CC BY
104
биологических исследованиях. - Л.: Медицина, 1973. - 140 с.
5. Иванов Д.Е., Пучиньян Д.М. Нарушения функций печени при травматическом стрессе // Успехи физиологических наук. - 1998. - Т. 29, № 1. -С. 58-67.
6. Симоненков А.П., Федоров В.Д. Современная концепция стресса и адаптации с учетом новых данных о генезе тканевой гипоксии // Вестник Российской академии медицинских наук. - 2008. -№ 5. - С. 7-14.
7. Судаков К.В. Новые акценты классической концепции стресса // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 1997. - Т. 123, № 2. -С. 124-130.
8. Kato K. Effect of hepatocyte growth factor on the proliferation of intrasplenically transplanted hepatocytes
in rats // Biochemistry Biophysics Research Communications. - 1996. - Vol. 222, N 1. - P. 101-106.
9. Miller D.M., DeSilva D., Pickart L., Aust S.D. Effects of glycyl-histidyl-lysyl chelated Cu(II) on ferritin dependent lipid peroxidation // Advanced Experimental Medical Biology. - 1990. - Vol. 264, N 1. - P.79-84.
10. Shi E., JiangX., Wang L. et al. Intrathecal injection of hepatocyte growth factor gene-modified marrow stromal cells attenuates neurologic injury induced by transient spinal cord ischemia in rabbits // Anesthesiology. - 2010. - Vol 113, N 5. - P. 1109-1117.
11. Xue F., Zhang J.J., Xu L.M. et al. Protective effects of HGF-MSP chimer (metron factor-1) on liver ische-mia-reperfusion injury model // Journal of digestive Diseases. - 2010. - Vol. 11, N 5. - P. 299-305.
УДК 615.279.:616.381-007.274-092.9
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОТИВОСПАЕЧНОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ D-ПЕНИЦИЛЛАМИНА В СОЧЕТАНИИ С МЕЗОГЕЛЕМ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ СПОСОБАХ
ВВЕДЕНИЯ
© Лазаренко В.А., Липатов В.А., Ефременков А.М., Жуковский В.А., Булаткин А.А.,
Вербицкий Д.А., Григорьев Н.Н.
Кафедра хирургических болезней ФПО, кафедра оперативной хирургии и топографической анатомии Курского государственного медицинского университета, Курск
E-mail: drli@yandex.ru
Количество осложнений, связанных с образованием спаек, неуклонно растёт. Спаечный процесс брюшной полости может служить причиной хронических абдоминальных болей, женского бесплодия и кишечной непроходимости, существенно снижает качество жизни и повышает риск летальных осложнений. Несмотря на множество работ, посвящённых разработке средств профилактики спайкообразования, проблема внутрибрюшной адгезии остаётся нерешённой. В статье представлены результаты экспериментальных исследований, посвящённых изучению эффективности комплексообразующего вещества d-пеницилламина для профилактики послеоперационного спаечного процесса брюшной полости. D-пеницилламин использовали отдельно и в комбинации с барьерным средством Мезогель. Исследования проводились на крысах-самцах линии Вистар. Всем животным моделировали спаечный процесс путём травмы брюшины. Животным контрольной серии в брюшную полость вводили изотонический раствор хлорида натрия и Мезогель. В первой опытной серии изучали противоспаечный эффект d-пеницилламина при различных способах его введения. Во второй опытной серии оценивали профилактический эффект d-пеницилламина и Мезогеля. После вывода животных из эксперимента изучали макроморфологическую картину адгезивного процесса - выраженность спаек в баллах и площадь плоскостных сращений, а также проводилось гистологическое исследование, микроморфометрия с определением толщины коллагеновых волокон и степени зрелости соединительной ткани. Внутрибрюшное введение барьерного средства Мезогель с депонированным в нём d-пеницилламином достоверно в 3,5 раза снижает выраженность спаечного процесса брюшной полости по сравнение с моделью и в 1,1 раза по отношению к группе с применением только Мезогеля.
