma L. в течение недели / DonorZ., received Ganoderma L. broth fora week
Препарат МКАТ OKT4 OKT8 OKT4/OKT8 ИК020 ИК01
До приема / Before admlnistr. 46,7 25,0 1,8 13,2 10,1
После / After admlnistr. 42,9 26,0 1,6 14,7 10,5
Drug MAb OCT4 OCT8 OCT4/OCT8 IC020 IC01
Наблюдалось значительное подавление NK-клеточ-ной активности в первом исследовании ( ~ в 2 раза) у всех исследованных препаратов и незначительное подавление при повторном исследовании. Гуморальный иммунитет (ИК01) у донора У. незначительно подавлялся, но при повторном исследовании наблюдалась тенденция к его повышению у препаратов Ganoderma № 4 и 2 концентрациях и Ganoderma № 6 в низкой концентрации.
Исследования, выполненные in vivo у донора 3., которая принимала по 30 мл отвара ежедневно в течение 1-й недели, не показали существенной разницы в изучаемых показателях по сравнению с контрольными значениями. На основании полученных данных делается вывод о том, что данный препарат не влияет сущест-
mosin, T-activin, levamisole, lentinan, etc.) Ganoderma L. seems to enhance weak, to weaken strong and to induce no change in normal response of the immune system, i.e. to possess immunoregulatory activity.
At the next stage of the investigation we performed a comparative study of immunomodulating action of the vegetable drugs in vitro and in vivo.
Experimental animals: we carried out the experiments on BALB/c female mice of age ranging from 8 to 12 weeks.
To culture the L-929 lineage cells we used medium 199 and cattle serum.
y-interferon in the murine blood serum was determined by antiviral activity. The interferon titration
Таблица 3/ТаЫе 3 Продукция интерферона у мышей BALB/c в ответ на внутрибрюшинное введение препаратов Interferon production in BALB/c mice induced by intraperitoneal administration of the drugs
Уровень интерферона в сыворотках мышей, ед/мл
Препарат Концентрация, мг/мл Время после введения препарата
24 ч / 24 h 72 ч / 72 h
Элеутерококк,СССР 0,01 41,7* 18,0** 15,2
/Eleutherococcus, USSR 1.0 37,6* 29,2
Ganoderma Lucidum 0,01 24,9 18,0** 20,3
1,0 51,1* 18,1
Китайский лимонник 0,01 6,6* 0,2** 12,6*
/Schisandra chinensis 1,0 9,0* 6,0*
Drug Concentration, mg/ml Interferon content In murine serum, U/ml
Time following drug administration
Примечание. * — p<0,05.:
■ все группы сравнивались с группой интактных мышей.
Note. * — p<0.05. ** — every group was compared with intact mice.
венным образом на состояние нормальной иммунной системы.
По-видимому, как и классические иммуномодуляторы (тимозин, Т-активин, левамизол, лентинан и др.), Ganoderma L. также способна усиливать слабую, ослаблять сильную и оставлять без изменения нормальную реакцию иммунной системы, т.е. обладать иммунорегуляторным действием.
Следующим этапом наших исследований было сравнительное изучение иммуномодулирующего действия препаратов растительного происхождения in vitro и in vivo.
Экспериментальные животные: в опытах использовались мыши-самки линии BALB/с в возрасте 8-12 нед.
Для культивирования клеток линии L929 использовали среду 199 и сыворотку крупного рогатого скота.
Наличие у-интерферона в сыворотке крови мышей определяли по их противовирусной активности. Титрование интерферона проводилось методом задержки диффузного цитопатического эффекта, вызванного вирусом везикулярного стоматита в 24-часовой культуре L929 (табл.З).
Элеутерококк СССР проявил свою активность в 2 концентрациях: при высокой концентрации 1,0 мг/мл и низкой 0,01 мг/мл при 24 ч после введения препарата. 41,7 ед/млпри0,01 и37,6ед/мл при 1,0 (р<0,05).
Тем не менее при 72-часовой экспозиции препарата после внутрибрюшинного введения статистической разницы ни при одной концентрации получено не было: 15,2 и 29,2 ед/мл.
