CC BY
8УДК 616.995.1 (470. 342)
ЭПИЗООТОЛОГИЯ И ДИАГНОСТИКА ДИРОФИЛЯРИОЗА У СОБАК В КИРОВСКОЙ ОБЛАСТИ
Бякова О. В., кандидат биологических наук, доцент;
Пилип Л. В., кандидат ветеринарных наук, доцент;
Вятская государственная сельскохозяйственная академия
Антропозоонозное заболевание дирофиляриоз официально регистрируется в Кировской области с 2013 года. Источником зооноза в синантропном очаге являются собаки. Экстенсивность инвазии в период с 2013 по 2017 годы у служебных собак и животных частного сектора в среднем составляет 18,12 % и 9,2 % соответственно. Прижизненная лабораторная диагностика заболевания включает микроскопию мазка крови, морфобиохимиче-ское исследование крови, данные ЭКГ и эхографии. По результатам гельминтологического вскрытия, а также им-мунохроматографических тестов выявлено 2 вида возбудителя заболевания: Dirofilaria immitis и Dirofilaria repens.
Ключевые слова: дирофиляриоз, служебные собаки, антропозооноз, кровь, комары, человек, микрофилярии, Dirofilaria mmitis, Dirofilaria repens.
EPISEOLOGY AND DIAGNOSTICS OF DYROFILARIOSIS IN DOGS IN THE KIROV REGION
Byakova O. V., Candidate of Biological Sciences, Associate Professor; Pilip L. V., Candidate of Veterinary Sciences, Associate Professor; Vyatka State Agricultural Academy
Anthropozoonosis disease dirofila-rwsis is officially registered in the Kirov region since 2013. The source of zoonosis in the synanthropic focus is dogs. Extensiveness of infestation in the period from 2013 to 2017 in service dogs and animals of the private sector averaged 18,12% and 9,2%, respectively. Intravital laboratory diagnosis of the disease includes microscopy of the blood smear, morphobiochemical analysis of blood, ECG analysis and echography. According to the results of helminthological autopsy and immunochromatographic tests two types of pathogens were identified: Dirofilaria immitis and Dirofila-ria repens.
Key words: dirofilariоsis, service dogs, anthropozoonosis, blood, mosquitoes, human, microfilaria, Dirofilaria immitis, Dirofilaria repens.
Введение. Статистика по некоторым паразитарным болезням не отражает истинного состояния проблемы. Случаи выявления дирофиляриоза у собак в ветеринарных клиниках единичны и спонтанны. Истинная картина заболеваемости людей дирофиляриозом неизвестна, так как не ведется ее официальная регистрация. Вследствие недостаточной информированности врачей диро-филяриоз проходит под различными диагнозами непаразитарной этиологии.
156
С 2003 года дирофиляриоз впервые включен в СанПиН 3.2.1333-03 «Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации».
До 2013 года в ветеринарной отчетности по Кировской области не регистрировался дирофиляриоз у собак. Однако случаи заражения человека диро-филяриозом регистрировались ежегодно с 2008 года [1; 3]. Заражение заболевших происходило на территории области через укусы кровососущих комаров в лесу, на садоводческих участках, при этом заболевшие дирофиляриозом не использовали репеллентные средства для отпугивания кровососущих насекомых. Возникла необходимость в обследовании собак как потенциальных источников антропозоонозного заболевания - дирофиляриоза.
На сегодняшний день можно отметить, что дирофиляриоз имеет всё более широкий ареал распространения. Он охватывает территорию 53 субъектов РФ, благоприятных для заражения человека [5]. Характерное для южных регионов заболевание распространяется в северные широты. Этому способствуют изменение климата, миграции диких плотоядных, транспортировка домашних и служебных собак, а также комары - переносчики и промежуточные хозяева ди-рофиляриоза. Проблема распространения дирофиляриоза обусловлена широкой циркуляцией возбудителя в природной среде, отсутствием надлежащих мер по выявлению и дегельминтизации зараженных собак - облигатных дефинитивных хозяев, а также бессимптомностью и атипичностью течения заболевания [1; 5].