Ключевые слова: спайки, хирургия, модель, спаечный процесс, профилактика, брюшина, Мезогель, d-пеницилламин, имплант, полимер.
EXPERIMENTAL STUDY OF D-PENICILLAMINE TO PREVENT POSTOPERATIVE ADHESIONS
IN THE ABDOMINAL CAVITY Lazarenko V.A., Lipatov V.A., Efremenkov A.M., Zhukovsky V.A., Bulatkin A.A., Verbitsky D.A., Grigoryev N.N.
Department of Surgery FPE, Department of Operative Surgery & Topographic Anatomy of the Kursk State Medical University, Kursk The number of complications associated with the formation of adhesions is growing steadily. Abdominal adhesions can cause chronic abdominal pain, female infertility and intestinal obstruction, significantly reduces the quality of life, and increases the risk of fatal complications. Despite many studies devoted to the development of preventing adhesions, intraabdominal adhesion problem remains unsolved. The article presents the results of the experimental studies on the effectiveness of sequestering agent d-penicillamine to prevent postoperative adhesions in the abdominal cavity. D-penicillamine was used separately or in combination with a barrier means Mesogel®. The investigations were conducted in male Wistar rats. All animals were simulated adhesions by the standard peritoneal injury. Isotonic sodium chloride solution and Mesogel® were injected into the peritoneal cavity of animal controls. On withdrawing the animals from the experiment we studied the macromorphological picture of adhesive process - the severity of adhesions in terms of points and the area of planar adhesions, as well as the histological study - micromorphometry with determining the thickness of collagen fibers and maturity of the connective tissue was conducted. Intraabdominal implantation of the barrier means Mesogel® with d -penicillamine deposited therein significantly reduced the severity of adhesions of the abdominal cavity.
Keywords: adhesions, surgery, animal model, prevention, peritoneum, Mesogel, d-penicillamine, polymer.
Количество осложнений, связанных с образованием спаечных сращений после операций, травм и воспалительных процессов в брюшной полости, неуклонно растёт [10].
Спаечный процесс брюшной полости (СПБП) может служить причиной кишечной непроходи-
мости, хронической абдоминальной боли, женского бесплодия, а также симулировать клинические проявления других патологических процессов в брюшной полости, таких как холецистит, аппендицит, панкреатит и т.д. Изменённая анатомия оперированного живота при повторных опе-
рациях может приводить к повреждениям органов, утяжелению операционной травмы, значительному увеличению времени оперативного вмешательства, и, соответственно, операционноанестезиологического риска [6, 9].
Несмотря на множество работ, посвящённых патогенетическим аспектам спайкообразования, разработке мер его профилактики, проблема вну-трибрюшной адгезии остаётся нерешённой [10].
В связи с тем, что основным этиологическим фактором спайкообразования считается повреждение брюшины, главное место в комплексе профилактических мероприятий отводится бережному отношению к органам и тканям, применению малоинвазивных технологий. Однако сама лапаротомия и минимальные манипуляции уже являются фактором, способным вызвать внутри-брюшную адгезию. Активное использование малоинвазивных доступов и лапароскопических методов не избавляет от возможности образования спаек [2, 13]. В связи с этим разработка и внедрение в практику дополнительных мер и средств, направленных на борьбу со спайкообразованием, является актуальной задачей.
В настоящее время наиболее перспективным направлением многие авторы считают применение так называемых «барьеров», которые разобщают раневые поверхности на время их ремезо-телизации, препятствуют консолидации и склеиванию фибрином. Барьерные средства находят всё более широкое применение в клинической практике, выпускаются в основном в виде растворов, гелей и мембран [4, 5, 8, 12].
Существенную роль в нарушении состояния местного гомеостаза при травмах является увеличение количества свободного ионизированного кальция в брюшной полости, который катализирует активацию тромбина, способствующего переводу растворимого фибриногена в нерастворимый фибрин, тем самым формируя основу спаечного сращения. В литературе существуют данные о положительном эффекте применения комплексообразующих препаратов (ЭДТА, убихинон, ио-дит калия) для профилактики спайкообразования
[1].