Следующим препаратом, исследуемым на уровень продукции у-интерферона у мышей, была Ganoderma L. (Буллочо). Этот препарат достоверно повышал уровень у-интерферона в сыворотке крови мышей при 24-часовой экспозиции в высокой концентрации, так же как и элеутерококк СССР и китайский лимонник, 1,0-
51,1 ед/мл против 18,0 ед/мл.
was carried out by the diffuse cytopathic effect delay, induced with the vesicular stomatitis virus (VSV) in a 24-hour culture of L-929 (table 3).
Eleutherococcus (USSR) exhibited its activity at two concentrations: high — 1.0 mg/ml and low — 0.01 mg/ml 24 following administration — 41.7 U/ml at 0.01 and 37.6 U/ml at 1.0 (p < 0.05).
However a 72-hour exposure of the drug as administered intraperitoneally did not show any statistically significant difference at either concentration:
15.2 and 29.2 U/ml.
Ganoderma L. (Bullocho) was the next drug studied for production of y-interferon in mice. This drug at high concentration of 1.0 mg/ml induced a statistically significant rise in the mouse blood serum at a 24-hour exposure, similar to eleutherococcus (USSR) and Schisandra chinensis: 51.1 U/ml vs 18.0 U/ml.
The comparative study of the immunomodulating effect of the drugs of vegetable origin in vitro and in vivo showed a significant increase in y-interferon in the murine serum 24 h following administration of the Ganoderma drug at high concentration, as well as after administration of eleutherococcus and Schisandra chinensis.
The data obtained allow the conclusion that Schisandra chinensis (Omiza), eleutherococcus and Ganoderma L. (Bullocho) may be considered y-interferon inducers in BALB/c mice.
This investigation was performed in continuation of a study in vitro of y-interferon production in cancer patients in response to effect of the above-mentioned drugs. Table 4 shows Ganoderma-in-duced production of y-interferon by lymphocytes in skin melanoma patients. The patient A. with shank skin melanoma presented lymphocyte production of y-interferon in response to the Ganoderma L. drug. The patient G. with disseminated shank skin melanoma and metastases failed to respond to the drug at
Таблица 4/Table 4
Продукция у-интерферона (в ед/мл) лимфоцитами больных с меланомой кожи в ответ на препараты растительного происхождения Lymphocyte production of у-interferon induced by drugs of vegetable origin in skin melanoma patients
Препарат Концентрация препарата, мг/мл Больной
A. Г.
Ganoderma Lucidum 0,01 10* 0
1,0 10* 0
Женшень плантационный. КНДР 0,01 10* 0
/Plantation ginseng, KPDR 1,0 0 0
Женшень дикорастущий, КНДР 0,01 0 0
/Wild ginseng, KPDR 1,0 10* 0
Элеутерококк, СССР 0,01 10* 0
/Eleutherococcus, USSR 1,0 0 0
Китайский лимонник 0,01 0 0
/Schisandra chinensis 1,0 0 10*
Drug Concentration, mg/ml A. G.
Patients
Примечание. * — p<0,05.
Note. *— p<0.05.
Сравнительное изучение иммуномодулирующего действия препаратов растительного происхождения in vitro и in vivo показало достоверное повышение уровня у-интерферона в сыворотке мышей при 24-часовой экспозиции в высокой концентрации препарата Gano-derma L., так же как элеутерококка и китайского лимонника. На основании полученных данных мы делаем заключение, что китайский лимонник (Omiza), элеутерококк и Ganoderma (Буллочо) можно рассматривать в качестве индукторов у-интерферона у мышей линии BALB/c.
Проведенное выше исследование явилось логическим продолжением изучения продукции у-интерферона у онкологических больных in vitro в ответ на продукцию вышеназванных препаратов (табл.4). Показана продукция у-интерферона лимфоцитами больных с меланомой кожи в ответ на индукцию препаратом Ganoderma L.