Целью нашей работы было исследование служебных собак и собак частного сектора для определения эпизоотологической ситуации по дирофиляри-озу в Кировской области, а также анализ данных Роспотребнадзора и ветеринарной статистики.
Материал и методы исследований. На протяжении пяти лет выполнялись научные исследования по внутреннему гранту Вятской ГСХА по диагностике дирофиляриоза в Кировской области. С февраля 2013 года по ноябрь 2017 года исследованию на зооноз было подвергнуто 614 служебных собак и 109 животных частного сектора. Прижизненный диагноз ставили по результатам клинической картины и данных сбора анамнеза, а также лабораторных исследований. Кровь у собак брали в утренние часы из вены сафена. Для обнаружения живых микрофилярий кровь центрифугировали с дистиллированной водой с последующей микроскопией мазков крови [6]. Для диагностики сердечной формы дирофиляриоза применяли коммерческие иммунохроматографические тесты, использовали электрокардиографию, эхокардиографию. Проводили морфобиохимические исследования крови интактных и зараженных собак. Для постановки посмертного диагноза использовали полное гельминтологическое вскрытие по методике А. К. Скрябина (1928). За период исследований полному гельминтологическому вскрытию было подвергнуто 6 собак (5 кобелей и 1 сука). Дополнительно проводили анализ отчётов Роспотребнадзора и управления ветеринарии Кировской области с 2000 года.
157
Результаты и обсуждение. По данным Роспотребнадзора, в 2008 году официально зарегистрирован дирофиляриоз у человека. С 2008 по 2011 годы дирофиляриоз в Кировской области зарегистрирован у 9 человек. Из всех зарегистрированных случаев 57 % приходилось на «глазной» дирофиляриоз, 29 % -с локализацией гельминта в области головы (лобная и волосистая часть головы) и 14 % случаев - в области коленного сустава. Во всех случаях при оперативном лечении были извлечены нематоды Dirofilaria repens. Заражение заболевших происходило на территории Кировской области через укусы кровососущих комаров.
По данным управления ветеринарии Кировской области, за 2009-2010 годы при проведении ветеринарно-санитарной экспертизы туш диких животных выявлено 9 случаев поражения мяса медведей дирофиляриозом. В природной среде дирофиляриоз зарегистрирован у бурых медведей и вызывается нематодой Dirofilaria ursi (Yamaguti, 1941). В 2009-2012 гг. у всех исследованных медведей (100 %) обнаружены нематоды D. ursi [1].
В 2013 году обследованию на дирофиляриоз была подвергнута 131 служебная собака. Микрофилярии в крови выявлены у 40 животных различного породного состава: 4 лабрадора, 1 ротвейлер и 35 немецких овчарок. Экстенсивность инвазии (ЭИ) составила 30,5 %, интенсивность инвазии (ИИ) находилась в пределах от 3 до 1466 личинок в 1 мл крови.
В 2014 году обследованию на дирофиляриоз подвергнуто 110 служебных собак. Микрофилярии в крови выявлены у 28 животных, из них 1 ротвейлер, 3 лабрадора, 24 немецкие овчарки. ЭИ составила 25,5 %, ИИ находилась в среднем 158,4±43,1 экз/мл крови.
В 2015 году 98 служебных собак обследовано на дирофиляриоз. По результатам исследований микрофиляриемия выявлена у 11 собак, исключительно у немецких овчарок. Экстенсивность инвазии зоонозом составила 11,2%. Интенсивность инвазии находилась в пределах от 1 до 255 личинок в 1 мл крови, в среднем 50,8±22,7 экз/мл крови. Из числа больных собак две выезжали в служебные командировки в южные регионы РФ.