Целью исследования явилось в условиях эксперимента изучить эффективность совместного применения препарата Купренил® (d-пеницил-ламин) и противоспаечного рассасывающегося средства Мезогель, обладающего барьерными свойствами.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
D-пеницилламин - действующее вещество препарата Купренил® обладает высокой ком-
плексообразующей активностью в отношении ионов металлов, главным образом кальция, меди, ртути, свинца, подавляет синтез коллагена, снижает уровень патологических макроглобулинов, имеет иммуномодулирующие эффекты. Применяется при болезни Вильсона-Коновалова, интоксикации медью, свинцом, ревматоидном артрите, склеродермии и др.
Мезогель, единственный отечественный препарат барьерного действия, представляет собой рассасывающийся гель натриевой соли кар-боксиметилцелюллозы, производства ООО «Лин-текс» (Санкт-Петербург). Обладает высокой биологической инертностью, биосовместимостью, биорастворимостью.
Исследования проводились на крысах-самцах линии Вистар с массой тела 200-250 г, с соблюдением всех принципов, изложенных в конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных целей (г. Страсбург, Франция, 1986).
Животные были разделены на 3 экспериментальные серии: одна контрольная и две опытные, причём в первой опытной серии d-пеницилламин применялся как самостоятельное средство или в комбинации с изотоническим раствором хлорида натрия, а во второй опытной серии d-пеницилламин использовался в комбинации с Мезогелем (распределение животных по экспериментальным сериям представлено в табл. 1). Мезогель и изотонический раствор хлорида натрия вводили в дозе 10,7 мл/кг, что согласно данным G.S. DiZerega, J.D. Campeau (2001), является необходимым минимальным количеством, чтобы покрыть всю поверхность брюшины у крыс
[11]. Крысы из всех серий содержались в одинаковых условиях на стандартном питьевом и пищевом режиме.
Всем животным в стерильных условиях под эфирным наркозом производилась срединная ла-паротомия и моделирование перитонеальной травмы путём скарификации слепой кишки до появления «кровавой росы» и десерозирования правой вентральной стенки площадью 1х1 см, отступя на 1 см от края лапаротомной раны, после предварительного гидравлического препарирования брюшины изотоническим раствором хлорида натрия [3].
Контрольная серия была разделена на 3 экспериментальные группы по 10 животных на каждый срок выведения из опыта. Животным первой группы производилось только моделирование СПБП, а во второй и третьей группах однократно интраоперационно в брюшную полость вводили изотонический раствор хлорида натрия и Мезо-гель соответственно, в количестве 10,7 мл/кг.
Таблица 1
Распределение экспериментальны животных по сериям
Серия Экспериментальная группа Количество животных
контрольная модель 20
модель + 0,9% NaCl в брюшную полость 20
модель + Мезогель в брюшную полость 2G
1 опытная модель + d-пеницилламин внутрижелудочно 2G
модель + 0,9% NaCl в брюшную полость + d-пеницилламин внутрижелудочно 2G
модель + 0,9% NaCl в брюшную полость с d-пеницилламином 2G
2 опытная модель + d-пеницилламин внутрижелудочно + Мезогель в брюшную полость 2G
модель + Мезогель в брюшную полость с d-пеницилламином 2G
В первой опытной серии изучали противоспа-ечный эффект d-пеницилламина при различных способах его введения. В первой группе препарат вводили через зонд в разовой дозе 160 мг/кг на изотоническом растворе хлорида натрия ежедневно, однократно. Дозу препарата определяли соответственно инструкции по его применению в перерасчёте на площадь поверхности тела (Frelreich E.J. 1966). Животным второй группы препарат применяли аналогично, вместе с этим интраоперационно однократно в брюшную полость вводили изотонический раствор хлорида натрия в количестве 10,7 мл/кг. В третьей группе d-пеницилламин применяли интраоперационно в разовой дозе 160 мг/кг, растворённый в изотоническом растворе хлорида натрия в количестве 10,7 мл/кг.