Показана продукция у-интерферона лимфоцитами больного А. с меланомой кожи голени в ответ на препарат Ganoderma L. Больной Г. с диссеминированной меланомой кожи голени с метастазами не дал ответа ни в одной концентрации на данный препарат, т.е. оказался интактным, нечувствительным к Буллочо. Таким образом, данное исследование продемонстрировало наличие индивидуальной чувствительности этих больных к изучаемым иммуномодуляторам.
Использование лазерного проточного анализатора с набором МКАТ открывает широкие возможности моделирования in vitro различных комбинаций препаратов, особенно комплексных препаратов восточной медицины. Используя набор МКАТ, можно в считанные секунды определить чувствительность тех или иных больных к исследуемым веществам. Так, изучение иммуномодулирующего действия различных типов индукторов интерферона растительного
either concentration, i.e. appeared insensitive to Bul-locho. So, the patients showed individual sensitivity to the immunomodulators studied.
Employment of laser flow analysers with a MAb panel opens vast prospects in simulation in vitro of various drug combinations, especially of complex drugs of oriental medicine. Using MAbs allows patients’ sensitivity to drugs to be determined rapidly. The study of immunomodulating action of various interferon inducers of vegetable origin by flow cytometry revealed a number of interesting features of the drugs tested: lentinan, eleutherococcus, Panax ginseng, Schisandra chinensis, Ganoderma L.
Polysacharides from Ganoderma L. fungi may be useful in therapy of cancer patients. The polysacharides may be administered, for example, to remove post-operative immunosuppression or to prevent side effects of antitumor therapy. They may be of use in a complex treatment, including surgery, chemotherapy, radiotherapy and other immuno-stimulating effects. That is why the antitumor polysacharides isolated from mushrooms may be considered as the most physiologically active cytokines able to enhance antitumor resistance, rather than just an ordinary element in the treatment complex.
Таблица 5/ТаЫе 5
Сравнительное изучение иммуномодулирующего действия препаратов расти тельного происхождения при использовании метода проточной цитометрии Comparative study of immunomodulating action of drugs of vegetable origin by flow cytometry
Иммунологические показатели
Препарат бласттранс- продукция
ОКТЗ OKT4 OKT8 Leu 7 формация РБТ-проба В-клетки интерферо- на
Элеутерококк, СССР t * + t ♦ t X
/Eleutherococcus, USSR ♦ ♦
Элеукокк, ФРГ / Eleucoccus, FRG f ♦ It t X
Женьшень / Ginseng t t t ♦ + t
Китайский лимонник/Schisandra t И H t f X
chinensis
Лентиан / Lentlan f ♦ И и ♦ \ —
Ganoderma 1, Китай / China t t f t ♦ ♦ X
Ganoderma 2, Корея / Korea 4 t 4 ♦ X
Ganoderma 3, СССР / USSR + 1 ♦ I ♦ ♦ X
Blast
Drug OCT3 OCT4 OCT8 Leu 7 NK transformation BTR 'test B-cells Interferon production
Immunologic parameters
происхождения с помощью метода проточной цитометрии выявило ряд интересных особенностей исследуемых препаратов лентинана, элеутерококка, женьшеня, китайского лимонника, Ganoderma L. (табл.5).
Что касается полисахаридов, выделенных из грибов Ganoderma L., то они могут оказаться чрезвычайно полезными в терапии онкологических больных. Например, полисахариды, выделенные из грибов, можно применять для снятия иммуносупрессии при послеоперационной терапии или для предотвращения побочных эффектов противоопухолевой терапии. Они могут оказаться полезными при включении их в комплекс общей терапии, включая хирургическое лечение, химиотерапию, лучевое лечение и другие иммуностимулирующие воздействия. Поэтому среди множества терапевтических приемов, известных в настоящее время, противоопухолевые полисахариды, выделенные из грибов, можно рассматривать не просто как один из множества компонентов, входящих в комплекс лечебных мероприятий, а как наиболее сильные физиологически активные цитокины, способные усиливать механизмы противоопухолевой резистентности.
Поступила 20.08.91. / Submitted 20.08.91.