При первичном исследовании крови в 2016 году из 145 обследованных служебных собак личинки дирофилярий (микрофилярии) в крови выявлены у 15 животных, что составляет 10,3 %. Интенсивность инвазии зарегистрирована в пределах от 1 до 120 личинок в 1 мл крови. Микрофилярии в крови выявлены у 1 шелти, остальные немецкие овчарки. 1 немецкая овчарка для разведения приобретена из Словакии. Из числа больных собак две выезжали в служебные командировки в южные регионы РФ.
В результате исследований, проведенных в 2017 году, из 130 служебных собак микрофилярии в крови выявлены у 17 животных, при этом экстенсивность инвазии дирофиляриозом составила 13,1 %. Интенсивность инвазии находилась в пределах от 1 до 1020 личинок в 1 мл крови, в среднем 201,5±102,7 экз/мл крови. Микрофиляриемия выявлена у одной шелти в возрасте 3-х лет и 16 немецких овчарок в возрасте от 2 до 10 лет.
158
Заражение служебных собак происходило преимущественно на территории Кировской области, а также благодаря выездному характеру работы животных как по территории, так и вне границ РФ. Так, из числа больных собак 22 % животных выезжало в служебные командировки в южные регионы: Сочи, Северный Кавказ, являющиеся неблагополучными по данному заболеванию, а остальные животные территорию Кировской области не покидали, были приобретены в частном секторе или их передвижения не известны. Также зарегистрирован случай микрофиляриемии у собаки, привезенной из Словакии.
40,00% 30,00% 20,00% 10,00% 0,00%
Ж,
2013 г. I 2014 г.
2015 г.
2016 г.
2017 г.
Собаки
Рисунок 1. Экстенсивность инвазии служебных собак дирофиляриозом с 2013 по 2017 г.
Можно отметить тенденцию к снижению частоты возникновения дирофи-ляриоза, связанную, по-видимому, со своевременной диагностикой заболевания, эффективным лечением животных и информированностью населения.
Анализируя результаты исследования собак частного сектора с 2013 по 2017 гг, отметим, что из 109 собак инвазированными оказались 10 животных, экстенсивность инвазии составила 9,2 %, при этом 3 собаки содержатся в вольере на открытом воздухе, а 7 - в городских квартирах. Интенсивность инвазии находилась в пределах от 14 до 4100 экз. в 1 мл крови.
Более высокая степень зараженности дирофиляриозом служебных собак (18,12 %) по сравнению с животными частного сектора (9,2 %) объясняется содержанием первых на открытом воздухе (возможность переноса возбудителя комарами) и большой концентрацией животных на территории питомника.
Клинические признаки дирофиляриоза не специфичны, заболевание протекает бессимптомно. Прижизненный диагноз на подкожную форму дирофи-ляриоза ставяли по результатам обнаружения микрофилярий в крови, клинического осмотра животного, данных анамнеза. У собак заболевнаие имело нетипичное проявление клинической картины. Чаще всего у животных регистрировалась худоба и периодическая хромота задних конечностей, дерматиты, пододерматиты, «мигрирующие уплотнения» под кожей головы, у основания хвоста, на грудной стенке. Для прижизненного лабораторного обнаружения микрофилярий предложено несколько методик (метод нативной капли, метод Кнотта), однако, по результатам наших исследований, метод с дистиллирован-
ной водой путем обнаружения живых микрофилярий в осадочной жидкости [1; 6] является простым и наиболее эффективным в диагностике заболевания.
Рисунок 2. Микрофилярия среди разрушенных форменных элементов крови, увеличение 10х40 (фото О. В. Бяковой)
Сердечная форма дирофиляриоза непатогномонична и проявляется худобой, утомляемостью, одышкой, смертельным исходом [3]. При аускультации чаще всего изменений сердечной деятельности не выявляется. Однако ЭКГ и электрокардиография показывают нарушение сердечной деятельности. На рисунке 3 представлена электрокардиограмма собаки Тимура с сердечной формой дирофиляриоза: электрическая ось не смещена, неполная атрио-вентральная блокада II степени, амплитуда зубцов в пределах нормы, удлинение предсердно-желудочковой проводимости.