Во второй опытной серии оценивали профилактический эффект d-пеницилламина и Мезогеля. Животным первой группы однократно интра-операционно в брюшную полость вводили Мезо-гель в количестве 10,7 мл/кг, а затем в послеоперационном периоде ежедневно однократно внут-рижелудочно применяли d-пеницилламин на изотоническом растворе хлорида натрия в разовой дозе 160 мг/кг. Во второй группе d-пеницилламин вводили однократно, интраоперационно интрааб-доминально в такой же дозировке, депонированный в Мезогеле в объёме 10,7 мл/кг.
После оперативного вмешательства брюшную полость зашивали наглухо нитью лавсан 5/0. Животных соответственно серии выводили из эксперимента через 7 и 14 суток путем передозировки эфирного наркоза, производили патологоанатомическое исследование. Вскрывали брюшную полость. Визуально оценивали состояние участка вентральной стенки в месте моделирования травмы и слепой кишки, проводили оценку выраженности СПБП, фотографирование. Для
оценки выраженности СПБП использовали методику семантического дифференциала, которая заключается в интегральной оценке выраженности СПБП путём оцифровывания отдельных характеристик адгезивного процесса с учётом их коэффициента значимости (распространённость, деформация органов и выраженность отдельных видов спаек). Определяли площадь плоскостных сращений, длину окружности измеряли нитью, а затем вычисляли площадь гипотетического круга [4].
Слепую кишку с подпаянными тканями изымали для гистологического исследования. Морфологический материал фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина. Затем производили его гистологическое исследование по общепринятой методике с заливкой препаратов в парафин, окраской срезов гематоксилин-эозином, пикро-сириус красным, и по Маллори в модификации Гальденгейна. Препараты изучали посредством световой микроскопии. Проводили микрофотографирование гистологических препаратов. С целью изучения морфометрических показателей определяли степень зрелости соединительной ткани, разработанным нами способом (положительное решение формальной экспертизы по заявке на выдачу Патента РФ № 2010131096 от 28 июля 2010 года). Кроме этого, измеряли толщину коллагеновых волокон в образованных спайках, а там где плоскостных сращений не формировалось изучали толщину брюшины.
Полученные данные обработаны статистически с помощью программы Biostatistics 4.03, инструментов табличного процессора Microsoft Excel (Office XP). Вычислялись средние величины количественных показателей, средние ошибки средних величин. Для обработки данных использовались однофакторный дисперсионный анализ и критерий Манна-Уитни. Достоверность разли-
чий средних определяли по показателю р (существенным считали, если этот показатель был менее или равен 0,05).
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
У животных контрольной группы, где не проводилось никаких профилактических мероприятий, выраженность СПБП была наибольшей: отмечались спайки практически во всех областях брюшной полости, деформация слепой кишки, выраженный адгезивный процесс в месте перитонеальной травмы и послеоперационного рубца (рис. 1). Выраженность СПБП в баллах методом семантического дифференциала в этой группе составляла 2,68 на сроке 7 суток и 2,46 на сроке 14 суток. У животных, которым после операции в брюшную полость вводили изотонический раствор хлорида натрия, степень адгезии была несколько меньше и составляла 2,01 и 2,0 балла на
разных сроках. В группе с применением Мезогеля макроморфологическая картина патологических изменений в брюшной полости значительно отличалась от предыдущих групп. Адгезивный процесс захватывал не более 2 анатомических областей, место перитонеального дефекта во всех случаях представляло собой белесоватый рубец неправильной формы и было свободно от спаек. В нескольких случаях имело место подпаивание сальника к слепой кишке. Выраженность СПБП в баллах в этой группе составила 0,84 балла на 7-е сутки и 0,13 на 14 сутки. В контрольной серии показатели выраженности СПБП представлены в табл. 2.
Среднее значение площади плоскостных сращений в группе модели было наибольшим и составило 21,35 мм2 на сроке 7 суток и 19,92 мм2 на сроке 14 суток. В группе, где животным производилось введение изотонического раствора хлорида натрия площадь плоскостных спаек со-
Рис. 1 . Макроморфологическая картина брюшной полости у животного контрольной группы с моделированным СПБП без использования профилактических средств.
Таблица 2
Показатели СПБП у животных контрольной серии
Экспериментальная группа 7-е сутки 14-е сутки
Выражен- ность СПБП Р Площадь плоскостных спаек (мм2) Р Выражен- ность СПБП Р Площадь плоскостных спаек (мм2) Р
Модель 2,68±0,01 — 21,35±1,28 — 2,46±0,28 — 19,92± 1,34 —
Модель + 0,9% №С1 в брюшную полось 2,01±0,18 < 0,05 17,28±0,87 < 0,05 2,0±0,17 < 0,05 14,18±1,54 < 0,05
Модель + Мезогель в брюшную полость 0,84±0,23 < 0,05 Спаек нет -— 0,13±0,31 < 0,05 Спаек нет -—
Применение: р - достоверность статистических различий средних по сравнению с моделью.
ставила 17,28 и 14,18 мм2 соответственно. В группе с применением Мезогеля образования плоскостных спаек не отмечалось.
В первой опытной серии выраженность СПБП оказалась меньше, чем в группе модели, где после моделирования перитонеальной травмы профилактических мероприятий не проводилось (табл. 3). При зондовом введении d-пеницил-ламина, спайки были распространены, захватывали две и более анатомических областей, деформация слепой кишки встречалась практически у всех животных, место перитонеальной травмы только в одном случае оказалось свободным от спаек. Выраженность внутрибрюшной адгезии составила 1,58 балла на 7-е сутки и 1,90 на 14-е. Несколько ниже распространённость сращений зарегистрирована в группе с однократным интра-операционным введением изотонического раствора хлорида натрия и энтеральным применением d-пеницилламина. При аутопсии также встречались множественные спайки в нескольких анатомических областях, вздутие и деформация слепой кишки, подпаивание кишечных петель и сальника к месту перитонеального дефекта и послеоперационному рубцу (рис. 1). СПБП в данной группе оценен в 1,47 и 1,45 балла на соответствующих сроках выведения. Еще большее существенное снижение выраженности СПБП наблюдалось при однократном интраоперационном введении d-пеницилламина, депонированного в изотоническом растворе хлорида натрия: 1,26 и 1,33 балла соответственно.
Средняя площадь плоскостных сращений в группе с внутрижелудочным введением d-пени-цилламина оказалась 10,73 и 8,98 мм2 на 7-е и 14е сутки соответственно. У животных, которым после моделирования СПБП интраабдоминально
Показатели СПБП у животных с
вводили изотонический раствор хлорида натрия и в послеоперационном периоде через зонд вводили ^пеницилламин, площадь плоскостных спаек составила 5,42 и 4,76 мм2. В группе с применением d-пеницилламина растворённого в изотоническом растворе хлорида натрия среднее значение плоскостных сращений было несколько меньше: 2,48 и 2,02 мм2.
Во второй опытной серии комбинация внут-рибрюшного введения Мезогеля с различными путями введения d-пеницилламина позволила значительно уменьшить интенсивность спайкооб-разования (табл. 4). В группе с применением d-пеницилламина через зонд у животных слепая кишка незначительно деформирована, место травмы вентральной стенки у всех животных свободно от сращений. В одном случае к месту послеоперационного рубца припаялся сальник. Выраженность СПБП в баллах составила 0,80 и 0,88 на 7-е и 14-е сутки. В группе животных, которым производилось однократное интраоперационное введение d-пеницилламина депонированного в геле, наблюдалась самая низкая выраженность СПБП (рис. 2). При аутопсии имелась незначительная деформация слепой кишки, поверхность ее, как и место перитонеальной травмы было свободным от сращений и представляло собой едва заметный белесоватый рубец. СПБП в баллах составил 0,75 и 0,77 соответственно срокам выведения. В группах с совместным использованием Мезогеля и d-пеницилламина плоскостных сращений не регистрировалось.