Рисунок 3. ЭКГ немецкой овчарки с сердечной формой дирофиляриоза (фото О. В. Бяковой)
При проведении эхокардиографии у собаки с подозрением на сердечный дирофиляриоз выявлена незначительная дилятация правого желудочка (рис. 4).
Облегчают постановку диагноза специфические методы, основанные на выявлении в крови собак антигенов паразита или антител к ним [4]. Коммерческие
иммуноферментные экспресс-тесты позволяют легко выявлять антигены D. тт^ и широко используются в лабораториях ветеринарных клиник (рис. 5).
Рисунок 4. Дилятация правого желудочка у собаки с сердечной формой дирофиляриоза (фото О. В. Бяковой)
Рисунок 5. Положительный иммунохроматографический тест на обнаружение антигенов D. шипШн у собаки Тимура (фото О. В. Бяковой)
Морфобиохимические показатели крови являются дополнительными исследованиями при диагностике дирофиляриоза. По нашим данным, у собак с микрофиля-риемией отмечено увеличение количества гемоглобина, эозинофилов и нейтрофи-лов, однако полученные значения находились в пределах физиологических границ. Среди биохимических показателей у зараженных животных регистрировалось более высокое содержание показателей АЛТ и АСТ: соответственно 54,9+8,1 ед./л и 25,4+1,1 ед./л против 19,5+4,4 и 10,9+1,1 у незараженных собак [2].
Посмертно дирофиляриоз устанавливали на основании обнаружения имаго в местах их локализации. Местами локализации D. гере^, вызывающим подкожную форму дирофиляриоза, являлись подкожная клетчатка области головы, шеи, лопатко-плечевого сочленения, задних конечностей, область вдоль позвоночника, семенники (рис. 6).
161
Рисунок 6. Нематоды D. герепз в подкожной клетчатке собаки (фото О. В. Бяковой)
Местами локализации D. тт^, вызывающими сердечную форму диро-филяриоза, являлись правые отделы сердца собаки (рис. 7).
Рисунок 7. Нематода D. ¡пипки в правом отделе сердца немецкой овчарки Тимура (фото О. В. Бяковой)
Выводы. 1. Источником антропозоонозного заболевания в синантропном очаге являются собаки. Экстенсивность инвазии дирофиляриозом у служебных собак в среднем составила 18,12 % и 9,2 % у животных частного сектора (2013-2017 гг.). Интенсивность инвазии, регистрируемая у собак частного сектора, была выше, чем у служебных, и составляла в среднем соответственно 954,5+583,1 против 188,53+66,65 личинок в 1 мл крови.
2. Дирофиляриоз зарегистрирован у собак всех возрастов с наибольшей частотой выявления у животных породы немецкая овчарка 3-8 лет, т. е. в период их максимального использования на службе.
3. В результате полного гельминтологического вскрытия у двух собак выявлена нематода D. тт^, у четырех собак - D. гере^.
4. Эффективным прижизненным методом диагностики дирофиляриоза является метод с дистиллированной водой с последующей микроскопией живых микрофилярий в осадочной жидкости. Для уточнения вида возбудителя ф. тт^) рекомендуются иммунохроматографические экспресс-тесты, а также дополнительные методы: электрокардиография и эхокардиография.
162
Список использованных источников:
1. Бякова О. В. Дирофиляриоз собак в Кировской области / О. В. Бякова, О. В. Масленникова, С. А. Ермолина // Фундаментальные исследования. -2014. - № 11. - С. 1297-1300.
2. Бякова О. В. Морфологические и биохимические показатели крови при дирофиляриозе плотоядных / О. В. Бякова, Л. В. Пилип, А. Ф. Сапожников // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями. - М., 2016. - Выпуск 17. - С. 49-53.
3. Бякова О. В. Сердечный ди-рофиляриоз у собак в Кировской области / О. В. Бякова, С. А. Ермолина, О. В. Масленникова, Л. В. Пилип // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями: Материалы докладов международной научной конференции. - М., 2017. - С. 81-84.