При гистологическом исследовании у животных, которым моделировали СПБП, на 7-е сутки морфологическую организацию новообразованной соединительной ткани составляла зрелая кол-
Таблица 3
применением d-пеницилламина
Экспериментальная группа 7-е сутки 14-е сутки
Выражен- ность СПБП Р Площадь плоскостных спаек (мм2) Р Выражен- ность СПБП Р Площадь плоскостных спаек (мм2) Р
Модель + d-пеницилламин внутрижелудочно 1,58±0,21 -— 10,73±0,82 -— 1,90±0,11 -— 8,98±0.95 -—
Модель + 0,9% №С1 в брюшную полость + ^пеницилламин внутрижелудочно 1,47±0,11 > 0,05 5,42±0,48 < 0,05 1,45±0,17 < 0,05 4,76±0.34 < 0,05
Модель + 0,9% №С1 в брюшную полость с ^пеницилламином 1,26±0,14 < 0,05 2,48±0,26 > 0,05 1,33±0,31 < 0,05 2,02±0,25 > 0,05
Примечание: р - достоверность статистических различий средних величин по сравнению с группой: модель + (1-пеницилламин внутрижелудочно.
Таблица 4
________Показатели СПБП у животных с применением d-пеницилламина в комбинации с Мезогелем
Экспериментальная группа 7-е сутки 14-е сутки
Выраженность СПБП p Выраженность СПБП p
Модель + d-пеницилламин внутрижелудочно + Мезогель® в брюшную полость 0,80±0,30 -— 0,88±0,23 -—
Модель + Мезо-гель® с d-пеницилламином в брюшную полость 0,75±0,07 > 0,05 0,77±0,09 > 0,05
Примечание: p - достоверность статистических различий средних величин выраженности СПБП по сравнению с группой: модель + d-пеницилламин внутрижелудочно + Мезогель в брюшную полость.
Рис. 2. Макроморфологическая картина брюшной полости у животного опытной группы с профилактикой СПБП комбинацией имплантации Мезогеля с депонированном в нем ^пеницилламином.
лагеновая сеть с незначительным количеством эластических волокон. Данное явление отмечено и у париетального края спаек. К 14-м суткам сращения имеют хорошо выраженную сосудистую сеть, которая уже имеет упорядоченное строение. Клеточный состав скуден, представлен фибробла-стами, фиброцитами, гистиоцитами, единичными клетками лейкоцитарного ряда и лимфоцитами (рис. 3). В препаратах животных, у которых сращений не сформировалось, париетальная и висцеральная брюшина утолщена, фиброзно изменена, определяется дистрофия мышечного слоя кишечника с явлениями дезинтеграции мышечных волокон. В опытной серии брюшина, по своей гистоструктуре качественно не отличалась от ин-тактной. Лишь в отдельных препаратах определя-
лись очаговые поля фиброза, существенных признаков воспаления не отмечено (рис. 4).
Результаты микроморфометрии представлены в табл. 5 и 6.
Из табл. 5 видно, что толщина коллагеновых волокон в группе модели была наибольшей и составила 84,95 на сроке 7 суток и 56,42 на сроке 14 суток. Введение в брюшную полость изотонического раствора хлорида натрия вызвало уменьшение данного показателя до 49,65 и 41,66 на соответствующих сроках. Интраоперационное применение ^пеницилламина, растворённого в изотоническом растворе хлорида натрия, позволило уменьшить толщину коллагеновых волокон в спайках до 39,65 на 7-е и 34,11 на 14-е сутки. При введении в брюшную полость барьерного средства Мезогель образования плоскостных
Рис. 3. Гистоструктура плоскостной спайки слепой кишки и вентральной стенки у животного контрольной группы с моделированным СПБП без использования профилактических средств. Окр. Г+Э, ув. 8х8х8.
Рис. 4. Восстановившаяся висцеральная брюшина стенки слепой кишки у животного опытной группы с профилактикой СПБП комбинацией имплантации Мезогеля с депонированном в нем ^пеницилламином. Окр. по Маллори, ув. 8х8х20.
сращений не наблюдалось, и мы оценивали толщину брюшины в месте перитонеальной травмы (табл. 6). Данный показатель в группе с применением Мезогеля составил 34,58 на 7-е сутки и 28,55 на 14-е. Применение ^пеницилламина позволило уменьшить толщину травмированного участка брюшины до 28,25 и 23,93±0,20 на соответствующие сроки. Наименьшая толщина брюшины наблюдалась при совместном внутри-брюшном введении Мезогеля и ^пеницилламина и составила 24,96 и 20,15 на 7-е и 14-е сутки соответственно.
Проведённое нами исследование посвящено одной из актуальной проблем современной хирургии - профилактике послеоперационного спаечного процесса брюшной полости. Его результаты подтвердили состоятельность барьерной концепции и рациональность использования техно-
логий, на ней основанных, в комплексе противо-спаечных лечебных и профилактических мероприятий. Даже внутрибрюшное введение изотонического раствора хлорида натрия с целью формирования контрольной группы достоверно снизило выраженность СПБП по сравнению с моделью на 25%. Применение d-пеницилламина в раннем послеоперационном периоде в эксперименте на животных достоверно уменьшает спай-кообразование, причём внутрибрюшинное его введение оказывается на 15% более эффективным. Это можно объяснить одномоментным и значительным снижением уровня ионизированного кальция в брюшной полости и, следовательно, меньшей катализирующей способностью в реакции активизации тромбина. Вероятно, снижение уровня ионизированного кальция в брюшной полости при введении d-пеницилламина через
Таблица 5
Толщины коллагеновых волокон в ткани спаек и степень зрелости соединительной ткани у животных экспериментальных групп
Экспериментальная группа 7-е сутки 14-е сутки
Толщина коллагеновых волокон p Степень зрелости p Толщина коллагеновых волокон p Степень зрело- сти p
модель 84,95±0,47 — 4,57 — 56,42±0,04 — 4,75 —
Модель + 0,9% NaCl в брюшную полость 57,69±1,03 < 0,05 4,33 > 0,05 52,63±0,32 < 0,05 4,29 > 0,05
Модель + d-пени-цилламин внутрижелудочно 49,65±1,05 < 0,05 3,5 < 0,05 41,66±1,12 < 0,05 3,57 < 0,05
Модель + 0,9% NaCl в брюшную полость + d-пени-цилламин внутри-желудочно 43,87±0,18 < 0,05 3,29 < 0,05 37,84±0,09 < 0,05 3,14 < 0,05
Модель + 0,9% NaCl с d-пени-цилламином в брюшную полость 39,65±0,14 < 0,05 2,5 < 0,05 34,11±0,23 < 0,05 2,57 < 0,05
Примечание: р - достоверность статистических различий средних по сравнению с моделью.
Таблица 6
Толщина брюшины в группах без образования плоскостных сращений
Экспериментальная группа 7-е сутки 14-е сутки
Толщина брюшины p Толщина брюшины p
Модель + Мезо-гель в брюшную полость 34,58±1,25 < 0,05 28,55±0,24 < 0,05
Модель + d-пени-цилламин внутрижелудочно + Ме-зогель в брюшную полость 28,25±0,84 < 0,05 23,93±0,20 > 0,05
Модель + Мезо-гель с d-пеницил-ламином в брюшную полость 24,96±0,12 > 0,05 20,15±0,06 < 0,05
зонд, происходит медленно и недостаточно эффективно снижает его каталитическую способность. Интраоперационное введение Мезогеля достоверно уменьшает выраженность СПБП в сравнении с группой модели в 3,2 раза. Комплексное применение d-пеницилламина и Мезо-геля усиливает противоспаечную эффективность, достоверно снижая выраженность СПБП на 70% при зондовом введении d-пеницилламина и на 72% при внутрибрюшном введении депонированного в имплантате Мезогеля.