4. Пилип Л. В. Использование экспресс-теста для выявления антигенов D. 1тт^ / Л. В. Пилип, О. В. Бякова // Вестник совета молодых ученых Рязанского государственного агротехнологи-ческого университета имени П. А. Кос-тычева. - 2018. - № 1 (6) - С. 53-57.
5. Сергиев В. П. Дирофиляриоз человека в России / В. П. Сергиев, В. Г. Супряга, Н. Н. Дарченкова, Л. А. Жукова, Т. Н. Иванова // Российский паразитоло-гический журнал. - 2012. - № 4. - С. 60-64.
6. Ястреб В. Б. Дирофиляриоз собак и человека в Московском регионе / В. Б. Ястреб // Шнауцер сегодня. -2006. - № 2. - С. 23-25.
References:
1. Byakova O. V. Dirofilariosis of dogs in the Kirov region / O. V. Byakova, O. V. Maslennikova, S. A. Ermolina // Fundamental research. - № 11. - 2014. -P. 1297-1300.
2. Byakova O. V. Morphological and biochemical parameters of blood during carnivorous dirofilariosis / O. V. Byako-va, L.V. Pilip, A.F. Sapozhnikov // Theory and practice of fighting parasitic diseases. - M., 2016. - Issue 17. - P. 49-53.
3. Byakova O. V. Cardiac dirofilari-osis in dogs in the Kirov region / O. V. Bya-kova, S. A. Ermolina, O. V. Maslenni-kova, L. V. Pilip // Theory and practice of combating parasitic diseases: Proceedings of the International Scientific Conference. - M., 2017. - P. 81-84.
4. Pilip L. V. Using an express test to identify the antigens D. Immitis / L. V. Pilip, O. V. Byakova // Bulletin of the Council of Young Scientists of the Ryazan State Agrotechnological University named after P. A. Kostycheva. - № 1 (6) -2018. - P. 53-57.
5. Sergiev V. P. Human dirofilariosis in Russia / V. P. Sergiev, V. G. Supryaga, N. N. Darchenkova, L. A. Zhukova, TN. Ivanova // Russian Parasitological Journal. - № 4. - 2012. - P. 60-64.
6. Yastreb V. B. Dirofilariosis of dogs and humans in the Moscow region / V. B. Hawk // Schnauzer today. - 2006. -№ 2. - P. 23-25.
Сведения об авторах: Information about the authors:
Бякова Ольга Викторовна - кан- Byakova Olga Viktorovna - Candi-дидат биологических наук, доцент date of Biological Sciences, Associate кафедры зоогигиены, физиологии и Professor of the Department of Zooghy-
163
биохимии ФГБОУ ВО «Вятская государственная сельскохозяйственная академия», e-mail: aib05@mail.ru, 610000, г. Киров, Октябрьский проспект, 133, ФГБОУ ВО «Вятская ГСХА».
Пилип Лариса Валентиновна -кандидат биологических наук, доцент кафедры зоогигиены, физиологии и биохимии ФГБОУ ВО «Вятская государственная сельскохозяйственная академия», e-mail: pilip_larisa@mail.ru, 610000, г. Киров, Октябрьский проспект, 133, «ФГБОУ ВО Вятская ГСХА».
giene, Physiology and Biochemistry, FGBOU VO «Vyatka State Agricultural Academy», e-mail: aib05@mail.ru, 610000, Kirov, Oktyabrsky Prospekt 133, FGBOU VO Vyatka State Agricultural Academy.
Pilip Larissa Valentinovna - Candidate of Biological Sciences, Associate Professor of the Department of Zooghy-giene, Physiology and Biochemistry FGBOU VO «Vyatka State Agricultural Academy», e-mail: pilip_larisa@mail.ru, 610000, Kirov, Oktyabrsky Prospekt 133, FGBOU VO Vyatka State Agricultural Academy.
164