Уменьшение площади плоскостных сращений является важным показателем эффективности
противоспаечных мероприятий. В группах с применением d-пеницилламина этот показатель был достоверно ниже по сравнению с группой модели. При применении Мезогеля плоскостных спаек не регистрировалось. Это говорит о выраженном «барьерном» действии гидрогеля целлюлозы.
При изучении гистологических срезов степень зрелости новообразованной соединительной ткани также была наивысшей в группе модели. При зондовом применении ^пеницилламина этот показатель достоверно уменьшился на 27%. Вну-трибрюшное введение ^пеницилламина, растворённого в изотоническом растворе хлорида
□ 7-Е СУТКИ
14-Е СУТКИ
О 0,5 1 1,5 2 2,5 3
Модель
0,9% NaCl в брюшную нолость Мезогель в брюшную нолость
d-пеницилламин внутрижелудочно
0,9% NaCl в брюшную нолость + d-пеницилламин внутрижелудочно
0,9% NaCl с d-пеницилламином в брюшную нолость
d-пеницилламин внутрижелудочно + Мезогель в брюшную нолость
Мезогель с d-пеницилламином в брюшную нолость
Рис. 5. Выраженность СПБП в экспериментальных группах на разные сроки.
Натрия, достоверно уменьшило степень зрелости соединительной ткани в 1,8 раза. Как и предыдущие показатели, степень зрелости спаек была наименьшей при совместном применении Мезо-геля и d-пеницилламина и составила 1,83 и 1,86 балла при зондовом введении комплексообразующего препарата и 2,16 и 2,14 балла при совместном интраоперационном введении.
Б-пеницилламин, связывая ионизированный кальций, замедляет процесс полимеризации коллагеновых волокон, расщепляет перекрёстные связи между вновь синтезирующимися молекулами тропоколлагена, что сказывается на степени зрелости и толщине волокон соединительной ткани.
На основании проведенных исследований можно сделать следующие выводы:
1. Применение ^пенницилламин достоверно на 41% снижает выраженность СПБП в сравнении с группой модели.
2. Внутрибрюшное введение ^пенницил-ламина достоверно более эффективно уменьшает выраженность СПБП по сравнению с внутриже-лудочным на 7%.
3. Совместное применение ^пеницил-ламина, депонированного в Мезогеле, достоверно в 3,5 раза уменьшает степень внутрибрюшной адгезии по сравнению с группой, где профилак-
тических средств после моделирования перитонеальной травмы не применялось.
ЛИТЕРАТУРА
1. Адамян Л.В., Мынбаев О.А., Стругацкий В.М. Экспериментальное подтверждение применения электрофореза с гиалуронидазой для предотвращения послеоперационных спаек // Вопр. ку-рортол. физиотер., леч. физ. культ. - 1995. - № 3. -С. 18-20.
2. Бебуришвили А.Г., Воробьёв А.А., Михин И.В. и др. // Хирургия. Журнал им. Н.И. Пирогова. -2007. - № 6. - С. 27-28.
3. Лазаренко В.А., Бежин А.И., Липатов В.А. и др. Коррекция нарушений иммунитета при экспериментальном спаечном процессе брюшной полости с использованием дерината и лонгидазы // Человек и его здоровье. - 2010. - № 3. - С. 37-43.
4. Лазаренко В.А., Суковатых Б.С., Бежин А.И. и др. Первый опыт применения противоспаечного рассасывающего полимерного средства «Мезогель» при остром аппендиците // Человек и его здоровье. - 2011. - № 1. - С. 51-55.
5. Пелипась Ю.В., Вербицкий Д.А., Жуковский В.А., Липатов В.А. Результаты применения противоспа-ечного геля «Мезогель» в комплексном лечении больных острой спаечной кишечной непроходимостью // Медицинский академический журнал. -2007. - Т. 7, № 3. - С. 86-88.
